CC BY
34
/ребёнка
Kaíhíhhq пед1атр1я / Clinical Pediatrics
УДК 616.926:612.017.1-053.2
МАЙААННИКВ.Г.1, СМ1ЯН-ГОРБУНОВА к.о.2 1Нацюнальний медичний унверситет¡мен/ О.О. Богомольца, м. Ки!в Сумський державний унверситет, кафедра пед1атрп п'слядипломно! освти
OCOBAMBOCTÍ KAiTMHHOÍ ЛАНКИ ÍMYHÍTETY В AÍTEÉ, ХВОРИХ НА MOHO- TA MÍKCT-BAPÍAHTM POTABÍPYCHOÍ
НФЕКЦП
Резюме. У poóomi наведет дат лабораторного обстеження 35 dimeü раннього вшу з гострою кишковою тфекщеюротавiрусноiетюлогп. Проведена оцшка динамки клтинно1'ланки iмунноiсистеми в гострий перюд захворювання та у перодреконвалесценщ. Встановлет вiрогiднi вiдмiнностi показнитв CD3+ та CD16+ у сироватц кровi мiж моно- та мiкст-варiантомротавiрусноi шфекци. Ключовi слова:ротавiрусна тфекщя, дти, клтинний iмунiтет.
Серед шфекцшних захворювань важливе мюце посвдають rocrpi кишковi шфекци (ГК1). Згвдно з даними багатьох aBTopiB, значну питому вагу в CTpyoypi ГК1 мають гастроентерити ро-TaBipycHo'i етюлогп. Ротавiрyсна iнфекцiя (РВ1) е основною причиною виникнення дегвдрата-цшно1 дiареi у дiтей раннього вжу [1], гост-талiзацiй третини дггей з дiареею. Летальнiсть при патологи становить 25 % ввд уих дiарей та 500 000—800 000 смертельних випадюв на рж. Реiнфекцiя характерна для всiх вжових груп, проте тяжкiсть перебiгy варше залежно вiд вiкy. Частота повторного зараження РВ1 зростае у дь тей першого року життя та дггей раннього вiкy, становить 30—70 % [2]. Ротавiрyсна iнфекцiя по-ширена в усьому свiтi, але особливо тяжко вра-жае дгтей у крашах, що розвиваються. Прямi та опосередкованi витрати, пов'язанi з лжуванням РВ1, становлять 400 мшьйошв евро в бврот та бшьше нiж 1 мiльярд доларiв у Сполучених Штатах Америки [3].
1мунна вщповщь органiзмy людини на вiрyснy iнфекцiю складна та багатокомпонентна. Одшею зi складових специфiчноi iмyнноi вiдповiдi е клгтин-на ланка iмyнiтетy (В-лiмфоцити, Т-лiмфоцити, Т-хелпери, Т-супресори та Т-кшери).
Метою нашого дослвдження було вивчення особливостей кли,инно'1 ланки iмyнiтетy в дiтей iз гострими кишковими iнфекцiями ротавiрyсноi етюлогп.
Матер1али та методи досл1дження
Дослiдження проводилися на 6a3i iнфекцiйного вщдшення № 3 КУ «Сумська MicbKa дитяча клшч-на лiкарня Св. Зшахди» у 2013—2014 рр. Пiд спо-стереженням знаходилось 35 дiтей (19 хлопчиюв i 16 дiвчаток), хворих на гостр1 кишковi шфекцп ро-тавiрусноl етюлогп Середнiй bík обстежених дiтей становив 17,30 ± 1,83 мюяця. Дiагноз ротавiрусноl шфекцп був шдтверджений iмунохроматографiч-ним тестом CITO TEST ROTA ТОВ «Фармаско», бактерюлопчним дослiдженням калу на кишкову групу та групу умовно-патогенних мжрооргашзм!в.
У результат! дослщження дiтей було роздшено на дв1 групи. До I групи ввшшли 16 дiтей з моно-варiантом ротавiрусноl шфекцп, до II групи — 19 пащенпв i3 мiкст-варiантом ротавiрусноl шфекцп У групу контролю включено 15 практично здоро-вих дггей, репрезентативних за вжом i статтю.
Дослiдження проводились у перюд розпалу захворювання (1-ша — 3-тя доба) та в перюд реконвалесценщ! (5-6-та доба).
