CC BY
13
В1СНИК Украгнсъког медичног стоматологгчног акадежш
УДК 616 - 001.4 - 089.28 - 028.77
ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ РАНЕВОГО ПРОЦЕССА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ СЕТЧАТЫХ ПРОТЕЗОВ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)*
Гюльмамедов Ф.И., Плахотников И.А., Попандопуло А.Г., Гюльмамедов П.Ф., Полунин Г.Е.
Донецкий государственный медицинский университет им. М.Горького, г. Донецк
В экспериментальном исследовании на крысах выполнена имплантация полипропиленового сетчатого протеза с предварительной фиксацией на нем культурой аллофибробластов. В сроки 2, 4, 6 недель выполняли реимплантацию и микроскопически изучали полученный материал используя различные методики окрашивания. Изучали динамику течения раневого процесса, реакцию сетчатого протеза на окружающие ткани, скорость образования соединительнотканного рубца. Было доказано, что применение модифицированного сетчатого протеза повышает скорость регенераторных процессов и прорастания межволоконных пространств соединительной тканью при минимальных признаках воспалительной реакции в окружающих тканях.
Ключевые слова: сетчатый протез, соединительная ткань, фибробласт.
Введение
Проблема хирургического лечения паховых грыж у больных пожилого и старческого возраста всегда стояла перед хирургией [3]. Вопросам регенерации тканей после выполнения гернио-пластики уделяется большое значение [1]. Оперативное лечение, которое выполняется у лиц пожилого и старческого возраста, имеет особенности в течении репаративных процессов [3]. Известно, что физиология старения обусловливает обязательное ухудшение репарации [4]. Исследования, которые были проведены в последние 10 лет показали, что около 30% пожилых людей действительно имеют сниженные способности относительно тканевой регенерации. Длительное применение сетчатых протезов в лечении грыжевой болезни показало наличие у них такого нежелательного эффекта, как возникновение воспалительной реакции. Сейчас доказано, что заживление раны невозможно без макрофагов, поскольку последние синтезируют цитокины и факторы роста, которые усиливают воспалительную реакцию [5], а также ускоряют хемотаксис клеток, стимулируют клетки к пролиферации и трансформации. Экспериментальными и клиническими исследованиями последних лет было показано, что синтез и секреция фибробластами (ФБ) фактора роста фибробла-стов играет непосредственную роль в период раневого заживления [6]. Исследование воспалительной реакции организма при имплантации сетки «Рго1епе» и «Эигд1рго» показало, что при применение монофиламентной сетки полипропилена воспалительный ответ тканей был выраженным. Применение фактора роста фиброб-ластов в эксперименте на животных с воспроизведенным сахарным диабетом показал ускорение процессов регенерации тканей за счет улучшения не только репаративных процессов, но и усиленной тканевой микроциркуляции за счет неоангиогенеза [7].
Цель исследования В эксперименте проследить особенности течения раневого процесса при использовании полипропиленового сетчатого протеза (СП) с предварительной его обработкой культурой аллофибробластов (КА).
