CC BY
136
Игорь Алексеевич Кудрявцев1, Маргарита Владимировна Гудкова2, Ольга Михайловна Павлова3, Валерий Евгеньевич Шевченко4
ОСОБЕННОСТИ РОСТМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ OSU03012 НА КЛЕТКИ А549 И H1299 АДЕНОКАРЦИНОМЫ ЛЕГКОГО ЧЕЛОВЕКА
1 К. м. н., ведущий научный сотрудник, лаборатория онкопротеомики НИИ канцерогенеза
РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
2 К. б. н., старший научный сотрудник, лаборатория онкопротеомики НИИ канцерогенеза
РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
3 Научный сотрудник, лаборатория онкопротеомики НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
4 Д. б. н., заведующий, лаборатория онкопротеомики НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
Адрес для переписки: 115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24, лаборатория онкопротеомики НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Кудрявцев Игорь Алексеевич; e-mail: kudryavtzev.i@yandex.ru
Исследовано ростмодулирующее действие OSU03012 (производного противовоспалительного препарата целекоксиба) на клетки А549 и Н1299 аденокарциномы легкого человека. По сравнению с известным ингибитором циклооксигеназы-1 и -2 индометацином OSU03012 проявлял более высокую активность в торможении роста обеих злокачественных линий, однако его эффект сопровождался значительным (до 5,5 раза по сравнению с контролем) повышением включения [3Н]тимидина в ДНК. При этом, в отличие от индометацина, OSU03012 существенно (до 4,5 раза) усиливал экспрессию циклоок-сигеназы-2 в опухолевых клетках. В проведенных исследованиях выявлена выраженная способность OSU03012 ингибировать липоксигеназный путь метаболизма арахидоновой кислоты.
Ключевые слова: метаболизм арахидоновой кислоты, ингибиторы СОХ-1 и СОХ-2, ростмодулирующее действие, опухолевые клетки человека.
OSU03012 (2-амино-№{4-[5-(2-фенантренил)-3-(три-фторметил)-1Н-пиразол-1-ил]-фенил} ацетамид) является производным третьего поколения высокоэффективного противовоспалительного препарата целекоксиба [1; 2] — одного из селективных ингибиторов циклооксиге-назы-2 (COX-2) [3—5]. В настоящее время индуцибель-ная форма COX рассматривается как важная мишень для химиотерапии и химиопрофилактики рака человека [3; 6]. Убедительным основанием для этого являются многочисленные экспериментальные данные о взаимосвязи COX-2 с экспрессией онкогенов, метаболической активацией химических канцерогенов, эффектом промоторов, иммуносупрессией, неоангиогенезом [5— 7], высокая антиканцерогенная и противоопухолевая активность селективных ингибиторов COX-2, в частности целекоксиба, в исследованиях in vivo и in vitro [8— 11], а также успешное применение их в комбинации с химиотерапевтическими препаратами и лучевым лечением [12—14].
© Кудрявцев И. А., Гудкова М. В., Павлова О. М.,
Шевченко В. Е., 2011
УДК 616.24-006.66-091.8:615.015.44
В отличие от целекоксиба, 0SU03012 не является ингибитором COX-2, однако проявляет выраженные противоопухолевые свойства, которые связывают с торможением фосфоинозитид-зависимой протеинкиназы-1 (PDK1) [1; 15; 16]. Молекулярные механизмы действия этого аналога целекоксиба в настоящее время интенсивно изучаются, и уже выявлено его влияние на ряд важных сигнальных путей [2; 15—18]. В то же время значение каскада арахидоновой кислоты (АК) в реализации ростин-гибирующего эффекта 0SU03012 остается неясным, особенно в свете того, что ключевую роль в контроле роста опухолевых клеток в зависимости от их типа могут играть не только изоформы COX, но и 12- или 5-липоксигеназы (LOX) [19—20]. В связи с этим представлялось важным исследовать особенности ростмодулирующего действия 0SU03012 на разных опухолевых клетках с оценкой экспрессии COX-1 и COX-2 в них, а также протестировать аналог целекоксиба по влиянию на биосинтез основных циклооксигеназных и липоксигеназных метаболитов АК.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использованы клетки линий А549 и H1299 аденокарциномы легкого человека (American Type Cul-
ture Collection, США), которые культивировали при 37 °С и увлажненной атмосфере с 5% CO2 (инкубатор 5215-2, «ShelLab», США) на пластиковых флаконах (S = 25 см2; «Corning Costar», США) в среде RPMI-1640 (общий объем 5 мл) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки («HyClone», США), пенициллина (100 ед/мл) и стрептомицина (100 мкг/мл). Индометацин, OSU03012, а также моноклональные антитела к COX-1 и COX-2 получены от фирмы «Cayman» (США), [1-14С]АК (удельная активность 54 мКи/ммоль) и меченые стандарты — от «Amersham» (Великобритания). [Метил-3Н] тимидин (удельная активность 50 Ки/ммоль) изготовлен в Институте молекулярной генетики РАН (Москва). В данных исследованиях были использованы моноклональные антитела, ковалентно связанные с разными флуоресцеинами: FITC (Xabs/Xem = 492/514; COX-1) и R-PE (Xabs/Xem = 488/575; COX-2). Приготовление образцов и окрашивание клеток осуществляли в соответствии с рекомендациями производителя.
