CC BY
16<efeBKi j
онкология
Особенности распределения антигенов главного комплекса гистосовместимости I класса у детей с солидными злокачественными опухолями
Арсамакова Х. Х.; Козель Ю. Ю., профессор, зав. отделением детской онкологии, ФГУ «РНИОИ» Минздравсоцразвития России; Фадеева Т. В., главный врач СПК; Кудинова Э. Е., зав. иммунологическим отделением, ГУЗ «Станция переливания крови» РО; Златник Е. Ю., профессор, зав. лабораторией культуры тканей; Кузнецов С. А., к.м.н., отд. детской онкологии ФГУ «РНИОИ» Минздравсоцразвития России; г. Ростов-на-Дону
По современным представлениям, система главного комплекса гистосовместимости (HLA), обеспечивая регуляцию иммунного ответа, осуществляет такие важнейшие физиологические функции, как взаимодействие всех иммунокомпетентных клеток организма, распознавание своих и чужеродных, в том числе, измененных собственных, клеток, запуск и реализацию иммунного ответа и, в целом, обеспечивает выживание человека как вида в условиях экзогенной и эндогенной агрессии (Bodmer W., 1997).
Следует отметить, что внедрение в исследования системы HLA молекулярно-генетических методов не только позволило конкретизировать представления о системе HLA, но и значительно расширило представления о ее полиморфизме, при этом были открыты многие новые аллели классов I, II и III, и общее количество только известных специфичностей HLA классов I и II увеличилось более чем в 6 раз. Аллельные варианты HLA классов I и II входят в несколько генетических локусов. Так, в классе I имеется 3 локуса HLA: А, В и С; также к антигенам HLA класса I относятся гены локуса МЮ — МНС class I chain — related gens (МЮ — А и МЮ — В) (Komatsu-Wakui M. et al., 1999). Эти гены локализуются на хромосоме 6 в непосредственной близости от HLA — В (Janeway Ch. A., 1997).
К настоящему моменту установлено 17 аллельных вариантов генов МЮ — А и МЮ — В (Komatsu-Wakui M. et al., 1999; Bauer S. et al., 1999). В настоящее время обнаружено, что антигены МЮ — А участвуют в активации взаимодействия TCR — молекулы мНс в развитии Т-клеточно-опосредованной цитотоксичности и активности НК-клеток, тем самым, в частности, играя роль в обеспечении противоракового иммунитета (Bauer S. et al., 1999).
Успехи молекулярной биологии, в частности, имму-ногенетические методы изучения главного комплекса гистосовместимости человека (МНС) не только способствовали новому взгляду на этиологию и патогенез многих заболеваний, но и прогноз ряда заболеваний в клинике. Исследование МНС стало одним из приоритетных направлений в иммуногенетике (Хаитов Р. М., Алексеев Л. П., 1998). Изучение характера ассоциированности антигенных вариантов генов HLA со злокачественными солидными опухолями у детей в изученной нами литературе ранее не проводилось.
