CC BY
3УДК 57:619:591.16
DOI: 10.31279/222-9345-2023-12-49-13-18
EZIUFA Щ Дата поступления статьи в редакцию: 20.03.2023
А. В. Петряева, В. И. Семёнова, В. И. Кузнецов, А. В. Ткачев, О. Л. Ткачева
Petryaeva A. V., Semenova V. I., Kuznetsov V. I., Tkachev A. V., Tkacheva O. L.
ОСОБЕННОСТИ САПРОФИТНОЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КОНТАМИНАЦИИ СПЕРМЫ FELIS CATUS
FEATURES OF SAPROPHYTIC BACTERIAL CONTAMINATION O F SEMEN FEUS CATUS
Во всех действующих государственных стандартах к сперме животных прописано максимально допустимое количество общей бактериальной обсемененности до 5000 КОЕ/см3 в нативной сперме и до 500 КОЕ/см3 в заморожен-но-оттаянной сперме. Подобные нормативы отсутствуют для спермы Felis catus. Цель работы - изучить особенности общей сапрофитной бактериальной контаминации препу-циальной полости и спермы Felis catus разных пород для разработки максимально допустимого уровня контаминации спермы микроорганизмами. Наибольший уровень сапрофитной бактериальной контаминации спермы котов после оттаивания установлен у котов породы сфинкс, что на 9970,37 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от котов сибирской породы, на 1092,9 КОЕ/см3 больше (Р<0,05) котов русской голубой породы, на 10165,08 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от самцов персидской породы, 9431,76 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от котов породы мейн-кун, на 5078,33 КОЕ/см3 больше (Р<0,01) от европейской породы, на 9679,78 КОЕ/ см3 больше (Р<0,001) от британской породы и на 11849,14 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от котов бельгийской породы. Полученные результаты позволяют нам предположить, что максимально допустимое количество сапрофитных бактерий для Felis catus может иметь породные отличия. Например, для нативной спермы европейской породы это может быть уровень до 6000 КОЕ/см3, для русской голубой породы этот уровень может составить до 7000-7500 КОЕ/см3, для породы сфинкс до 8000-8500 КОЕ/см3. Для остальных пород можно предлагать такой же уровень, как и для всех сельскохозяйственных животных - до 5000 КОЕ/см3.
Ключевые слова: сперма, физиология, криоконсер-вирование, воспроизводство, домашний кот, сапрофитные бактерии, порода.
All current state standards for animal sperm prescribe the maximum permissible amount of total bacterial contamination up to 5000 CFU/cm3 in native sperm and up to 500 CFU/cm3 in frozen-thawed sperm. There are no similar standards for Felis catus sperm. The aim of the work is to study the features of the general saprophytic bacterial contamination of the preputial cavity and Felis catus sperm of different breeds in order to develop the maximum permissible level of contamination of sperm by microorganisms. The highest level of saprophytic bacterial contamination of sperm of cats after thawing was found in Sphinx cats, which is 9970.37 CFU/cm3 more (P<0.001) from Siberian cats, 1092.9 CFU/cm3 more (P<0.05) from Russian blue cats, 10165.08 CFU/cm3 more (P<0.001) from males of the Persian breed, 9431.76 CFU/cm3 more (P<0.001) from Maine Coon cats, 5078.33 CFU/cm3 more (P<0.01) from the European breed, 9679.78 CFU/cm3 more (P<0.001) from the British breed and 11849.14 CFU/cm3 more (P<0.001) from cats of the Belgian breed. The obtained results allow us to assume that the maximum allowable number of saprophytic bacteria for Felis catus may have breed differences. For example, for native sperm of European breed, this can be up to 6000 CFU/cm3, for the Russian blue breed, this level can be up to 7000-7500 CFU/cm3, for the Sphinx breed up to 8000-8500 CFU/cm3. For other breeds, you can offer the same level as for all farm animals - up to 5000 CFU/cm3.
Key words: semen, physiology, cryopreservation, reproduction, domestic cat, saprophytic bacteria, breed.