Материалы и методы исследования Экспериментальное исследование проводилось на 10 самцах крыс весом 120 - 150 гр. с использованием полипропиленовых СП размером 1 х 2 см. Животные были распределены на 2 группы по 5 в каждой. Первую группу составляли животные, которым имплантировали СП. Вторую группу животные, которым имплантировали СП предварительно обработанный КА. Крысам 1-й и 2-й группы имплантацию СП проводили в условиях внутримышечного кетамино-вого наркоза в асептических условиях. Под апоневроз устанавливали и фиксировали отдельными проленовыми швами СП. Рану послойно ушивали. На пятые сутки снимали швы. Для получения КА в условиях стерильной операционной проводили забор биоптатов кожи лабораторных животных. Фрагменты кожи размером 2x4 мм. размещали в 0,25% раствор трипсина («Биолот», Санкт-Питербург) и инкубировали при 40С на протяжении 1б-20 часов. После трип-синизации кожи и отделения эпидермиса, дерму выкладывали в чашку Петри и заливали раствором Хенкса («Биолот», Санкт-Питербург), после чего измельчали. В дальнейшем кусочки двукратно промывали раствором Хенкса («Биолот», Санкт-Питербург). Культуральный флакон заливали небольшим количеством питательной смеси Игла («Биолот», Санкт-Питербург) и переносили кусочки дермы во флакон. Полученный через 3-4 недели монослой КА снимали со дна культурального флакона и в асептических условиях переносили на сетчатый протез. Общая длительность исследования составляла 6 недель. Каждые 2 недели после имплантации СП
* Работа является фрагментом плановой научно-исследовательской работы кафедры общей хирургии № 2 Донецкого государственного медицинского университета им.М.Горького "Хирургическая реабилитация больных с заболеваниями и повреждениями передней брюшной стенки, пищевода и толстой кишки, а также с хирургическими осложнениями заболеваний эндокринной системы" (№ госрегистрации 0105и003456).
Актуальт проблеми сучасно! медицини
(через 2, 4, и 6 недель) в операционной, в условиях внутримышечного кетаминового наркоза у экспериментальных животных удаляли имплантированные СП вместе с перифокальными тканями с последующим восстановлением целостности передней брюшной стенки. Все лабораторные животные остались живыми.
Удаленные СП помещали в 10% раствор нейтрального формалина. Гистологические срезы которые были полученные во время реимплан-тации СП, окрашивали гематоксилином-эозином, альциановим синим, гематоксилином-пикофуксином. Также использовали методику Ван-Гизона и ставили РАЭ-реакцию. В дальнейшем оценивали динамику течения раневого процесса, реакцию СП на окружающие ткани, скорость образования соединительнотканного рубца.
Результаты и их обсуждение: Для изучения реакции имплантированной КА на СП во время
культивирования, мы провели микроскопическое исследование СП через 6 и 14 суток. При исследовании СП через 6 суток с момента начала культивирования, ФБ заполняют около 25% СП. При исследовании СП через 14 суток после начала культивирования КА оказалось, что около 90% площади СП заполнена пролиферирующи-ми ФБ. Оптимальными сроками культивации КА являются 14 сутки.
Сравнение морфологических признаков прорастания СП протеза СТ и реакции парасетча-тых тканей через 2 недели после имплантации, продемонстрировало у животных 1-й группы наличие признаков тяжелого хронического воспаления с минимальной регенеративной реакцией. Напротив, во 2-й группе признаки воспалительной реакции были менее значительными, при этом отмечено более интенсивные процессы регенерации и заполнения сетчатых пространств молодыми ФБ и молодой СТ (табл. 1).
Таблица 1.
<е изменения в сетчатом протезе в период культивации КА
Сроки исследования Группы животных
1-я 2-я
Через 2 недели Признаки значительного хронического воспаления вокруг сетки. Большое количество молодых ФБ. Ячейки молодой СТ. Минимальные признаки воспалительной реакции вокруг сетки. Вокруг сетки большое количество молодой СТ, молодых ФБ, ячейки пучков коллагеновыхволокон.
Через 4 недели Умеренная воспалительная перифокальная реакция. Уменьшение количества клеток инородных тел. Большая плотность молодой СТ. Увеличение количества молодых ФБ. Минимальная воспалительная перифокальная реакция. Большое количество молодых ФБ и макрофагов вокруг сетки. Значительное увеличение количества волокон зрелой ст. Уменьшение количества молодых ФБ на периферии от волокон сетки.
Через 6 недель Большое количество соединительнотканных волокон. Меньшее количество клеток инородных тел. Умеренная перифокальная хроническая воспалительная реакция. Вокруг СП и между волокон сетки зрела СТ. Перифокальная воспалительная реакция отсутствует.
