CC BY
20
УДК: 57.579.61:616-078
Тригуб С. А., ГолодокЛ. П., Братусь О. В.
ОСОБЛИВОСТ1 ПАП1ЛОМАВ1РУС1В УРОГЕН1ТАЛЬНОГО ТРАКТУ Ж1НОК
Дшпропетровський нацюнальний ушверситет ¡мен1 Олеся Гончара (м. Днтро)
Роботу було виконано у межах держбюджетно! теми № 1-294-15, що виконуеться на кафедр1 мкро-бюлогп, в1русолог1У та бютехнологп Днтропетров-ського нацюнального уыверситету ¡м. Олеся Гончара, № державно! реестрацп 0115U002385.
Вступ. Висока захворюванють населення ¡н-фекцiями, що передаються статевим шляхом, при-вертае увагу фахiвцiв всiх краУн у зв'язку з частим розвитком ускладнень, що призводять до пору-шення функцп репродуктивноУ системи [4]. Серед сексуально-трансмюивних iнфекцiй перше мiсце за поширенютю займае папiлома вiрусна iнфекцiя. Проблема захворювань, асоцмованих з вiрусом паптоми людини, набула особливоУ значущостi у зв'язку з високою контапознютю, поширенютю вiру-су i його онкогенним потен^алом [3]. За останнi 10 роюв спостерiгаeться тенденцiя зростання юлькос-тi випадкiв дисплазiй шийки матки в молодих жшок вiком до 30 роюв, що вказуе на переважне ураження саме жшок репродуктивного в^. Численнi до^-дження показали, що етюлопчна структура урогеы-тальних шфекцм, обумовлених умовно-патогенною мiкрофлорою, як правило, представлена асо^ащею декiлькох мiкроорганiзмiв. Все вищесказане дозволяв розглядати проблему урогеытальних папто-мавiрусних шфекцм, асоцiйованих з умовно-патогенною мiкрофлорою, як актуальну, в попередженн1 поширеност та наслiдкiв в майбутньому [1].
Метою роботи було дослiдження збудниюв па-пiломавiрусiв рiзних типiв канцерогенност та прове-дення аналiзу асо^ацп його з мiкрофлорою уроге-ытального тракту жiнок в нормi та при патолопчних ускладненнях.
Для реалiзацii мети були поставлен такi завдан-ня: провести дослщження бiологiчного матерiалу на наявнють вiрусу папiломи людини рiзних типiв; зробити аналiз частоти виявлення поширеност ВПЛ серед рiзних вкових груп жiнок; визначити асо^а-цт папiломавiрусноi iнфекцii з мiкрофлорою сечо-статевих шляхiв жiнок в нормi та при патологiчних змiнах.
Об'ект i методи дослщження. В експеримен-тальному дослiдженнi був проведений аналiз збуд-никiв вiрусноi природи, а також стввщношення патогенно! та умовно-патогенно! мiкрофлори уро-генiтального тракту, у жшок рiзних вiкових категорiй.
Для проведення дослав було обстежено жшок вiком вiд 18 до 55 роюв з нормофлорою та шфекцм-но-запальними процесами урогеытального тракту за допомогою ПЛР з детек^ею результа^в в режим1 реального часу, та з допомогою тест-системи «Фе-мофлор» [2,7]. Mатерiалом для дослiдження мето-
дом ПЛР-РЧ служить зш^б епiтелiальних клiтин (задньо-боковий звiд тхви та цервiкальний канал) [3,5].
Результати дослiдження та Yx обговорення.
Нами було обстежено 337 жшок вком вщ 18 до 55 роюв, яю робили дiагностику на наявнють папто-мавiрусноi iнфекцii за допомогою метода ПЛР-РЧ ¡з тест-системою Фемофлор.
1з 337 пацieнток, якi звернулись для обстеження на виявлення ВПЛ, у 142 (42%) обстежених було ви-явлено папiломавiрусну Ыфекцю.
Для подальших дослiджень була вивчена мкро-флора урогенiтального тракту 100 жшок, яю зверну-лися з рiзними дисбiотичними порушеннями.