Петряева Алина Вадимовна -
педагог дополнительного образования кафедры общеобразовательных дисциплин Института русского языка
ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» г. Москва
Тел.: 8-991-385-23-10 Е-mail: [email protected]
Семёнова Валентина Ивановна -
кандидат ветеринарных наук, доцент департамента ветеринарной медицины ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» г. Москва
РИНЦ SPIN-код: 2152-5318 Тел.: 8-495-434-70-07 Е-mail: [email protected]
Кузнецов Владимир Иванович -
доктор медицинских наук, профессор кафедры общей врачебной практики
ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» г. Москва
РИНЦ SPIN-код: 5732-8789 Тел.: 8-495-434-70-07 Е-mail: [email protected]
Petryaeva Alina Vadimovna -
Teacher of Additional Education of the Department
of General Education Disciplines
of the Institute of the Russian Language
FSAEI HE «Russian University Friendship of Peoples»
Moscow
Tel.: 8-991-385-23-10 Е-mail: [email protected]
Semenova Valentina Ivanovna -
Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor
of the Department of Veterinary Medicine
FSAEI HE «Russian University Friendship of Peoples»
Moscow
RSCI SPIN-code: 2152-5318 Tel.: 8-495-434-70-07 E-mail: [email protected]
Kuznetsov Vladimir Ivanovich -
Doctor of Medicine Sciences, Professor of the Department of General Medical Practice FSAEI HE «Russian University Friendship of Peoples» Moscow
RSCI SPIN-code: 5732-8789 Tel.: 8-495-434-70-07 E-mail: [email protected]
научно-практический ИС Ставрополья
журнал ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ -—-
Ткачев Александр Владимирович -
доктор сельскохозяйственных наук, профессор
кафедры ветеринарной медицины
ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный
университет - МСХА им. К. А. Тимирязева»;
доцент департамента ветеринарной медицины
ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов»
Москва
РИНЦ SPIN-код: 4852-0353 Тел.: 8-499-976-14-47 E-mail: [email protected]
Ткачева Ольга Леонидовна -
кандидат сельскохозяйственных наук, преподаватель колледжа
ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К. А. Тимирязева» г. Москва
РИНЦ SPIN-код: 7638-9512
Тел.: 8-499-976-14-47
E-mail: [email protected]
Tkachev Aleksandr Vladimirovich -
Doctor of Agricultural Sciences, Professor
of the Department of Veterinary Medicine
FSBEI HE «Russian State Agrarian University - Moscow
Agricultural Academy named after K. A. Timiryazev»;
Associate Professor of the Department of Veterinary Medicine
FSAEI HE «Russian University Friendship of Peoples»
Moscow
RSCI SPIN-code: 4852-0353 Tel.: 8-499-976-14-47 E-mail: [email protected]
Tkacheva Olga Leonidovna -
Candidate of Agricultural Sciences, college teacher FSBEI HE «Russian State Agrarian University -Moscow Agricultural Academy named after K. A. Timiryazev» Moscow
RSCI SPIN-code: 7638-9512
Tel.: 8-499-976-14-47
E-mail: [email protected]
Загрязнение спермы - важный негативный фактор контроля репродуктивной биотехнологии и использование антибактериальных веществ в качестве добавок в разбавители спермы для обеспечения ее санитарного качества и сохранения ее от бактериального разрушения [1-3]. Во всех действующих государственных стандартах к сперме животных прописано максимально допустимое количество общей бактериальной обсемененности до 5000 КОЕ/см3 в нативной сперме (ГОСТ 23745-2014 Сперма быков неразбавленная свежеполученная; ГОСТ 23681-79 Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная), а для хряков до 1000 КОЕ/см3 (ГОСТ 33826-2016 Сперма хряков свежеполученная). Максимально допустимый уровень до 500 КОЕ/см3 в заморо-женно-оттаянной сперме (ГОСТ 26030-2015 Сперма быков замороженная; ГОСТ 241682017 Сперма жеребцов замороженная; ГОСТ 33826-2016 Сперма хряков замороженная). При этом подобные нормативы спермы для котов отсутствуют.
