Научная статья на тему 'Особливості будови панкреатичних острівців на різних етапах онтогенезу'

Особливості будови панкреатичних острівців на різних етапах онтогенезу Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
144
56
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПАНКРЕАТИЧНі ОСТРіВЦі / ЩУРИ / ОНТОГЕНЕЗ

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Міськів В. А., Левицький В. А.

Протягом життя визначаються структурні зміни в ендокринній частині підшлункової залози, які проявляються збільшенням середніх розмірів острівців до максимальних значень у 12 місяців постнатального онтогенезу. У щурів 24 місячного віку середні розміри острівців зменшуються на 15 відсотків. Загальна кількість клітин збільшується з віком, що спостерігається також для окремих типів клітин в складі острівців. Максимальна кількість капілярів визначається в 12 місячному віці, а діаметр обмінної ланки гемомікроциркуляторного русла є максимальним у 6 місячних щурів.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Особливості будови панкреатичних острівців на різних етапах онтогенезу»

3. Пат. №42454 МПК А61К 35/16 Україна. Біостимулюючий препарат „Кріокорд - С” та спосіб лікування хронічних сальпінгоофоритів з його використанням / Грищенко В.І., Прокопюк О.С., Ліпіна О.В., Мошко Ю.О. Заявник та патентовласник ІПКіК НАН України Заявл. 05.03.01. Опубл. 15.12.04. Бюл. №12. С.4.1.

4. Попович Я.О.Препарат кріоконсервованої сироватки кордової крові «Кріокорд - С» в лікуванні синдрому діабетичної стопи / Я.О.Попович // Проблемы криобиологии. - 2005. - Т.15, №1. - С.63-70.3.

5. Шідловський В.О. Імунокорегуюча терапія в комплексному лікуванні хворих на важку гнійну патологію в хірургії / В.О.Шідловський, І.М.Дейкало, І.В.Чепіль [та ін.] // Проблемы криобиологии. - 2005. - Т.15, №1. - С.79-84.

6. Ширшев С.В. Белки фетоплацентарного комплекса в регуляции иммунных реакций / С.В.Ширшев //Успехи современной биологии. - 1993. - Т.113, № 2. - С.230-237.

ПРЕПАРАТ СИРОВАТКИ КОРДОВОЇ КРОВІ

ЛЮДИНИ: КЛІНІЧНЕ ЗАСТОСУВАННЯ.

Ліпіна О.В., Мусатова І.Б., Трифонов В.Ю., Прокопюк О.С.

В роботі вивчали вплив низьких температур на збереженість сироватки кордової крові людини (СККЛ) та ефективність її використання в клінічній практиці. Показано, що кріоконсервована СККЛ зберігає свій фракційний білковий та гормональний вміст та успішно використовується при лікуванні різних патологій.

Ключові слова: сироватка кордової крові людини, кріоконсервування, клінічна ефективність.

PREPARATION OF HUMAN CORD BLOOD SERUM: CLINICAL APPLICATION Lipina O.V., Musatova I.B., Trifonov V.Yu., Prokopyuk O.S.

The effect of low temperatures on the integrity of human cord blood serum (HCBS) and the efficiency of its application in clinical practice were investigated. Cryopreserved HCBS was shown to preserve its fractional, protein and hormonal contents and to be successfully applied in treating various pathologies.

Key words: human cord blood serum, cryopreservation, clinical efficiency.

УДК 615.36:612-06

ОСОБЛИВОСТІ БУДОВИ ПАНКРЕАТИЧНИХ ОСТРІВЦІВ НА РІЗНИХ ЕТАПАХ

ОНТОГЕНЕЗУ

Протягом життя визначаються структурні зміни в ендокринній частині підшлункової залози, які проявляються збільшенням середніх розмірів острівців до максимальних значень у 12 місяців постнатального онтогенезу. У щурів 24 місячного віку середні розміри острівців зменшуються на 15 відсотків. Загальна кількість клітин збільшується з віком, що спостерігається також для окремих типів клітин в складі острівців. Максимальна кількість капілярів визначається в 12 місячному віці, а діаметр обмінної ланки гемомікроциркуляторного русла є максимальним у 6 місячних щурів.