Выраженность экспрессии COX-1 и COX-2 определяли на проточном цитофлуориметре «BD FACS Canto II» («BD Bioscienses», США) и многоцелевом планшетном ридере «Chameleon V» («Hidex», Финляндия), а также контролировали с помощью флуоресцентной микроскопии. Тестирование 0SU03012 по влиянию на биосинтез основных эйкозаноидов из экзогенной [“^АК проводили в бесклеточных гомогенатах ткани легкого мыши [19]. Синтезированные ex vivo метаболиты р^АК экстрагировали дважды 3 объемами этилацетата с последующим выпариванием растворителя в токе азота.
Синтезируемые эйкозаноиды определяли методом тонкослойной хроматографии с привлечением авторадиографии и радиометрии [19]. Влияние индометацина и OSU03012 на пролиферацию опухолевых клеток оценивали через 72 и 96 ч после начала культивирования, рабочая концентрация обоих препаратов составила 10-5 М [1; 2; 19]. [3Н]тимидин вводили импульсно на 1 ч в концентрации 1 мкКи/мл, затем излишки метки удаляли 3-кратным промыванием клеток средой. Измерение радиоактивности (имп/мин) в снятых опухолевых клетках проводили на жидкостном сцинтилляционном счетчике «Wallac 1219» («LKB», Швеция).
Статистическую значимость результатов оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
При сравнительном анализе ростмодулирующего действия 0SU03012 и индометацина на разных линиях аденокарциномы легкого человека были выявлены принципиальные различия как по чувствительности клеток А549 и H1299 к действию препаратов, так и по влиянию последних на включение [3Н]тимидина в ДНК. На клетках А549 наблюдалось выраженное торможение роста культуры при введении обоих препаратов. Так, по сравнению с контрольными культурами A549 на 3-и сутки роста, в которых количество адгезивных клеток составляло (4,21 ± 0,56) х 106, при воздействии индометацина и 0SU03012 оно снижалось до (2,79 ± 0,19) х 106 ( — 34%; р < 0,05) и (2,18 ± 0,35) х 106 ( — 48%; р < 0,02) соответственно. Сходный эффект ингибиторов COX-1/COX-2 и PDK1 в подавлении роста клеток А549 сопровождался
в первом случае торможением, а во втором — резкой стимуляцией включения [3Н]тимидина в ДНК. Средний уровень радиоактивности в контрольных культурах этой линии составил 12 052 ± 1859 имп/мин на 106 адгезивных клеток, при введении индометацина — 11 350 ± 938 имп/мин на 106 адгезивных клеток ( — 6% по сравнению с контролем; р > 0,05), в то время как при воздействии OSU03012 он достигал 65 241 ± 5414 имп/мин на 106 адгезивных клеток ( + 441%; р < 0,0001; рис. 1).