По мере увеличения поголовья Felis catus и расширения применения искусственного осеменения может возрастать негативная роль как сапрофитной микрофлоры, так и уровень инфекций, передаваемых половым путем и/ или вместе со спермой. Органы половой системы самцов Felis catus населены различными бактериями, которые попадают в сперму при ее получении. Нормальная бактериальная микрофлора гениталий самцов, как правило, не вызывает инфекции у здоровых самок. Однако, когда нарушается баланс бактериальной микрофлора полового члена или крайней плоти, чрезмерный рост распространенных патогенных бактерий, таких как E. coli, Enterobacter ssp., Klebsiella ssp., Pseudomonas aeruginosa и других, может снизить качество нативной, оттаянной спермы и ее оплодотворяющую способность [4, 5].
Основными источниками бактериального загрязнения, влияющими на перво-
начальное количество бактерий в сперме, являются препуциальная жидкость, пред-спермальная фракция, волосы, кожа, дыхательные выделения кошек, дистиллированная вода, используемая при приготовлении разведенных доз спермы, корм, укрытие, воздух, система вентиляции, инфекции яичек, уретры, мочевого пузыря, лабораторные материалы и т. д. Чрезмерный рост загрязняющих бактерий определенных родов оказывает пагубное влияние на качество спермы и продолжительность жизни половых клеток. Происходит агглютинация сперматозоидов, снижается подвижность и жизнеспособность сперматозоидов, и в результате у самок могут наблюдаться репродуктивные нарушения, выражающиеся в возврате течки, выделениях из вульвы после осеменения, абортах, мумификации и низкой репродуктивной эффективности в целом [6, 7].
Исследованные дозы спермы котов содержали виды бактерий с известным негативным воздействием на репродуктивные пути самок (E. coli, Enterobacter ssp., Klebsiella ssp., Pseudomonas aeruginosa), и более половины этих изолятов были устойчивы к гентамицину (56,52 %) и пенициллину (58,69 %). Этот факт доказывает наличие патогенных бактерий со множественной устойчивостью в сперме, и поэтому есть необходимость в проведении периодического микробиологического скрининга на бактериоспермию у котов и самцов других видов животных, чтобы избежать использования некачественной спермы при осеменении самок [8, 9].
Строгое и неукоснительное соблюдение гигиены во время сбора и обработки спермы может уменьшить бактериальное загрязнение спермы и повысить ее фертильность. Нормальная флора кожи, шерсти и дыхательных путей не может быть снижена. Однако персонал может свести к минимуму бактериальную нагрузку, максимально строго соблюдая правила гигиены и стерильности оборудования для сбора и обработки спермы. Особенно важно знать
бактериальную микробиоту в сперме котов и профиль их устойчивости к противомикробным препаратам [10, 11].
В современной ветеринарии котов недостаточно внимания уделяется установлению естественного количества сапрофитных микроорганизмов в половых органах и сперме котов с целью разработки максимально допустимого уровня по аналогии с таковыми для сельскохозяйственных животных. В доступной русскоязычной литературе нам не удалось найти подобных публикаций. Установлены лишь отдельные физиологические особенности нативной спермы домашних и диких кошачьих в России [1, 2].
В связи с этим цель работы - изучить фактические особенности общей сапрофитной бактериальной контаминации препуциальной полости и спермы Felis catus разных пород для разработки максимально допустимого уровня контаминации спермы микроорганизмами.
Исследование выполняли с 2017 по 2022 г. в Москве и Московской области. В работе использовали 65 половозрелых котов в возрасте от 2 до 8 лет, которые принадлежали к 8 различным породам (бенгальская порода - 8 голов, британская короткошерстная - 7 голов, европейская - 9 голов, сибирская порода -9 голов, персидская - 9 голов, русская голубая - 8 голов, мейн-кун - 7 голов, сфинкс -8 голов). Образцы спермы были собраны у каждого самца с использованием стандартизированной процедуры электроэякуляции и на искусственную вагину для кроликов. Электроэякуляцию осуществляли с помощью Electro Ejaculator e320 (Minitube, Tiefenbach, Germany) после введения ректального зонда диаметром 0,95 см [3].
