CC BY
37
Asia. Seventy percent of the clinical strains were characterized by high stability levels of .virulence genes inheritance, 8.7 % were deprived either of the CTX' prophage, or of its ctxA gene. Virulence genes lacking only tcpA gene formed a portion of 3.5 percent. Instability of other MGE containing virulence genes ranged from 1.0 % (for RStp) to 12.3 (for VSP-1). As a whole, 30 % of the clinical strains isolated’ in the territories of different countries, were lacking one or another of the tested virulence associated genes. These results may be indicative of significant genetical heterogeneity present within the population of V. cholerae strains isolated from infected patients.
; . . Поступила 22.03.05
Т.М.Тараненко, С.М.Дальвадянц, М.Н.Киреев, Н.П.Гусева, В.А.Федорова, З.Л.Девдариани
ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРЫ И ФУНКЦИИ ОСНОВНОГО СОМАТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА ЧУМНОГО МИКРОБА
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Представлены современные данные о структурной организации, химической природе и иммунобиологических свойствах основного соматического антигена (ОСА) Yersinia pestis, извлекаемого из .клеток экстракцией по Буавену. Будучи серологически активным гликопротеиновым комплексом, ОСА является носителем общей специфичности у родственных чумных и псевдотуберкулезных иерсиний, находящихся в R-форме диссоциации, участвует в инициации иммунного ответа по клеточному типу и входит в состав химической (Ф1+ОСА) чумной вакцины. Предполагается, что ОСА с характерной для, него структурой циклического гетерогликана представляет собой заменяющий О-специфический полисахарид энтеробактериальный общий антиген, не соединенный с «коровой» частью липополисахарида.
Одним из перспективных направлений в области специфической профилактики чумы является создание препаратов нового типа - бесклеточных вакцин на основе очищенных специфических про-тективных антигенов, лишенных балластных веществ и исключающих нежелательные побочные явления. Конструирование ' чумных химических вакцин антигенного уровня по сути только еще начинается. И хотя в литературе охарактеризовано уже значительное количество антигенов чумного микроба, определены их генетическая детерминированность, молекулярная организация и фармако-биологическая активность [2, 27, 32, 46, 49, 53], в отечественной практике по созданию химической чумной вакцины пока реально используются два антигенных компонента - главный иммуноген, видоспецифический белковый капсульный антиген чумного микроба Ф1 и так называемый основной соматический антиген - комплексный гликопротеи-новый препарат, играющий определенную роль в индукции иммунных реакций при противочумной иммунизации [19, 35].
Указанный углевод содержащий комплексный антиген, извлекаемый из чумного микроба классическим методом Буавена путем экстракции клеток при 4 °С трихлоруксусной кислотой (ТХУ), впервые был назван основным соматическим антигеном (ОСА) в 1966 г. в работе А.АЛопова й В.В.Акимовича, поскольку1 он давал в реакции диффузионной преципитации с гипериммунной лошадиной сывороткой и ее эвглобулином широкую, массивную зону, примыкающую к резервуару с антителами [36].
Невозможность выделения классическим методом Буавена из S- и R-форм чумного микроба полного антигена с эндотоксической активностью еще ранее показали G. Girard [50] и Е.И.Коробкова [31].
Впервые удалось выделить этим методом и охарак-
теризовать по физико-химическим и иммунобиологическим свойствам препарат Буавена из штаммов, У. резШ, утративших рБга, С.М.Дальвадянцу - из штамма 358/12Р-ІІІ [17] и Е.Э.Бахрах и В.И.Вейн-блату - из ЕУ-2 [6]. Позднее подобный антигенный препарат был выделен и из типичных вакцинных штаммов ЕУ и 17 [7]. Полученный препарат по своей химической структуре и фармако-биологической активности не был идентичен типичному комплексному О-соматическому антигену Б-форм грамотри-цательных бактерий с характерной для него химической структурой и наличием эндотоксической активности. В отличие от типичного ЛПС ОСА оказался совершенно не токсичен для белых мышей и морских свинок [5].