Заболеваемость детей злокачественными опухолями в России за последние 10 лет увеличилась на 20% и достигла 4,25 тысяч (Агафонов Б. В. и соавт., 2004). В настоящее время в России насчитывается около 12500 детей до 15 лет, находящихся под врачебным наблюдением по поводу злокачественных новообразований (ЗН) всех локализаций (Аксель Е. М. и соавт., 2001; Давыдов М. И. и соавт., 2002; Чиссов В. И. и соавт., 2002). Россию можно отнести к странам с высоким уровнем заболеваемости
детской онкологической патологией. В 2002 году она составила 13—15 на 100 тысяч детского населения (Бондарь И. В., 2002; Дурнов Л. А., 2002). Солидные ЗН, включая опухоли ЦНС, занимают второе место в структуре заболеваемости детей злокачественными опухолями. На их долю, по данным различных отечественных и зарубежных авторов, приходится от 48,5 до 54% от всей онкопатологии (Моисеенко Е. И., 1995; Менткевич Г. Л., 2000; Аксель Е. М., 2001; Дурнов Л. А. и соавт., 2002; Pizzo P.A., Poplak D.J., 2003). Среди солидных опухолей наиболее часто диагностируются опухоли центральной нервной системы — около 20%, реже встречаются опухоли почек — 8%, костей и мягких тканей — 12%, глаз — 3,5%, половых органов — 0,7% (Вишневская Е. Е., 1997; Маицко Д. Е. и соавт., 1998; Нечушкина И. А. и соавт., 2001; Давыдов М. И., 2002; Дурнов Л. А. и соавт., 2002;
Таблица 1
Распределение HLA антигенов I класса у детей с нейробластомой (частота встречаемости антигена, %)
Антигены HLA I класса Контрольная группа (п=1215) Больные (n=14) С2
А1 25,19 21,42 0,09
А2 48,06 50,0 00,2
А3 25,35 7,14 2,43
А23 4,36 7,14 0,25
А24 16,46 35,71 3,69
А25 4,52 7,14 0,22
А26 5,35 7,14 0,09
А11 12,59 14,28 0,04
А31 0,90 7,14 5,56
В51 12,35 14,28 0,40
В7 19,67 1,14 1,38
В8 10,86 21,42 1,58
В44 14,07 14,28 0,001
В13 11,60 35,71 8,2
В62 6,99 7,14 0,001
В38 8,97 7,14 0,06
В39 1,73 7,14 2,31
В18 13,50 7,14 0,48
В49 5,10 7,14 0,12
В55 0,82 7,14 0,01
В27 10,70 28,57 4,55
В35 14,90 14,28 0,004
В60 6,34 14,28 2,32
В61 2,47 7,14 1,27
Ы
№2(25) • 2011
www.akvarel2002.ru
Таблица 2
Распределение HLA антигенов Iкласса у детей с нефробластомой (частота встречаемости антигена, %)
Антигены HLA I класса Контрольная группа (п=1215) Больные (n=14) С2
А1 25,19 14,28 0,86
А2 48,06 50,0 0,02
А3 25,35 35,71 0,78
А24 16,46 14,28 0,05
А25 4,52 7,14 0,22
А26 5,35 21,42 6,85
А11 12,59 14,28 3,60
А28 5,10 14,28 2,36
А29 1,48 7,14 2,91
А31 0,90 7,14 5,56
В51 12,35 28,57 3,32
В7 19,67 7,14 1,36
В8 10,86 14,28 0,17
В44 14,07 14,28 0,001
В13 11,60 7,14 2,69
В38 8,97 7,14 0,06
В18 13,50 28,57 2,66
В49 5,10 14,28 2,36
В35 14,90 35,71 3,17
В60 6,34 7,14 0,02
В41 4,12 14,28 3,13
Heydeman R.L., Packer R.J., 1997; Smit M.A. et al., 1999; Verstraete K.L., Lang P., 2000).
Целью настоящей работы явилось исследование распределения антигенов главного комплекса гистосовме-стимости I класса у детей с солидными злокачественными опухолями.
Материалы и методы. Информация об обследованной популяции
Определение антигенов HLA I класса было проведено у 74 пациентов отделения детской онкологии РНИОИ: 12 пациентов с саркомой Юинга (9 мальчиков, 3 девочки); 11 пациентов с остеогенной саркомой (7 мальчиков, 4 девочки); 14 пациентов с нейробластомой (8 мальчиков, 6 девочек); 14 пациентов с нефробластомой (9 мальчиков, 5 девочек); 23 пациента с герминогенными опухолями (10 мальчиков, 13 девочек). Средний возраст больных составил: с саркомой Юинга — 11,8 года, остеогенной саркомой — 17,1 года, нейробластомой — 4,7 года, не-фробластомой — 4,8 года, с герминогенными опухолями — 14,2 года. Заболевание, в среднем, начиналось в возрасте: саркома Юинга — 11,6 года, остеогенная саркома — 16,4 года, нейробластома — 4,4 года, нефробла-стома — 4,2 года, герминогенные опухоли — 10,6 года.
Контрольную группу составили 1215 доноров ГУЗ «СПК» РО.
