Особенности воспалительной реакции в микроокружении плоскоклеточных карцином головы и шеи Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ LABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIES

DOI: 10.21294/1814-4861-2018-17-6-57-63 УДК: 617.61/.53-006.61-091.8

Для цитирования: Бычков В.А., Бондарь Л.Н., Таширева Л.А., Черемисина О.В., Чойнзонов Е.Л., Перельмутер В.М. Особенности воспалительной реакции в микроокружении плоскоклеточных карцином головы и шеи. Сибирский онкологический журнал. 2018; 17 (6): 57-63. - doi: 10.21294/1814-4861-2018-17-6-57-63.

For citation: Bychkov V.A., Bondar L.N., Tashireva L.A., Cheremisina O.V., Choynzonov E.L., Perelmuter V.M. Characteristics of inflammatory reactions in the tumor microenvironment of head and neck squamous cell carcinoma. Siberian Journal of Oncology. 2018; 17 (6): 57-63. - doi: 10.21294/1814-4861-2018-17-6-57-63.

особенности воспалительной реакции в микроокружении плоскоклеточных карцином

головы и шеи

Б.А. Бычков12, л.Н. Бондарь1, л.А. таширева1, о.в. Черемисина1, Е.л. Чойнзонов12, в.М. Перельмутер1

Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук, г. Томск, Россия1

Россия, г Томск, 634009, пер. Кооперативный, 5. E-mail: va.bych@gmail.com1

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования

«Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации,

г Томск, Россия2

Россия, г Томск, 634050, Московский тракт, 2. E-mail: va.bych@gmail.com2

Аннотация

Цель исследования - анализ ассоциации характера воспалительной инфильтрации в плоскоклеточных карциномах головы и шеи с наличием 5 типов опухолевых структур и лимфогенным метастазированием. Материал и методы. У 44 пациентов проводилась оценка морфологической гетерогенности опухоли, уровня воспалительной инфильтрации стромы, подсчет С04+ и С08+ Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и макрофагов в инфильтрате и клеток Лангерганса в опухолевых структурах. Клеточные элементы воспалительного инфильтрата определяли при помощи иммуногистохимического исследования. Результаты. Количество клеток Лангерганса в структурах 1-го типа, представляющих собой высокодифференцированные клетки с ороговением в центре, коррелирует с наличием СО3+ и С04+ Т-лимфоцитов в воспалительном инфильтрате. У пациентов с метастатическим поражением лимфоузлов наблюдается снижение уровня воспалительной инфильтрации и количества СО3+ Т-клеток по сравнению с пациентами с интактными лимфоузлами. У пациентов с метастатическим поражением лимфоузлов, в отличие от случаев с отсутствием лимфогенного метастазирования, выявлена связь между степенью дифференцировки клеток в опухолевых структурах и наличием в воспалительном инфильтрате тех или иных субпопуляций лимфоцитов. При наличии высокодифференцированных структур в инфильтрате увеличена доля С04+ и/или С08+ и/или С020+ лимфоцитов. В опухолях с низкодифференцированными структурами 3-5-го типа зависимость обратная: уменьшена доля СО3+ и/или С08+ и/или С020+ лимфоцитов. Заключение. Проведенное исследование свидетельствует о снижении уровня воспалительной реакции, включая Т-клеточный ответ, у пациентов с реализованным лимфогенным метастазированием, а также демонстрирует в этой группе наблюдения ассоциацию наличия опухолевых структур разной степени дифференцировки с выраженностью и характером воспалительного инфильтрата. Показана связь клеток Лангерганса со стромальной воспалительной реакцией.

Ключевые слова: внутриопухолевая гетерогенность, воспаление, опухоли головы и шеи, лимфогенное метастазирование, дендритные клетки, воспалительная инфильтрация, Т-клеточный ответ.

Бычков вячеслав Алексеевич, va.bych@gmail.com СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2018; 17(6): 57-63

laboratory and experimental studies

characteristics of inflammatory reactions in the tumor microenvironment of head and neck squamous cell

carcinoma

V.A. Bychkov12, L.N. Bondar1, L.A. Tashireva1, o.V. Cheremisina1, E.L. Choynzonov12, V.M. Perelmuter1

Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences, Tomsk, Russia1

5, Kooperativny Street, 634009-Tomsk, Russia. E-mail: va.bych@gmail.com1

Siberian State Medical University, Tomsk, Russia2

2, Moskovsky trakt, Tomsk-634055, Russia. E-mail: va.bych@gmail.com2

Abstract

objective: to analyze the association between inflammatory cells with morphological heterogeneity and lymphogenous metastasis of head and neck squamous cell carcinoma. Material and Methods. Five types of tumor structures, the level of inflammatory infiltration and the counts of CD4+ and CD8+ T-lymphocytes, B-lymphocytes and macrophages in the stromal infiltrate and Langerhans cells in tumor structures were assessed in 44 patients. Results. The presence of Langerhans cells in type 1 structures was correlated with the presence of CD3+ and CD4+ T-cells in the inflammatory infiltrate. There was a decrease in the inflammatory reaction and the number of CD3+ T cells in patients with metastatic lymph nodes compared with patients with intact lymph nodes. In patients with lymph node metastasis, the proportion of CD4+ and / or CD8+ and / or CD20+ lymphocytes in the infiltrate was higher in cases with well-differentiated tumor than in cases with poorly-differentiated tumor. Conclusion. The results obtained showed the decrease in the level of inflammatory response, including T-cell response, as well as the relationship between the presence of Langerhans cells and stromal inflammatory response in patients with lymph node metastasis.

Key words: intratumoral heterogeneity, morphology, lymph node metastasis, head and neck squamous cell carcinoma, inflammation, Langerhans cells, inflammatory infiltration, T-cell response.

Введение

Плоскоклеточные карциномы области головы и шеи являются одними из наиболее часто встречающихся опухолей данной локализации. Такие опухоли отличаются высокой вариабельностью морфологического строения, когда у одного и того же пациента наблюдается сочетание клеток разной степени дифференцировки. В зависимости от преобладающей дифференцировки плоскоклеточный рак головы и шеи делят на высоко-, умеренно- и низкодифференцированный варианты в соответствии с рекомендациями ВОЗ (2005). Обращает на себя внимание, что опухолевые клетки расположены не хаотично, а в определенных устойчивых сочетаниях, образуя домены или структуры, разделенные стромой. Эти структуры в зависимости от формирующих их клеток также могут быть высоко- или низкодифференцирован-ными. Всего нами предложено выделять 5 типов доменов клеток: с ороговением в центре (формирующие «жемчужины»), с шиповатыми клетками без ороговения, с клетками базалоидного типа, низкодифференцированные высокополиморфные структуры и дискретно расположенные одиночные опухолевые клетки [1]. Наблюдения показывают, что опухоль может быть представлена как одним типом структур, так и различным их сочетанием. Мы изучили ассоциацию этих структур с клинико-морфологическими характеристиками заболевания

и показали, что наличие одиночных опухолевых клеток сопряжено с повышенным метастатическим потенциалом плоскоклеточной карциномы [2].

Тип структуры, степень дифференцировки составляющих ее клеток, по крайней мере частично, могут зависеть от условий микроокружения. Многочисленные исследования позволили выделить три ключевых компонента опухолевого микроокружения, оказывающих влияние на течение опухолевой болезни: экстрацеллюлярный матрикс, сосудистую сеть и инфильтрат иммунных клеток [3, 4]. Различное сочетание этих факторов обеспечивает разнообразие влияния на опухолевые клетки, что способствует возникновению внутри-опухолевой гетерогенности [5].

Проведенное нами ранее исследование [2] показало, что лимфогенное метастазирование наблюдалось чаще не только в опухолях с наличием одиночно расположенных опухолевых клеток (структуры 5-го типа) и высокополиморфных клеток (структуры 4-го типа), но и у пациентов со сниженным уровнем воспалительного инфильтрата в паренхиме опухоли, который, в свою очередь, был ассоциирован с наличием структур 5-го типа. Поэтому естественным продолжением работы стала попытка подробнее изучить характер воспалительного инфильтрата у пациентов с учетом морфологической гетерогенности плоскоклеточных карцином.

Цель исследования - оценить уровень CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, макрофагов и клеток Лангерганса (КЛ) в плоскоклеточных карциномах области головы и шеи в зависимости от наличия разных типов клеточных структур и параметров опухолевого роста и метастазирования.