Если у крыс 1-й группы через 4 недели после имплантации СП выявлена умеренная воспалительная реакция перифокальных тканей с начальными признаками репарации, то у животных 2-й группы происходила активная регенерация в виде увеличения численности молодых ФБ вокруг волокон сетки и количества волокон зрелой соединительной ткани. Отличия морфологической картины сеток и парасетчатых тканей через 6 недель после имплантации СП касаются в первую очередь сохранением признаков воспалительной реакции перифокальных тканей и медленностью процессов прорастания и синтеза волокон СТ у крыс 1-й группы. Напротив у животных 2-й группы отмечено формирование зрелой СТ с прорастанием сетчатых пространств с минимальной клеточной реакции перифокальных тканей.
Выводы
Таким образом, при предварительной обработке СП КА определялась высокая скорость регенераторных процессов и прорастания межволоконных пространств сетки при минималь-
ных признаках воспалительной реакции перифокальных тканей, что опережает по времени соответствующие процессы репарации и заживления у крыс без применения такой методики. Эффективность модифицированных СП экспериментально и морфологически обоснована.
Литература
1. Белянский Л.С., Савицкая И.М., Фурманов Ю.А., Маной-ло Н.В. Особенности течения раневого процесса в имп-лантационной герниопластике // Клш1чна xipyprifl.-.2002. -№11-12. - C. 8-9.
2. Воровський О.О., Верещапн Ф.Ф., Карий Я.В., Чайковсь-кий О.С. Особливосп лкування пахвинноТ гриж1 у хворих похилого та старечого вку // Клш1чна xipyprifl. - 2003. - № 11. - С. 11-12.
3. Егиев В.Н., Чижов Д.В., Филаткина Н.В. Взаимодействие полипротиленовых эндопротезов с тканями передней брюшной стенки // Герниология.-2005.-№2.- С. 41-49.
4. Шляховский И.А., Чекмазов И.А. Современные аспекты хирургического лечения грыж брюшной стенки // Consilium medicum.-2002.-№7.-C. 7-11.
5. Amid P.K., Parvis K., Shulman A.G., Lichtenstein l.L. Selecting Synthetic Mesh for the Repair of Groin Hernia // Postgraduate General Surgery.-2002.-Vol. 4.- P.150-155.
6. Cervigni M., Natale F. The use of synthetics in the treatment of pelvic organ prolapse // Curr. opin. urol.-2001.- Vol.11(4).-P. 429-435.
Tom 7, Выпуск 1-2
211
BiCHHK Украгнсъког медичног стоматологгчног акадежш
7. Continenza M.A., Vicentini C., Paradiso-Galatioto G. et al. In tifilamented polyestere // Ital. j. anat. embryol.-2003.-
vitro study of human dermal fibroblasts seeded on two kinds Vol.108(4).-P. 231-239.
of surgical meshes: monofilamented polypropylene and mul-
Реферат
0С0БЛИВ0СТ1 ПЕРЕБ1ГУ РАНОВОГО ПРОЦЕСУ ПРИ ВИК0РИСТАНН1 М0ДИФ1К0ВАНИХ С1ТЧАСТИХ ПР0ТЕ31В (ЕКСПЕРИМЕНТАПЬНЕ Д0СЛ1ДЖЕННЯ)
Гюльмамедов Ф.1., Плахотников I.A., ПопандопулоА.Г., Гюльмамедов П.Ф., Полунин Г.Е.. Ключов1 слова: С1тчастий протез, сполучна тканина, ф1бробласт.
У експериментальному дослщжены на щурах виконана ¡мплантац1я полипропиленового атчастого протеза з попередньою ф1к-сащсю на ньому культурою аллофибробласлв. У термши 2, 4, 6 тижыв виконували ре1мплантащю та м1кроскоп1чно вивчали одержаний матер1ал використовуючи pi3Hi методики фарбування. Вивчали динамку nepe6iry раньового процесу, реакцш атча-стого протеза на навколишы тканини, швидкють утворення сполучнотканинного рубця. Було доведено, що застосування моди-фкованого с1тчастого протеза пщвищус швидкють регенераторних процеав i проростання м1жволоконних npocTopiB сполучною тканиною при мш1мальних ознаках запальноТ реакцп в навколишых тканинах.