Исследование HLA фенотипа I класса проводилось на базе ГУЗ «СПК» РО в иммунологическом отделении методом серологического типирования, которое осуществляли в стандартном лимфоцитотоксическом тесте. Для определения HLA — антигенов I класса, локусов А и В, в качестве гистотипирующих стандартов использовали сыворотки Всероссийского банка гистотипирующих реагентов Санкт-Петербургского НИИ гематологии и переливания крови.
Таблица 3
Распределение HLA антигенов Iкласса у детей с саркомой Юинга (частота встречаемости антигена, %)
Антигены HLA I класса Контрольная группа (n=1215) Больные (n=12) С2
А1 25,19 33,33 0,11
А2 48,06 50,0 0,02
А3 25,35 33,33 0,89
А24 16,46 41,66 3,77
А25 4,52 8,33 0,004
А26 5,35 8,33 0,03
В51 12,35 33,33 3,05
В7 19,67 25,0 0,01
В8 10,86 25,0 0,57
В44 14,07 8,33 0,02
В13 11,60 8,33 0,02
В62 6,99 8,33 0,15
В18 13,50 8,33 0,01
В27 10,70 8,33 0,04
В35 14,90 16,67 0,06
В60 6,34 8,33 0,09
В61 2,47 8,33 0,13
В41 4,12 8,33 0,001
Статистическая обработка результатов. Достоверность различий и достоверность наблюдаемой ассоциации определяли с помощью общепринятого в иммуноге-нетике вычисления с2.
Результаты и обсуждение. Первым этапом работы выполнена оценка распределения антигенов иСд I класса у детей с солидными злокачественными опухолями. Результаты исследования распределения антигенов ИЬА I класса представлены в таблицах 1—5.
Все основные антигены присутствуют в популяции: ИЬА I класса (локус А и В).
Из представленных данных (табл. 1), при нейробла-стоме по сравнению с контролем повышена частота антигенов — А24 — 35,71%, А31 — 7,14%, В8 — 21,42%, В13 — 35,71%, В27 — 28,57%, В60 — 14,28%. Достоверно повышена только частота антигена В13 (с2 — 6,02, р<0,05). Снижена частота антигенов В7 — 7,14% и В18 — 7,14%. Число гомозигот при нейробластоме — 7 случаев.
При нефробластоме (табл. 2) повышена частота антигенов: А26 — 21,42%, А31 — 7,14%, В51 — 28,57%, В18 — 28,57%, В35 — 35,71%, В41 — 14,28%. Достоверно повышена только частота антигена А26 (с2 — 6,85, р<0,05). Снижена частота антигена В13 — 7,14%. Число гомозигот при нефробластоме — 5 случаев. Повышение частоты ИЬА А31, вероятнее всего, обусловлено низкой частотой антигена в популяции и небольшим числом пациентов в обследуемой группе.
При саркоме Юинга (табл. 3) значительно повышена частота антигенов А24 — 41,66%, В51 — 33,33%, В61 — 8,33%. Достоверных различий не выявлено.
У пациентов с остеогенной саркомой (табл. 4) повышена частота антигенов А24 — 36,36%, В51 — 36,36%, В61 — 9,0%, также отмечено повышение частоты антигенов В13, В56, В35 (соответственно, 27,27%, 9,0%, 27,27%) по сравнению с контрольной группой. Снижена частота антигенов В7 — 9,0%, однако эти различия недостоверны из-за небольшого числа наблюдений. Число гомозигот в группе с остеогенной саркомой составило 5 случаев, число гомозигот у пациентов с саркомой Юинга — 7.