Материал и методы

Материалом исследования служили образцы опухоли от 44 пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи Т1-4^-3М0 стадии различных локализаций, получавших лечение в НИИ онкологии Томского НИМЦ в период с 2007 по 2016 г. Поражение гортани и гортаноглотки диагностировано у 34 (77,2 %), ротоглотки и ротовой полости - у 10 (22,8 %) пациентов. Во всех случаях диагноз верифицирован морфологически. Никто из пациентов специфического лечения до биопсии не получал. Исследование проходило в соответствии с Хельсинкской декларацией 1964 г. (исправленной в 1975 и 1983 гг.) и с разрешения локального этического комитета института, все пациенты подписали информированное согласие на исследование. Из данных канцер-регистра и амбулаторных карт были получены сведения о поле, возрасте пациентов и распространенности по ТКМ плоскоклеточных карцином. Выраженность воспалительного инфильтрата оценивалась в процентах площади стромы, инфильтрированной лимфоцитами, от общей площади стромы, по аналогии с рекомендациями Международной рабочей группы [6]. Анализ морфологической гетерогенности плоскоклеточных карцином проводился методом световой микроскопии на препаратах, окрашенных

гематоксилином и эозином. Оценка уровня CD4+ и CD8+ T-лимфоцитов, В-лимфоцитов и макрофагов осуществлялась при помощи иммуногистохимиче-ского окрашивания срезов с применением первичных антител к CD3 (клон LN10, Leica, Германия), CD4 (клон 4B12, Dako, США), CD8 (C8/144B, Dako, США), CD20 (клон L26, Dako, США), CD68 (клон PG-M1, Dako, США), результат выражался в процентах. В каждом из четырех типов многоклеточных структур плоскоклеточной карциномы подсчитывалось количество дендритных клеток Лангерганса с длинными, короткими и средней величины отростками. Для этой цели использовались антитела к CD^ (клон MTB1, Leica, Германия) и S100 (поликлональное, Leica, Германия).

На каждом срезе подсчет проводился минимум в 10 полях зрения, после чего вычислялась медиана.

Для проверки статистически значимой разницы результатов в исследуемых группах использовались непараметрический критерий Манна-Уитни, коэффициент корреляции по Спирмену.

Результаты

Сопоставление наличия и количества дендритных клеток (ДК) в многоклеточных структурах 2-4-го типов с клеточным составом воспалительного инфильтрата не выявило корреляции между этими показателями. Напротив, обнаружена прямая корреляция между количеством CD1a+ ДК в структурах 1-го типа с общим количеством CD3+ Т-клеток (г=0,78, р=0,037) и с долей в инфильтрате CD4+ Т-лимфоцитов-хелперов (г=0,84, р=0,017). Прямая корреляция с количеством CD4+

Таблица 1

Связь воспалительного инфильтрата в строме плоскоклеточных карцином с типом опухолевых

структур (%, Ме (01-03))

Характеристика вос- 1- й тип 2-й тип 3-й тип 4-й тип 5-й тип

палительной инфиль- Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть

трации (n=23) (n=21) (n=7) (n=37) (n=25) (n=19) (n=20) (n=24) (n=30) (n=14)

Выраженность воспаления

Р

CD3+ Р

CD4+ p

CD8+ Р

CD20+ Р

CD68+ Р

40 40 40 40 40 42 55

(35; 65) (40; 60) (37,5; 70) (38,8; 60) (37,5; 60) (37,5; 70) (40; 68

40 50 40

(31,3; 50) (40; 70) (35; 40)

0,849

1,0

50 40 40 50

(20; 60) (17,5; 60) (10; 40) (22,5; 60)

0,522 5 10

0,171 5 10

0,692

55 (32,5; 82,5)

0,062 10 10

0,003

0,01

40 50 45 50 40

(15; 60) (16,3; 60) (28,8; 70) (27,5; 60) (18,8; 60)

0,924 10 6,3

0,077 10 15

0,342 20 10

0,482 15 15

(5; 20) (10; 22,3) (10; 27,5) (5; 20) (5; 27,5) (10; 20) (10; 20) (5; 21,3)

(5; 12,5) (5; 22,5) (5; 7,5) (5; 20) (5; 20) (5; 12,5) (5; 18,1) (5; 18,! 0,144 20 10 (10; 25) (5; 20) 0,614 1 5

(1; 7,5) (1; 11,3) 0,16 5 5

(1; 5) (5; 10) 0,335

0,409 10 6,3

(5; 20) (5; 16,3) 0,453 15 10

1

0,826 0,1 1 5 5

(1; 1) (1; 10) (1; 10) (1; 10) 0,134 0,494

5 5 5 5

(1; 10) (5; 7,5) (1; 5) (5; 10) 0,66 0,09

0,718 1 5

(1; 9,4) (1; 10) 0,653 5 5

(2; 6,9) (5; 10) 0,744

0,36 1 5

(1; 8,1) (1; 10,6) 0,364 5 5

(4; 7,5) (4; 10) 0,61

Т лимфоцитов-хелперов подтверждается и при выявлении в структурах 1-го типа ДК антителами к S100 (1=0,78, р=0,037).

