УДК 581.1
ОСОБЕННОСТИ ПИТАНИЯ ВОДОРОСЛЕЙ NITZSCHIA PALEA (KUTZ.) W. SM. (BACILLARIOPHYTA) И MYCHONASTES HOMOSPHAERA (SKUJA) KALINA ET PUNC.
(CHLOROPHYTA)
©2013 В.Б. Багмет, Ш.Р. Абдуллин, Ю.В. Крупская
Башкирский государственный университет, г. Уфа Поступила 03.06.2013
В статье рассмотрены особенности питания водорослей Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. и Mychonastes homosphaera (Skiija) Kaiina et Pune., выделенных из цианобактериально-водорослевых ценозов пещеры Пропащая яма (Республика Башкортостан). Проведен сравнительный анализ роста штаммов данных видов в темноте и на свету на минеральной и органической среде. Установлено, что при наличии освещенности Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. и Mychonastes homosphaera (Skuja) Kaiina et Pune, питаются автотрофно, при ее отсутствии переходят на гетеротрофный тип питания.
Ключевые слова: Nitzschia palea, Mychonastes homosphaera, тип питания, автотрофия, гетеротрофия.
В природных экосистемах концентрация минеральных и органических ресурсов, а также уровень освещенности изменяются как во временном, так и в пространственном масштабах. Большинство водорослей имеют автотрофный тип питания, хотя известны виды, которым свойственно миксотроф-ное и гетеротрофное питание.
Одним из наиболее легкоусвояемых водорослями органических субстратов являются свободные моносахариды. Способность к потреблению этих субстратов отмечена у представителей почти всех классов водорослей [3]. В исследованиях Н.С. Тух-ман с соавт. [4] было выявлено, что многие диатомовые водоросли, в том числе и Nitzschia palea, в условиях слабого освещения способны усваивать ацетат, лактат, этанол, насыщенные жирные кислоты, глицерин, аминокислоты, а также глюкозу. Некоторые виды рода Mychonastes также способны к росту в темноте, используя глюкозу в качестве единственного источника энергии и углерода [6].
Вопрос о питании водорослей в условиях отсутствия освещения, включая и пещеры, до настоящего времени остается полностью не выясненным, поэтому изучение данного вопроса является актуальным.
Целью данной работы было определить возможность диатомовой водоросли Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. и зеленой водоросли Mychonastes homosphaera (Skuja) Kaiina et Punc. использовать экзогенные сахара (глюкозу) в качестве источника энергии на свету и в темноте, а также провести сравнительный анализ их скорости роста при разных условиях освещенности.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Для эксперимента использовали штамм Nitzschia palea, выделенный из цианобактериально-водорослевого ценоза донных отложений озера
Багмет Вероника Борисовна, студент, e-mail: cha-
ral989(S)yandex.ru; Абдуллин Шамиль Раисович, к.б.н.,
доцент, e-mail: abdullinshrbsu(S>mail.ru; Крупская Юлия Валерьевна, студент e-mail: Krup-julia(S>iambler.ru
Брехунов пещеры Пропащая Яма (Бурзянский район, Республика Башкортостан) с начальной концентрацией клеток 1,24-106 в см3 и штамм Mychonastes homosphaera, выделенный из цианобактериально-водорослевого ценоза стены недалеко от входного колодца на дне пещеры Пропащая яма (Бурзянский район, Республика Башкортостан) с начальной концентрацией клеток 7,02-106 в см3. Предварительно, перед началом эксперимента штаммы были очищены от грибов и бактерий с помощью антибиотика нистатина [2]. Опытным путем была подобрана наиболее эффективная концентрация антибиотика: для Nitzschia palea - 20-25 ЕД /мл, для Mychonastes homosphaera - 80 ЕД /мл. Штаммы культивировали на среде Громова № 6 [1], диатомовую водоросль - с добавлением силиката натрия, в опытную среду дополнительно добавили 1% р-р глюкозы. Подсчет клеток осуществлялся при помощи камеры Горяева в течение десяти дней культивирования.