www.akvarel2002.ru №2(25) • 2011
к
Таблица 4
Распределение HLA антигенов I класса у детей с остеогенной саркомой (частота встречаемости антигена, %)
Антигены HLA I класса Контрольная группа (п=1215) Больные (n=11) С2
А1 25,19 18,18 0,03
А2 48,06 45,45 0,02
А3 25,35 36,36 0,22
А24 16,46 36,36 1,84
А26 5,35 9,00 0,01
А28 5,10 9,00 0,01
В51 12,35 36,36 3,83
В7 19,67 9,0 0,25
В8 10,86 18,18 0,08
В44 14,07 18,18 0,01
В13 11,60 27,27 1,25
В14 5,60 9,0 0,02
В62 6,99 9,0 0,10
В38 8,97 9,0 0,27
В56 1.97 9,0 0,28
В35 14,90 27,27 0,52
В60 6,34 9,0 0,07
В61 2,47 9,0 0,18
В41 4,12 9,0 0,004
При герминогенных опухолях (табл. 5) повышена частота антигенов А24 - 26,09%, А26 - 17,39%, А11 - 26,09%, В51 - 21,74%, В18 - 21,74%, В39 - 4,34%, В50 - 4,34%, В55 - 4,34%. Достоверные различия по сравнению с контрольной группой отмечены в частоте встречаемости антигена А26 (с2 - 3,98, р<0,05). Повышение частоты антигенов В39, В50, В55 вероятнее всего обусловлено небольшим числом обследованных пациентов с данной патологией и низкой частотой этих антигенов среди здоровых лиц.
Проведение сравнительного анализа ^А I класса позволило выявить различия между антигенным составом у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой, с нейробластомой, нефробластомой, герминогенными опухолями. Так, у больных с нейробластомой, нефробла-стомой, герминогенными опухолями встречается антиген А11, а у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой не выявляются данные антигены. В то же время, у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой чаще встречается антиген В51, нежели при нейробласто-ме, нефробластоме, герминогенных опухолях.
Таблица 5
Распределение HLA антигенов I класса у детей с герминогенными опухолями (частота встречаемости антигена, %)
Антигены HLA I класса Контрольная группа (n=1215) Больные (n=23) С2
А1 25,19 17,39 1,20
А2 48,06 56,52 0,65
А3 25,35 26,09 0,006
А24 16,46 26,09 1,51
А25 4,52 4,34 0,22
А26 5,35 17,39 3,98
А11 12,59 26,09 2,42
А30 2,39 4,34 0,75
А23 4,36 4,34 0,26
В51 12,35 21,74 1,08
В7 19,67 17,39 0,001
В8 10,86 8,69 0,001
В44 14,07 21,74 0,56
В13 11,60 4,34 0,57
В14 5,60 8,69 0,03
В62 6,99 13,04 1,14
В39 1,73 4,34 0,02
В18 13,50 21,74 0,71
В57 6,91 4,34 0,55
В49 5,10 4,34 0,10
В50 1,24 4,34 1,45
В55 0,82 4,34 0,45
В27 10,70 4,34 1,78
В35 14,90 26,09 2,24
Выводы
1. В исследованных нами группах детей с солидными злокачественными опухолями: нефробластомой, ней-робластомой, саркомой Юинга, остеогенной саркомой, герминогенными опухолями, - отмечено достоверное увеличение частоты встречаемости ряда антигенов ^А I класса. Так, достоверно повышена частота антигена ^А В13 при нейробластоме (р<0,05), ^А А26 - при нефро-бластоме и герминогенных опухолях (р<0,05). Необходимо продолжить исследование пациентов с данными патологическими процессами для уточнения результатов.
2. Для дальнейшего изучения ассоциативных связей системы ^А со злокачественными опухолями у детей целесообразно провести ^А-типирование по II классу (локус - ОЯБ I).
ОЗОМЗ
ОАО »Загорский оптико-механический завод» Медицинские и лабораторные приборы от крупнейшего российского производителя
141300, Московская область, г. Сергиев Посад, пр. Красной Армии, 212 В Тел./факс: (496) 542-89-78, 546-91-13, 546-92-24 www.zomz.ru, e-mail:
zomzsales@yandex.ru, zomz- lan@tsinet.ru
ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИБОРЫ:
• щелевые лампы SL-P (варианты комплектации с тонометром/ видеоадаптером);
• офтальмоскопы НБО-3-01, ОР-3Б;
• анализаторы поля зрения АППЗ-01;
• монобиноскопы МБС-02;
• диоптриметры ДО-3.
ЛАБОРАТОРНЫЕ ПРИБОРЫ:
• спектрофотометры КФК-3-«ЗОМЗ» (прибор зарегистрирован как медтехника);
• колориметры фотоэлектрические КФК-5М;
• фотометры пламенные ФПА-2-01;
• поляриметры круговые СМ-3.
ж
№2(25) • 2011
www.akvarel2002.ru
