*УДК 591.3:636.5 +636.58 ОСОБЕННОСТИ ПОСТНАТАЛЬНОГО МОРФОГЕНЕЗА ЭКЗОКРИННЫХ ПАНКРЕОЦНТОВ И АЦННУСОВ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ БРОЙЛЕРОВ КРОССА «СМЕНА-7» ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ГАМАВИТА И ФОСПРЕНИЛА
Щеглов Н А.
В результате исследования гистологических структур поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» под влиянием биологически активных препаратов установлена возрастная динамика панкрецитов и ацинусов. Ключевые слова: морфогенез, панкреацит, ацинус, поджелудочная железа, бройлер кросса «Смена-7», Гамаеит, Фоспренил.
Введение
Актуальность. Известно, что фактор питания оказывает значительное влияние на морфофункциональное состояние пищеварительной системы человека и животных [1, с.40]. Установлено, что изменение качественного и количественного состава пищевых рационов вызывает выраженные сдвиги в ферментных системах, функции и структуре органов и тканей, а питание в целом оказывает значительное влияние на уровень заболеваемости и смертности [2, стр.150; 3, с.20].
Приспособление к характеру питания детерминировано не только взаимоотношениями между пищевым субстратом и органами пищеварительной системы, но и особенностями обмена веществ в организме и регуляторных системах [4, с.59].
Биологически активные вещества являются специфическими катализаторами, регулирующими интенсивность и направленность процессов обмена веществ и способствующих повышению продуктивности животных и птиц. К таким препаратам относится фоспренил и гамавит - новый уровень повышения резервных возможностей животноводства.
Цель исследования. Установить особенности постнатального морфогенеза экзокринных панкреоцитов и ацинусов поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» при применении Гамавита и Фоспренила.
Задачи исследования. Провести сравнительно-морфологический анализ структурных преобразований экзокринных панкреоцитов и ацинусов различных частей поджелудочной железы в норме и при применении Гамавита и Фоспренила в условиях птицефабрики ОАО «Снежка»
Материалы и методы исследования
В рамках решения поставленных задач была проведена серия исследований по изучению влияния иммуномодуляторов «Гамавит» и «Фоспренил» на морфогенез экзокринных панкреоцитов и ацинусов различных частей поджелудочной железы в разные периоды постнатального онтогенеза.
Фоспренил - продукт фосфорилирования полипренолов хвои - противовирусный препарат широкого спектра. Фоспренил - продукт фосфорилирования полипренолов хвои - противовирусный препарат широкого спектра.
Гамавит это комплексный детоксицирующий и биостимулирующий препарат. Он содержит 20 аминокислот, 17 витаминов, нуклеинат натрия и экстракт плаценты. Показано, что при ведении гамавита наблюдается повышение уровня гемоглобина и эритроцитов, нормализуется нарушенное соотношение кальция и фосфора, возрастает количество общего белка, глюкозы, показатели бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, резервной щёлочности крови.
Работа выполнена в период с сентября 2009 года по апрель 2010 года в лаборатории физиологии человека и животных кафедры зоологии и анатомии Брянского государственного университета имени академика И. Г. Петровского и в лабораториях Брянского патологоанатомического института при департаменте здравоохранения Брянской области.
Материалом наших исследований были бройлеры «Смена-7» суточного, 5-, 15-, 20-, 25-, 30- и 36дневного возрастов по пять экземпляров каждой возрастной группы. Каждая возрастная группа состояла из контрольных и опытных животных. Опытная группа птиц получала препараты Гамавит и Фоспринил. Дозировка препаратов для опытной группы бройлеров представлена в таблице 1.
Таблица 1.