Нами було виявлено ВПЛ типу 3, 6, 42, 61- низь-кого канцерогенного ризику (НКР) , та типи ВПЛ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 - ви-сокого канцерогенного ризику(ВКР), яю е основним етюлопчним фактором передракових i ракових ура-жень шийки матки [8].
За результати нашого доогмдження (рис. 1) було встановлено, що частота видтення паптома вiрусiв складае 42%, серед уЫх обстежених жiнок. З високою частотою були видтеы ВПЛ ВКР - 93% та ВПЛ НКР - 7%.
250 200
| 150
6 100 i 50
0
_Позитивний результат_Негативний результат
Рис. 1. Частота виявлення вiрусу пашломи людини у жшок рiзного вту.
На наступному етапi для проведення аналiзу ди-намiки патологiчних змiн бюценозу репродуктивно! системи дослiджуваних жiнок було умовно подтено на три вiковi групи: I вiкова група - жшки вiком вiд 18 до 25, II вкова група - жшки вком вщ 26-42 роюв, III - вщ 43 до 55 роюв.
На рисунку 2 показано, що у перинй вковм груп1 серед всiх типiв ВПЛ ВКР в найбтыхнй кiлькостi були видтеы типи 51 типу (12 жшок), 16 (у 10 жшок), та 31 (у 8 жшок). ВПЛ НКР зустрiчаeться в малм юлькост1 випадюв.
Серед другоУ вково'| групи бiльша кiлькiсть ВПЧ ВКР 16 типу (у 17 жшок), 68 (у 10), 51 тип (10 жшок), 18 (9 жшок), 56 (у 8), 39 (у 8), 31 (у 8). З титв низько-го канцерогенного ризику переважае 3 тип (2 жшки).
Рис. 3. Сшввщношення (%) р1зних тишв ВПЛ у вшовш категорп 18-25 ромв.
Рис. 4. КГльмсть (%) тишв ВПЛ репродуктивного тракту жшок друго'Г вковоУ групи.
За результатами обстеження було встановлено, що серед 337 дослщжених пащенток у 153 (45,4%) був виявлений нормоценоз та у 184 (54,6%) бакте-р1альний вапноз, викликаний умовно-патогенними мкрооргашзмами.
На рисунку 5 представлене юлькюне стввщ-ношення дослщжених м1кроорган1зм1в, що входять
b TecT-CMCTeMy «OeMo^nop»; TaKi ak Ureaplasma (urealiticum + parvum) b KrnbKOCTax >104, Mycoplasma hominis b b KrnbKOCTHx >104, Candida spp b KinbKOCTi >103, oöniraTHO-aHaepoöm MiKpoopraHi3MM b KinbKOC-Ti > 105 .
Рис. 2. Частота виявлення ВПЛ р1зних тишв вщносно вшових груп.
У третм вковм категорп найбтьше паптомави русу 16 типу (у 3-х пащенток), також бачимо, що частота видшення ВПЛ з вком р1зко знижуеться.
З рисунку 3 бачимо, що у першм вковм грут з вком вщ 18 до 25 роюв серед вс1х титв ВПЛ ВКР в найбшьшм кшькост були видшеж ВПЛ титв 51 (15,2%), 16 (12,7%) та 31 (10,1%). В найменшм кшь-кост 45 тип (2,5%).
Серед жшок вком вщ 26 до 42 роюв з рисунку 4, ми бачимо що серед вах титв ВПЛ частше було видшено типи високого канцерогенного ризику, таю як: 16 (16,7%), 68 (9,6%), 51 (9,6%) та 18 (8,7%), по 7,7% видшеш типи 31, 56. Менша частка припадае на типи: 52 (5,8%), 35, 45, 33 (по 4,8%), 66 (3,8%). Також в данм вковм грут було видшено в меншш м1р1 типи ВПЛ НКР 3 (1,9%) i 42 (1%) [7].