Полученные данные были обработаны с помощью пакета программ Statistica 8.0 и Microsoft Office Excelle 2007.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Было выявлено, что в начале опыта на свету в контроле (CK) наблюдается активное увеличение числа клеток Nitzschia palea, однако после восьмого дня размножение замедляется. Возможно, это связано с уменьшением концентрации минеральных веществ в среде. Различия в численности клеток между контролем на свету и опытом в темноте (ТГ) (р<0,014), а также с контролем в темноте (ТК) (р<0,007) на протяжения всего опыта были достоверными, различия с опытной средой на свету (СГ) стали достоверными с третьего дня (р=0,000) (рис. 1, табл. 1).
В СГ размножение идет крайне медленно, но сокращения численности клеток не наблюдается. Различия в численности клеток между СГ и ТГ стали достоверными лишь на восьмой день (р=0,000) (рис. 1, табл. 1).
Известия Самарского нт'чного центра Российской академии на\'к. 2013. Т. 15, №3 (4)
Рис. 1. Динамика изменений числа клеток Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. при разных условиях культивирования.
Прим.: N - число клеток; СК - свет, контроль; СГ -свет, глюкоза; ТК - темнота, контроль; ТГ - темнота, глюкоза
Таблица 1. Скорость роста клеток Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. при разных условиях культивирования (кл./час)
10.12. 2012 11.12. 2012 13.12. 2012 15.12. 2012 17.12. 2012 19.12. 2012
СК 0 0,056 0,143 0,568 1,629 1,806
СГ 0 0,032 0,010 0,048 0,005 0,019
ТК 0 0,016 0,026 0,001 0,005 -0,041
ТГ 0 0,013 0,040 0,009 0,015 -0,026
Прим.: обозначения как на рис. 1
В ТК скорость размножения клеток самая низкая. На восьмой день численность клеток резко падает. Различия в численности клеток между ТК и СГ в первый день были достоверными (р<0,036), однако с третьего по шестой день показали недостоверность (р>0,05). Но в последующие дни различия стали более явными и достоверными (р<0,037) (рис. 1, табл. 1).
В ТГ численность клеток почти сравнима с СГ, и значительно выше, чем в ТК. Различия в численности клеток между ТГ и ТК не достоверны лишь в первый день (р=0,885), в остальные дни результаты были достоверными (р<0,016) (рис. 1, табл. 1).
За весь период проведения опыта в СК наблюдается активное увеличение числа клеток Мус1ктан1ен ЪотоирЪаега, (ежедневно почти в 2 раза). Различия в численности клеток между СК и ТК на протяжения всего опыта были достоверными (р<0,001), различия с СГ стали достоверными с шестого дня (р=0,000),а между СК и ТГ стали достоверными на четвертый день (р<0,001) (рис. 2, табл. 2).
В ТК скорость размножения клеток Мус1ктан1ен ИотоярИаега самая низкая. Различия в численности клеток между ТК и СГ были на протяжения всего опыта достоверными (р<0,001) (рис. 2, табл. 2).
В ТГ численность клеток выше, чем в ТК. Различия в численности клеток между ТГ и ТК были
достоверными на протяжения всего опыта (р<0,001) (рис. 2, табл. 2).
Различия в численности клеток Mychonastes ИотоярИаега между СГ и ТГ стали достоверными на четвертый день (р<0,001) (рис. 2, табл. 2).
Скорость потребления глюкозы, как правило, зависит от уровня освещенности. У некоторых видов свет инактивирует транспортную систему, обеспечивающую поступление глюкозы в клетки [5]. У Ш^ясЫа рака, как и у МусАоиж^ ЪотоирЪаега, в органической среде на свету размножение идет медленно, но сокращения численности клеток не наблюдается (рис. 1, 2, табл. 1, 2). Возможно, в нашем случае, у водорослей на свету также происходит инактивация транспортной системы.
Гетеротрофная утилизация органических субстратов у водорослей является важной стратегией выживания, когда уровень света слишком низок для фотосинтеза, или освещенность вообще отсутствует. Поэтому, на наш взгляд, можно говорить о том, что изученные нами штаммы водорослей из пещеры Пропащая яма в условиях темноты питаются гетеротрофно.