Адреси для листування з авторами: Майданник В.Г. E-mail: [email protected] Смшн-Горбунова К.О. E-mail: [email protected]
© Майданник В.Г., Смшн-Горбунова К.О., 2015 © «Здоров'я дитини», 2015 © Заславський О.Ю., 2015
KëiHi4Ha neAiorpifl / Clinical Pediatrics
Вивчення клiтинноï ланки ÎMyHÎTeTy робили на n^cTaBÎ визначення BMicTy CD3+ (Т^мфоципв), CD4+ (Т-хелперiв), CD8+ (T-cynpecopiB), iмyнорегyляторного iндексy (CD4+/CD8+), CD16+(NK-клiтин), CD21+ (В^мфоцш1в) методом iмyнофлюоресценщï з моноклональними ан-титiлами y сироватцi кровi [4].
Статистичнy о6ро6ку отриманих результапв проводили з використанням методiв варiацiйного ряду з вирахуванням середньоï арифметичноï ве-личини, стандартноï похибки середнього ариф-метичного. Вiрогiднiсть рiзницi двох вибiрок ощ-нювали за допомогою критерiю Стьюдента (t). Розрахунки — на персональному комп'ютерi за допомогою програм Microsoft Excel, адаптованих для медико-бюлопчних дослщжень.
Результати та ïx обговорення
При дослiдженнi клiтинноï ланки iмyнноï сис-теми в дггей з моно- та мiкст-варiантами ротавь рyсноï кишковоï шфекцИ виявленi порушення iмyнного статусу в гострий перюд захворювання (табл. 1). У I груш дггей iз моноварiантом РВ1 по-казник CD3+ y сироватщ кровi вiрогiдно знижу-вався до 45,13 ± 0,55 % порiвняно з аналогiчним показником дiтей групи контролю — 55,53 ± 0,69 % (р < 0,001). Характерним було також вiрогiд-не зниження T-хелперiв (CD4+) та NK-клiтин
(СБ16+), концентрацiя яких була 31,25 ± 0,65 % i 14,94 ± 0,62 % порiвняно з практично здоровими диъми - 36,47 ± 0,48 % та 27,53 ± 0,48 % вщпо-вiдно (р < 0,001). Пд час дослщження спостерта-лось вiрогiдне пiдвищення T-супресорiв (СБ8+) та В-лiмфоцитiв (СБ21+) до 19,43 ± 0,56 % та 19,50 ± 0,57 %, аналопчш показники групи контролю були 17,93 ± 0,41 % та 17,73 ± 0,62 % вадпо-вiдно (р < 0,05). 1мунорегуляторний iндекс у дiтей з моношфекщею знижувався та становив 1,62 ± 0,39 проти 2,14 ± 0,10 групи контролю (р > 0,05).
Перюд реконвалесценцп моно-РВ1 характе-ризувався змшою показникiв iмунного статусу, проте жоден не досягав рiвня дггей групи контролю. Концентрацiя СБ3+ та СБ16+ тдвищува-лась до 52,25 ± 0,70 % та 16,67 ± 0,39 % вщповвдно (р < 0,001 i р < 0,05). Рiвень СБ4+ у сироватщ кровi вiрогiдно зрiс до 34,06 ± 0,44 % (р < 0,01). Показники СБ8+, СБ21+, а також вiдношення СБ4+/ СБ8+ дещо пiдвищувались — до 18,94 ± 0,27 %, 19,43 ± 0,41 % та 1,78 ± 0,02 (р > 0,05).