В отличие от клеток А549, на другой линии аденокарциномы легкого ростмодулирующий эффект обоих препаратов был слабо выражен. Среднее количество адгезивных клеток в этих контрольных культурах на 3-и сутки роста составляло (3,34 ± 0,18) х 106, при воздействии индометацина — (3,61 ± 0,37) х 106 ( + 8%; р > 0,05), OSU03012 — (2,72 ± 0,32) х 106 (-19%; р > 0,05). При этом средняя радиоактивность в контроле равнялась 14 713 ± 1080 имп/мин на 106 адгезивных клеток, в культурах с введением индометацина — 12 330 ± 1170 имп/мин на 106 адгезивных клеток (-16%; р > 0,05), OSU03012 — 39 064 ± 7357 имп/мин на 106 адгезивных клеток ( + 166%; р < 0,05; см. рис. 1). В то же время при использовании в
2 раза менее плотной культуры Н1299 торможение роста опухолевых клеток индометацином и OSU03012 достигало 34 и 50% соответственно, но влияние препаратов на включение [3Н]тимидина в ДНК практически оставалось прежним. Так, в менее плотных культурах этой линии средняя радиоактивность была следующей: в контроле — 78 819 ± 1668 имп/мин на 106 адгезивных клеток, при введении индометацина — 68 310 ± 7428 имп/мин на 106 адгезивных клеток (-13%; р > 0,05) и OSU03012 — 184 287 ± 15 036 имп/мин на 106 адгезивных клеток ( + 134%; р < 0,01). Следует отметить, что при достижении культурами плотного монослоя на 4-е сутки роста столь выраженный стимулирующий эффект OSU03012 на
80 000
* 70 000 -
О
К
(Г
со 60 000 -
0
со
х 50 000 -
| 40 000 -
.о
к
О 30 000 -
сс
£
§ 20 000 -
с!
то
“■ 10 000 -0
Рисунок 1. Влияние индометацина и OSU03012 на включение [^тимидина опухолевыми клетками А549 и Ж299. Данные радиометрии на жидкостном сцинтилляционном счетчике Wallac 1219. I — контроль; II — индометацин (10-5 М); III — 081103012 (10-5 М).
1
II I
А549
H1299
III
III
II
включение [3Н]тимидина в ДНК отсутствовал на обеих линиях опухолевых клеток, причем средняя радиоактивность во всех контрольных и опытных группах не превышала 1500—2000 имп/мин на 106 адгезивных клеток.
Экспрессия COX-1 была хорошо выражена в обеих клеточных линиях. Средний уровень флуоресценции по FITC в 100 000 анализируемых клеток в контрольных культурах H1299 составлял приблизительно 4000 усл. ед., в клетках А549 — более 5000 усл. ед. (рис. 2, А). Влияние индометацина на экспрессию COX-1 в обеих культурах было незначительным, в то время как 0SU03012 усиливал ее в клетках А549 до 85%.
Другая ситуация наблюдалась с экспрессией COX-2 в исследуемых клетках. Средний уровень флуоресценции по R-PE в 100 000 анализируемых клеток в обеих контрольных культурах был крайне низкий — около 200 усл. ед. (рис. 2, Б). Влияние индометацина на экспрессию этой изоформы COX также было слабым. На этом фоне 0SU03012 проявлял очень выраженные стимулирующие свойства, усиление экспрессии COX-2 им в клетках H1299 составило 107%, в клетках А549 — 345%.
Тестирование 0SU03012 по влиянию на биосинтез основных эйкозаноидов из экзогенной [^^АК в ткани легкого мыши позволило выявить существенные изменения в продукции основных липоксигеназных метаболитов — 5-, 12- и 15-гидроксиэйкозатетраеновых кислот (HETE). Так, радиоактивность пятна с 12-HETE/15-HETE в контроле составила 7636 имп/мин, при воздействии 0SU03012 — 5418 имп/мин ( — 29% по сравнению с контролем; рис. 3). Влияние аналога целекоксиба на конверсию [“^АК в 5-HETE было менее выражено. В контрольной хроматограмме радиоактивность этого пятна была равна 4308 имп/мин, в опытной — 3496 имп/мин ( — 19% по сравнению с контролем). В то же время различия в биосинтезе основного циклооксигеназного метаболи-
12 000
j 10 000 -
о > s"
§ 8000 -X
§
о
(D
° 6000 -■&
-D
к
g 4000 -
ш 5
о
X
ь
2000 -0
А549 H1299
A
III
III
II
II
та АК — простагландина E2 (PGE2) были минимальными. В контроле радиоактивность пятна с PGE2 составила 1505 имп/мин, при воздействии 0SU03012 — 1623 имп/мин ( + 8%). Блок конверсии [^^АК в липоксигеназные метаболиты в результате действия аналога целекоксиба сопровождался значительным увеличением пула неме-таболизированной меченой АК. В контроле радиоактивность этого пятна была равна 3833 имп/мин, в опыте — 7112 имп/мин ( + 86%).