Расчёты опытного количества доз Фоспренила и Гамавита.________________________
Количество доз Фоспренила Количество доз Гамавита Время забоя: возрастные сутки -количество особей
Возрастные Количество Количество Возрастные Количество Количество
сутки доз особей сутки доз особей
2 180 90 2 180 90 1-10
6 80 80 5 90 90 5-10
г 13 70 70 7 80 80 10-10
16 60 60 10 70 70 15-10
21 50 50 14 70 70 20-10
17 60 60 25 - 10
28 40 40 30-10
30 35-10
20 40(36)- 10
Всего/ периодов 440 доз-21 сутки; 480 доз -25 суток; 580 доз-35 суток Всего 90 опытных особей (без контроля) Всего 7 периодов 600 доз Всего 90 опытных особей (без контроля)
Закладка опыта по применению биологических добавок Гамавит и Фоспринил проводилась на птицефабрике «Снежка». В лаборатории гистоморфологии Брянского государственного университета проводилось анатомическое вскрытие и морфометрия исследуемых животных по методике A.B. Комарова (1981). Длину, ширину, толщину и диаметр измеряли при помощи штанген-циркуля и линейки с ценой деления 1 мм.
Для приготовления гистопрепаратов образцы поджелудочной железы, фиксированные в 5-7% растворе нейтрального формалина, заливали в парафин по общепринятой методике. С помощью микротома МПС-2 из каждого образца получали сегментальные срезы толщиной от 5-15 мкм, которые затем окрашивали для получения обзорной картины гематоксилин-эозином. Работы приготовлению гистопрепаратов (проводка, заливка, изготовление гистосрезов, окрашивание) проводилось в лабораториях гистологии Брянского патологоанатомического института.
Для морфометрического исследования применялась компьютерная видеотестсистема, включающая микроскоп «Axiostar plus», цифровую фотокамеру Canon Power Shot G 5 («Canon», Германия) и компьютерную программу денситофотомерии «Mecos-C1».
Результаты исследования
Результаты исследования показали, что у животных I опытной группы, потребляющих Гамавит и Фоспренил, в раннем постнатальном онтогенезе значение средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов дуоденальной части поджелудочной железы характеризуется тенденцией к уменьшению от 23,77±0,07 мкм2 у 5-суточных животных до 23,09±0,08 мкм2 у 15-суточных. Аналогично уменьшается (р<0,05) средняя площадь сечения ядер экзокринных панкреоцитов билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы от 22,28±0,06 мкм2 и 20,69±0,06 мкм2 до 22,06±0,07 мкм2 и 20,03±0,07 мкм2 у 5- и 15-суточных птиц соответственно. При этом средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы животных I опытной группы к 15-м суткам увеличивается (р<0,05) в 1,2 раза относительно значений 5-суточных птиц (рис. 1). В позднем препубертатном периоде значения рассмотренных показателей экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы у животных I опытной группы почти в 2 раза ниже значений аналогичных показателей животных контрольной группы того же периода, что может свидетельствовать о развитии гипотрофии экзокринного отдела поджелудочной железы у животных, питающихся диспергированной пищей (рис. 1, 2). В пубертатном периоде происходит резкое падение значений средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов всех исследуемых частей поджелудочной железы до минимального для всего исследованного периода онтогенеза (5-36 сутки). Средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов всех исследуемых частей поджелудочной железы птиц I опытной группы в пубертатном периоде достоверно уменьшается (рис. 1). Значения средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов всех частей поджелудочной железы птиц I опытной группы к 120-м суткам на 12,6% меньше аналогичных значений птиц контрольной группы того же возраста, что указывает на сохранение гипотрофии, у птиц I опытной группы (рис. 1, 2).
мкм
мкм
5 15 20 3
□ дуоденальная часть
| билиарная часть
□ желудочно-селезеночная часть
36
сутки
5 15 20 30
П дуоденальная часть
■ билиарная часть
□ желудочно-селезеночная часть
Рис. 1. Площадь (мкм2) сечения Рис. 2. Площадь (мкм2) сечения
цитоплазмы экзокринных панкреоцитов цитоплазмы ацинусов различных частей
различных частей поджелудочной железы при поджелудочной железы при применении применении Гамавита и Фоспренила (опыт I) Гамавита и Фоспренила (опыт I)
В репродуктивном периоде происходит увеличение (р<0,05) средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов поджелудочной железы птиц I опытной группы. В период возмужания происходит увеличение (р<0,05) в 1,2 раза средней площади сечения ядер экзокринных панкреоцитов всех частей поджелудочной железы, однако к 36-м суткам значения средней площади сечения ядер панкреоцитов птиц I опытной группы, оказываются достоверно ниже значений, отмеченных у птиц контрольной группы. Репродуктивный период характеризуется увеличением (р<0,05) средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов поджелудочной железы птиц I опытной группы, но рассмотренные значения ниже, чем аналогичные данные у птиц контрольной группы (рис. 1, 2). В репродуктивный период средняя площадь сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов всех исследуемых частей поджелудочной железы птиц I опытной группы увеличивается в 1,3 раза, не превышая (р<0,05) значение средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов поджелудочной железы у бройлеров контрольной группы к 30-м суткам (рис. 1, 3). В периоде возмужания значения средней площади сечения цитоплазмы экзокринных панкреоцитов всех частей поджелудочной железы бройлеров I опытной группы оказываются достоверно выше значений рассматриваемого параметра птиц контрольной группы, что указывает на формирование компенсаторных изменений в экзокринном отделе поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» потреблявших Гамавит и Фоспренил.