Pmc. 5. Ki^bKicHe (%) po3nofli^eHHq MiKpoopraHi3Miß y ^epTM^bHMX ^iHOK penpoflyKTMBHoro BiKy npw HopMoueHo3i.
y 54% BMnaflKiB xoAeH 3 AOCniAxeHMx MiKpoopra-Hi3MiB BM^B^eHMM He öyB. y 24% BMnaAKiB öyB BMHBne-hmm BipyC HPV. CepeA 3ÖyAHMKiB HeBipyCHOi npMpoAM Ureaplasma (urealyticum + parvum) b bmcokmx TMTpax (>104), öyna BM^B^eHa b 6%, Mycoplasma hominis 4% b KrnbKOCTHx >104 , Candida spp 8% b KinbKOCTi >103, oöniraTHo-aHaepoörn MiKpoopraHi3MM 4% b KinbKOCTi > 105.
Ha pucyHKy 6 npeACTaB^eHO CniBBiAHorneHHH Mi-KpoopraHi3MiB npM öaKTepianbHOMy BariHO3i, naCTOTa BMHB.neHHfl BipyCiB HPV 3i 3HMxeHora KinbKiCTra naK-TOÖaöMn (28%) BiApi3H^^aC^ BiA naCTOTM BMABneHHA öboro 3ÖyAHMKa y rpynM xiHOK 3 HopManbHora KinbKiCTra Lactobaccillus spp. (24%).
HaCTOTa BMHBneHHH Ureoplasma sp. b AiarHOC-tmhho 3HanMMMx KinbKOCTax CKnana 14%, ^o öyno AOCTOBipHO naCTirne, Hix b rpyni «HopMa» [6]. TaKOx 36i^brnyeTbC^ piBeHb rpMÖiB poAy Candida - 10%, Mycoplasma hominia (8%) Ta oöniraTHo-aHaepoö-hmx MiKpoopraHi3MiB; Gardnarella vaginalis/Prevotella bivia/Porhyromonas spp (6%). npoBOA^HM nopiBHanb-hmm aHani3 oTpMMaHMx HaMM pe3ynbTaTiB ^oao aCOöi-aum yMOBHO-naToreHHMx MiKpoopraHi3MiB 3 areHTaMM BipyCHoi eTionorii, Harni pe3ynbTaTM KopenraraTb 3 pe-3y^bTaTaMM iH0Mx aBTopiB [1,4].
Рис. 6. Сшввщношення (%) м1крооргашзм1в у жшок репродуктивного в1ку при бактер1альному вагшозк
Висновки
1. В результат дослiдження частоти видiлення рiзних титв ВПЛ, було встановлено, що серед 337 дослщжених пащенток у 142 жшок було виявлено ВПЛ. Встановлено, що iз 100 обстежених жшок з ВПЛ у 93% випадюв виявлено ВПЛ ВКР та в 7%- НКР.
2. Було визначено, що серед першоУ вковоУ групи в^о^чено високий вiдсоток виявлення таких титв ВПЛ: 51-12%, 16 -10% та 31 -8%, серед жшок другоУ вковоУ категорп переважають 16 тип -17%, 68
та 51 типи - по 10% та 18 - 9%. 3 вком частота ви-никнення ВПЛ р1зко знижуеться.
3. При дослщжены асо^ацп ВПЛ з умовно-пато-генною мкрофлорою виявлено, що в rpyni жшок з нормоценозом у 24% випадюв виявлено ВПЛ. Серед жшок, у яких був виявлений бактеpiальний вапноз. ВПЛ виявлено у 28%, асоцмований з Ureaplasma sp. - 14%, гpибiв роду Candida - 10%, також Mycoplasma hominis - 8% та облкатно-анаероб-
них мiкpооpганiзмiв: Gardnarella vaginalis/Prevotella bivia/Porhyromonas spp - 6%.
Перспективи подальших дослщжень. Отри-ман експеpиментальнi данi представляють практич-ний штерес, оскiльки вони можуть бути використан для подальшого аналiзy розповсюдженост piзних типiв ВПЛ та асощацп даних вipyсних агентiв iз мi-крофлорою ypогенiтального тракту жiнок та розроб-ки засобiв для профтактики та лiкyвання ВП1 репро-дуктивно! системи жiнок.
Л1тература
1. Analiz chastoty vyyavleniya onkogennyh tipov virusa papillomy cheloveka u zhenshchin s ginekologicheskoj patologiej / O.L. Blatova, K.N. Kontorshchikova, L.D. Androsova [i dr.] // Vestnik dermatovenerologa. — 2011. — № 1. — S. 66-68.