Обычно ОСА выделяют из нативной культуры чумного микроба, выращенной в течение 48 ч при 28 °С на агаре Хоттингера. После двукратного экстрагирования ТХУ при 4 °С из объединенного диализованного экстракта препарат получают в сухом виде путем лиофилизации или осаждения ацетоном [8]. Полученный таким способом ОСА имеет стандартные характеристики. Он хорошо растворим в воде и. солевых растворах, термостабилен и серологически гомогенен [3, 45].
Проведенный на первых порах анализ общего химического состава ОСА показал, что по своей химической природе , он представляет собой глико-протеиновый комплекс [3, 17]. Более тщательный анализ ОСА и особенно, его моносахаридного состава установил, что препарат не содержит липида Айв нем отсутствуют сахара, характерные для оли-госахаридного остова, так называемой «коровой» части ЛПС - альдогептоза и КДО. При этом были идентифицированы гексозы и пентозы такие как галактоза, глюкоза, манноза, ксилоза, рибоза, фуко-за и глюкозамин [42].
| K.S.Nefeodov, A.V.Ossin, N.l.Smimova
Genetic Diversity of Pandemic Vibrio cholerae Biovariant lEI Tor Strains Isolated from Different Objects i • j in the Territory of South-East Asia
Russian Anti-Plague Research Institute "Microbe", Saratov
The method of PCR testing of 20 genes involved in mobile genetical elements (CTXcp and RSltp prophages, pathogenicity islandsVPI-1 and VPI-2, pandemicity islands VSP-1 and VSP-2, the persistence island), as well as the core region of the chromosome (hapA, toxR, attRS ) was applied to make genetic “portraits’’ for 62 strains isolated from various-sources in South-East
УДК 616.981.452:576.809.7
Характерно, что при более жестком воздействии на чумные бактерии фенолом, щелочью или разбавленной уксусной кислотой при нагревании из них наряду с ОСА выделяется и ЛПС [5]. Причем оба препарата ОСА и ЛПС или их серологически активные фрагменты являлись самостоятельными специфическими антигенными структурами чумного микроба. Установленная первоначально на вакцинном штамме К реяня ЕУ НИИЭГ такая разобщенность центрального стержня ЛПС и ОСА как возможного носителя его боковых О-специфиче-ских цепей была обнаружена и для штаммов с разными биологическими свойствами: для антибиотикоустойчивых мутантов штаммов У. резШ ЕУ и К-1, ахромогенных вариантов указанных штаммов и ауксотрофных мутантов вирулентного штамма А1435, зависимых от аминокислот, азотистых оснований и витаминов [40]. Подобная структурная организация соматических антигенов определена нами у культур, выделенных в различных природных очагах [9], и у штаммов, находящихся в гладкой форме диссоциации [40].
В последующих исследованиях показано, что ОСА является поликомпонентным препаратом. Первоначально при изучении гомогенности ОСА в электрофорезе было отмечено наличие двух разноименно заряженных компонентов, различающихся по серологической специфичности. Один из них двигался к аноду и реагировал с чумной агглютинирующей лошадиной сывороткой, а другой - к катоду и реагировал только с кроличьей антисывороткой [21]. Установлено, что только «кроличий» компонент ОСА способен резко угнетать дыхание митохондрий печени лабораторных животных - мышей, крыс и кроликов [23].
ОСА оказался неоднородным и по молекулярно-массовому распределению. При фильтрации на различных биогелях - сефадексе 0-75 [38, 44], биогеле Р-200 [14] и ультрагеле АсА-44 [39] получены два специфических полисахаридных компонента, образующих в реакции иммунодиффузии (РИД) с лошадиной сывороткой зоны идентичности, и низкомолекулярный полипептидный фрагмент, серологически активный только с кроличьей антисывороткой. Углеводная часть ОСА по составу гексоз и пентоз несколько варьировала у штаммов с разными биологическими свойствами и выделенных в различных природных очагах [9, 40].
