CC BY
62
16. http://vetneva.ru/uslugi/shinirovanie-zubov-u-sobak
17. Борисевич В. Б., Борисевич Б. В., Хомин Н.М., Каплуненко В. Г., KociHOB М. В., Волошина Н. О., Ткаченко С. М., Дорощук В. О., Литвиненко Д. Ю., Кулща М. А., Кулшч С. М. Калашшкова Ю. В. Здобутки нанотехнологш в лшуванш та профшактищ хвороб тварин. Пос1б. для студ. аграр. закл. осв1ти I-IV р1вшв акредитацп 3i спец. «Вет. медицина» та ветеринарно-медичних спещалют1в - К., 2009.
Стаття надшшла доредакци 30.03.2015
УДК 619:576.852:636.2
Шевщв М. В., к.вет.н., професор © E-mail: [email protected]
Пвненсъкий державный гуматтарний утверситет, м.Пвне, Украта
ОСОБЛИВОСТ11МУН0Л0Г1ЧН01 РЕАКТИВНОСТ1 ОРГАН13МУ ТВАРИН ПРИ ТУБЕРКУЛЬ0311 М1КОБАКТЕРЮЗАХ
У cmammi висв1тлюеться проблема diazHoemuKU, боротъби i проф1лактики туберкулъозу велико! рогато! худоби. За остант 30-40 poKie при досл1дженм велико! рогато! худоби на туберкулъоз масово почали видыяти реагуючих на туберкулт тварин. Але на забо! патологоанатом1чним досл1дженням зм1н, характерних для туберкулъозу, не виявляли. При лабораторному досл1дженш матер1алу eid реагуючих на туберкулт тварин видыяли кулътури атипових мтобактерт. Ученими були розроблем pi3Hi методи посмертно! diazHoemuKU туберкулъозу i MiKo6aKmepio3ie, але eci вони зводилися до необгрунтовано масового забою тварин з метою установления причини реакщй на туберкул1н i нанесення значного збитку, внасл1док передчасного забою продуктивних тварин.
Нагалъною стала проблема удосконалити прижиттевi методи diazHoemuKU MiKo6aKmepio3ie.3 ц1ею метою була застосована симулътанна алерг1чна проба з ППД-туберкул1ном i алергеном iз атипових м1кобактер1й (ААМ). Нами додатково застосована iмунолог1чна реакщя пошкодження нейтрофмв i агломерац1я лейкоцит1в, яка дае змогу прижиттево диференщювати туберкул1нов1 реакцп, зменшити кыъюстъ eidiöpanux тварин для забою i проведению лабораторного досл1джеиня щодо встановлення етюлогИ алерг1чних туберкул1новихреакц1й.
Ключовг слова: туберкулъоз, м1кобактер1ози, ППД-туберкул1н, ААМ (алерген атипових м1кобактерт), iмуттет, реактивмстъ, in vitro, М. bovis, М. intracellularae, лейкоцити, сенсибтзащя, агломеращя, Kapionimo3, rnpiopeKCUc, кар1ол1зис.
УДК 619:576.852:636.2
Шевцив М. В., к.вет.н., профессор
Ровненский государственный гуманитарныйуниверситет, г.Ровно, Украина
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ И МИКОБАКТЕРИОЗАХ
В статье освещается проблема диагностики, борьбы и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота. За последние 30-40 лет при исследовании крупного рогатого скота на туберкулез массово начали выделять реагирующих на туберкулин животных. Но на забое патологоанатомическим исследованием
©Шевщв М. В., 2015
220
изменений, характерных для туберкулеза, не выявляли. При лабораторном исследовании материала от реагирующих на туберкулин животных выделяли культуры атипичных микобактерий. Учеными были разработаны различные методы посмертной диагностики туберкулеза и микобактериозов, но все они сводились к необоснованно массового забоя животных с целью установления причины реакций на туберкулин и нанесения значительного ущерба, в результате преждевременногоубоя продуктивных животных.