У дггей II групи з мiкст-варiантом РВ1 показники клгтинно! ланки iмунiтету також характеризу-вались значними змшами. У гострий перюд захворювання концентращя СБ3+ та СБ16+ вiрогiдно зменшувалась до 47,68 ± 0,72 % i 11,84 ± 0,65 % вщ-повщно (р < 0,001). Рiвень СБ4+ у сироватцi кровi знижувався до 30,58 ± 0,53 % (р < 0,01). У той же час
Таблиця 1. Динамка показниюв клтинно)' ланки ïmyhhoï системи в дтей при моно- та м1кст-вар1антах
ротав1русно1 ¡нфекци (М ± m)
1ммунолопчш показники Група контролю (n = 15) Гострий перюд Перюд реконвалесценцп
1 група (n = 16) II група (n = 19) I група (n = 16) II група (n = 19)
1 2 3 4 5
CD3+, % 55,53 ± 0,69 45,13 ± 0,55 Р1-2 < 0,001 47,68 ± 0,72 Р1-3 < 0,001 Р2-3 < 0,01 52,25 ± 0,70 Р1-4 < 0,01 Р2-4 < 0,001 50,32 ± 0,82 Р1-5 < 0,001 Р3-5 < 0,05
CD4+, % 36,47 ± 0,48 31,25 ± 0,65 Р1-2 < 0,001 30,58 ± 0,53 Р1-3 < 0,01 Р2_3 > 0,05 34,06 ± 0,44 Р1-4 < 0,001 Р2_4 < 0,01 32,53 ± 0,43 Р1 5 < 0,01 Р3-5 < 0,01
CD8+, % 17,93 ± 0,41 19,43 ± 0,56 Р1-2 < 0,05 20,16 ± 0,81 Р1-3 < 0,05 Р^3 > 0,05 18,94 ± 0,27 Р1-4 < 0,05 Р^ > 0,05 23,79 ± 0,58 Р1 5 < 0,001 Р3-5 < 0,01
CD4+/CD8+ 2,14 ±0,10 1,62 ± 0,39 Р1-2 > 0,05 1,52 ± 0,03 Р1-3 < 0,001 Р2-3 > 0,05 1,78 ± 0,02 Р1-4 < 0,01 Р2-4 > 0,05 1,35 ± 0,04 Р1 5 < 0,001 Р3-5 < 0,01
CD16+, % 27,53 ± 0,48 14,94 ± 0,62 Р1-2 < 0,001 11,84 ± 0,65 Р1-3 < 0,001 Р2-3 < 0,01 16,67 ± 0,39 Р1-4 < 0,001 Р2-4 < 0,05 13,21 ± 0,52 Р1-5 < 0,001 Р3-5 > 0,05
CD21+, % 17,73 ± 0,62 19,50 ± 0,57 Р1-2 < 0,05 19,79 ± 0,31 Р1-3 < 0,01 Р1_3 > 0,05 19,43 ± 0,41 Р1-4 < 0,05 Р1_4 > 0,05 20,21 ± 0,30 Р1-5 < 0,01 Р3-5 > 0,05
Примтки: Р12 — р1зниця мж даними в дтей групи контролю та I групи в гострому перюд1; Р13 — р1зниця мж даними в дтей групи контролю та II групи в гострому перюдi; Р2 3 — р'зниця мж даними в дтей I та II групи в гострому перюдi; Р14 — р 'зниця м 'ж даними в дтей групи контролю та I групи в пер1од1 реконвалесценцп; Р2 4 — р'зниця м1ж даними в дтей I групи в гострому перюдi та перiодi реконвалесценцп; Р15 — р 'зниця мж даними в дтей групи контролю та II групи в пер1од1 реконвалесценцп; Р3 5 — р 'зниця мж даними в дтей II групи в гострому перюдi та перюдi реконвалесценцп.
визначалось пiдвищення СБ8+ (20,16 ± 0,81 %, р < 0,05) та збгльшення концентрацп СБ21+ (до 19,79 ± 0,31 %, р < 0,01). 1мунорегуляторний ш-декс становив 1,52 ± 0,03, що менше за показники практично здорових дггей (р < 0,001).
У дггей II групи, що знаходились тд спосте-реженням при виписцi зi стацiонару, вiдбувалось пiдвищення СБ3+ до 50,32 ± 0,82 % (р < 0,05). Концентрацп СБ4+ та СБ8+ збiльшились до 32,53 ± 0,43 % i 23,79 ± 0,58 % вiдповiдно (р < 0,01). Одночасно спостерпалась тенденцiя до збшьшення показниюв СБ21 + та СБ16+ - 20,21 ± 0,30 % i 13,21 ± 0,52 % вщповщно (р > 0,05). Поряд iз тим iндекс СБ4+/СБ8+ зменшувався до 1,35 ± 0,04 (р < 0,01).
У дггей II групи в гострий перюд захворювання вiдмiчалось вiрогiдне пiдвищення рiвня СБ3+ та зменшення СБ 16+ при порiвняннi з пацieнтами I групи (р < 0,01). Паралельно спостерпалось не-значне пiдвищення СБ8+ i СБ21+ та зменшення СБ4+ у хворих II групи.