Проведенная нами химическая модификация углеводных фракций с помощью кислотного и щелочного гидролиза, обработки горячим фенолом и протеолитическим ферментом проназой не вызывали заметного разрушения специфического полисахарида и утраты иммунохимической активности [43]. Исходя из этого можно полагать, что специфический полисахарид ОСА по своей химической природе представляет, собой термостабильный, кислоте- и щелочеустойчивый гетероаминогликан, в котором углеводная и полипептидная части связаны достаточно прочно. С помощью метода торможения реакции иммунопреципитации В.И.Вейнблатом было показано [13], что иммунодоминантными сахарами являются глюкоза, галактоза и глюкозамин. Как оказалось, предварительная инактивация бактериальной массы чумного микроба с помощью электромагнитных полей сверхвысоких частот дециметрового диапазона способствовала в 2 раза большему выходу ОСА [48]. '
Сравнительное иммунохимическое изучение
соматических антигенов близкородственных бактерий Y. pestis и Y. pseudotuberculosis [39] показало, что при экстракции по Буавену из R-форм псевдотуберкулезных иерсиний так же, как и у чумного микроба, извлекается только ОСА, являющийся носителем их общей специфичности. Напротив, из типичных S-форм при тех же условиях выделяется полноценный по структуре ЛПС с эндотоксической активностью. При этом препараты ОСА у этих двух родственных видов бактерий с чумной агглютинирующей лошадиной сывороткой в РИД были серо-логически идентичны. Эти данные, а также более высокий выход ОСА свидетельствуют о преимуществе псевдотуберкулезного микроба как источника ОСА [20, 26].
Такая разобщенность ОСА и R-ЛПС у типичных штаммов чумного микроба [4], наличие у некоторых вирулентных культур в ОСА характерных маркеров О-специфичности - 3,6-дидезоксигексоз
[40], наконец, возможность извлечения экстракцией ТХУ из атипичных, находящихся в OS-форме диссоциации бадхызских штаммов чумного микроба
[41] и псевдотуберкулезоподобного варианта ЕУм полного О-антигена с липидом А, эндотокЬической активностью и серологически идентичного ОСА вакцинного штамма Y. pestis EV [5] дали основание ряду исследователей отождествить этот антиген с О-специфическим полисахаридом [4, 12, 42].
Сравнительно недавно, в 1994 г., химический анализ полисахаридсодержащего препарата, выделенного из штамма EV чумного микроба экстракцией ТХУ, описанный в работе Е.Vinogradov et al. [56], показал, что по химическому составу и структурной организации он представляет собой энтеро-бактериальный общий антиген (ЭОА), характерный для большинства энтеробактерий [54]. С помощью ЯМР и масс-спектрометрии препарат был охарактеризован как циклический тетрамер из повторяющихся трисахаридных единиц, состоящих из ацети-лированной маннозаминуроновой кислоты, дезок-сигалактозы и глюкозы.
Следует отметить, что обнаружение именно ЭОА у возбудителя чумы и родственных микроорганизмов еще в 1976 г. [52] позволило в отличие от пастерелл выделить их в род Yersinia и включить в семейство Enterobacteriaceae. Как считает O.Lude-ritz [51], ЭОА при определенных условиях может заменять О-специфические цепи, а иногда даже встраиваться в «коровую» часть. Можно полагать, что ОСА чумного микроба как раз и представляет собой такую гаптеновую, не соединенную с кором форму ЭОА, с характерной для него структурой циклического гетерополисахарида. В то же время получены данные, свидетельствующие о присутствии в ОСА и ЛПС чумного микроба помимо специфических эпитопов еще и общих антигенных детерминант [25].
Что касается генетического контроля; синтеза ЭОА, то он связан с синтезом ЛПС и мастером генов хромосомы rfe, rff и rfb [54]. А кластер генов, кодирующих синтез О-боковых цепей, по данным M.Skurnik et al. [55], у чумного микроба инактивирован, поскольку экспрессия этого антигена, по-видимому, не обязательна для вирулентности и жизнедеятельности возбудителя чумы.
