CC BY
23
ОСОБЕННОСТИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ И ЛАКТОФЕРРИНА В МОЧЕ ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ В СТАДИИ КЛИНИЧЕСКОЙ РЕМИССИИ
Н.А. Пекарева, Т.В. Белоусова
Кафедра факультетской педиатрии и неонатологии Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава Красный проспект, 52, Новосибирск, Россия, 630091
А.Н. Трунов
Лаборатория иммунологии репродукции Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения РАМН ул. Тимакова, 2, Новосибирск, Россия, 630117
С целью выявления активности воспалительного процесса и нарушений иммунного реагирования было обследовано 147 детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита. Проводилось определение концентраций ИЛ-1Р, ИЛ-8, лактоферрина в моче. Индивидуальный анализ значений изучаемых показателей показал, что у детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита определяется гетерогенность по величине концентраций ИЛ-1Р в моче.
В подгруппе больных с высоким содержанием ИЛ-1Р в моче определяется значимый рост содержания других маркеров активности воспалительного процесса (ИЛ-8, лактоферрина). Клинически это сопровождается высокой частотой регистрации рецидивов хронического пиелонефрита. Рекомендуется неинвазивное определение концентраций ИЛ-1Р в моче в качестве дополнительного критерия отбора пациента в группу риска по возникновению обострения пиелонефрита.
Ключевые слова: хронический пиелонефрит, клинико-лабораторная ремиссия, воспалительный процесс, цитокины, лактоферрин.
Введение. Не вызывает сомнения широкая распространенность хронического пиелонефрита у детей, при этом отмечается высокая частота хрони-зации воспалительного процесса, стертости клинической картины, значимые медико-социальные последствия как для пациента, так и для общества в целом [1; 2; 4; 5].
В настоящее время в научной литературе представлены данные исследований, посвященные оценке активности иммуновоспалительного процесса и баланса цитокинов при остром и обострении хронического пиелонефри-
та [1; 3; 6; 7]. Однако практически отсутствуют сведения о динамике изменений цитокинов и других биологически активных веществ, участвующих в развитии воспаления, в стадии клинико-лабораторной ремиссии вторичного хронического пиелонефрита у детей, что является значимым для понимания механизмов развития патологического процесса, а также разработки критериев активности заболевания и прогноза возникновения его обострений.
Вышеизложенное позволило сформулировать цель исследования: Изучить содержание цитокинов, участвующих в развитии иммуновоспалитель-ного процесса, и лактоферрина в моче детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита.
Материалы и методы. На базе ГБУЗ НСО « Государственная Новосибирская областная клиническая больница» было обследовано 147 детей в возрасте от 3 до 14 лет с документированной полной клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита (КЛРВХП). Диагнозы верифицированы руководителем кафедры факультетской педиатрии и не-онатологии ГОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава, д м.н., профессором Т.В. Белоусовой.
В качестве нормативных значений показателей в сыворотке крови были взяты данные клинико-лабораторного обследования 25 «практически здоровых». У родителей больных и здоровых детей было получено информированное согласие на забор биологического материала и использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования.
Определение концентраций ИЛ-1Р, ИЛ-8 в моче выполнялись на тест-системах производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург). Результаты выражали в пг/мл. Определение концентрации лактоферрина в сыворотке крови выполняли на тест-системах производства ЗАО «Вектор-БЕСТ» (НСО, п. Кольцово) по инструкции производителя. Результаты выражали в нг/мл. Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре Униплан при длине волны 450 нм.
Статистическая обработка включала вычисление средних арифметических величин (М) и ошибку репрезентативности средней арифметической
В работе использовали методы непараметрической статистики. Достоверным считали различия между сравниваемыми рядами с уровнем вероятности 95% (р < 0,05).
Результаты собственных исследований. В результате проведенных исследований были получены следующие данные, представленные в табл. 1.