Результаты оценки выраженности и клеточного состава воспалительной инфильтрации в стро-ме плоскоклеточных карцином представлены в табл. 1.

Согласно полученным данным, уменьшение выраженности воспалительного инфильтрата ассоциировано с клеточными структурами 4-го типа, которые представляют собой кластер клеток, и 5-го типа одиночными клетками опухоли. Оба типа структур имеют низкую степень дифференцировки и высокий уровень полиморфизма. Выявлен ряд изменений на уровне тенденций. При наличии структур 1 и 2-го типов инфильтрата была больше доля CD4+ Т-лимфоцитов и CD20+ В-лимфоцитов. При наличии в опухоли структур 3-го типа, наобо-

рот, обнаружено уменьшение относительного количества CD3+ и CD8+ Т-лимфоцитов.

Поскольку ранее была показана выраженная связь низкого уровня воспалительной инфильтрации с лимфогенным метастазированием [2], особый интерес представлял анализ его клеточного состава в зависимости от распространенности злокачественного процесса и поражения регионарных лимфоузлов метастазами (Т- и ^критерий по ТКМ-классификации опухолей) (табл. 2).

Результаты свидетельствуют, что при значениях величин опухоли, соответствующих Т3-4, степень воспалительной инфильтрации меньше на уровне тенденции, чем при Т1-2. Величина опухоли не была связана с наличием изучаемых популяций клеток воспалительного инфильтрата. Обнаружена связь воспалительной инфильтрации с лимфогенным метастазированием. У пациентов с N1-3 выражен-

Таблица 2

Характеристика воспалительной инфильтрации в зависимости от величины опухоли и лимфогенного метастазирования (%, Ме (01-03))

Характеристика во спалительной инфильтрации T1-2 (n=15) T3-4 (n=29) Р N0 N1-3 (n=28) (n=16) Р

Выраженность 55 40 0,103 52,5 40 0,009

воспаления (40; 70) (35; 55) (40; 70) (35; 41,5)

СБ3+ 45 45 0,671 55 22,5 0,021

(40; 60) (20; 60) (40; 60) (15; 50)

СБ4+ 5 (5; 20) 10 (5; 17,5) 0,525 10 8,8 (5;15) (5; 20) 0,792

СБ8+ 15 15 0,332 15 17,5 0,219

(5; 20) (7,5; 25) (5; 20) (10; 28,8 )

СБ20+ 2,5 (1; 10) 1 (1; 10) 0,665 3,8 1 (1; 9,4) (1; 10) 0,95

СБ68+ 5 (1; 10) 5 (5; 8,8) 0,544 5 5 (2; 9,4) (5; 8,8) 0,907

Таблица 3

Связь состава воспалительного инфильтрата с наличием разных типов опухолевых структур при

отсутствии лимфогенных метастазов (в %, Me (Q1-Q3))

Кле- 1-й тип 2-й тип 3-й тип 4-й тип 5 -й тип

точные Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть

элементы (n=13) (n=15) (n=4) (n=24) (n=16) (n=12) (n=13) (n=15) (n=20) (n=8)

CD3+ 55 55 40 (17,5; 57,5 55 50 60 55 55 57,5

(35; 70) (40; 60) 58,8) (40; 60) (40; 72,5) (18,8; 60) (25; 65) (40; 60) (32,5; 60) (41,3; 71,3)

Р 0,525 0,59 0,28 0,804 0,636

CD4+ 10 10 5 10 10 10 10 5 10 6,3

(5; 13, 8) (5; 20) (5; 16,3) (5; 15) (5; 18,8) (5; 11,9) (7,5; 16,3) (5; 15) (5; 18,8 (5; 13,8)

Р 0,717 0,355 0,568 0,71 0,533

CD8+ 20 10 15 15 15 12,5 15 15 15 15

(10; 20) (5; 20) (6,3; 20) (5; 20) (10; 20) (5; 20) (5; 20) (5; 20) (6,3; 20) (5; 27,5)

p 0,185 0,975 0,45 0,576 0,823

CD20+ 1 5 1 5 3 3,8 2,5 5 1,8 5

(1; 8,8 ) (1; 10) (1; 7,8) (1; 9,4) (1; 6,9) (1; 11,9) (0,5; 8,8) (1; 10) (1; 6,9) (1; 11,9)

