CC BY
9
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
57
ОСОБЕННОСТИ МИОСАТЕЛЛИТОЦИТОВ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП МЫШЦ ПРИ ТРЕНИРОВКАХ, ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ И ПРИЕМЕ АМИНОКИСЛОТ
Е.С. Головнева1, 2, Р.В. Тахавиев2, Г.В. Брюхин1
1 ФГБОУ ВО Южно-Уральский государственный медицинский университет Минздрава России, Челябинск, Россия
2 ГБУЗ Многопрофильный центр лазерной медицины, Челябинск, Россия
e-mail: micron30@mail.ru
Ключевые слова: миосателлитоциты, тренировка; лазерная терапия; аминокислоты
Мышцы различных групп формируют отличающиеся друг от друга паттерны регенеративного ответа на физическую нагрузку, включающие реакцию миосателлитов. Известно, что лазерное воздействие и прием аминокислот с разветвленной цепью (BCAA) могут воздействовать на процессы гиперплазии и гипертрофии мышцы в условиях тренировки [1,2], при этом особенности реакции ми-осателлитов различных групп мышц на комбинированную стимуляцию лазером и аминокислотами не изучались.
Целью исследования явился анализ влияния инфракрасного лазерного воздействия и BCAA на миосател-литоциты различных мышечных групп при принудительном плавании. Эксперимент был выполнен на 30 крысах Wistar, разделенных на 5 групп: 1) интактный контроль, 2) тренировки принудительным плаванием, 3) тренировки с приемом аминокислот с разветвленной цепью, 4) тренировки с инфракрасным лазерным воздействием, 5) тренировки с лазерным воздействием и приемом аминокислот с разветвленной цепью. Животные выводились из эксперимента через 6 недель после начала тренировок. Изучались гистологические препараты m. biceps femoris, m. pectoralis major, m. triceps brachii, анализировали количество миосателлитоцитов и площадь их ядер.
Принудительное плавание в течение 6 недель не приводило к статистически значимым изменениям количества и площади ядер миосателлитов. Площади ядер миосателлитов в разных мышечных группах не отличались, а количество миосателлитов было выше в m. triceps brachii. После стимуляции регенерации лазерным воздействием наиболее выраженные изменения как количества миосателлитов, так и площади ядер наблюдались в m. biceps femoris, а при приеме ВСАА количество миосателлитоцитов было значительно выше в m. triceps brachii. В группе комбинированного применения инфракрасного лазерного облучения и BCAA происходило более выраженное увеличение площади ядер ми-осателлитоцитов и их количества, чем при изолированной лазерной терапии, либо приеме аминокислот. В m. pectoralis major увеличение площади ядер миосателли-тов было выражено слабее относительно других групп мышц, при этом количество клеток увеличивалось сопоставимо. Таким образом, лазерное воздействия на мышцы в комбинации с приемом ВСАА стимулирует ответные реакции миосателлитов в тренировочном процессе, при этом наибольшая эффективность регенеративного процесса наблюдается в мышцах конечностей.
Литература:
1. Галлямутдинов Р.В., Астахова Л.В., Головнева Е.С., Серыше-ва О.Ю. Лазерная медицина. 2020. Т. 24. № 2-3. С. 90.
2. Ra S.G., Miyazaki T., Kojima R.J. Sports Med. Phys. Fitness. 2018. V. 58 (11). Р.1582.
МОДЕЛИРОВАНИЕ ПЕРИВАСКУЛЯРНОЙ НИШИ СЕРДЦА ПУТЕМ ОБОГАЩЕНИЯ КАРДИОСФЕР ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ
Ю.Д. Гольцева, К.В. Дергилев, А.А. Гусева, М.А. Болдырева, Е.В. Парфенова, И.Б. Белоглазова
ФГБУ НМИЦК им. ак. Е.И. Чазова Минздрава России, Москва, Россия
e-mail: eleagnusom@gmail.com
Ключевые слова: сфероид, кардиосферы, периваскулярная ниша, эндотелиальные клетки.
В сердце периваскулярная ниша формирует микроокружение сосуда и участвует в регуляции гомеостаза и репаративных процессах. Данную регуляцию обеспечивает взаимодействие компонентов периваскулярной ниши: эндотелиальных клеток, перицитов, фибробластов и формируемого ими матрикса, за счет паракринной и межклеточной передачи сигналов. Для изучения механизмов функционирования периваскулярной ниши и возможных способов воздействия необходимо наличие адекватных 3D клеточных моделей, обогащенных сосудистыми клетками. В связи с чем целью нашей работы было разработать метод получения 3D модели периваскулярной ниши сердца.
Модель периваскулярной ниши разрабатывали на основе сфероидов (кардиосфер), полученных из кардиаль-ных клеток (КК) и эндотелиальных клеток (ЭК). КК получали методом эксплантной культуры из сердец мышей линии C57BI/129 и культивировали в среде IMDM, содержащей 20% сыворотки, на фибронектине. ЭК получали путем ферментативной диссоцииации сердечной ткани (1 мг/ мл коллагеназа А, 30 мин при 37°С) с последующей им-муномагнитной селекцией по маркеру CD31, и культивировали в среде EGM2-MV на желатине. Для обогащения кардиосфер эндотелиальными клетками ЭК и КК комбинировали (3:50, 1:5 и 2:5) и культивировали в планшетах с низкоадгезивным U-образным дном (Nunc) в среде для кардиосфер (35% IMDM, 65% DMEM/F-12, 3% сыворотки) в течение 3 дней. Характеристику обогащенных ЭК кардиосфер выполняли путем иммунофлуоресцентно-го окрашивания и оценки проангиогенных свойств по способности формировать «сосудистую сеть» в фибриновом геле и секретировать факторы-регуляторы ангиогенеза (ProteomeProfiler antibody array).
Мы показали, что разработанный нами протокол позволяет формировать обогащенные ЭК кардиосферы независимо от доли ЭК. При этом монокультура ЭК не способна к формированию сфероидов. В составе обогащенных ЭК кардиосфер визуализировали эндотелиальные (CD31) и гладкомышечные (SMA) клетки, а также компоненты внеклеточного матрикса (коллаген, фибронектин, лами-нин). Анализ секретома обогащенных сфероидов показал наличие факторов-регуляторов ангиогенеза (MCP-1, MIP-1 a, MMP3 и др.). При этом способность обогащенных ЭК кардиосфер формировать сосудистые структуры (число и длина отростков) была выше, чем монокультуры ЭК. Данные результаты свидетельствуют о сохранении в обогащенных ЭК кардиосферах принципов взаимной регуляции, характерных для периваскулярной ниши.
Таким образом, мы разработали 3D клеточную модель периваскулярной ниши в сердце. Обогащенные ЭК кардиосферы обеспечивают сохранение основного состава и специализированных межклеточных и секреторных взаимодействий сосудистого микроокружения, что позволяет использовать данную модель для изучения
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