Насущной стала проблема усовершенствовать прижизненные методы диагностики микобактериозов. С этой целью была применена симультанная аллергическая проба с ППД-туберкулином и аллергеном из атипичных микобактерий (ААМ). Нами дополнительно применена иммунологическая реакция повреждения нейтрофилов и агломерация лейкоцитов, которая позволяет прижизненно дифференцировать туберкулиновые реакции, уменьшить количество отобранных животных для убоя и проведению лабораторного исследования по установлению этиологии аллергических туберкулиновыхреакций.
Ключевые слова: туберкулез, микобактериозы, ППД-туберкулин, ААМ (аллерген атипичных микобактерий), иммунитет, реактивность, in vitro, М. bovis, М. intracellularae, лейкоциты, сенсибилизация, агломерация, кариопикноз, кариорексис, кариолизис.
UDC 619: 576,852: 636.2
Shevtsiv M. V. (E-mail: [email protected])
Rivne State Humanitarian University, Rivne, Ukraine
FEATURES IMMUNOLOGICAL REACTIVITY ANIMALS WITH TUBERCULOSIS AND MYCOBACTERIOSIS
The article deals with the problem of diagnosis, prevention and combat of bovine tuberculosis. Over the past 30-40 years in the study of bovine tuberculosis began to devote massive reacting to tuberculin animals. But mine pathoanatomical study changes characteristic of tuberculosis is not known. In a laboratory study material from animals reacting to tuberculin isolated atypical mycobacteria culture. Scientists have developed a variety of methods for post-mortem diagnosis of tuberculosis and mycobacterioses, but they were as unreasonably mass slaughter of animals for the purpose of establishing the causes of reactions to tuberculin and causing significant damage as a result ofpremature slaughter of farm animals.
An urgent problem was to improve the lifetime mikobakterioziv.Z diagnostic methods for this purpose was used simultaneous allergic test with PPD-tuberculin and allergen from atypical mycobacteria (masses by means). We additionally applied immunological response of neutrophils damage and agglomeration of leukocytes, which allows to differentiate in vivo tuberculin reaction, reduce selected animals for slaughter and laboratory studies to establish the etiology of allergic tuberculin reactions.
Key words: tuberculosis, mycobacterioses, PPD-tuberculin, masses by means of (allergen atypical mycobacteria) immunity reactivity, in vitro, M. bovis, M. intracellularae, leukocytes, sensitization, agglomeration, kariopiknoz, karioreksys, kariolisis.
Вступ. Прояви туберкульозно! шфекцп i характер туберкульозного процесу значною м1рою зумовлеш бюлопчними властивостями збудника, анатомо-ф1зюлопчними i ¿мунолопчними особливостями оргашзму. Факт проникнення мшобактерш туберкульозу в оргашзм, що визначае стушнь шфшування, не р1внозначний прояву туберкульозу. Пщ впливом ¿мунно! системи оргашзму
221
мшобактерп туберкульозу можуть змшювати cboi бюлопчш властивосл: припиняють picT i розмноження, набувають р1зних морфолопчних змш, в результат! чого знижуеться ix в1рулентнють. Водночас мшобактерп повшстю не ел1мшуються з оргашзму, а постшно видозмшюються, або персистують, трансформуючись з неактивно! у активну форму, створюючи загрозу розвитку захворювання та призводять до зниження ¿мунного захисту [5, 7, 8].
При шфшуванш розмноження мшобактерш туберкульозу в оргашзм1 безпосередньо чи опосередковано мае згубний вплив на ¿мунокомпетентш кл1тини. 1мунолопчна реактившсть багато в чому визначае особливосп розвитку та наслщки туберкульозно! шфекцп, а важюсть nepe6iry туберкульозно! шфекцп корелюе з виразн!стю тих чи шших змш ¿мунокомпетентних кл!тин та !мунолог!чного гомеостазу [5].
