CC BY
35
/ребёнка
Неонатолопя / Neonatology
УДК 616.831-053.32-074 БЕНИС H.A., САМСОНОВА Т.В., НАЗАРОВ С.Б, КУЗЬМЕНКО Г.Н., ПОПОВА И.Г. ФГБУ «Ивановский НИИ материнства и детства имени В.Н. Городкова» Минздрава России
ОСОБЕННОСТИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КОЛИЧЕСТВА ГЛИАЛЬНОГО БЕЛКА S100 И УРОВНЯ СУММАРНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА В КРОВИ
У ГЛУБОКОНЕДОНОШЕННЫХ ДЕТЕЙ С ПЕРИНАТАЛЬНЫМ ГИПОКСИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ГОЛОВНОГО МОЗГА
Резюме. Частота рождения недоношенных детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела за последние десятилетия остается стабильной и составляет в развитых странах мира 5—12 % от общего числа родившихся. Частота перинатальных поражений головного мозга у них составляет 50—80 %. В связи с этим определение особенностей показателей содержания специфических белков мозговой ткани и суммарных метаболитов оксида азота в крови у глубоконедоношенных детей с перинатальным поражением головного мозга является актуальной задачей. Проведено комплексное клиническое и лабораторное обследование 92 детей в динамике первого года жизни. Основную группу составили 70 глубоконедоношенных детей с перинатальным гипоксическим поражением головного мозга и сроком гестации при рождении 25—32 недели, группу сравнения — 22 здоровых доношенных ребенка первого года жизни, которые не имели отклонений со стороны нервной системы. В результате исследования установлена сопряженность изменения количества белка 8100 и суммарных метаболитов оксида азота в крови у глубоконедоношенных детей с тяжестью перинатального поражения головного мозга и сроком гестации при рождении. Обосновано диагностическое значение изучаемого глиального белка в отношении оценки степени тяжести церебральной ишемии в раннем неонаталь-ном периоде.
Ключевые слова: глубоконедоношенные дети, перинатальное поражение ЦНС, глиальный белок 8100, суммарные метаболиты оксида азота.
Достижения неонатальной медицины, стремительно развивающейся в последнее время, привели к значительному повышению выживаемости недоношенных детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении. Частота перинатальных поражений у таких детей, по данным разных авторов, колеблется от 50 до 80 % [1—3]. Одним из ведущих звеньев в патогенезе гипокси-ческого поражения головного мозга является изменение продукции оксида азота. Данные экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что оксид азота (N0^ может участвовать в процессах активации апоптоза и играть адаптивную роль в нервной системе [4, 5]. Известно, что маркеры повреждения центральной нервной системы (ЦНС) — специфические пептиды мозговой ткани. Динамика их содержания может свидетельствовать о глубине структурного дефекта и интенсивности
патологического процесса [6—8]. Таким образом, определение особенностей показателей специфических белков мозговой ткани и суммарных метаболитов оксида азота у глубоконедоношенных детей с перинатальным гипоксическим поражением головного мозга является актуальной задачей.
Целью настоящего исследования явилось определение особенностей показателей количества глиального белка Б100 и уровня суммарных метаболитов оксида азота в крови у глубоконедоношенных детей с перинатальным гипоксиче-ским поражением головного мозга на первом году жизни.