Биологическое действие ЭОА до конца еще не выяснено. Установлено, что он термостабилен, не токсичен и является активным индуктором антител, в том числе и перекрестно реагирующих в организ-
ме людей [52, 54]. В отношении ОСА" чумного микроба установлено, что он вызывает образование антител у лошадей (Н), кроликов (И.) [10, 17] и у мышей [47], протективён для морских свинок и, по-видимому, для человека, а также обладает высокой аллергогенной и аллергенной активностью [17]. При этом в отличие от Ф1, выявляющей как правило немедленный тип гиперчувствительности, ОСА регистрирует гиперчувствительность смешанного или преимущественно замедленного типов с максимумом развития реакции через 24 ч [10], ;,
Об участии ОСА в инициации иммунного ответа по клеточному типу свидетельствует его способность стимулировать у лабораторных животных реакцию бласт-трансформации лимфоцитов и индуцировать синтез цитокинов ИЛ-1 и ЙЛ-2, отражаюг щих уровень специфических процессов в Т-лимфоцитах, коррелирующих со степенью антиин-фекционной резистентности [29, 34]. По данным Н.Ю.Стуковой с соавт: [37], также установлено, что в фагоцитирующих клетках морских свинок при взаимодействии с ОСА чумного микроба происходит ряд метаболических процессов, характеризующих значительное усиление активности фермента супероксиддисмутазы, участвующей в формировании бактерицидного потенциала фагоцитов.
Для повышения протективнои активности ОСА были разработаны оптимальные условия включения антигена в фосфолипидные везикулы [16, 30], и показана в тесте прямого заражения более высокая про-тективная активность липосомальной формы ОСА по сравнению со свободным антигеном [15]. Наконец, в совместных исследованиях с сотрудниками института Иммунологии (Москва) нами показана возможность конструирования вакцин нового поколения на основе Ф1 и ОСА в виде комплексов и конъюгатов с синтетическими полиэлектролитами [1].
В результате проведенных исследований в последние десятилетия на лабораторных животных [11, 22, 24, 33] и на волонтерах [18, 19, 28] установлено, что полярная позиция сторонников живых и инактивированных чумных вакцин была ошибочна. Перспектива повышения роли вакцинопрофилакти-ки в общем комплексе средств борьбы с чумой лежит в рациональном применении живой вакцины в качестве непревзойденного грундиммунизирующе-го препарата и химической - для индукции вторичного ответа и коррекции индивидуального или коллективного иммунитета. ' • -
Результаты косвенных аналитических и инте-гральных тестов дают основание считать химиче-, скую чумную вакцину весьма перспективным ревакцинирующим препаратом, одним из компонентов которого является ОСА. При совместном введении с Ф1+ОСА оказывает потенцирующий эффект, выражающийся в гиперплазии клеток иммуноком-петентных органов, в повышении уровня циркулирующих антител и гиперергических ответов, а главное - в индукции у большинства привитых и ревак-цинированных . животных состояния резистентности к инфицированию массивной дозой вирулентных бактерий чумы [18, 19, 28].
Таким образом, учитывая важную роль ОСА в индукции иммунных реакций при противочумной вакцинации и его реальное практическое использование как компонента химической чумной вакцины для ревакцинации, разрабатываемой в институте «Микроб», дальнейшее развитие исследований, кат. сающихся молекулярно-генетической организации,