Пров!дна роль у мехашзмах ¿мунного захисту належить кл!тинним реакц!ям, опосередкованим макрофагами i Т-л!мфоцитами. У зв'язку з токсичною д!ею мшобактерш туберкульозу на орган!зм в!дбуваеться пошкодження б!олог!чних мембран кл!тин, м!тохондр!й та утворення пов!льно-радикальних речовин. Утворення останшх в!дбуваеться особливо штенсивно при гальмуванн! функц!й м!тохондр!й в умовах гшоксичних стан!в pi3Ho! етюлогп та ступеня штоксикацп, знижуючи б!оенергетику структур кттин аж до !х апоптозу або некрозу [1, 2, 3, 9].
На проникнення мшобактерш в оргашзм активно ддать фагоцити, яю з функцюнально! точки зору можуть перебувати у двох станах - споко! та активованому. Поява подразника р1зко змшюе цей показник, вщображаючи подключения фагоцит1в до реакцш, спрямованих на корекщю внутршнього середовища оргашзму, у форм1 алергп - гшерчутливосп сповшьненого типу Цей процес залежить вщ в1рулентносп збудника туберкульозу [4, 6].
3 погляду сучасно! ¿мунологп та алергологи ще недостатньо вщомо справжню роль алергп при туберкульозу особливо мшобактерюзах. Особливо стосуеться це ранньо! та прижиттево-диференщально! д1агностики [10,11,12]. Тому вивчення кштинного протитуберкульозного ¿муштету при гшерчутливосп сповшьненого типу залишаеться актуальним. Нами була поставлена мета дослщити участь в шфекцшному м1кобактер1альному процес1 лейкоцита кров1, сенсибшзованих in vitro алергенами, виготовленими ¿з мшобактерш туберкульозу i атипових мшобактерш.
Матер1ал та методи. Дослщження проводилися на 10 бичках, 6-7 Mic. вшу, масою Tina 120-140 кг, у яких попередньо туберкулшовою пробою виключили природне шфшування м1кобактер1ями туберкульозу i розподшили на 3 групи: 1- а ЕГ - 4 бички, перорально заражен! М. bovis в доз1 1 мг/кг маси; 2-а ЕГ - 4 бички, перорально заражен! М. intracellularae в доз1 2 мг/кг маси трикратно через 5 дшв; 3-я - контрольна група. Тривалють експериментальних дослщжень - 100 дшв.
Проби Kpoßi вщбирали трич1 через 30, 60 i 90 дшв до i теля кожно! туберкулш1зацп на 72 годиш оцшки внутршньошюрних реакцш. Для ¿мунолопчних дослщжень за основу були використаш методики пошкодження нейтрофшв [9] i агломерацп лейкоцита [13], яю застосовувалися в медицин!. Нами лише була вщтитрована доза алергешв для стимуляцп in vitro кл1тин кров1, а саме: ППД-туберкулш - 100 МО; ААМ (алерген атипових мшобактерш) - 100 МО) i термши вщбору кров1 - до i теля сенсибшзацп алергенами.
Результата ¿мунолопчних показниюв обробляли статистично з обчисленням середнього арифметичного (m), середнього арифметичного вщхилення (Sm), значения в1ропдносп (Р) та коефщента кореляцп (r) з метою визначення
222
взаемозв'язку пошкодження нейтрофшв i агломерацп лейкоцита щодо в1рулентних властивостей патогенних i непатогенних мшобактерш туберкулъозу для велико! рогато! худоби (Пушкарьов Н. В., Соболев А. Д., 1983).
Результата дослщження. Результати проведених дослщжень свщчать про законом1ртсть шдвищення показника пошкодження нейтрофшв в залежносп вщ виду мшобактерш протягом усього дослщження. При цьому юнуе певна вщмштсть у показниках до i теля туберкулшзацп, особливо у перший мюяць теля заражения у rpyni M.bovis, де показник пошкодження нейтрофшв (ППН) з ППД-туберкулшом для ссавщв теля туберкулшзацп збшьшився у 5 раз1в (Р<0,01), а з алергеном ААМ - в 3 рази (Р>0,05).
У подальших дослщженнях ця р1зниця дещо зменшуеться i становила: з ППД-туберкулшом вище 1,5 раза, а з ААМ - 2 рази. Але суттева законом1рнють полягае в тому, що протягом усього дослщу ППН теля туберкулшзацп при дп на сенсибшзоват лейкоцити ППД-туберкулшом в 2 рази вище, шж з ААМ i становила вщповщно 0,44+0,10 проти 0,20+0,10 (Р<0,05).