© Бенис Н.А., Самсонова Т.В., Назаров С.Б.,
Кузьменко Г.Н., Попова И.Г., 2013 © «Здоровье ребенка», 2013 © Заславский А.Ю., 2013
Материалы и методы
Проведено комплексное клиническое и лабораторное обследование 92 детей в динамике первого года жизни, с первого дня жизни до скорректированного возраста 1 года. Основную группу (Б) составили 70 детей первого года жизни с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении, гестационным возрастом (ГВ) при рождении 25—32 недели и перинатальным гипоксическим поражением головного мозга. В группу сравнения (А) вошли здоровые доношенные дети первого года жизни, которые не имели отклонений со стороны нервной системы (n = 22). Формирование подгрупп внутри основной группы проводили по двум признакам: степени церебральной ишемии и сроку гестации при рождении. В зависимости от степени церебральной ишемии были выделены две подгруппы: подгруппа Б1 (n = 44) — дети с церебральной ишемией II степени (ЦИ II), подгруппа Б11 (n = 26) — дети с церебральной ишемией III степени (ЦИ III). В зависимости от гестационно-го возраста при рождении недоношенные дети были разделены на две подгруппы: Б1-подгруппа (n = 24) — дети с ГВ при рождении менее 28 недель, Б2-подгруппа (n = 46) — дети с ГВ при рождении 28—32 недели. Содержание глиально-го белка S100 и суммарных метаболитов оксида азота определяли в сыворотке крови. Исследование уровня белка S100 проводили на планшетном фотометре серии EL808 Ultra Microplate Readers методом иммуноферментного анализа наборами CanAg S100 EIA (США). Уровень суммарных метаболитов оксида азота определяли по методу M. Katrina (2001) путем восстановления нитратов в нитриты в присутствии хлорида ванадия. Клиническое и биохимические исследования проводили на 3-и — 5-е сутки жизни, в возрасте 1 месяца жизни и в постконцептуальном возрасте (ПКВ) 38-40 и 44-46 недель.
Результаты исследования и их обсуждение
Анализ значений показателя количества белка S100 в сыворотке крови позволил установить, что у детей основной группы на 3-и — 5-е сутки жизни он был меньшим, чем в группе сравнения (р < 0,001). К ПКВ 38-40 недель его концентра-
ция в сыворотке крови у недоношенных детей оставалась меньшей, чем в группе сравнения (р < 0,001) (табл. 1).
При определении количества белка Б100 в сыворотке крови у детей основной группы в раннем неонатальном периоде установлено, что при ЦИ III оно было выше, чем при ЦИ II (р < 0,05). В возрасте 1 месяца жизни выявлено статистически значимое снижение данного показателя во II подгруппе пациентов по сравнению с показателем на 3-и - 5-е сутки жизни (р < 0,05). К ПКВ 44-46 недель у детей с тяжелыми ишемическими поражениями количество белка Б100 было меньшим, чем при ЦИ II (р < 0,05) (табл. 2).
При анализе показателей содержания белка Б100 в подгруппах детей с различным гестацион-ным возрастом при рождении статистически значимые различия выявлены только в ПКВ 38-40 недель: уровень данного белка в сыворотке крови был большим у детей, родившихся в сроке геста-ции 28-32 недели, чем у детей с ГВ при рождении менее 28 недель (р < 0,05).
По-видимому, изменение количества изучаемого протеина у детей в остром периоде гипо-ксически-ишемического поражения головного мозга в большей степени связано с проницаемостью гематоэнцефалического барьера, а в конце раннего восстановительного периода преимущественно отражает снижение его продукции, связанное с нарушением функции астроглиальных клеток.
При проведении индивидуального и ЯОС-анализа установлено, что показатель количества белка Б100 в сыворотке крови у детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении на 3-5-й день жизни имеет диагностическое значение в отношении оценки степени тяжести перинатального гипоксического поражения головного мозга. При его значении, равном 537 нг/л или менее, диагностируют церебральную ишемию II степени с чувствительностью 87,5 %, специфичностью 91,7 %.
Анализ значений показателя содержания суммарных метаболитов оксида азота в сыворотке крови показал, что его количество у детей основной группы на 3-и — 5-е сутки жизни было большим, чем в группе сравнения (р < 0,001). К ПКВ 38-40 недель его значение оставалось по-
Таблица 1. Динамика показателя количества белка S100 в крови у детей исследуемых групп, нг/л
Возраст Группа сравнения — А (n = 15) Основная группа — Б (n = 55)
3-и — 5-е сутки жизни
Me 681 5361 *
UQ-LQ 630-718 426-629
ПКВ 38-40 недель
Me 681 5181 *
UQ-LQ 630-718 459-622
Примечания:1 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями в группе сравнения; * — p < 0,001.