Установлено, что отсутствие клинико-лабораторных проявлений вторичного хронического пиелонефрита (отсутствие лейкоцитоза, нормативные значения СОЭ в гемограмме, отсутствие лейкоцитурии и бактериурии) у детей при клинико-лабораторной ремиссии не является свидетельством отсутствия активности воспалительного процесса. Это подтверждается достоверно
Таблица 1
Содержание определяемых показателей в моче больных с вторичным хроническим пиелонефритом в стадии клинико-лабораторной ремиссии М ± т
Показатель Группа контроля КЛРВХП Границы нормы
ИЛ-1 в, пг/мл 11,2 ± 2,5 16 ± 2,9 5,1-17,3
ИЛ-8 пг/мл 2,1 ± 0,32 10,1 ± 1,6"* > 5,1
Лактоферрин нг/мл 43 ± 8,7 69 ± 9,2*,** 26,7-59,3
Примечания: * - р < 0,05 - достоверность различий между сравниваемыми показа** ^
телями; - значение показателя превышает значение верхней границы нормативных значений.
высоким содержанием провоспалительного интерлейкина ИЛ-8 и лактофер-рина в моче относительно величин показателей в группе контроля. Развитие воспалительного процесса сопровождается активацией иммунного реагирования с повышением концентраций индуктора Т-хелпер-2 опосредованного иммунного ответа - ИЛ-4 в моче.
Следующим этапом настоящего исследования был индивидуальный анализ полученных данных.
При индивидуальном анализе концентраций основного провоспалительного цитокина ИЛ-1 в в моче у обследованных детей с КЛРВХП были выявлены следующие закономерности. Несмотря на отсутствие достоверности различий между концентрациями изучаемого цитокина в моче пациентов контрольной группы и детей с КЛРВХП и нахождением его в границах нормативных значений, концентрации ИЛ-1 в в моче, превышающие верхнюю границу нормативных значений показателя, тестируются у 28 больных с КЛРВХП, что составляет 19,04% от всех обследованных. Концентрации цитокина, находящиеся в границах нормативных значений, были выявлены у 119 детей (80,96%).
Учитывая, что целью исследования явилось изучение активности имму-новоспалительного процесса, было проведено разделение обследованной группы детей с КЛРВХП на основании содержания основного провоспали-тельного цитокина ИЛ-1 в в моче.
1-я подгруппа - 28 детей (19,04%), в моче которых были выявлены концентрации ИЛ-1 в, превышающие верхнюю границу нормы.
2-я подгруппа - 119 детей (80,96%), у которых концентрации ИЛ-1 в находились в границах нормативных значений.
«Средняя» концентраций ИЛ-1 в в моче у детей 1-й подгруппы составила 23,8 ± 3,1 пг/мл, что превышало значение средней группы контроля (11,2 ± 2,5 пг/мл) и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). Полученное значение «средней» изучаемого показателя находилось выше верхней границы нормативных значений - 17,3 пг/мл. «Средняя» концентраций ИЛ-1 в в моче у боль-
ных, составивших 2-ю подгруппу, равнялась 13,3 ± 2,6 пг/мл, что превышало значение «средней» данного показателя в группе контроля (11,2 ± 2,5 пг/мл), но достоверно от нее не отличалось. Полученное значение «средней» показателя находилось в пределах нормативных значений - 5,1-17,3 пг/мл.
Полученное значение «средней» изучаемого показателя в моче больных 1-й подгруппы также достоверно превышало «среднюю» его концентраций в общей группе детей с КЛРВХП (р < 0,05). Сравнение данных между подгруппами показало, что «средняя» концентраций ИЛ-1Р в моче детей 1-й подгруппы достоверно выше его содержания у детей 2-й подгруппы (р < 0,05).
Данный факт свидетельствует, что в группе детей с КЛРВХП существует гетерогенность, позволяющая выделить подгруппу детей, у которых определяется более выраженная активность иммуновоспалительного процесса относительно общей группы больных.