Таким образом, результаты проведенных исследований указывают на выраженное ростингибирующее действие аналога целекоксиба 0SU03012 на двух линиях аденокарциномы легкого человека, происходящее на фоне значительного усиления включения [3Н]тимидина в ДНК и экспрессии COX-2, которое наиболее ярко наблюдается на клетках А549. Его эффект принципиально отличается от ростингибирующего действия известных ингибиторов метаболизма АК, которое, как правило, сопровождает подавление включения [3Н]тимидина опухолевыми клетками. Важным выявленным свойством 0SU03012 является также способность существенно ингибировать биосинтез основных липоксигеназных метаболитов АК — 5-, 12- и 15-HETE.
Необходимо отметить, что при модификации химической структуры целекоксиба сохранилось активное влияние на каскад АК, но изменилась направленность действия на его отдельные ветви. В первую очередь это относится к экспрессии COX-2, которая, как и включение [3Н]тимидина в ДНК, значительно усиливалась при воздействии 0SU03012 на опухолевые клетки. Причем и тот, и другой стимулирующие эффекты были выражены в одинаковой степени как в клетках A549, так и в клетках H1299, что указывает на взаимосвязь этих процессов. Полученные данные согласуются с результатами одной из работ Н. Ding и соавт. [17] об активации Erk1/2
1000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
А549
H1299
III
II
II
0
Б
Рисунок 2. Влияние индометацина и OSU03012 на экспрессию COX-1 и COX-2 опухолевыми клетками А549 и H1299. Данные цитофлуориметрии на проточном цитофлуориметре BD FACS Canto II. I — контроль; II — индометацин (10-5 М); III — 0SU03012 (10-5 М).
А. COX-1. Б. COX-2.
10 ООО 9000 -8000 -
Д 7000 -
с
5
s 6000 -
о 5000 -
сс
5
^ 4000 -
Л
о
S
її 3000 -
Cl
2000 -
1000 -0
Рисунок 3. Влияние OSU03012 на биосинтез основных эйкозаноидов из экзогенной [140]АК в бесклеточных гомогенатах ткани легкого мыши. Данные радиометрии пятен из ТС-хроматограмм, проведенной на жидкостном сцинтилляционном счетчике Wallac 1219. I — контроль; II — 081103012 (10-4 М).
А. РйЕ2. Б. 5-НЕТЕ. В. 12-НЕТЕ/15-НЕТЕ. Г. Остальные метаболиты АК. Д. Неметаболизированная [14С]АК.
и Cdk2/cyclin A данным аналогом целекоксиба, ведущей к накоплению клеток в S-фазе и апоптозу. Важно отметить, что OSU03012 способен активировать как каспаза-зависимый, так и альтернативные пути апоптоза; при этом, в отличие от большинства противоопухолевых препаратов, аналог целекоксиба индуцирует гибель клеток абсолютно независимо от экспрессии bcl-2 [2].
Что же касается подавления препаратом биосинтеза основных липоксигеназных метаболитов АК, значение этого феномена для процессов пролиферации и гибели опухолевых клеток разного гистогенеза остается неясным. Ранее нами было показано, что в таких опухолевых клетках, как клетки линии A431 эпидермоидного рака человека, ключевую роль в контроле роста играют не конститутивная или индуцибельная изоформы COX и их основной метаболит PGE2, а звенья другого, липок-сигеназного, пути каскада АК — 12-LOX и ее метаболит 12-HETE [19]. В то же время результаты настоящей работы не исключают возможное участие различных LOX и в реализации сложного проапоптотического действия OSU03012, которое необходимо детально исследовать на опухолевых клетках с разным профилем синтезируемых эйкозаноидов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В исследованиях на клетках А549 и H1299 аденокарциномы легкого человека выявлены новые важные особенности ростингибирующего действия аналога целекокси-ба — OSU03012. Противоопухолевый эффект препарата сопровождается значительным усилением включения [3И]тимидина в ДНК и экспрессии COX-2 в опухолевых клетках. Тестированием OSU03012 по влиянию на биосинтез основных эйкозаноидов в бесклеточных гомогенатах ткани легкого мыши показана выраженная способность аналога целекоксиба тормозить липоксигеназный путь метаболизма АК.