Оценка, разбавление, охлаждение и крио-консервирование спермы Felis catus выполняли по модифицированной нами Харьковской технологии [2] c применением разрабатываемого нами разбавителя, состав которого является коммерческой тайной. В размороженном семени котов общепринятыми методиками [2] определяли общую бактериальную контаминацию в КОЕ/см3 смыва и спермы.
Математико-статистические расчеты результатов ветеринарно-физиологических исследований осуществляли по общепринятым формулам критерия Стьюдента в компьютерной программе SPSS for Windows (IBM, USA). В связи с тем что на сегодня в воспроизводстве котов отсутствует общепринятый максимально допустимый уровень сапрофитной контаминации спермы, нами было решено установить фактическое количество сапрофитов в половых органах и сперме котов без применения антибиотиков и санирующих средств.
По результатам исследований установлено, что наименьшей сапрофитной контаминацией препуциальной полости обладали коты бенгальской породы, что на 1968,1 КОЕ/см3 меньше по сравнению с котами британской породы, на 5256,33 КОЕ/см3 меньше от котов европейской породы, на 2023,19 КОЕ/см3 - мейн-кунов, на 1566,7 КОЕ/см3 меньше от котов персидской породы, на 6699,82 КОЕ/см3 меньше от котов русской голубой породы, на 1800,38 КОЕ/ см3 меньше от котов сибирской породы и на 7773,43 КОЕ/см3 меньше от котов породы сфинкс (табл.). Таким образом, мы видим, что без применения санации препуция уровень сапрофитов может быть до 8500 КОЕ/см3 без дальнейшего снижения качества семени.
Таблица - Особенности общей сапрофитной контаминации половых органов и спермы
Felis catus разных пород
Порода котов (количество голов) Сапрофитная контаминация препуция и спермы котов, КОЕ/см3 Физиологические характеристики оттаянной спермы
Количество проб Контаминация см3 смывов из препуция Контаминация см3 оттаянной спермы Подвижность спермиев, % Переживаемость при 38 °С, часов
Бенгальская (8 котов) 189 524,34±49,1 613,35±55,65 37,62±1,09 4,23±0,13
Британская (7 котов) 149 2492,44±79,67* 2782,71±85,25* 34,21±0,67 3,88±0,08*
Европейская (9 голов) 210 5780,67±267,61** 7384,16±345,91*** 36,09±1,68 2,42±0,10***
Мейн-кун (7 голов) 219 2547,53±101,49* 3030,73±99,72** 33,70±0,77* 3,35±0,07**
Персидская (9 голов) 147 2091,04±78,28* 2297,41±78,44* 22,0±1,07*** 2,22±0,10***
Русская голубая (8 голов) 255 7224,16±390,58*** 11369,59±1156,47*** 32,73±0,64** 3,48±0,08**
Сибирская (9 голов) 208 2324,72±99,79* 2492,12±105,01* 32,78±0,52** 3,41±0,05**
Сфинкс (8 голов) 201 8297,77±822,98*** 12462,49±1269,35*** 29,27±0,48*** 2,5±0,07***
Примечание: *р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001 в сравнении с бенгальской породой.
научно-практический ИС Ставрополья
журнал ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ -—-
Анализируя данные таблицы, можно заключить, что наилучшие показатели контаминации препуциальной полости были у котов бенгальской породы - до 1000 КОЕ/см3, с наилучшими физиологическими показателями семени после оттаивания, подвижностью (более 37 %) и переживаемостью спермиев (более 4 часов). Такое количество сапрофитов ближе к максимально допустимому уровню сапрофи-тов в нативной сперме хряков. Уровень сапрофитной контаминации препуциальной полости до 3000 КОЕ/см3 установлен у котов британской породы, мейн-кунов, персидских и сибирских котов, у которых физиологические характеристики спермы после оттаивания были на среднем уровне, приемлемом для применения спермодоз при искусственном осеменении. Такой фактический уровень сапрофитной контаминации ближе к требованиям, предъявляемым к сперме жеребцов и быков.