Следующим этапом исследования был анализ индивидуальных значений, полученных в общей группе пациентов при распределении обследованных детей на подгруппы в зависимости от концентраций ИЛ-1Р в моче.
Проведенное исследование позволило констатировать следующие закономерности.
«Средняя» концентраций ИЛ-8 в моче у детей 1-й подгруппы составила 16,7 ± 2,1 пг/мл, что превышало значение «средней» группы контроля (2,1 ± 0,32 пг/мл) и достоверно от нее отличалось (р < 0,05)
«Средняя» концентраций ИЛ-8 в моче у детей 2-й подгруппы составила 8,7 ± 1,9 пг/мл, что было выше значений «средней» величины показателя в группы контроля (2,1 ± 0,32 пг/мл), и достоверно от нее отличалось (р < 0,05).
Сравнительный анализ значений концентраций ИЛ-8 в моче у больных 1-й и 2-й подгрупп позволил зафиксировать достоверное нарастание его концентраций в подгруппе детей с исходно высоким уровнем содержания ИЛ-1Р в сыворотке крови и моче (р < 0,05).
Проведенный анализ результатов позволил выявить сопряженное нарастание этого, ключевого для развития местного воспалительного процесса, цитокина в моче в подгруппе больных с исходно более высокими уровнями содержания ИЛ-10.
«Средняя» концентраций острофазового белка лактоферрина в моче у детей 1-й подгруппы составила 89 ±18 нг/мл, что превышало значение «средней» группы контроля (43 ± 8,7 нг/мл) и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). Полученное значение «средней» этого показателя находилось выше верхней границы нормативных значений - 59,3 нг/мл.
«Средняя» концентраций лактоферрина в моче у детей 2-й подгруппы составила 61 ± 7,3 нг/мл, что превышало значение «средней» группы контроля (43 ± 8,7 нг/мл) и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). Полученное значение «средней» этого показателя находилось в пределах нормативных значений - 59,3 нг/мл.
Сравнительный анализ значений концентраций лактоферрина в моче больных 1-й и 2-й подгрупп позволил констатировать достоверное нарастание его концентраций в подгруппе больных с исходно высоким уровнем содержания ИЛ-1Р в сыворотке крови и моче (р < 0,05).
Проведенный анализ результатов позволил выявить сопряженное нарастание лактоферрина в сыворотке крови и моче у больных с исходно более высокими уровнями содержания ИЛ-10.
Полученные данные свидетельствуют, что механизмы развития воспалительного процесса у детей с КЛРВХП характеризуются двумя вариантами течения.
Несомненный интерес представляет анализ клинического течения вторичного хронического пиелонефрита в стадии клинико-лабораторной ремиссии в зависимости от распределения обследованных детей по подгруппам, исходя из высоких или нормативных значений ИЛ-1Р в моче.
Анализ анамнестических данных и наблюдение за обследованными детьми позволили сделать заключение, что у той категории больных с КЛРВХП, у которых в сыворотке крови и моче определялись высокие показатели ИЛ-1Р и было выявлено сопряженное с ним повышение содержания других маркеров (ИЛ-8, лактоферрин в моче), отражающих активность воспалительного процесса, частота возникновения рецидива вторичного хронического пиелонефрита превышала таковую у детей 2-й подгруппы в 4 раза, а его длительность в 1,5 раза в сравнении с больными, у которых величины содержания ИЛ-1Р находились в пределах нормативных значений.
Версии о возможных рецидивах рефлюксов, либо стриктуры вновь созданного ЛМС в качестве причины рецидива пиелонефрита, у больных данной подгруппы отвергнуты данными динамического обследования. Сохранность восстановленной уродинамики подтверждалась результатами контрольного рентген-урологического обследования, также на амбулаторном этапе, согласно рекомендациям, всем детям регулярно проводилось выявление и санация очагов хронической инфекции в носоглотке, полости рта, кишечнике.