Ключові слова: панкреатичні острівці, щури, онтогенез.

Цукровий діабет є однією з найголовніших медико-соціальних проблем і займає третє місце серед захворювань, які найчастіше є причиною ранньої інвалідизації та летальності серед населення практично у всіх країнах світу. Кількість хворих на ЦД у світі перевищила 100 млн. осіб. У медичних закладах України на обліку їх біля 1 млн. Щорічно число хворих збільшується на 5-7%, а кожні 15 років - подвоюється [2]. ЦД 1-го типу є автоімунним захворюванням з деструкцією клітин острівців підшлункової залози, що розвивається під дією факторів зовнішнього середовища та при наявності генетичних передумов. Дана патологія супроводжується порушеннями вуглеводного, ліпідного та білкового обмінів, що призводить до формування ряду ускладнень. Незважаючи на велику кількість досліджень у цілому світі патогенез ЦД з’ясований не до кінця. У останній час головні завдання дослідників - перехід від діагностики діабету до його передбачення, від лікування до попередження, а це не можливо без ґрунтовних морфологічних досліджень саме ендокринної частини підшлункової залози. Проаналізувавши дані літератури, ми з’ясували, що діти та підлітки становлять 8-10% хворих на цукровий діабет 1 типу. Пік захворюваності спостерігається в пубертатному віці. Захворюваність дітей та підлітків на цукровий діабет в європейських країнах поширюється стрімкими темпами. Прогнозується, що до 2010 року її рівень сягне показника 30,0 на 100 тис. осіб дитячого

населення [11]. В Україні на цукровий діабет хворіє 1,5-3% населення. Протягом 1990-2003 рр. поширеність діабету серед дітей зросла на 20,4%. Так, в Україні на цукровий діабет хворіють 3,3 тис. підлітків. Щороку ця хвороба виявляється приблизно у 800 дітей у віці до 14 років, а рівень захворюваності становить 9,3 на 100 тис. осіб дитячого населення [8, 10]. Тому, увага дослідників повинна бути акцентована на вивченні морфологічних змін острівцевого апарату підшлункової залози на різних етапах постнатального онтогенезу, а прогнозування даної патології не можливе без математичних моделей, які стосуються розвитку цукрового діабету та прогнозування його ускладнень[3, 7].

Метою роботи було визначення особливостей будови ендокринної частини підшлункової залози щурів у постнатальному періоді онтогенезу.

Матеріал та методи дослідження. Робота виконана на 30 білих безпородних щурах-самцях масою 90-200 г трьох вікових груп: молодих — 6-місячних, дорослих — 12-місячних і старих — віком 24 місяці, що утримувались в стандартних умовах віварію з дотриманням загальноприйнятих правил [6, 9].

Матеріалом для дослідження були препарати підшлункової залози. Евтаназію тварин проводили шляхом передозування кетамінового наркозу. Після взяття матеріалу шматочки тканин ущільняли в ЕПОН-812 за загальноприйнятою методикою [4]. Напівтонкі зрізи виготовляли на ультрамікротомі УМТП-5 Сумського ПО «Електрон» (Україна) і забарвлювали толуїдиновим синім. Вивчення особливостей будови ендокринної частини підшлункової залози проводили за допомогою світлового мікроскопу, визначення розмірів острівців, діаметрів судин гемомікроциркуляторного русла - за допомогою програмного забезпечення Biovision Version 2 нового покоління, використовуючи тринокулярний мікроскоп МС 300 (ТХР) з підключеною професійною відеокамерою САМ V300. Отримані дані оцінювали за параметричними статистичними методами [5].

Результати дослідження та їх обговорення. Вивчення напівтонких зрізів підшлункової залози щурів показало, що її ендокринна частина утворена ендокриноцитами, які мають округлу форму, нерівні контури і розташовуються серед екзокринних епітеліальних комплексів, відмежовуючись від них тонким прошарком пухкої сполучної тканини.