Р 0,618 0,635 0,698 0,209 0,469

CD68+ 5 5 7,5 5 5 5 5 5 5 5

(3; 7,5) (1; 10) (2; 13,8) (2; 7,5) (2; 6,9) (2; 10) (5; 8,8) (1; 10) (2; 9,4) (2; 8,8)

Р 0,618 0,645 0,478 0,576 0,709

Таблица 4

Связь состава воспалительного инфильтрата с наличием разных типов опухолевых структур при

наличии лимфогенных метастазов (в %, М (01; 03))

Кле- 1-й тип 2-й тип 3-й тип 4-й тип 5-й тип

точные Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть Нет Есть

элементы (п=10) (п=6) (п=3) (п=13) (п=9) (п=7) (п=7) (п=9) (п=10) (п=6)

CD3+ 42,5 17,5 20 25 25 20 20 25 (17,5; 47,5 17,5

(18,8; 52,5) (13,8; 36,3) (10; ) (15; 55) (17,5; 60) (15; 45) (15; 60) 47,5) (18,8; 60) (13,8; 21,3)

Р 0,263 0,364 0,252 0,758 0,031

CD4+ 5 15 5 10 10 7,5 10 7,5 10 6,3

(4; 12,5) (6,9; 45) (5; ) (5; 20) (5; 30) (1; 20) (5; 20) (5; 20) (5; 20) (4; 25)

Р 0,093 0,146 0,47 0,918 0,713

CD8+ 17,5 15 5 20 (12,5; 25 10 30 15 22,5 10

(5; 31,3) (10; 32,5) (5; ) 32,5) (15; 35) (5; 15) (5; 35) (10; 22,5) (13,8; 35) (5; 21,3)

Р 1 0,025 0,023 0,47 0,093

CD20+ 1 7,5 1 5 5 1 1 5 1 3

(0,9; 6,3) (1; 16,3) (0; ) (1; 11,3) (1; 13,8) (0,5; 5) (1; 10) (0,8; 11,3) (0,9; 10,6) (1; 11,3)

Р 0,118 0,111 0,114 0,918 0,635

CD68+ 5 5 5 5 5 5 5 5 5 7,5

(1; 6,3) (5; 10) (1; ) (5; 7,5) (1; 5) (5; 10) (1; 5) (5; 10) (4; 5) (4; 12,5)

Р 0,368 0,9 0,091 0,174 0,263

ность воспалительной реакции была в 1,3 раза ниже, чем у больных с N0 (40 % и 52,5 % соответственно), главным образом за счет снижения количества CD3+ Т-лимфоцитов: у пациентов с N1-3 их количество было вдвое ниже по сравнению с пациентами с N0 (табл. 2). По нашим данным, количество CD20+ В-лимфоцитов и CD68+ макрофагов в опухоли не различалось у пациентов с Т1-2/Т3-4 и Ш/Ш-3.

Отдельно оценивали связь морфологической гетерогенности и условий опухолевого микроокружения с лимфогенным метастазированием. У пациентов с N0 зависимости параметров воспалительной инфильтрации от морфологической гетерогенности не было обнаружено (табл. 3). В противоположность этому у пациентов с N1-3 выявлена такая связь (табл. 4).

При наличии в опухоли структур 1 и 2-го типов увеличена доля CD4+ Т-лимфоцитов-хелперов и CD20+ В-лимфоцитов. В опухолях со структурами 2-го типа увеличено еще и относительное количество CD8+ цитотоксических лимфоцитов. В опухолях со структурами 3-го типа зависимость обратная: уменьшена доля CD8+ цитотоксических лимфоцитов и CD20+ В-лимфоцитов. Наконец, в опухолях с одиночными клетками (5-й тип структур) уменьшено общее количество CD3+ Т-клеток и среди них CD8+ цитотоксических лимфоцитов.