Таким образом, неинвазивное определение концентраций ИЛ-1Р и лак-тоферрина в моче у детей с хроническим вторичным пиелонефритом в стадии клинико-лабораторной ремиссии, превышающих границу нормативных значений, может использоваться в качестве дополнительного критерия отбора пациента в группу риска по возникновению обострения пиелонефрита.
Заключение. При индивидуальном анализе значений изучаемых показателей установлено, что у детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита определяется гетерогенность по величине концентраций ИЛ-1Р в моче. При этом в подгруппе больных с высоким содержанием ИЛ-1Р в моче определяется значимый рост содержания других маркеров активности воспалительного процесса (ИЛ-8, лактоферрина), что
клинически сопровождается высокой частотой регистрации рецидивов хронического пиелонефрита.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Паунова С.С., Кучеренко А.Г., Смирнов И.Е. и др. Цитокины в патогенезе рефлюкс-нефропатии у детей // Нефрология и диализ. - 2003. - Т. 5. - № 3. - С. 207-211.
[2] Iacobelli S., Bonsante F., Guignard J.P. Urinary tract infections in children // Arch. Pedi-atr. - 2009. - V. 16. - № 7. - Р. 1073-1079.
[3] Puczko-Michalczuk A., Zoch-Zwierz W., Wasilewska A. et al. Evaluation of inflammatory and renal injury markers in youngest children with pyelonephritis // Pol. Merkur. Lekar-ski. - 2008. - V. 25. - P. 451-454.
[4] Rudaitis S., Pundziene B., Jievaltas M. et al. Recurrent urinary tract infection in girls: do urodynamic, behavioral and functional abnormalities play a role? // J. Nephrol. - 2009. -Vol. 22. - № 6. - Р. 766-773.
[5] Shaikh N., Morone N.E., Bost J.E. et al. Prevalence of urinary tract infection in childhood: a meta-analysis // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2008. - V. 27. - № 4. - Р. 302-308.
[6] Sheu J.N., Chen S.M., Meng M.H. et al. The role of serum and urine interleukin-8 on acute pyelonephritis and subsequent renal scarring in children // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2009. -Vol. 28. - № 10. - Р. 885-890.
[7] Sheu J.N., Chen M.C., Chen S.M. et al. Relationship between serum and urine interleukin-6 elevations and renal scarring in children with acute pyelonephritis // Scand. J. Urol. Nephrol. - 2009. - V. 43. - № 2. - P. 133-137.
FEATURES OF THE CONTENT OF PROINFLAMMATORY CYTOKINES AND LACTOFERRIN IN THE URINE OF CHILDREN WITH CHRONIC PYELONEPHRITIS AT THE STAGE OF CLINICAL REMISSION
N.A. Pekarevа, T.V. Belousova
Department of faculty pediatrics and neonatology
Novosibirsk State Medical University Krasny Prospekt, 52, Novosibirsk, Russia, 630091
A.N. Trunov
Laboratory of immunology reproduction Research Center of Clinical and Experimental medical, SB RAMS Timakova Str., 2, Novosibirsk, Russia, 630117
To determine the inflammatory activity surveyed 147 children with complete clinical and laboratory remission of secondary chronic pyelonephritis. The study was conducted the concentrations of IL-1ß, IL-8, lactoferrin in the urine. Individual analysis of the values of the
studied parameters showed that in children with clinical and laboratory remission of secondary chronic pyelonephritis determined heterogeneity of concentrations of IL-ip in the urine. In the subgroup of patients with a high content of IL-ip in the urine is determined by the significant increase in the content of other markers of inflammatory activity (IL-8, lactoferrin). Clinically it is accompanied by a high frequency of relapse of chronic pyelonephritis. It is recommended that non-invasive determination of concentrations of IL-1 P in the urine as an additional criterion for selection of patients at risk for the emergence of acute pyelonephritis.
Key words: chronic pyelonephritis, clinical and laboratory remission, cytokines, lactoferrin, heterogeneity.