вышенным по сравнению с показателем в подгруппе здоровых доношенных детей (p < 0,001) (табл. 3).
При сравнении показателей на 3-и — 5-е сутки жизни в подгруппах детей с церебральной ишемией II и III степени статистически значимых различий не выявлено. Содержание NOx снизилось к концу первого месяца жизни в основной группе детей по сравнению с показателем в раннем нео-натальном периоде (р < 0,01). К ПКВ 44—46 недель уровень NOx в крови повысился по сравнению с показателем в возрасте 1 месяца жизни в основной группе детей (р < 0,05). В ПКВ 38—40 и 44—46 недель у детей с тяжелыми ишемически-ми поражениями головного мозга уровень NOx был выше, чем в подгруппе детей с церебральной
ишемией II степени (р < 0,05 и р < 0,05 соответственно).
При сравнении изучаемого показателя в зависимости от гестационного возраста при рождении статистически значимые различия установлены только в ПКВ 38—40 и 44—46 недель: уровень МОх был выше у детей с гестационным возрастом при рождении менее 28 недель, чем в подгруппе детей, родившихся в сроке гестации 28—32 недели (р < 0,01 и р < 0,05 соответственно) (табл. 4).
Выводы
Таким образом, у глубоконедоношенных детей с перинатальным гипоксическим поражением головного мозга отмечаются особенности показателей содержания глиального белка Б100 и суммар-
Таблица 2. Динамика количества белка Б100 в крови у детей с экстремально низкой и очень низкой
массой тела при рождении, нг/л
Возраст Основная группа
Основная группа в целом — Б (n = 55) Подгруппы детей в зависимости от степени церебральной ишемии Подгруппы детей в зависимости от ГВ при рождении
Церебральная ишемия II степени — Б1 (n = 29) Церебральная ишемия III степени — БП (n = 26) Менее 28 недель — Б1 (n = 24) 28-32 недели — Б2 (n = 46)
3-и — 5-е сут. Me UQ-LQ 536 426-629 468 346-535 6291 * 599-775 600 501-633 538 429-702
Первый месяц жизни Me UQ-LQ 545 487-630 591 487-630 4882' * 377-716 591 377-716 555 489-630
ПКВ 38-40 недель Me UQ-LQ 518 459-622 467 459-622 573 438-652 312 249-471 5813' * 463-628
ПКВ 44-46 недель Me UQ-LQ 488,4 416-584 535 488-595 4141 * 382-450 584 488-644 430 399-530
Примечания:1 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями в подгруппе детей с церебральной ишемией II степени; 2 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями результатов у детей на 3-5-й день жизни;3 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями результатов в подгруппе детей с ГВ при рождении менее 28 недель; * — р < 0,05.
Таблица 3. Динамика показателя количества суммарных метаболитов оксида азота (N0) в крови у детей исследуемых групп, мкмоль/л
Возраст Группа сравнения — А (n = 22) Основная группа — Б (n = 70)
3-и — 5-е сутки жизни
Me 137,2 2201 *
UQ-LQ 120-155 184-296
ПКВ 38-40 недель
Me 137,2 2141' *
UQ-LQ 120-155 174-234
Примечания:1 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями в группе сравнения; * — р < 0,001.