иммунохимическйх и иммунобиологических свойств ОСА иерсиний, а также стандартизация методов его получения и контроля,; представляют несомненный теоретический и практический интерес.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Алексеева Н.Ю., Калита С.’А., Савинова И.В. и др. // Матер, науч.-практ. конф., поев. 100-летию образов, противочумн. службы России. - Саратов, 1997. - Т. 1, - С. 173— 174. - 2. Анисимов А.П. // Мол. генет. - 2002. - № 3. - С. 3-
23. - 3. Бахрах Е.Э..// Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1972. - Вып. 4(26). - С. 177—182. - 4. Бахрах Е.Э. // Вестн. АМН СССР. - 1973. - № 11. - С. 71-76. - 5. Бахрах Е.Э., Боровикова Т.П., Вейнблат В.И. и др. // ЖМЭИ. -1972. - № 9. - С. 101-105. - 6. Бахрах Е.Э., Вейнблат
B.И. // Пробл. особо, опасных инф. - Саратов-, 1969. - Вып. 6.(10). - С. 82-87. - 7. Бахрах Ё.Э., Вейнблат В.И. // Пробл. особо'опасных инф. - Саратов, 1970. - Вып. 1 (11). -
C. 109-116. - 8. Бахрах Е.Э.., Вейнблат В.И., Таранен-ко Т.М. и др. //Профилакт. особо опасных инф. - Саратов, 1976. - Вып. 1 (47). - С. 131-139. - 9. Бахрах Е.Э., Тара-ненко Т.М., Гольдфарб Л-.М. и др.//Пробл. особо опасных инф. -’ Саратов, 1977. - Вып. 4 (56). -■ С. 70-71. -Ю.Белов Л.Г., Дальвадянц С.М. // Микробиол., лаб. ди-агн. и специфич. профилакт. карантинных инф. - Саратов, 1989. - С. 84-90. - 11. Бывалов А. А., Паутов В.И., Чичерин Ю.'В. и др. // ЖМЭИ. - 1984. -.№4. - С. 74-76. -12. Вейнблат В.И. Антигены Уе«шю реїШ (биохимические и иммунологические аспекты): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. - Саратов, 1974. - 36 с,- 13. Вейнблат В.И. // Микробиол. и биохим. возбудит, особо опасных инф. - Саратов, 1982.- С. 24—28. - 14. Вейнблат В.И., Мартенс Л. А. // ЖМЭИ. - 1973, № 5. - С. 130-134. - 15. Гусева Н.П. Липосо-мальные формы иммуногенов чумного микроба: Автореф. дис. ... кавд. биол. наук. - Саратов, 1995. - 20 с. - 16. Г у сев а Н.П., Тараненко Т.М., Наумов А,В. и др.//Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1994. - Вып. 5 (75). - С. 159-166. -17. Дальвадянц С.М. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1968. - Вып. 2. - С. 139-142. - 18. Дальвадянц С.М., Сероглазое В.В. // Матер. УП съезда Всерос. об-ва эпиде-миол., микробиол. и паразитол. - М., 1997. - Т. 2. - С. 85-86. -19.Дальвадянц С.М., Белобородов Р.А., Сероглазое
B.В. // Матер, науч.-практ. конф., поев. 100-летию образов, противочумн. службы России. - Саратов, 1997.- Т. 1. -
C. 201. - 20. Дальвадянц С.М., Белобородов Р. А., Пономарев Н.Г. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1976. - Вып. 3 (49). - С. 21-23. - 21. Дальвадянц С.М., Попов А.А., Буркина М.А. // Пробл. особо опасных инф. -Саратов, 1970. - Вып. 5(15). - С 37-41. - 22. Дальвадянц С.М., Дятлов И.А., Еремин С.А., Кутырев В.В. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 2003. - Вып. 86. -С. 123-132. - 23. Дальвадянц С.М., Мартенс Л. А., Тараненко Т.М., Джапаридзе М.Н.//Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1972. - Вып. 4 (26). - С. 210-219. -
24.Дальвадянц С.М., Филиппов А.Ф., Белобородов Р.А., Огарев ‘Н.Н. // Профилакт. особо опасных инф. - Саратов, 1977. - Вып. 3. - С. 105-112. - 25. Девдариани З.Л., Федорова В.А.,. Терешкина Н.Е. и др. //Матер, науч.-
' практ. конф., поев. 100-летию образования противочумн. службы России, - Саратов, 1997. - Т. 2. - С. 32-3*. - 26. Домарад-ский И.В. Проблемы перекрестного иммунитета. - М.: Медицина, 1973. - 136 с. - 27. Домарадский И.В. Чума. - М.: Медицина, 1998.- 175 с. - 28. Евстигнеев В.И., Кутырев