2. Akulenko L.V. Klinicheskaya lekciya: o nasledstvennom rake organov zhenskoj reproduktivnoj sistemy / L.V. Akulenko // Onkoginekologiya. — 2012. — № 1. — S. 24-31.
3. Batyrshina S.V. Kandidoznaya i papillomavirusnaya infekciya u zhenshchin s vospalitel'nymi i distroficheskimi zabolevaniyami vul'vy i vlagalishcha / S.V. Batyrshina, E.H. Galihanova, D.R. Akberova // Prakticheskaya medicina. — 2012. — № 9 (65). — S. — 175-180.
4. Vergejchik G.I. Papillomavirusnaya infekciya naruzhnyh polovyh organov. Novye podhody k diagnostike i lecheniyu / G.I. Vergejchik // Sibirskij onkologicheskij zhurnal. — 2012. — № 5 (53). — S. 18-22.
5. 5. Osobennosti bioty urogenital'nogo trakta zdorovyh zhenshchin reproduktivnogo vozrasta pri issledovanii metodom PCR v rezhime real'nogo vremeni / M.N. Boldyreva, E.V. Lipova, D.Yu. Trofimov [i dr.] // Vestnik dermatologii i venerologii. — 2010. — № 1.
6. American Cancer Society, American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, and American Society for Clinical Pathology Screening Guidelines for the Prevention and Early Detection of Cervical Cancer // CA Cancer J Clin. — 2012. — 62. — P. 147-172.
7. Covariates of high-risk human papillomavirus (HPV) infections are distinct for incident CIN1, CIN2 and CIN3 as disclosed by com-peting-risks regression models / M. Branca, K. SyrjAnen, I. Shabalova [et al.] // Eur J.Gynaecol Oncol. - 2012. - Vol. 33, № 1. -P. 5-14.
8. Fredricks D.N. Molecular identification of bacteria associated with bacterial vaginosis / D.N. Fredricks, T.L. Fiedler, J.M. Marrazzo // N. Engl. J. Med. — 2005. — Vol. 353. — P. 1899-1911.
УДК 57.579.61:616-078
ОСОБЛИВОСТ1 ПАП1ЛОМАВ1РУС1В УРОГЕН1ТАЛЬНОГО ТРАКТУ Ж1НОК Тригуб С. А., Голодок Л. П., Братусь О. В.
Резюме. Об'ектдосл1дження: аналiз збудниюв вipyсноi природи, а також стввщношення патогенно! та умовно-патогенно! мкрофлори урогеытального тракту, у жшок piзних вкових категорм.
Мета — доогмдження збудниюв папiломавipyсiв piзних титв канцерогенной та проведення аналiзy асо-щацп його з мкрофлорою урогеытального тракту жшок в ноpмi та при патолопчних ускладненнях.
Проведено дослщження бюлопчного матеpiалy на наявнють вipyсy паптоми людини piзних титв. Ви-значено асо^ацю папiломавipyсноi шфекцп з мкрофлорою сечо-статевих шляхiв жшок в ноpмi та при патолопчних змшах. Також наведен дан частоти виявлення поширеност ВПЛ серед piзних вкових груп жшок.
Отриман результати можуть бути застосован для подальшого аналiзy паптоми людини урогеытального тракту жшок i може бути корисна для отримання профтактики i л^вання дисбактерюзу урогеытального тракту жшок.
Ключов1 слова: ПЛР в pежимi реального часу, урогеытальний тракт, щентифка^я, онкогеннють, мкро-бюта.
УДК 57.579.61:616-078
ОСОБЕННОСТИ ПАПИЛЛОМАВИРУСОВ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА ЖЕНЩИН Тригуб С. А., Голодок Л. П., Братусь А. В.
Резюме. Объект исследования: анализ возбудителей вирусной природы, а также соотношение патогенной и условно-патогенной микрофлоры урогенитального тракта у женщин разных возрастных категорий.
Цель — исследование возбудителей папилломавирусов различных типов канцерогенности и проведение анализа ассоциации его с микрофлорой урогенитального тракта женщин в норме и при патологических осложнениях.