Таблица 4. Динамика количества суммарных метаболитов оксида азота (ЫОх) в крови у детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении, мкмоль/л
Возраст Основная группа
Основная группа в целом — Б (n = 70) Подгруппы детей в зависимости от степени ЦИ Подгруппы детей в зависимости от ГВ при рождении
Дети с ЦИ II — Б1 (n = 44) Дети с ЦИ III — Б11 (n = 26) Менее 28 недель — Б1 (n = 24) 28-32 недели — Б2 (n = 46)
3-и — 5-е сутки Ме ид^д 220 184-296 251 209-311 239 185-278 220 171-276 220 184-322
Первый месяц жизни Ме ид^д 1822, ** 134-212 172 125-210 169 144-196 144 124-212 192 142-212
ПКВ38-40 недель Ме ид^д 214 174-234 182 126-224 2111 * 150-240 224 224-228 1764' ** 132-240
ПКВ44-46 недель Ме ид^д 2183' * 172-285,5 211 168-252 2831 * 212-324 248 180-288 1884' * 166-238
Примечания:1 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями в подгруппе с церебральной ишемией II степени;2 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями результатов на 3-5-й день жизни;3 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями результатов в первый месяц жизни; 4 — уровень статистической значимости различий результатов по сравнению с показателями в подгруппе детей с ГВ при рождении менее 28 недель; * — р < 0,05; ** — р < 0,01.
ных метаболитов оксида азота в крови на первом году жизни. Уровень суммарных метаболитов оксида азота в крови у них в неонатальном периоде повышен по сравнению со здоровыми доношенными новорожденными, что может отражать один из патогенетических механизмов гипоксического поражения головного мозга, а дальнейшая его динамика, повышение к постконцептуальному возрасту 44—46 недель, более выраженное у детей с тяжелыми ишемическими поражениями головного мозга, — включение компенсаторных механизмов и их выраженность у этой группы пациентов.
Изменение уровня белка 8100 в сыворотке крови у недоношенных детей с массой тела при рождении менее 1500 г и перинатальным гипоксическим поражением головного мозга в остром и позднем восстановительном периоде сопряжено с глубиной перинатального гипоксического поражения головного мозга, а в раннем восстановительном периоде — со сроком гестации при рождении. Этот показатель может служить дополнительным критерием ранней оценки степени тяжести церебральной ишемии у детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении.
Список литературы
1. Пальчик А.Б., Федорова Л.А., Понятишин А.Е. Неврология недоношенных детей. — М., 2010. — 352 с.
2. Neurobehavioral and developmental profile of very low birthweight preterm infants in early infancy / M.J. Wolf [et al.] // Acta Paediatr. - 2002. - Vol. 91, № 8. - P. 930938.
3. Preterm infants' early developmental status is associated with later developmental outcome / C. Lundqvist-Persson [et al.] // Acta Paediatric. - 2012. - Vol. 101, № 2. - P. 172178.
4. Бенис Н.А., Самсонова Т.В., Попова И.Г., Кузьмен-ко Т.Н. Клиническое значение определения уровня суммарных метаболитов оксида азота и десквамированных эндотелио-цитов в крови у недоношенных детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении и перинатальным поражением ЦНС// Врач-аспирант. - 2011. - № 5(48). -С. 4-9.
5. Попова И.Г. Роль эндотелиальной дисфункции в развитии перинатальной патологии у доношенных новорожденных, родившихся от матерей с гестозом: Автореф. дис... канд. мед. наук. - Иваново, 2010. - 21 с.
6. Бенис Н.А., Самсонова Т.В., Кузьменко Т.Н. Динамика количества глиального белка S100 в крови у детей с экстремально низкой и очень низкой массой тела при рождении // Российский иммунологический журнал. - 2012. - Т. 6(14), № 2(1). - С. 28-29.
7. Изменение уровня белка S-100у новорожденных с перинатальным гипоксическим поражением ЦНС / Г.С. Голосная [и др.]// Педиатрия. - 2004. - № 1. - С. 10-15.
8. Современные биохимические критерии диагностики перинатальных гипоксических поражений ЦНС у новорожденных детей / О.В. Гончарова [и др.]// Российский педиатрический журнал. - 2007. - № 4. - С. 13-18.
Получено 11.06.13 □
Бенис H.A., Самсонова Т.В., Назаров С.Б., Кузьменко Г.М., Попова 1.Г.