Морфометричне дослідження виявило, що у 6 місячних щурів середній діаметр панкреатичних острівців складає 39,5±0,49 мкм. З віком показник збільшується і сягає до 12 місячного віку 96,6±2,23 мкм. Але у щурів похилого віку середні розміри острівців вірогідно зменшуються (до 79,7±5,07 (р < 0,050), але є вдвічі більшими за аналогічний показник у 6 -місячних тварин. Загальна кількість клітин в складі ендокринної частини підшлункової залози щурів в постнатальному періоді онтогенезу збільшується: з 6 до 12 місяців в 2,5 рази, протягом наступного року життя на 30 відсотків (рис.1).

загальна кількість клітин

24 міс 12 міс.

6 міс.

0 20 40 60 80 100 120 140

‘ 0

100,2 J. (

' 0

39,2 J. J. J.

Рис. 1. Зміни загальної кількості клітин в складі острівців Лангерганса підшлункової залози щурів в постнатальному онтогенезі.

За цей період вдвічі зменшується відсоток а-клітин, хоча в абсолютних числах їх кількість збільшується. Топографічно вони розміщуються по периферії острівців, мають оптично щільну базофільну цитоплазму (рис.2). Середня кількість р-клітин з віком зростає і сягає максимуму у 12-місячних тварин, після чого дещо зменшується. Основним місцем їх локалізації є центральні відділи панкреатичних острівців (рис.3).

Аналогічна тенденція спостерігається відносно абсолютної кількості 5- і рр-клітин: кількість рр- клітин зменшується до 12-місячного віку і в 1,5 рази зростає у 24 місячних щурів.

Рис. 2. Острівець Лангерганса щура 6 місяців. Рис. 3. Острівець Лангерганса щура 12 місяців.

Напівтонкий зріз: Заб.: метиленовим синім: 36.: 1000. Напівтонкий зріз: Заб.: метиленовим синім: 36.: 1000.

Рис. 4. Острівець Лангерганса щура 24 місяців. Напівтонкий зріз: Заб.: метиленовим синім: Зб.: 1000.

Кількість обмінних гемомікросудин в складі острівців Лангерганса з віком збільшувалась і з 2,0±0,17 сягала 5,3±0,23 у 24-місячних тварин. Середні значення діаметрів капілярів в постнатальному онтогенезі зменшувались з 11,8±0,21 мкм у 6 місячних щурів до 4,9±0,52 мкм- у 24 місячних.

1. Протягом життя в ендокринній частині підшлункової залози виявляються структурні зміни, які проявляються збільшенням розмірів острівців до максимальних значень у 12-місячних тварин. У щурів 24-місячного віку розміри острівців є меншими на 15% .

2. З віком збільшується кількість ендокринних клітин.

3. Максимальна кількість капілярів визначається в 12-місячному віці, а діаметр обмінної ланки гемомікроциркуляторного русла є максимальним у 6 місячних щурів.

Перспективи подальших досліджень в даному напрямку. В подальшому планується визначити субмікроскопічні ососбливості острівців Лангерганса щурів в онтогенезі.

9У//№ШШґУ///////////ж

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия - Москва: Медицина. - 1990.-178 с.

2. Бездедко П.А., Горбачева Е.В. Эпидемиология и частота сахарного диабета// Міжнародний ендокринологічний журнал. - 2006. - №4. - С. 76-80

3. Жемчужкіна Т.В. Комп'ютерна диференційна діагностика порушень вуглеводного обміну на основі однокомпартментних математичних моделей. - Автореф. дис... канд. техн. наук: 05.11.17 / Т.В. Жемчужкіна; Харк. нац. ун-т радіоелектрон. — Х., 2002. — 22 с.: рис. — уф.

4. Карупу В.Я. Электронная микроскопия.- Киев: Вища школа.- 1984.-208с.

5. Лапач С.Н., Чубенко А.В., Бабич П.Н. Статистические методы в медико-биологических

6. Общие этические принципы работы с экспериментальными животными при проведении медицинских и биологических исследований / Національний конгрес з біоетики (Київ 17—20 вересня 2001 р.) // Ж.АМН України. -2001. - Т. 7, №4. - С. 814-816.

7. Старинець Наталія Анатоліївна. Ускладнення у дітей та підлітків, хворих на цукровий діабет І типу та оптимізація їх раннього скринінгу : Дис... канд. мед. наук: 14.01.18 / Національна медична академія післядипломної освіти ім. П.Л.Шупика. — К., 2006. — 195арк. : рис., табл. — Бібліогр.: арк. 151-178.

