CC BY
50
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ
ОСОБЕННОСТИ ВВЕДЕНИЯ В КУЛЬТУРУ ТКАНЕЙ СОРТОВ КЛЕМАТИСА (CLEMATIS L.) Волкова Е.А.
Волкова Елена Александровна - магистрант, направление: лесная биотехнология, кафедра лесных культур, селекции и биотехнологии, Поволжский государственный технологический университет, г. Йошкар-Ола
Ключевые слова: клематис, культура тканей, эксплант, стерилизующий агент, in vitro.
Клематис - прекрасное декоративное растение, известное с древних времён. Местные виды клематиса стали культивировать в садах Западной Европы более 400 лет назад, т.е. ещё в XVI в. История интродукции клематисов наиболее полно отражена в специальной литературе Англии, где они являются особенно любимыми среди цветочных растений [1].
Род Клематис (Clematis L.) - ломонос, лозинка - принадлежит к семейству Лютиковые (Ranunculaceae Juss.) и представлен кустарниками с вьющимися и прямыми побегами, а также травянистыми многолетниками. Многие виды клематиса цепляются за опоры при помощи закручивающихся черешков листьев. Есть виды с прямостоячими стеблями и прямыми черешками листьев. У клематисов чаще всего листья парные (супротивные), тройчатые, дваждытройчатые или непарноперистые, реже простые. Цветки собраны в соцветия (редко одиночные), обоеполые (иногда раздельнополые). Лепестков нет, а простой околоцветник состоит из 4-8-лепестковидных чашелистиков разнообразной окраски. Тычинок и пестиков в цветке много. Многочисленные семянки с коротким или длинным в разной степени опушенным столбиком собраны в головки [2].
Клематисы широко используются в озеленении и занимают одно из ведущих мест в декоративном садоводстве. Для сохранения исходных признаков все сорта размножают только вегетативно: черенками, отводками. Однако, вегетативное размножение достаточно медленное, трудоемкое, зависит от природных условий и способствует накоплению инфекции в растительном материале. Использование методов получения посадочного материала в условиях in vitro предпочтительнее перед традиционным методом размножения [3].
Целью работы было изучение условий введения вегетативных почек в культуру in vitro и индукция побегообразования сортов клематисов.
Для выполнения цели были поставлены следующие задачи:
1. Подобрать стерилизующие агенты и их концентрации при введении в культуру тканей.
2. Выявить оптимальные сроки введения в культуру.
3. Изучить влияние регуляторов роста на процессы размножения изучаемых объектов.
Объекты и методы исследования:
В качестве объектов исследования были взяты 4 сорта клематисов из коллекции Ботанического сада-института ПГТУ: Savannah, Николай Рубцов, Дженни Кадик и Ред Кардинал.
В качестве растительных эксплантов использовали конусы нарастания (апексы) и пазушные почки однолетних побегов в различные фазы вегетации растений (рис. 1).
Рис. 1. Пазушные почки однолетних побегов в культуре in vitro
Экспланты последовательно стерилизовали 30 секунд в 70%-ном этиловом спирте, а затем в течение 5 минут в растворах стерилизующих агентов с последующей 3-кратной промывкой бидистиллированной водой. В качестве стерилизующих агентов использовали растворы «Белизны» (гипохлорит натрия) и «Лизоформина 3000» в 3% и 5%-ной концентрации. В результате было установлено, что обработка 3%-ным Лизоформином дает положительные результаты. При использовании такого способа дезинфекции выход жизнеспособных эксплантов был максимальным и составил 89,9% (таблице 1).
Таблица 1. Влияние режима стерилизации на жизнеспособность эксплантов в условиях in vitro
Стерилизующ ий агент Кон- цент рация Время экспозици и Количество эксплантов, %
Инфицирован. Потемневш. Жизнеспособн.
Белизна 3% 5 мин. 100 0 0
5% 0 75 25
Лизоформин 3000 3% 11,1 0 89,9
5% 0 45,5 54,5
Жизнеспособность эксплантов напрямую зависит и от срока их изоляции от
материнского растения. Установлено, что для всех исследуемых образцов фаза
активного роста является наиболее оптимальным сроком отбора первичных эксплантов (рис. 2).
■
Savannah Николай Рубцов Дженни Кадик Ред Кардинал
Рис. 2. Зависимость жизнеспособности эксплантов от фазы развития маточного растения
Для индукции развития пазушных меристем использовали цитокинин 6-БАП в концентрациях от 0,5 до 5 мг/л. Следует отметить, что максимальный коэффициент отмечен на среде MS, дополненной 6-БАП в концентрации 2 мг/л. В связи с вышеизложенным были сделаны следующие выводы:
1. Для введения в культуру in vitro клематисов оптимальным режимом стерилизации является последовательная обработка 70%-ным этиловым спиртом в течение 30 секунд и 3%-ным раствором «Лизоформина 3000» при экспозиции 5 мин.
2. Оптимальным сроком для изоляции эксплантов от растения-донора является фаза начала активного роста.
3. Наиболее подходящей средой для прорастания почек и для последующего культивирования побегов является среда MS, дополненная 2 мг/л 6-БАП.
Список литературы
1. Бескаравайная М.А. Клематисы / М.А. Бескаравайная. М: Росагропромиздат, 1991. 189 с.
2. Бескаравайная М.А. Клематисы /М.А. Бескаравайная. Киев: Урожай, 1989. 141 с.
3. Коротков О.И. Формирование и комплексное изучение коллекции клематисов (род Qematis L.) биотехнологические и молекулярно-генетические аспекты: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.05. M., 2008.
■ фаза атиеного роста
■ фаза начала бутонизацми фаза массового цветения