Проведено исследование биологического материала на наличие вируса папилломы человека различных типов. Определены ассоциации папилломавирусной инфекции с микрофлорой мочеполовых путей женщин в норме и при патологических изменениях. Также приведены данные частоты выявления распространенности ВПЧ среди различных возрастных групп женщин.
Полученные результаты могут быть использованы для дальнейшего анализа папилломы человека урогенитального тракта женщин и может быть полезна для получения профилактики и лечения дисбактериоза урогенитального тракта женщин.
Ключевые слова: ПЦР в режиме реального времени, урогенитальный тракт, идентификация, онкоген-ность, микробиота.
UDC 57.579.61:616-078
FEATURES OF HUMAN PAPILLOMAVIRUSES OF UROGENITAL TRACT OF WOMEN
Trygub S. A., Holodok L. P., Bratus O. V.
Abstract. The object of the study was analysis of viral pathogens and the ratio of pathogenic micro flora of the urogenital tract of women of different age groups.
The aim of research was to study the pathogens of various types of carcinogenic papillomaviruses and analysis of it's associations with the micro flora of the urogenital tract of women in norm and during pathological lesions.
The data presents the prevalence of different of types HPV in women of reproductive age. A study of biological material for the presence of HPV types was made. It was determined association with HPV infection of microorganism urogenital tract of women in normal and during pathological changes. Also presented data about frequency of detection of HPV among women of different age groups.
She sampbs of biological material from 337 women aged 18 to 55 ages who made the diagnosis for the presence of HPV infection were made by method or real-time PCR with test system Femoflor
Presence of HPV in 142 (42%) patients were confirmed.
For further research the micro flora of the urogenital tract 100 women who applied to various dysbiotic disorders was stadied.
HPV of type 3, 6, 42, 61- lower cancer risk (LCR), and HPV of types 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 - high cancer risk (HRC), which is the main etiological factor of precancerous and cancerous lesions of the cervix were detected. It was found that the frequency of identification of papillomavirus was 42% amons all surveyed women. With the high frequency of HPV have been identified HCR - 93% and HPV LCR - 7%.
The next step was an analysis of the dynamics of pathological changes in the micro biota composition of the reproductive system of women was roughly divided into three age groups: I age group - women aged 18 to 25, II age group - women aged 26-42 years, III - 43 to 55 years.
In first age group all of HPV was presented by HCR type in the largest quantities were allocated types 51 (12 women), 16 (10 women) and 31 (8 women). LCR type of HPV was found in a little number of cases.
Among other age group was fixed an increasing number of HCR type of HPV: 16 type (17 women), 68 (10 women) 51 type (10 women), 18 (9 women), 56 (8 w.) 39 (8 w.), 31 (in 8 w.). LCR type of HCV was predominant type in 3 (2 women).
In the third age group predominant type of papillomavirus was 16 (in 3 patients), in this age group the frequency of identification of HPV was significantly reduced.
In the results of the survey it was found that among 337 patients in 153 (45.4%) was found in normocenosis and in 184 (54.6%) cases bacterial vaginosis caused by opportunistic microorganisms.
In 54% of cases none of the studied microorganism was not found. In 24% of cases the HPV virus was detected. Among the causative non-viral agents Ureaplasma (urealyticum + parvum) in high titers (>104) was found in 6%, Mycoplasma hominis - 4% in quantities >104, Candida spp 8% in the number of >103, obligate anaerobic microorganisms - 4% in quantity > 104 CFU/ml.
Among women who with bacterial vaginosis HPV was detected in 28% associated with Ureaplasma sp. - 14%, fungi of the genus Candida - 10%, and Mycoplasma hominis - 8% and obligate anaerobic microorganisms: Gardnarella vaginalis/Prevotella bivia /Porphyromonas spp - 6%.
The work is interesting for medicine for further analysis of human papillomavirus in urogenital tract of women and could be useful for getting prevention and treatment dysbiosis of the urogenital tract of women.
Keywords: real time PCR, urogenital tract, identification, oncogenicity, microbiota.
Рецензент — проф. Саричов Л. П.
Стаття надшшла 02.06.2017 року