У rpyni тварин, яким вводили M.intracellularae, ще! законом1рносп не спостер1гаеться. У них ППН при дп in vitro на сенсибшзоват лейкоцити обома алергенами приблизно однаковий i становить вщповщно не вище 0,08+0,02 з ППД-туберкулшом, проти 0,11+0,03 з ААМ (Р>0,05).
Под1бш законOMipHOcri вщмшностей показниюв при дп in vitro ППД-туберкулшом i ААМ до i теля туберкулшзацп вщм1чено i при агломерацп лейкоцита. Так, у rpyni тварин, заражених M.bovis, ПАЛ (показник агломерацп лейкоцита) на 30 день теля заражения найбшьш високий i с ППД-туберкулшом становить: до туберкулшзацп - 54+24, теля не! - 100+50; з ААМ до туберкултзацп майже однаково, теля - вдвое менше, тж з ППД-туберкулшом -58+25. На 60 день теля заражения таких суттевих вщмшностей не виявлено. На 90 день р1зниця у показниках до i теля туберкулшзацп суттева. Так, при дп in vitro ППД-туберкулшом на сенсибшзоват лейкоцити, ПАЛ до туберкулшзацп дуже низький - 3+2, з ААМ такий же самий - 3+2 (Р>0,05). Пюля туберкулш1зацп показник pi3KO пщвищуеться i становить: з ППД-туберкулшом - 69+20 (Р<0,05), а з ААМ - 33+10 (Р<0,05). Але все ж таки ПАЛ з ППД-туберкулшом вдвое вище, тж з ААМ.
Под1бно! законом1рност1 вщмшностей у показниках агломерацп лейкоцита при провокацп in vitro р1зними алергенами не спостер1гаеться у rpyni тварин сенсибшзованих М. intracellularae. Протягом дослщу показники агломерацп лейкоцита з двома алергенами приблизно однаков1 i становлять на 90 день при провокацп ППД-туберкулшом 40+20, а з ААМ - 56+15 (Р>0,05). Пор1вняння показниюв ще! групи тварин з контрольною (незараженою) становить: з ППД-туберкулшом 40+20 проти 8+2; з ААМ - 56+15 проти 7+2 - суттева (Р<0,05).
У контрольнш rpyni тварин показники пошкодження нейтрофшв i агломерацп лейкоцита низью i становили -2+1 (Р>0,05).
Кореляцшний взаемозв'язок м1ж патогенними властивостями мшобактерш виду M.bovis i M.intracellularae вщм1чена наступним: пошкодженню нейтрофшв -середньою позитивною кореляцшною залежтстю - r=0,4; агломеращею лейкоцита - слабо вираженою позитивною кореляцшною залежтстю - r=0,2.
Одночасно вивчали характер процентного стввщношення окремих вид1в нейтрофшв та морфолопчт змши !х при nepeöiry патолопчного процесу, викликаного патогенними i непатогенними для велико! рогато! худоби. Так. У тварин, заражених М. bovis, вщм1чено зеув ядра нейтрофшв вл1во, юних виявлено
223
вщ 5 до 10 %, паличкоядерних збшьшилось в 3-5 раз1в, сегментоядерних - на 57 %. Морфолопчш змши нейтрофшв характеризувались наступним: хемотаксичними змшами, ткнозом, карюрексисом i карюл1зисом кттин. Патологоанатом1чним дослщженням у заглоткових, середостшних i портальних л1мфатичних вузлах виявлено характерш туберкульозт гранульоми.
У rpyni тварин, заражених M.intracellularae, зсув ядра нейтрофшв дещо меншнй: юннх нейтрофшв вщ 2 до 5 %; паличкоядерних збшьшилось у 1,5-2 рази; сегментоядерних - 3-4 %. На кшець дослщу показники нейтрофшв знижуються до норми. Морфолопчш змши нейтрофшв характеризувались наступним: незначними ознаками хемотаксису та ткнозом кттин. Туберкульозних змш у внутршшх органах i л1мфатичних вузлах не виявлено.