Фактическая сапрофитная контаминация препуция от 5000 до 6000 КОЕ/см3 была у котов европейской породы с высокой подвижностью спермиев после оттаивания - более 36 %, средней переживаемостью половых клеток -2,42 часа. Физиологический уровень сапрофитных бактерий в препуции котов русской голубой породы и сфинксов был более 7000 КОЕ/ см3; на фоне такой контаминации подвижность их спермиев после оттаивания была соответственно более 32 и 29 %, что считается вполне приемлемым уровнем для дальнейшего искусственного осеменения. Такого допустимого уровня контаминации для спермы других видов животных нет, и он считается повышенным. Повышенным считается уровень более 5000 КОЕ/ см3 эякулята. Известно, что повышенные уровни сапрофитов снижают физиологические характеристики спермы в процессе биотехнологической обработки, то есть в процессе разбавления, охлаждения и криоконсервиро-вания спермодоз [7].
При дальнейшей биотехнологической обработке спермы, ее разбавлении, эквилибрации при температуре +2-+5 °С, замораживании и оттаивании была проведена оценка динамики уровня общего количества сапрофитных бактерий без применения антибиотиков в составе разбавителей, для того чтобы проследить характер изменения количества микроорганизмов без применения ингибирующих веществ, то есть для чистоты эксперимента.
Фактический наибольший уровень сапрофитной бактериальной контаминации спермы котов после оттаивания без применения антибиотиков установлен у котов породы сфинкс с наименьшими физиологическими характеристиками эякулятов после оттаивания, что на 9970,37 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от котов сибирской породы с высокой криорезистентно-стью семени, на 1092,9 КОЕ/см3 больше (Р<0,05) котов русской голубой породы, на 10165,08 КОЕ/ см3 больше (Р<0,001) от самцов персидской породы, 9431,76 КОЕ/см3 больше (Р<0,001)
от котов породы мейн-кун, на 5078,33 КОЕ/ см3 больше (Р<0,01) от европейской породы, на 9679,78 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от британской породы и на 11849,14 КОЕ/см3 больше (Р<0,001) от котов бельгийской породы, у которой были наилучшие физиологические характеристики спермы после оттаивания. Полученные породные отличия фактического уровня сапрофитов позволяют соотнести их с физиологическими показателями семени после оттаивания и предположить максимально допустимый уровень контаминации. Кроме того, полученные фактические результаты сапрофитной контаминации косвенно характеризуют разный уровень естественной резистентности у разных пород. Поэтому в следующих работах мы изучим уровень естественной резистентности у разных пород, для подтверждения данного предположения.
Полученные результаты позволяют нам предположить, что максимально допустимое количество сапрофитных бактерий для Felis catus может иметь породные отличия. Например, для нативной спермы европейской породы это может быть уровень до 6000 КОЕ/см3, так как физиологические характеристики спермы являются приемлемыми для дальнейшего процесса осеменения -подвижность более 35 %, переживаемость более 2 часов. Для русской голубой породы этот уровень может составить до 7000-7500 КОЕ/см3, так как физиологические характеристики сперми-ев свидетельствуют о средней криорезистентно-сти семени - подвижность более 35 %, переживаемость более 2 часов. Для породы сфинкс - до 8000-8500 КОЕ/см3, так как физиологические характеристики спермодоз после оттаивания свидетельствуют о минимальном допустимом уровне криорезистентности спермодоз - подвижность более 25 %, переживаемость 2,5 часа. Для остальных пород можно предлагать такой же уровень, как и для сельскохозяйственных животных - до 5000 КОЕ/см3, так как физиологические характеристики спермодоз после оттаивания вполне допустимы для дальнейшего применения такого семени в системе искусственного осеменения (подвижность не менее 20-25 %, переживаемость не менее 2-2,5 часов).