B.В., Дальвадянц С.М. и др. /I Диагн., лечение и профилакт. опасных инф. забол. Биотехнология. Ветеринария: Матер, юбил. науч. конф., поев. 70-летию НИИ микробиол. МО РФ. -Киров, 1998. - С. 86-87.'- 29. Исин Ж.М., Тугамбаев Т.И., Тлеулйева :Р.Т. и др.// ЖМЭИ. -.1989. - № 11. -
C.-71-76. - ЗО.Киоеев М.Н., Гусева Н.П., Коровкин С.А. и др. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1998. -С. 132-136. - 31. Коробкова Е.И., Котельников Г.И., Урода Л. А. и др. П ЖМЭИ.-1944. - № 12. - С. 22-28. -32; Куклева Л.М., Проценко О.А., Кутырев В.В. // Мол. генет. - 2002. -№ 1. -г С. 2-І-. -33. Лебединский В. А., Чичерин , Ю.В., Паутов В.Н. и др. // ЖМЭИ. - 1982. -№ 5. - С. 60-63. - 34. Ледванов М.Ю.; Емельянова Н.В., Стукова Н.Ю. и др. // ЖМЭИ, - 1995. - №6. - С.4-5. -35.Наумов А.В., Ледванов-М.Ю., Дроздов И.Г. Иммунология чумы. - Саратов, 1992. - 172 с. - 36. Попов А. А., Акимович В.В. // Производство бакпрепаратов для профилакт. и диагн. особо опасных инф. - Саратов, 1966. - С. 140— 143. - 37. Стукова. Н.Ю., Емельянова Н.В., Дроздов И.Г. и др. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1993. -
Вып. 1-2(71-72). - С. 104-112. - 38. Суров B.C., Суриков Н.Н., Тараненко Т.М.// Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1978. - Вып. 3(61). - С. 9-12. - 39. Суров В.<5., Тараненко Т.М., Суриков Н.Н..// Пробл: особо опасных инф. - Саратов, 1979.. - Вып. 1 (65). - С. 9-12. - 40: Тараненко Т.М. Углеводсодержащие антигены чумного и псевдотуберкулезного микробов: Авторёф. дис. ... д-ра биол. наук. -Саратов, 1988. - 41 с. - 41. Тараненко Т:М., Бахрах Е.Э., Гольдфарб JI.M. и др.//Пробл. особо опасных инф.- Саратов, 1977. — Вып. 6 (58). - С. 17-20. - 42. Тараненко Т.М., Вейнблат В.И. // Иммунохим: и лаб.'диагн. особо опасных инф. - Саратов, 1985. - С. 7-15. - 43. Тараненко Т.М., Гусева Н.П., Ермакова Г.В. и др. и Матер, науч.-практ. конф., поев. 100-летию образов, противочумн. службы России,- Саратов, 1997,- Т. 1. - С. 246-247. - 44. Тараненко Т.М., Дальвадянц С.М., Бахрах Е.Э. и др.//Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1972. - Вып. 3 (25). - С. 93-98. -45. Тараненко Т.М., Дальвадянц С.М., Боровикова Т.П. и др. // Пробл. особо опасных инф. - Саратов, 1972. -Вып. 1 (2j). - С. 37-41. - 46. Федорова В. А., Девдариани 3.JI. // Мол. генет. - 2002. - № 4. - С. 22-27. - 47. Федорова В.А., Хомяков А.Е., Девдариани 3.JI. и др.//Сб. науч. тр., поев. 50-летию Дагестанской противочумн. ст. - Махачкала, 2002. - С. 63-66. - 48. Шульгина И.В., Малюкова Т. А. // Матер, межгос. науч. конф:, поев. 100-летию открытия возбудит, чумы,- Алматы, 1994. - С. 158. - 49. Anderson G.W. , Heath D.G., Bolt-Ch.R. et al. II Am. J. Trop. Med:. Hug. - 1998.-Vol. 58, N 6. - P. 77-83. - 50. Girard G. II C. R. Soc. Biol. - 1941. - Vol. 135. - P. 1577-1579. - 51.Luderitz O./l Am. Soc. Microbiol. - N.Y., 1977. - P. 239-246. -52. Makela P.H., Mayer H.11 Bacteriol. Rev. - 1976. -Vol. 40. - P. 591-596. - 53. Perry R.D., Fetherston J.D. // Clin. Microbiol. Rev. - 1997. - Vol. 10, N 1. - P. 35-66. -
54.Rick P.D., Mayer H., Neumeyer B.A. et al.il J. Bacteriol. - 1985. - Vol. 162, N2. -P. 494-503. - 55. Skurnik M., Peippo A., Ervela E. // Mol. Microbiol. - 2000. —Vol. 37. -P. 316-330. - 56. Vinogradov E.V., Knirel Y.A., Tho-mas-Oates J.E. et al. 7/ Carbohydr. Res. - 1994. - Vol. 258. -P. 223-232. ,
T.M.Taranenko, C.M.Dalvadyants, M.N.Kireyev, N.P.Gusseva, V.A.Feodorova, Z.L.Devdariani • '•