УДК 617-001.4 (035)
РАНЕВОЙ ПРОЦЕСС КАК ФУНДАМЕНТАЛЬНАЯ ПРОБЛЕМА СОВРЕМЕННОЙ КЛИНИЧЕСКОЙ ХИРУРГИИ
Даценко Б.М.
Харьковская медицинская академия последипломного образования, г. Харьков
На основании данных литературы и многолетнего опыта лечения больных с локальными формами гнойной хирургической инфекции (около 3000 наблюдений) представлены основные проблемы раневого процесса, имеющие фундаментальный характер: роль бактерий в раневом инфекционном процессе; роль медиаторов воспаления в раневом инфекционном процессе; системы антибактериальной защиты организма; взаимодействие клеточных популяций в гнойной ране; формирование иммунного ответа при гнойной инфекции. Проводимое с учетом современных достижений в разработке указанных проблем патогенетическое лечение гнойных ран позволяет улучшить результаты и сократить сроки лечения.
Ключевые слова: раневой процесс, микрофлора раны, медиаторы воспаления, клеточная популяция, антибактериальная защита, патогенетическое лечение.
Гнойная рана представляет собой очаг травматической (чаще всего) деструкции тканей, осложненный инфекцией. Наличие в ране этих 2 повреждающих факторов - тканевой деструкции и возбудителя инфекции - определяют развитие в ней раневого гнойно-воспалительного процесса.
Под термином «раневой процесс» понимается сложный комплекс общих и местных биологических реакций организма, развивающийся в ответ на очаг инфицированной деструкции тканей и направленный на скорейшее заживление раневого дефекта.
С позиций общей патологии раневой процесс представляет собой частный случай воспаления, местно проявляющийся одновременным сочетанием деструктивных и репаративных изменений. Таким образом, воспаление включает в себя не только процессы, нарушающие жизнедеятельность ткани, т.е. процессы патологические, но и процессы защитные, возместительные, т.е. физиологические. Эти процессы воспаления, развивающиеся в тканях гнойной раны в виде альтерации, экссудации, некролизиса, воспалительной инфильтрации и репарации неразрывно связаны между собой и протекают одновременно, но в разном количественном выражении.
Так, процессы пролиферации обнаруживаются в ране уже через несколько часов после ее образования, однако становятся доминирующими после подавления инфекции и очищения раны
от некротических тканей.
Превалирование в количественном выражении того или иного признака воспаления в гнойной ране позволяет выделить ряд фаз раневого процесса, последовательно переходящих одна в другую.
Анализ предложенных морфологами [Н.Н.Аничков, 1951; И.В.Давыдовский, 1956; E Peacock. a W. Van Winkle, 1970], патофизиологами [Д.Е.Альперн, 1954; А.Д.Адо и И.Р.Петров, 1957;Н.Н.Зайко, 1996] и клиницистами [И.Г.Руфанов, 1953; С.С.Гирголав, 1956; М.Ф.Камаев, 1970; В.И.Стручков, 1975; М.И.Кузин, 1977; R.Ross, 1968, С.Понкиров, 1977; A.Forrest et al., 1994] классификаций фаз-ности раневого процесса позволил выявить в них ряд разного рода недостатков, затрудняющих использование этих классификаций в практической работе хирурга.
Рациональная классификация фазности раневого процесса должна основываться на четких кпинико-морфологических критериях, однозначно отражающих сущность каждой фазы воспаления. С этих позиций более целесообразной на наш взгляд является предложенная нами в 1985 году классификация раневого процесса, согласно которой различают три последовательные фазы его течения в гнойной ране:
- Гнойно-некротическую фазу, клинически характеризующуюся наличием некротических тканей и гнойного содержимого в ране, края которой отечны и инфильтрированы;