В поздний препубертатный период средние значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7» I опытной группы снижаются (р<0,05) по сравнению с предыдущим возрастным периодом (табл. 1). В пубертатном периоде - возрастают (р<0,05), достигая максимума для всего исследованного периода онтогенеза (1-36 сутки). В репродуктивный период и период возмужания значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы бройлеров I опытной группы поступательно равномерно снижаются (р<0,05), достигая минимального значения у 36-суточных птиц (табл. 1). Таким образом, судя по данным морфометрии, степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов поджелудочной железы бройлеров I опытной группы оказывается самой низкой (р<0,05) в пубертатном периоде. В позднем препубертатном и в репродуктивном периодах степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов у птиц I опытной группы возрастает (р<0,05) и продолжает увеличиваться в период возмужания (табл. 1).
Достоверные отличия между значениями ЯЦО экзокринных панкреоцитов бройлеров кросса «Смена-7» контрольной и I опытной групп обнаруживаются только в поздний препубертатный период и период возмужания. Особо примечателен факт, что значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов у птиц контрольной группы оказываются ниже таковых у птиц I опытной группы в позднем препубертатном периоде, следовательно, степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов у бройлеров I опытной группы к 15-м суткам оказывается ниже, чем степень активности контрольных птиц. В период возмужания значения ЯЦО экзокринных панкреоцитов у птиц контрольной группы оказываются ниже таковых у птиц I опытной группы, следовательно, степень функциональной активности экзокринных панкреоцитов у птиц I опытной группы к 36-м суткам оказывается выше, чем у контрольных птиц.
В ходе постнатального морфогенеза поджелудочной железы у бройлеров кросса «Смена-опытной группы происходит поэтапное изменение относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах (табл. 1). В поздний препубертатный период происходит незначительное увеличение относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах. Наиболее значительное (р<0,05) увеличение рассматриваемого показателя отмечается в пубертатном периоде (табл. 1). В репродуктивный период и в период возмужания относительное количество экзокринных панкреоцитов в ацинусе поджелудочной железы у бройлеров I опытной группы снижается (р<0,05).
Таблица 1
Морфометрические показатели экзокринных панкреоцитов и ацинусов бСменаилиарной части
Показатель z'' ^^Возраст (сутки)группа Экзокринный панкреоцит Ацинус Отно сительно е количество экзокринных панкреоцитов в ацинусе
Площадь сечения (мкм2) ЯЦО (%) Площадь сечения (мкм2)
ядра цитоплазмы
5 22,28±0,06 81,75±0,51 25,60±0,27 433,79±3,44 5,00±0,01
15 Контроль 23,99±0,10+ 114,31±1,18+ 21,09±0,28+ 628,96±5,62+ 5,37±0,03
Опыт I 22,06±0,07*+ 97,74±0,95*+ 23,07±0,25*+ 531,85±4,77*+ 5,31±0,03
20 Контроль 15,24±0,10+ 66,17±1,05+ 27,52±0,44+ 521,34±5,79+ 6,99±0,03+
Опыт I 15,22±0,04+ 59,52±0,68*+ 27,51±0,41+ 455,92±5,38*+ 6,97±0,04+
30 Контроль 17,90±0,07+ 83,09±1,27+ 23,71±0,33+ 502,07±5,25+ 6,31±0,04+
Опыт I 16,88±0,04*+ 75,86±0,87*+ 23,62±0,35+ 482,45±4,52*+ 6,29±0,04+
Опыт II 20,21±0,05*+ 100,56±0,90*+ 20,16±0,21*+ 543,18±5,38*+ 5,29±0,03+
36 Контроль 21,03±,04+ 98,64±0,70+ 23,30±0,20 540,27±3,52+ 5,21±0,03+
Опыт I 19,55±0,04*+ 103,09±0,78*+ 18,62±0,16*+ 540,00±3,85+ 5,17±0,02+
Опыт II 21.35±0,06*+ 106,74±0,95*+ 20,67±0,22*+ 583,45±4,76*+ 5,30±0,03+
Примечание: * - различия достоверны по сравнению с контролем (р<0,05);
+ - различия достоверны по сравнению с предшествующим сроком (р<0,05).