Таким чином, тд час проведеного дослщження було виявлено пiдвищення СБ8+ та СБ21+ i зменшення СБ3+, СБ4+ та СБ16+у дiтей обох груп при госmталiзащi до стацiонару. Перюд реконвалес-ценцп характеризувався змiною показниюв, проте вони не досягали рiвня дiтей групи контролю. Данi змши, ймовiрно, обумовленi пригнiченням функ-цп iмунокомпетентних клiтин. При дослщжен-ш з'ясована вiрогiдна рiзниця м1ж показниками СБ3+ (45,13 ± 0,55 % та 47,68 ± 0,72 %), а також СБ16+ (14,94 ± 0,62 % та 11,84 ± 0,65 %) клiтинноi ланки iмунiтету в дiтей з моно- та мжст-шфекщею (р < 0,01).
У лггературних джерелах описано, що Т^мфоцити (СБ3+) е частиною Т-клiтинного рецепторного комплексу, що мае значення в передачi сигналу через плазматичну мембрану лiмфоцита в середину клггини [5]. NK-клiтини (СБ 16+) — основний ефектор клiтинноi ланки [6], що в периферичних органах iмунноi системи набувае здатност до цитотоксичноi дд вщносно уражених вiрусами клiтин власного оргашзму [7]. Не менш важливе значення в сташ iмунноi системи вщграе вiдношення Т-хелперiв i Т-супресорiв периферичноi кровi, бо вiд нього залежить штен-сивнiсть iмунноi ввдповщ [5].
Можливо, виявленнi нами змши у дггей з моно-та мiкст-варiантом РВI пов'язанi з тим, що клгтин-на ланка iмунiтету бiльшою мiрою реагуе на мжст-варiант ротавiрусноi шфекцп. Поряд iз цим було встановлено, що тсля проведеного базисного лiкування дiтей з ротавiрусною iнфекцiею повноi нормалiзацli показниюв не спостерiгалось, особливо у пащенпв iз мiкст-варiантом ротавiрусноi шфекцп.
У лiтературi описанi дослiдження клiтинноi ланки iмунiтету в дiтей iз моноварiантом РВI, де визначалось зниження рiвня субпопуляцiй лiм-фоцитiв СБ3+, СБ4+ та СБ8+ у гострий перюд
захворювання, проте в динамщ1 показники незна-чно пiдвищувались [8]. Iншi дослiдники вiдмiчали вiрогiдне зниження концентрацш CD3+ i CD8+ у сироватщ кров1 в дiтей iз моноварiантом РВ1 [9]. Протилежнi результати були отримаш авторами при вивченш Гмунно! вiдповiдi при ГК1 в дггей, а саме тдвищення рГвня показникiв CD3+ i CD8+ [10]. Беручи до уваги суперечливiсть даних рГзних авторiв при дослiдженнi клггинно! ланки Гмунно! системи у дггей Гз ротавiрусною iнфекцieю, доцгль-ним е подальше вивчення цього питання.
Висновки
1. У дГтей Гз моноварГантом ротав1русно! шфекцп Гмунний статус характеризувався Т-л1мфопешею, зниженням концентраци CD4+, CD16+ та Гмуно-регуляторного шдексу, п1двищенням р1вня CD8+ та CD21+. У перюд ранньо! реконвалесценцп спо-стер1галась позитивна динам1ка показник1в, проте повно! ix нормал1зацп не настало.
2. У хворих Гз м1кст-вар1антом ротав1русног ш-фекцп в розпал захворювання також в1дм1чалось зниження CD3+, CD4+, CD 16+ та Гмунорегуля-торного шдексу, шдвищення р1вня CD8+, CD21 + пор1вняно з аналог1чними показниками здорових д1тей. П1сля проведення базисног терашг динам1ка нормал1зацп показник1в була менш штенсивною, н1ж у д1тей з моноварГантом ротав1русно! шфекцп
3. При пор1внянш результат1в досл1дження д1-тей I та II групи встановлено бгльш значне зниження CD3 + та CD16+ (р < 0,01) у хворих Гз м1кст-вар1антом ротав1русно! шфекцп
Список лiтeрaтyри
1. Holloway G. Innate cellular responses to rotavirus infection / G. Holloway, B.S. Coulson// J. Gen. Virol. — 2013. — Vol. 94(6). — P. 1151-11601.