ФАБУ «1ван!всы<ий НД1 материнства I дитинства ¡мен! В.М. Городкова» МОЗ РосИ
OCOBAMBOCTi ПОКАЗНИЮВ KiAbKOCTi ГЛ|АЛЬНОГО BiAKA S100 i PiBHß СУМАРНИХ METABOAiTiB ОКСИДУ АЗОТУ В KPOBi У ГAИBOKOHEДOHOШEHИХ ДЛЕЙ i3 ПEPИHATAAЬHИM ГiПOKCИЧHИM УРАЖЕННЯМ rOAOBHOrO MO3KУ
Резюме. Частота народження недоношених дiтей iз екс-тремально низькою i дуже низькою масою тша за останнi десятилiття залишаеться стабшьною i становить у розви-нених кра!нах свiту 5—12 % вщ загального числа народже-них. Частота перинатальних уражень головного мозку у них становить 50—80 %. У зв'язку з цим визначення особ-ливостей показникiв вмiсту специфiчних бшыв мозково! тканини i сумарних метаболтв оксиду азоту в кровi у глибоконедоношених дней iз перинатальним ураженням головного мозку е актуальним завданням. Проведено комплексне клiнiчне та лабораторне обстеження 92 дiтей у динамщ першого року життя. Основну групу склали 70 глибоконедоношених дiтей iз перинатальним ппоксич-ним ураженням головного мозку i термiном гестацп при народженш 25—32 тижнi, групу порiвняння — 22 здоровi доношенi дитини першого року життя, яы не мали вщхи-лень iз боку нервово! системи. У результатi дослщження встановлено спряженiсть змiни кiлькостi бшка S100 i сумарних метаболтв оксиду азоту в кровi у глибоконедоношених дтей iз тяжыстю перинатального ураження головного мозку i термiном гестацп при народженш. ОбГрун-товано дiагностичне значення дослщжуваного глiального б1лка щодо оцiнки ступеня тяжкостi церебрально! iшемii в ранньому неонатальному перюдг
Ключовi слова: глибоконедоношеш дiти, перинатальне ураження ЦНС, глiальний б1лок S100, сумарнi метаболiти оксиду азоту.
Benis N.A., Samsonova T.V., NazarovS.B., Kuzmenko G.N., Popova I.G.
Federal State Budgetary Institution «Ivanovo Research Institute of Motherhood and Childhood named after V.N. Gorodkov of Ministry of Health of the Russia», Ivanovo, Russia
FEATURES OF PARAMETERS OF GLIAL PROTEIN S100 AMOUNT AND THE LEVEL OF TOTAL NITRIC OXIDE METABOLITES IN THE BLOOD OF EXTREMELY PRETERM INFANTS WITH PERINATAL HYPOXIC BRAIN DAMAGE
Summary. The frequency of low birth-weight children with extremely low and very low birth weight infants over the past decade has remained stable and in the developed world is 5—12 % of the total number of births. Frequency of perinatal brain lesions at them is 50—80 %. In this regard, the definition of the features of the content of specific proteins of brain tissue and total nitric oxide metabolites in the blood of extremely preterm children with perinatal brain lesions is an important task. A comprehensive clinical and laboratory examination of 92 children in the dynamics of the first year of life has been carried out. Study group comprised 70 extremely preterm children with perinatal hypoxic brain damage and gestational age at birth 25—32 weeks, the comparison group — 22 healthy full-term in infants who did not have abnormalities in the nervous system. The study established contingency changes of the amount of protein S100 and total nitric oxide metabolites in the blood of extremely preterm children with various severity of perinatal brain damage and gestational age at birth. Diagnostic value of the studied glial protein in the assessment of the severity of cerebral ischemia in the early neonatal period has been sustantiated.
Key words: extremely preterm children, perinatal CNS affection, glial protein S100, total nitric oxide metabolites.