Достоверных отличий в значениях относительного количества экзокринных панкреоцитов в ацинусах дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы на всех этапах исследованного периода онтогенеза не обнаружено. Полученные данные позволяют предположить, что применение Гамавита и Фоспренила не оказывает влияния на относительное количество экзокринных панкреоцитов в ацинусах поджелудочной железы птиц I опытной группы.
В поздний препубертатный период значения средней площади сечения цитоплазмы ацинусов различных частей поджелудочной железы бройлеров I опытной группы достоверно возрастают (рис. 4). В пубертатный период значения средней площади сечения цитоплазмы ацинусов снижаются (р<0,05). В репродуктивный период показатели стабилизируются, а в период возмужания средняя площадь сечения цитоплазмы ацинусов, вырастает, достигая к 36-суткам максимальных значений (р<0,05).
Заключение
Полученные данные свидетельствуют, что всему исследованному периоду постнатального морфогенеза (1-36 сутки) поджелудочной железы бройлеров кросса «Смена-7», потребляющих Гамавит и Фоспренил, свойственно постоянство соотношения показателей различных частей поджелудочной железы. Постнатальный морфогенез дуоденальной, билиарной и желудочно-селезеночной частей поджелудочной железы бройлеров, потребляющих иммуномодуляторы, характеризуется четырехэтапностью изменений: общей гипотрофией экзокринных панкреоцитов и снижением их степени функциональной активности в поздний препубертатный период; выраженной гипотрофией структур экзокринного отдела поджелудочной железы (уменьшением объема ядер и цитоплазмы экзокринных панкреоцитов) в пубертатный период; замедлением гипотрофических преобразований основных структур поджелудочной железы в репродуктивном периоде; относительной компенсацией признаков гипотрофии структурных компонентов поджелудочной железы (повышение площади сечения экзокринных панкреоцитов по сравнению с контролем) развивающихся в период возмужания.
A study of histological structures of the pancréas broiler cross "Smena-7" under the influence of biologically active agents installed age dynamics pankretsits and acini.
The key words: morphogenesis, pankreatsit, acinus, pancreas, broiler cross Smena-7"Gamavit, Fosprenil.
Список литературы
1. Сыч, В. Ф. Влияние питания диспергированной пищей на морфогенез слизистой обол' желудка крыс / В. Ф. Сыч, А. Ф. Санжапова Ю. Н. Кондратенко // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2007 а. - Т.17. - № 1. - С.38-42.
2. Уголев, А. М. Теория адекватного питания и трофология /А. М. Уголев. - СПб.: Наука, 1991. -
272 с.
3. Волгарев, М. Н. Питание в патогенезе, терапии и профилактике заболеваний системы пищеварения / М. Н. Волгарев, В. А. Тутельян, М. А. Самсонов // Вестник Российской академии наук. -1997. - №11. - С. 18-21.
4. Козловская, С. Г. Влияние различных пищевых рационов на содержание биогенных аминов в гипоталамусе, энергетический обмен и продолжительность жизни старых крыс / С. Г. Козловская, Ю. Г. Григоров, Т. М. Семесько // Вестник АМН СССР. - 1986. - № 10. - С. 58-62.
Об авторе
Щеглов H.A., аспирант кафедры зоологии и анатомии, специальности 06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология, морфология.