Авторы благодарят И. Б. Зборовскую за предоставление культур опухолевых клеток A549 и H1299 для данных исследований.
ЛИТЕРАТУРА
1. Exploring the molecular mechanisms of 0SU-03012 on vascular smooth muscle cell proliferation / Kuo W. W., Weng J. R., Huang C. Y., Tsai C. H., Liu W. H., Wen C. H., Tsai S. C., Wu C. H. // Mol. Cell. Bio-chem. — 2010. — Vol. 344, N 1—2. — P. 81—90.
2. A novel celecoxib derivative, 0SU03012, induces cytotoxicity in primary CLL cells and transformed B-cell lymphoma cell line via a cas-pase- and Bcl-2-independent mechanism / Johnson A. J., Smith L. L., Zhu J., Heerema N. A., Jefferson S., Mone A., Grever M., Chen C. S., Byrd J. C. // Blood. — 2005. — Vol. 105, N 6. — P. 2504—2509.
3. Sarkar F. H., Adsule S., Padhye S. Back to the future: COX-2 inhibitors for chemoprevention and cancer therapy // Mini Rev. Med. Chem. — 2007. — Vol. 7, N 6. — P. 599—608.
4. Simmons D. L., Botting R. M., Hla T. Cyclooxygenase isozymes: the biology of prostaglandin synthesis and inhibition // Pharmacol. Rev. — 2004. — Vol. 56. — P. 387—437.
5. Cyclooxygenase-2 upregulation as a perigenic change in carcinogenesis / Tsuji S., Tsujii M., Kawano S., Hori M. // J. Exp. Clin. Cancer Res. — 2001. — Vol. 20, N 1. — P. 117—129.
6. Cyclooxygenase-2: a novel target for cancer chemotherapy? / Dempke W., Rie C., Grothey A., Schmoll H. J. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. — 2000. — Vol. 127. — P. 411—417.
7. Мясищева Н. В., Кудрявцев И. А. Эндогенные модуляторы канцерогенеза / Под ред. Д. Г. Заридзе. Канцерогенез. — М.: Медицина, 2004. — С. 415—428.
8. Anti-cancer effects of COX-2 inhibitors and their correlation with angiogenesis and invasion in gastric cancer / Fu S. L., Wu Y. L., Zhang Y. P., Qiao M. M., Chen Y. // World J. Gastroenterol. — 2004. — Vol. 10, N 13. — P. 1971—1974.
9. Celecoxib inhibits N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine-in-duced urinary bladder cancers in male B6D2F1 mice and female Fischer-344 rats / Grubbs C. J., Lubert R. A., Koki A. T., Leahy K. M., Mas-ferrer J. L., Steele V. E., Kelloff G. J., Hill D. L., Seibert K. // Cancer Res. — 2000. — Vol. 60, N 20. — P. 5599—5602.
10. Cyclooxygenase inhibitors in urinary bladder cancer: in vitro and in vivo effects / Mohammed S. I., Dhawan D., Abraham S., Snyder P. W., Waters D. J., Craig B. A., Lu M., Wu L., Zheng R., Stewart J., Knapp D. W. // Mol. Cancer Ther. — 2006. — Vol. 5. — P. 329—336.
11. Chemoprevention of colon cancer by specific cyclooxygenase-2 inhibitor, celecoxib, administered during different stages of carcinogenesis / Reddy B. S., Hirose Y., Lubet R., Steele V., Kelloff G., Paulson S., Seibert K., Rao C. V. // Cancer Res. — 2000. — Vol. 60. — P. 293—297.
12. Synergistic antitumor effects of celecoxib with 5-fluorouracil depend on IFN-gamma / Irie T., Tsujii V., Tsuji S., Yoshio T., Ishii S., Shinzaki S., Egawa S., Kakiuchi Y., Nishida T., Yasumaru M., Iijima H., Murata H., Takehara T., Kawano S., Hayashi N. // Int. J. Cancer. —
2007. — Vol. 121, N 4. — P. 878—883.
13. Combination of cyclooxygenase-2 inhibitors and oxaliplatin increases the growth inhibition and death in human colon cancer cells / Lin J., Hsiao P. W., Chiu T. H., Chao J. I. // Biochem. Pharmacol. —
2005. — Vol. 70, N 5. — P. 658—667.