Кроме того, полученные результаты фактической контаминации сапрофитами, возможно, свидетельствуют о лучшей естественной резистентности организма котов бенгальской породы, британской породы, мейн-кунов, персидской, сибирской и котов европейской пород в сравнении с самцами русской голубой породы и сфинксов.
В англоязычной литературе изучается только спектр бактериальной микрофлоры и соотношение различных микроорганизмов и не предлагается максимально допустимый уровень общей сапрофитной контаминации спермы для Felis catus с целью применения для разработки норм государственных стандартов, норм максимально допустимого количества сапрофитов в сперме [4, 6].
Таким образом, нами показаны фактические особенности естественной сапрофитной контаминации препуциальной полости котов разных пород и динамика изменений общей сапрофитной бактериальной контаминации спермы после оттаивания без применения антибиотиков в разбавителях спермы. Это необходимо для разработки максимально допустимого уровня сапрофитной контаминации нативной и деконсервированной спермы Felis catus.
Установлены естественные особенности сапрофитной бактериальной контаминации препуциальной полости Felis catus разных пород. Наилучшие показатели контаминации препу-циальной полости были у котов бенгальской породы - до 1000 КОЕ/см3. Уровень сапрофитной контаминации препуциальной полости до 3000 КОЕ/см3 установлен у котов британской породы, мейн-кунов, персидских и сибирских котов. Сапрофитная контаминация препуция от 5000 до 6000 КОЕ/см3 была у котов европейской породы. Физиологический уровень сапрофитных бактерий в препуции котов русской голубой породы и сфинксов был более
7000 КОЕ/см3. Наименьшей сапрофитной контаминацией препуциальной полости обладали коты бенгальской породы, что на 1968,1 КОЕ/ см3 меньше (Р<0,05) от котов британской породы, на 5256,33 КОЕ/см3 меньше (Р<0,01) от котов европейской породы, на 2023,19 КОЕ/см3 меньше (Р<0,05) от мейн-кунов, на 1566,7 КОЕ/ см3 меньше (Р<0,05) от котов персидской породы, на 6699,82 КОЕ/см3 меньше (Р<0,001) от котов русской голубой породы, на 1800,38 КОЕ/ см3 меньше (Р<0,05) от котов сибирской породы и на 7773,43 КОЕ/см3 меньше (Р<0,001) от котов породы сфинкс. Полученные результаты позволяют нам предположить, что максимально допустимое количество сапрофитных бактерий для Felis catus может иметь породные отличия. Например, для нативной спермы европейской породы это может быть уровень до 6000 КОЕ/см3, для русской голубой породы этот уровень может составить до 7000-7500 КОЕ/ см3, для породы сфинкс до 8000-8500 КОЕ/см3. Для остальных пород можно предлагать такой же уровень, как и для всех сельскохозяйственных животных - до 5000 КОЕ/см3.
Литература
1. Амстиславский С. Я., Брусенцев Е. Ю., Мо-кроусова В. И. Криоконсервация эпиди-димального семени домашнего кота // Ва-виловский журнал генетики и селекции. 2017. № 21 (6). С. 646-650.
2. Ивакина С. Р., Ткачев А. В. Физиологические особенности нативной спермы котов различных пород // Международный вестник ветеринарии. 2021. № 1. С. 328-332.
3. Попов И. В., Аксенова П. В., Карташо-ва Е. В. Развернутый обзор применения метода электроэякуляции у различных видов животных // Ветеринарная патология. 2020. № 3 (73). С. 3-15.
4. Althouse G. C., Lu K. G. Bacteriospermia in extended porcine semen // Theriogenology. 2005. Vol. 63. P. 573-584.
5. Field investigations of bacterial contaminants and their effects on extended porcine semen / G. C. Althouse, C. E. Kuster, S. G. Clark, R. M. Weisiger // Theriogenology. 2000. Vol. 53. P. 1167-1176.