8. Тронько Н.Д., Орленко В.Л. По материалам 42 конгресса европейской асоциации по изучению диабета// Здоров’я України. - 2006. - №21. - С. 210-241.

9. Этические вопросы использования животных в учебной работе и научных исслндованиях / Тез. докл. Белорусско-британского симпозиума (1б-18 окт., Минск, 1997) / Под ред. С.ДДенисова.- Минск, 1998.- 140 с.

10. Bober E, Buyukgebiz A. Hypoglycemia and its effects on the brain in children with type 1 diabetes mellitus// Pediatr. Endocrinol. Rev. - 2005. - Vol.2, №3. - P.378-382

11. Zimmet P., Alberti K.G., Shaw J. Global and societal implications of the diabetic epidemic// Nature. -2001. - Vol.414. - P. 782-787.

ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ ПАНКРЕАТИЧЕСКИХ ОСТРОВКОВ НА РАЗНЫХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА Миськив В.А., Левицкий В.А.

В течение жизни определяются структурные изменения в эндокринной части поджелудочной железы, которые проявляются увеличением средних размеров островков к максимальными значениями в 12 месяцев постнатального онтогенеза. У крыс 24 месячного возраста средние размеры островков уменьшаются на 15 процентов. Общее количество клеток увеличивается с возрастом, который наблюдается также для отдельных типов клеток в составе островков. Максимальное количество капилляров определяется в 12 месячном возрасте, а диаметр обменного звена гемомикроциркуляторного русла является максимальным в 6 месячных крыс.

Ключевые слова: панкреатические

островки, крысы, онтогенез.

FEATURES OF PANCREATIC ISLANDS STRUCTURE ON THE DIFFERENT STAGES OF ONTOGENESIS Mis'kiv V.A., Levitskyi V.A.

During life structural changes are determined in endocrine part of pancreas, which show up the increase of middle sizes of islands to to by maximal values in 12 months of postnatal ontogenesis. For rats 24 monthly ages the middle sizes of islands diminish on 15 percents. The general amount of cells is increased with age which is observed also for the separate types of cells in composition of islands. Maximal amount of capillaries is determined the in a 12 monthly age, and a diameter of exchange part of haemomicrivascular rate is maximal in 6 monthly rats.

Keywords: pancreatic islands, rats,

ontogenesis.

УДК 611.77:615.012.6

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ ЕФЕКТИВНОСТІ ЗАСТОСУВАННЯ ПРОТИГІПОКСИЧНОЇ СУМІШІ ДЛЯ ЗАХИСТУ ЕКСПЛАНТАТІВ ШКІРИ

Застосування суміші (0,25% розчину липину, 0,005% розчину аскорбінової кислоти, 0,0025% розчину ізоптину і 0,125% розчину унітіолу) проти гіпоксії покращує морфофункціональні властивості експлантатів шкіри щурів за умови інкубації in vitro і може бути рекомендоване для захисту шкіри від гіпоксій пошкодженій в екстремальних ситуаціях.

Ключові слова: експлантати шкіри, суміш протигіпоксії.

Робота є ініціативною.

Трансплантація шкіри активно застосовується для заміщення відповідних дефектів шкіри, які виникають внаслідок механічних, термічних або хімічних ушкоджень на виробництві та в побуті [5]. Окрім запобігання реакції відторгнення і продовження терміну функціонування трансплантата шкіри в організмі реципієнта з дермальними дефектами важливою проблемою залишається також оптимізація умов зберігання шкіри з моменту її отримання до моменту пересадки [8]. Відомо, що гіпоксія в умовах in vitro може призвести до активізації пероксидного окислення ліпідів, пошкодження клітинних мембран і, навіть, некрозу експлантата [7]. В зв’язку з цим, проводиться пошук нових протиокисних сумішей з використанням систем моделювання ліпідних процесів у шкірі [9]. Однак, незважаючи на численні дослідження, питання залишається відкритим.

Метою роботи було вивчення основних морфофункціональних характеристик експлантатів шкіри щурів в умовах in vitro та розробка способу їх захисту від метаболічних наслідків гіпоксичної ішемії.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.