Обсуждение

Воспалительная инфильтрация плоскоклеточных карцином встречается постоянно и, как правило, достаточно выражена. Результаты исследования демонстрируют связь проявлений воспалительной реакции с гетерогенностью морфологического строения плоскоклеточных карцином. Причем это касается как дендритных клеток, располагающихся среди опухолевых клеток многоклеточных кластеров, так и лейкоцитов, инфильтрирующих строму

опухоли. ДК опухолевых структур, подобно ДК нормального плоского эпителия, способны воспринимать воздействия антигенов и То11-лигандов, тем самым участвуя в развитии иммуновоспалитель-ных реакций как врожденного, так и адаптивного типов [7]. Происходит это, в частности, благодаря синтезу КЛ провоспалительных цитокинов, например TNF-а и ^-12. Прямая корреляция между количеством ДК в структурах 1-го типа и общим количеством Т-клеток и CD4+ Т-хелперов в строме опухоли соответствует описанной выше закономерности. Связь КЛ с воспалительной, преимущественно лимфоидной инфильтрацией описана при раке гортани. Высокое содержание Т-лимфоцитов и дендритных клеток рассматривается как благоприятный прогностический фактор, повышающий общую выживаемость пациентов [8, 9].

Примечательно, что корреляция количества клеток воспалительного инфильтрата имеется только с ДК в высокодифференцированных структурах 1-го типа, но не с ДК менее дифференцированных структур 2-4-го типов. Это обстоятельство, по-видимому, можно трактовать как косвенный аргумент в пользу предположения о том, что для полноценного функционирования ДК должны взаимодействовать с высокодифференцированны-ми клетками плоского эпителия. В определенной степени предположение подтверждается данными исследований, в которых показано, что наибольшее количество КЛ обнаруживалось в высокодиффе-ренцированных опухолях, наименьшее - в низко-дифференцированных новообразованиях [10].

Наши результаты демонстрируют положительную роль воспалительной инфильтрации, поскольку при большей распространенности опухоли (Т3-4) и наличии лимфогенных метастазов (N1-3) наблюдалось уменьшение степени инфильтрации стромы плоскоклеточных карцином. Лимфогенное

метастазирование было ассоциировано еще и с уменьшением в инфильтрате общего количества Т-клеток.

Внутриопухолевая гетерогенность морфологического строения плоскоклеточных карцином характеризуется основным признаком - степенью дифференцировки опухолевых клеток, строящих соответствующие структуры. Важно подчеркнуть, что структуры разной степени дифференцировки формируются в одной опухоли. Оценка связи гетерогенности морфологического строения плоскоклеточных карцином и воспалительной инфильтрации позволяет обсуждать роль степени дифференцировки опухолевых элементов в структурах в формировании воспалительного микроокружения. Первым аргументом в пользу существования такой зависимости служит обсуждаемая выше корреляционная зависимость между КЛ в высокодифференцированных структурах опухоли и CD4+ Т-хелперами в инфильтрате. Дополнительными аргументами являются большая степень инфильтрации стромы CD4+ Т-хелперами при наличии высокодифференцированных структур 1 и 2-го типа и уменьшение общей воспалительной инфильтрации при наличии низкодифференци-рованных структур 4 и 5-го типов. При наличии структур 3-го типа (тоже низкой степени дифференцировки) в инфильтрате была меньше доля CD3+ и CD8+ лимфоцитов.

Таким образом, можно предполагать, что вы-сокодифференцированные клеточные кластеры плоскоклеточных карцином напрямую связаны с более выраженной общей воспалительной реакцией или большим относительным количеством Т-лимфоцитов. Причем воспалительная инфильтрация в такой ситуации коррелирует с количеством клеток Лангерганса. Остается открытым

ЛИТЕРАТУРА/REFERENSES

1. Савенкова О.В., ЗавьяловаМ.В., Бычков В.А., Чойнзонов Е.Л., Перельмутер В.М. Связь экспрессии матриксных металлопротеиназ с морфологической гетерогенностью, дифференцировкой опухоли и лимфогенным метастазированием плоскоклеточной карциномы гортани. Сибирский онкологический журнал. 2015; 1: 51-58. [Savenk-ova О.У., Zavyalova M.V., Bychkov V.A., Choinzonov E.L., Perelmuter V.M. Relationship between expression of matrix metalloproteinases and morphological heterogeneity, tumor differentiation and lymphogenous metastasis of squamous cell laryngeal carcinoma. Siberian Journal of Oncology. 2015; 1: 51-58. (in Russian)].

2. Бычков В.А., Бондарь Л.Н., Чойнзонов Е.Л., Перельмутер В.М. Характер течения плоскоклеточных карцином головы и шеи в зависимости от морфологических особенностей исходной опухоли. Сибирский онкологический журнал. 2017; 16 (2): 20-26. [Bychkov V.A., BondarL.N., ChoynzonovE.L., Perelmuter V.M. Head and neck squamous cell carcinoma depending on the morphological characteristics of the primary tumor. Siberian Journal of Oncology. 2017; 16 (2): 20-26 (in Russian)]. doi: 10.21294/18144861-2017-16-2-20-26.