14. Radiosensitivity enhancement by combined treatment of celecoxib and gefitinib on human lung cancer cells / Park J. S., Jun H. J., Cho M. J., Cho K. H., Lee J. S., Zo J. I., Pyo H. // Clin. Cancer Res. —
2006. — Vol. 12. — P. 4989—4999.
15. Small-molecule inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase/Akt signaling inhibit Wnt/beta-catenin pathway cross-talk and suppress medulloblastoma growth / Baryawno N., Sveinbjornsson B., Eksborg S., Chen C. S., Kogner P., Johnsen J. I. // Cancer Res. — 2010. — Vol. 70, N 1. — P. 266—276.
16. Chemopreventive and bioenergetic signaling effects of PDK1/ Akt pathway inhibition in a transgenic mouse model of prostate cancer / Sargeant A. M., Klein R. D., Rengel R. C., Clinton S. K., Kulp S. K., Kashi-da Y., Yamaguchi M., Wang X., Chen C. S. // Toxicol. Pathol. — 2007. — Vol. 35, N 4. — P. 549—561.
17. 0SU03012 activates Erk1/2 and Cdks leading to the accumulation of cells in the S-phase and apoptosis / Ding H., Han C., Guo D., Wang D., Chen C. S., D'Ambrosio S. M. // Int. J. Cancer. — 2008. — Vol. 123, N 12. — P. 2923—2930.
18. Sensitivity to the non-COX inhibiting celecoxib derivative, 0SU03012, is p21(WAF1/CIP1) dependent / Ding H., Han C., Guo D., Wang D., Duan W., Chen C. S., D'Ambrosio S. M. // Int. J. Cancer. —
2008. — Vol. 123, N 12. — P. 2931—2938.
19. Липоксигеназный путь метаболизма арахидоновой кислоты в контроле роста опухолевых клеток разного типа / Кудрявцев И. А., Гудкова М. В., Павлова О. М., Орешкин А. Е., Мясищева Н. В. // Биохимия. — 2005. — Т. 70, вып. 12. — С. 1696—1704.
20. Кудрявцев И. А., Мясищева Н. В. Циклооксигеназа-1 и ци-клооксигеназа-2 как мишени в химиотерапии и химиопрофилактике опухолей животных и человека // Рос. биотер. журн. — 2008. — № 3. — С. 48—56.
Поступила 03.12.2010
Igor Alexeyevich Kudryavtsev1, Margarita Vladimirovna Gudkova2, Olga Mikhailovna Pavlova3, Valeriy Evgenievich Shevchenko4
CHARACTERISTIC FEATURES OF OSU03012 GROWTH-MODULATING EFFECTS ON A549 AND H1299 CELLS OF HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA
1 MD, PhD, Leading Researcher, Oncoproteomics Laboratory, Carcinogenesis Research Institute,
N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoe sh., Moscow, 115478, RF)
2 DSc, PhD, Senior Researcher, Oncoproteomics Laboratory, Carcinogenesis Research Institute,
N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoe sh., Moscow, 115478, RF)
3 Researcher, Oncoproteomics Laboratory, Carcinogenesis Research Institute,
N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoe sh., Moscow, 115478, RF)
4 MD, PhD,DSc, Head, Oncoproteomics Laboratory, Carcinogenesis Research Institute,
N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoe sh., Moscow, 115478, RF)
Address for correspondence: Kudryavtsev Igor Alexeyevich, Oncoproteomics Laboratory, Carcinogenesis Research Institute, N. N. Blokhin RCRC RAMS, 24, Kashirskoe sh., Moscow, 115478, Russian Federation; e-mail: kudryavtzev.i@yandex.ru
The paper analyzes growth modulating effects of OSU03012 (anti-inflammatory drug celecoxib derivative) on A549 and H1299 cells of human lung adenocarcinoma. OSU03012 demonstrated a higher growth inhibition activity on both cell lines than a known cyclooxygenase-1 and -2 inhibitor indometacin, though the effect of the former was associated with a considerable increase (up to 5.5-fold as compared to the control) in [3H] thymidine uptake by DNA. Unlike indometacin, OSU03012 induced a considerably (up to 4.5-fold) higher cyclooxygenase-2 expression in tumor cells. OSU03012 demonstrated the ability to inhibit lipooxygenase pathway of arachidonic acid.
Key words: arachidonic acid metabolism, COX-1 and COX-2 inhibitors, growth modulating activity, human tumor cells.