6. Althouse G. C. Sanitary procedures for the production of extended semen // Reprod. Do-mest. Anim. 2008. Vol. 43, S. 2. P. 374-378.
7. Bacterial contaminants and antimicrobial susceptibility profile of boar semen in southern Brazil Studs / P. E. Bennemann, S. A. Machado, L. K. Girardini, K. Sonálio, A. A. Tonin // Rev. MVZ Córdoba. 2018. Vol. 23. P. 6637-6648.
8. Effects of different concentrations of en-terotoxigenic and verotoxigenic E. coli on boar sperm quality / E. Bussalleu, M. Yes-te, L. Sepúlveda, E. Torner, E. Pinart, S. Bonet // Anim. Reprod. Sci. 2011. Vol. 127. P. 176-182.
References
1. Amstislavsky S. Ya., Brusentsev E. Yu., Mokrousova V. I. Cryopreservation of the epididymal semen of a domestic cat // Vavi-lov Journal of Genetics and Breeding. 2017. № 21 (6). P. 646-650.
2. Ivakina S. R., Tkachev A. V. Physiological features of native sperm of cats of various breeds // International Veterinary Bulletin. 2021. № 1. P. 328-332.
3. Popov I. V., Aksenova P. V., Kartashova E. V. A detailed review of the application of the electroejaculation method in various animal species // Veterinary Pathology. 2020. № 3 (73). P. 3-15.
4. Althouse G. C., Lu K. G. Bacteriospermia in extended porcine semen // Theriogenology. 2005. Vol. 63. P. 573-584.
5. Field investigations of bacterial contaminants and their effects on extended porcine semen / G. C. Althouse, C. E. Kuster, S. G. Clark, R. M. Weisiger // Theriogenology. 2000. Vol. 53. P. 1167-1176.
6. Althouse G. C. Sanitary procedures for the production of extended semen // Reprod. Do-mest. Anim. 2008. Vol. 43, S. 2. P. 374-378.
7. Bacterial contaminants and antimicrobial susceptibility profile of boar semen in southern Brazil Studs / P. E. Bennemann, S. A. Machado, L. K. Girardini, K. Sonálio, A. A. Tonin // Rev. MVZ Córdoba. 2018. Vol. 23. P. 6637-6648.
8. Effects of different concentrations of en-terotoxigenic and verotoxigenic E. coli on boar sperm quality / E. Bussalleu, M. Yes-te, L. Sepúlveda, E. Torner, E. Pinart, S. Bonet // Anim. Reprod. Sci. 2011. Vol. 127. P. 176-182.
BKeKBapTanbHbm «eCTHHKAIIK HayHHO^aKTwecKM CTaBpooojn.il xypHan -—-
9. Kuster C. E., Althouse G. E. The impact of bacteriospermia on boar sperm storage and reproductive performance // Theriogenolo-gy. 2016. Vol. 85. P. 21-25.
10. Santos C. S., Silva A. R. Current and alternative trends in antibacterial agents used in mammalian semen technology // Anim. Re-prod. 2020. Vol. 17. P. e2019011.
11. Adverse effects of members of the Entero-bacteriaceae family on boar sperm quality / J. L. Ubeda, R. Ausejo, Y. Dahmani, M. V. Falceto, A. Usan, C. Malo, F. C. Perez-Martinez // Theriogenology. 2013. Vol. 80. P. 565-570.
9. Kuster C. E., Althouse G. E. The impact of bacteriospermia on boar sperm storage and reproductive performance // Theriogenolo-gy. 2016. Vol. 85. P. 21-25.
10. Santos C. S., Silva A. R. Current and alternative trends in antibacterial agents used in mammalian semen technology // Anim. Re-prod. 2020. Vol. 17. P. e2019011.
11. Adverse effects of members of the Entero-bacteriaceae family on boar sperm quality / J. L. Ubeda, R. Ausejo, Y. Dahmani, M. V. Falceto, A. Usan, C. Malo, F. C. Perez-Martinez // Theriogenology. 2013. Vol. 80. P. 565-570.