Peculiarities of Structure and Function of the Main Somatic Antigen of the Plague Pathogen
Russian.Anti-Plague Research Institute "Microbe", Saratov
Presented in the paper are recent observations on the chemical nature, structural organization and immunobiologic properties of the main somatic antigen (MSA) of Yersinia pestis, derived from the cells by the extraction technique as described by. Boivin. MSA, a serologically active glycoprotein, acts as a vehicle of the specific characters common for the related plague and pseudotuberculosis yersinia in the state of R form dissociation. Involved into the initiation of the cell-type immune response, MSA is used as a component to develop a chemical anti-plague.vaccine (FlplusMSA). The authors come out with a suggestion that MSA with its unique structure of a cyclic hetero-glycane, might be a common antigen of enterobacteria that is substituted for the O specific polysaccharide, bearing no association to the core moiety of Y. pestis lipopolysaccharide molecule. .
' riocTynioia 22.04.04
ИММУНОЛОГИЯ, ПАТОГЕНЕЗ, ЛЕЧЕНИЕ
УДК 616.981.452-.636.91
А.А.Бывалов, И.В.Дармов, В.И.Евстигнеев, Е.В.Пименов
ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ВЫДЕЛЕНИЕ АНТИГЕНА, ЗАЩИЩАЮЩЕГО МОРСКИХ СВИНОК ОТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЧУМЫ
Научно-исследовательский институт микробиологии МО РФ, Киров .
Представлены результаты экспериментальных исследований, направленных на выявление в культурах патогенных иерсиний антигенной субстанции, способной индуцировать специфическую невосприимчивость к возбудителю чумы у морских свинок. Показано, что при «глубинном» культивировании бактерий Yersinia .pseudotuberculosis в питательную среду экскретируется высокомолекулярный антиген (Б-антиген), общий для патогенных иерсиний; его биосинтез кодируется хромосомной ДНК. Однократная подкожная иммунизация препаратом Б-антигёна, выделенным из культуральной жидкости и депонированным в неполном адъюванте Фрейнда, вызывает развитие специфической резистентности морских свинок к экспериментальной чуме. ■■ ■
Как известно, чумная живая вакцина способна индуцировать у экспериментальных животных и людей выраженную специфическую невосприимчивость к чумной инфекции. Защитное действие живой вакцины основано на способности микробов вакцинного штамма приживаться и распространяться в прививаемом макроорганизме' и, как следствие, на накоплении достаточных количеств протектив-ных антигенов, обеспечивающих развитие иммунных реакций. Однако тонкие механизмы формирования иммунитета к возбудителю чумы с помощью живой вакцины до настоящего времени изучены недостаточно. Конструирование новых средств специфической профилактики чумы, и тем более молекулярной (или субъединичной) вакцины, невозмож-
но без углубленного исследования антигенной структуры Yersinia pestis, роли отдельных антигенов в проявлении чумным микробом патогенных и имму-ногенных свойств. ,
Изучение протективных свойств отдельных компонентов бактерий У. pestis началось вскоре после открытия возбудителя чумы, однако начало целенаправленных усилий в этой области было положено работами H.Schutze [18], а затем, в первую очередь, K.F.Meyer с соавт. Последней группе исследователей удалось выделить в очищенном! виде и охарактеризовать физико-химические и иммунобиологические свойства фракции I (Ф1-антигена, Ф1), первого из идентифицированных «моноантигенов» чумного микроба [12, 13]. '