Рис. 2. Динамика изменений числа клеток
Mychonastes homosphaera (Skuja) Kaiina et Punc. при
разных условиях культивирования.
Прим.: N - число клеток; СК - свет, контроль; СГ -
свет, глюкоза; ТК - темнота, контроль; ТГ - темнота,
глюкоза
Таблица 2. Скорость роста клеток Mychonastes homosphaera (Skuja) Kaiina et Punc. при разных условиях культивирования (кл./час)
11.03. 2013 12.03. 2013 14.03. 2013 16.03. 2013 19.03. 2013 21.03. 2013
СК 0 0,105 0,289 1,561 2,503 4,546
СГ 0 0,109 0,243 0,381 0,169 0,166
ТК 0 -0,028 0,055 0,027 0,025 0,006
ТГ 0 0,096 0,103 0,090 0,130 -0,060
Прим.: обозначения как на рис. 2
Таким образом, изученные штаммы водорослей Nitzschia palea (Kütz.) W. Sm. и Mychonastes homosphaera (Skuja) Kalina et Punc. могут рассматриваться как миксотрофы, что является адаптацией к обитанию в пещерах.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Громов Б.В. Коллекция культур водорослей Биологического института Ленинградского университета // Труды Петергоф, биол. ин-та ЛГУ. Л, 1965. Т. 19. С. 125-139.
2. Сиренко Л.А., Сакееич A.II., Осипов Л.Ф., Лукина Л.Ф., Кузъменко ALII., Козицкая В.П., Величко II.M, Мысло-вич В.О., Гавриленко М.Я., Арендарчук В.В., Кириенко Ю.А. Методы физиолого-биохимического исследования водорослей в гидробиологической практике. Киев: Нау-кова думка, 1975. 248 с.
3. Успенская B.II. Экология и физиология питания пресноводных водорослей. М.: Изд-во МГУ, 1966. 123 с.
4. Tuchmcm N.C., Schollett М.А., Rier S.T., Geddes P. Differential heterotrophic utilization of organic compounds by diatoms and bacteria under light and dark conditions // Hydro-biologia. 2006. V. 561. P. 167-177.
5. Neilson A.H., Lewin R.A. The uptake and utilization of organic carbon by algae; an essay in comparative biochemistry // Phycologia. 1974. V. 13. P. 227-264.
6. Yantao Li, Junchao Huang, GerhardSandmann, Feng Chen. Glucose sensing and the mitochondrial alternative pathway are involved in the regulation of astaxanthin biosynthesis in the dark-grown Chlorella zofingiensis (Chlorophyceae) // Planta. 2008. V. 228. Is. 5. P. 735-743.
THE NUTRITION PECULIARITIES OF ALGAE NITZSCHIA PALEA (KUTZ.) W. SM. (BACILLARIOPHYTA) AND MYCHONASTES HOMOSPHAERA (SKUJA) KALINA ET PUNC. (CHLOROPHYTA)
©2013 V.B. Bagmet, Sh.R. Abdullin, Yu.V. Krupskaya
Bashkir State University, Ufa
The nutrition peculiarities of algae Nitzschia palea (Kittz.) W. Sm. and Mychonastes homosphaera (Skuja) Kalina et Punc. from cyanobacterial-algal cenoses of Propashchaya Yama cave (Republic of Bashkortostan) are considered in the paper. Comparative analysis of these species strains growth in light and in darkness on mineral and organic medium was made. It was revealed, that Nitzschia palea (Kiitz.) W. Sm. and Mychonastes homosphaera (Skuja) Kalina et Punc. in light feed on autotrophically, in darkness - heterotrophically.
Keywords: Nitzschia palea, Mychonastes homosphaera, type of nutrition, autotrophy, heterotrophy.
Veronika Bagmet, student, e-mail: charal989(S)yandex.ru; Sha-mil Abdullin, Candidate of Biology, Associate Professor, e-mail: abdullinshrbsu(S!mail.ru; Yuliya Krupskaya, student, e-mail: Krup-julia(S!rambler.ru