2. Полянская Н.А. Клинико-катанамнестическое наблюдение за детьми с моно- и микст-вариантами ротавирусной инфекции / Н.А. Полянская, Е.Ф. Лобова // Вестник новых медицинских технологий. — 2011. — Т. XVIII, № 2. — С. 315-317.
3. Desselberger U. Immune Responses to Rotavirus Infection and Vaccination and Associated Correlates ofProtection / U. Desselberger, H.-I. Huppertz// J. Infect. Dis. — 2011. — №203(2). — Р. 188195.
4. Mancini G. Immunochemical quantitation of antigens by single radial diffusion/ G. Mancini, A. Carbonare, J. Harmans//Immuno-chemistry. — 1965. — № 2. — Р. 235-239.
5. Чернишова Л.I. Дитяча iмунологiя / Л.1. Чернишова, А.П. Волоха, Л.В. Костюченко та т. — К.: ВСВ «Медицина», 2013. — 720 с.
6. Simone R., Zicca A., Saverino D. The frequency of regulatory CD3+CD8+CD28-CD25+T lymphocytes in human peripheral blood increases with age / R. Simone, A. Zicca, D. Saverino // Journal of Leukocyte Biology. — 2008. — № 84. — С. 1454-1461.
7. Skrzeczynska-Moncznik J., Bzowska M., Loseke S., Grage-Griebenow E., Zembala M., Pryjma J. Peripheral blood CD14(high) CD16(+) monocytes are main producers of IL-10 // Scandinavian Journal of Immunology. — 2008. —№ 67(2). — Р. 152-159. — Doi:1 0.1111/j.1365-3083.2007.02051.
8. Кирсанова Т.А. Особенности иммунного статуса детей старшего возраста, больных вирусными кишечными инфекциями, на фоне приема бактерийных препаратов, содержащихлак-тобактерииLGG/Т.А. Кирсанова, В.А. Строкач//International student's journal of medicine. — 2014. — Спец. вып.: Сборник ста-
тей и тезисов международной научно-практической конференции студентов и молодых ученых «Интеграция студенческой науки в международное пространство», посвященной 125-летию С.Д. Асфендиярова, г. Алматы, Казахстан, 24—25 апреля 2014 г. - С. 707-710.
9. Бабик Р.К. Клинико-иммунологические особенности ро-тавирусной инфекции у детей / Р.К. Бабик, Е.В. Корнеева // Вестник Южно-Уральского государственного университета.
Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура». - 2011. - № 28. - С. 53-57.
10. Романцов М.Г. Патогенетически обоснованная имму-нотропная терапия кишечных инфекций у детей (клинический обзор) / М.Г. Романцов, О.В. Тихомирова // Фундаментальные исследования. — 2010. — № 3. — С. 122-137.
Отримано 09.01.15 Ж
Майданник В.Г.1, Смеян-Горбунова К.О.2
1Национальный медицинский университет
имени A.A. Богомольца, г. Киев
Сумской государственный университет, кафедра педиатрии последипломного образования
ОСОБЕННОСТИ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА
У ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ МОНО- И МИКСТ-ВАРИАНТАМИ РОТАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Резюме. В работе представлены данные лабораторного исследования 35 детей раннего возраста с острой кишечной инфекцией ротавирусной этиологии. Проведена оценка динамики клеточного звена иммунной системы в острый период заболевания и в период реконвалес-ценции. Установлены достоверные отличия показателей CD3+ и CD16+ в сыворотке крови между моно- и микст-вариантом ротавирусной инфекции.
Ключевые слова: ротавирусная инфекция, дети, клеточный иммунитет.
Maidannyk V.H.1, Smiian-Horbunova K.O.2
National Medical University named after O.O. Bohomolets,
Kyiv
2Sumy State University, Department of Pediatrics of Postgraduate Education, Sumy, Ukraine
FEATURES OF CELLULAR IMMUNITY IN CHILDREN WITH MONO- AND MIXED ROTAVIRUS INFECTION
Summary. This paper presents the findings of laboratory examination in 35 infants with acute intestinal infection of rotavirus origin. The evaluation of the dynamics of cellular link of the immune system in the acute phase of the disease and during convalescence has been carried out. There were significant differences in CD3+ and CD16+ levels in blood serum at mono and mixed rotavirus infection.
Key words: rotavirus infection, children, cellular immunity.