3. Grivennikov S.I., Greten F.R., Karin M. Immunity, inflammation, and cancer. Cell. 2010 Mar 19; 140 (6): 883-99. doi: 10.1016/j. cell.2010.01.025.

4. Scheele C.L.G.J., Maynard C., van Rheenen J. Intravital insights into heterogeneity, metastasis, and therapy responses. Trends Cancer. 2016 Apr; 2 (4): 205-216. doi: 10.1016/j.trecan.2016.03.001.

5. Bonnans C, Chou J., Werb Z. Remodelling the extracellular matrix in development and disease. Nat Rev Mol Cell Biol. 2014 Dec; 15 (12): 786-801. doi: 10.1038/nrm3904.

вопрос: дифференцировка опухолевого эпителия первична, а изменение воспалительной инфильтрации вторично или наоборот?

Однако связь между степенью дифференциров-ки опухолевых структур и характером воспалительной инфильтрации стромы, вполне вероятно, может не носить причинно-следственный характер. Об этом красноречиво свидетельствует тот факт, что обнаруженный нами феномен связи между дифференцировкой опухолевых структур и характером воспалительной инфильтрации регистрируется только в группе случаев плоскоклеточных карцином с лимфогенными метастазами. В группе с отсутствием лимфогенных метастазов воспалительная инфильтрация не связана с морфологической гетерогенностью. Вполне допустимо наличие третьего фактора, с которым причинно-следственно связаны, независимо друг от друга, и лимфогенное метастазирование, и ассоциация воспалительной инфильтрации со степенью диф-ференцировки опухолевых структур. Если это так, то наличие лимфогенных метастазов может быть индикатором для деления пациентов на две группы: с наличием и отсутствием влияния неизвестного фактора.

Заключение

Проведенное исследование свидетельствует о снижении уровня воспалительной реакции, включая Т-клеточный ответ, у пациентов с реализованным лимфогенным метастазированием, а также демонстрирует в этой группе наблюдения ассоциацию наличия опухолевых структур разной степени дифференцировки с выраженностью и характером воспалительного инфильтрата и связь клеток Лангерганса со стромальной воспалительной реакцией.

6. Salgado R., Denkert C., Demaria S., Sirtaine N., Klauschen F., Pruneri G., Wienert S., Van denEynden G., BaehnerF.L., Penault-LlorcaF., Perez E.A., Thompson E.A., Symmans W.F., Richardson A.L., Brock J., Criscitiello C., Bailey H., Ignatiadis M., Floris G., Sparano J., Kos Z., Nielsen T., Rimm D.L., AllisonK.H., Reis-Filho J.S., Loibl S., Sotiriou C., Viale G., Badve S., Adams S., Willard-GalloK., Loi S.; International TILs Working Group 2014. The evaluation of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) in breast cancer: recommendations by an International TlLs Working Group 2014. Ann Oncol. 2015 Feb; 26 (2): 259-71. doi: 10.1093/ annonc/mdu450.

7. TeunissenM.B. Dynamic nature and function of epidermal Langerhans cells in vivo and in vitro: a review, with emphasis on human Langerhans cells. Histochem J. 1992 Oct; 24 (10): 697-716.

8. Gallo O., Libonati G.A., Gallina E., Fini-Storchi O., Giannini A., Urso C., Bondi R. Langerhans cells related to prognosis in patients with laryngeal carcinoma. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 1991; 117 (9): 1007-10. doi: 10.1001/archotol.1991.01870210079015.

9. EstebanF., Ruiz-CabelloF., Gonzalez-MolesM.A., Lopez-Gonza-lezM.A., FunezR., RedondoM. Clinical significance of Langerhans cells in squamous cell carcinoma of the larynx. J Oncol. 2012; 2012: 753296. doi: 10.1155/2012/753296.

10. MalothA., Dorankula S.P.R., PasupulaA.P., ThokalaM.R., Mud-dana K., Ramavath R. A Comparative immunohistochemical analysis of Langerhans cells in oral mucosa, oral lichen planus and oral squamous cell carcinoma. J Clin Diagn Res. 2015 Jul; 9 (7): ZC76-9. doi: 10.7860/ JCDR/2015/14170.6235.

Поступила/Received 09.09.18 Принята в печать/Accepted 28.11.18

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Бычков Вячеслав Алексеевич, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории онковирусологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Россия). E-mail: va.bych@gmail.com. SPIN-код: 6174-4896. AuthorlD (РИНЦ): 627135. ResearcherlD (WOS): C-8610-2012. Author ID (Scopus): 34970901200. ORCID: 0000-0003-2228-8335.

Бондарь Людмила Николаевна, врач-патологоанатом отделения общей и молекулярной патологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г Томск, Россия). E-mail: bondaroncology@mail.ru. SPIN-код: 2620-1353. ResearcherlD (WOS): G-8195-2018. Author ID (Scopus): 5720054694. ORCID: 0000-0001-6176-548.

Таширева Любовь Александровна, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отделения общей и молекулярной патологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Россия). E-mail: lkleptsova@mail.ru. SPIN-код: 4371-5340. AuthorID (РИНЦ): 632803. ResearcherID (WOS): C-8222-2012. Author ID (Scopus): 55234960400. ORCID: 0000-0003-2061-8417.

Черемисина Ольга Владимировна, доктор медицинских наук, заведующая эндоскопическим отделением, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Россия). E-mail: endoscopy@oncology.tomsk.ru. SPIN-код: 9579-2691. AuthorID (РИНЦ): 562287. ResearcherID (WOS): C-9259-2012. Author ID (Scopus): 6602197938. ORCID: 0000-0001-7234-4708.

Чойнзонов Евгений Лхамацыренович, академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, директор Томского национального исследовательского медицинского центра Российской академии наук (г. Томск, Россия). E-mail: nii@oncology.tomsk.ru. SPIN-код: 2240-8730. AuthorID (РИНЦ): 550195. ResearcherID (WOS): P-1470-2014. Author ID (Scopus): 6603352329. ORCID: 0000-0002-3651-0665.

Перельмутер Владимир Михайлович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделением общей и молекулярной патологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук (г. Томск, Россия). E-mail: pvm@ngs.ru. SPIN-код: 6252-5319. AuthorID (РИНЦ): 86909. ORCID: 0000-0002-7633-9620. Researcher ID (WOS): С-8227-2012. Author ID (Scopus): 8091317300.

Финансирование

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ и администрации Томской области в рамках научного проекта № 18-415-703014\18. Конфликт интересов

Авторы объявляют, что у них нет конфликта интересов.

ABOUT THE AUTHORS

Viacheslav A. Bychkov, PhD, Senior Researcher, Viral Oncology Laboratory, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russia). E-mail: va.bych@gmail.com. ResearcherID (WOS): C-8610-2012. Author ID (Scopus): 34970901200. ORCID: 0000-0003-2228-8335.

Ludmila N. Bondar, MD, pathologist, Department of General and Molecular Pathology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russia). E-mail: bondaroncology@mail.ru. ResearcherID (WOS): G-8195-2018. Author ID (Scopus): 5720054694. ORCID: 0000-0001-6176-548.

Lubov A. Tashireva, PhD, Senior Researcher, Department of General and Molecular Pathology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russia). E-mail: lkleptsova@mail.ru. ResearcherID (WOS): C-8222-2012. Author ID (Scopus): 55234960400. ORCID: 0000-0003-2061-8417.

Olga V. Cheremisina, MD, DSc, Head of the Department of Endoscopy, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russia). E-mail: endoscopy@oncology.tomsk.ru. ResearcherID (WOS): C-9259-2012. Author ID (Scopus): 6602197938. ORCID: 0000-0001-7234-4708.

Evgeny L. Choynzonov, MD, DSc, Professor, Academician of RAS, Director of the Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences; Head of the Department of Oncology, Siberian State Medical University (Tomsk, Russia). E-mail: nii@oncology. tomsk.ru. ResearcherID (WOS): P-1470-2014. Author ID (Scopus): 6603352329. ORCID: 0000-0002-3651-0665. Vladimir M. Perelmuter, MD, DSc, Professor, Head of the Department of General and Molecular Pathology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center Russian Academy of Sciences (Tomsk, Russia). E-mail: pvm@ngs.ru. ResearcherID (WOS): C-8227-2012. Author ID (Scopus): 86909. ORCID ID: 0000-0002-7633-9620.

Funding

The reported research was funded by the Russian Foundation for Basic Research and the government of the Tomsk region of the Russian Federation, grant № 18-415-703014\18. Conflict of interest

The authors declare that they have no conflict of interest.