Висновки. Результати дослщження, проведен! на великш рогатш худобу зараженш патогенними м1кобактер1ями виду М. bovis i непатогенними м1кобактер1ями виду М. intracellularae свщчать про специф1чну залежшсть ¿мунно! реактивност1 лейкоцита кров1 щодо ступеня в1рулентносп кислотост1йких мшобактерш, а в1дпов1дно i nepeöiry шфекцшного процесу при туберкульоз1 i мшобактерюзах.
Перспективи подальших досл1джень. Застосоваш методики ¿мунолог1чних досл1джень сл1д продовжити для застосування ix у раннш прижиттев1й д1агностиц1 туберкульозу i м1кобактерюз1в у комплекс! з ¿ншими методами д1агностики.
Л1тература
1. Иммунная альтерация лейкоцитов / А. А. Воробьев, С. С. Афанасьев, Г. Т. Патрикеев и др. // ЖМЭИ, 1978. - № 12. - С.21-28.
2. Каминская Г. О. Качественная оценка метаболических сдвигов, сопутствующая остропрогрессирующему течению туберкулеза / Г.О. Каминская, Р. Ю. Абдулаев, Б. А. Серебряная // Пробл. туб-за и болезней легких. - № 8. -С.53-57.
3. Китаев М. И. Иммуноаллергические реакции лейкоцитов при туберкулезе / М. И. Китаев. Фрунзе: Илим, 1978. - 249 с.
4. Кочмарский А. Ф., Шевцив М. В. Изучение специфической активности нейтрофилов у лабораторных животных, инфицированных микобактериями /А. Ф. Кочмарский, М. В. Шевцив // Ветеринария. -Киев, 1987. -Вып.62. - С. 20-24.
5. Кноринг Б. Е. Характер специфического иммунного ответа и продукции цитокинов мононуклеарами крови больных разным формами туберкулеза легких / Б. Е. Кноринг, И. С. Фрейдлин, А. С. Сибирцев и др. // Медицинская иммунология. - 2001. -Т. 3, № 1. - С. 61-68.
6. Ляшенко В. А. Макрофаги в инфекционном процессе / В. А. Ляшенко // Иммунология. - 1995. - № 4. - С. 48-52.
7. Тюлькова Т. Е. Особенности функционирования иммунной системы при туберкулезной инфекции / Т. Е. Тюлькова, Ю. П. Чугаев, Э. А. Кашуба // Туберкулез и болезни легких. - 2008. - № 11.- С.48-55.
8. Филиппова Т. П. Функциональное состояние адаптационных систем организма и характер течения туберкулеза легких / Т. П. Филиппова, Л. С. Васильева, А. В. Кочкин // Современные наукоемкие технологи. Медицинские науки. - 2004. - № 6. - С. 101-102.
9. Фрадкин В. А. Аллергодиагностика in vitro / В. А. Фрадкин. -М.:Медицина, 1975. -141 с.
10. Фрадкин В. А. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови / В. А. Фрадкин. - М.: Медицина, 1985. - 176 с.
224
11. Чумакова Л. П. Показатель повреждаемости нейтрофилов как критерий активности малых форм туберкулеза / Л. П. Чумакова // Проблемы туберкулеза.
- М., 1975. - № 2. - С. 78.
12. Шевцив М. В. Использование иммунологических методов для прижизненной дифференциации туберкулиновых реакций / М. В.Шевцив // Тезисы докл. респ. конф. молод. ученых. -Харьков, 1990. -С.26-28.
13. Fleck L., Lille-Szyszcowicz V. Leukergy and the metabolism of leukocytes / L. Fleck, V. Lille-Szyszcowicz // Jn.: Proc. Sixth Cong. Interh. Soc. Hematol. -Boston, 1958. - P. 137-139.
Стаття надшшла до редакци 3.03.2015
УДК 636.1:636.084:636.087.7:577.118
Щербатий А. Р., к.вет.н., старший викладач © E-mail: [email protected] Сшвшська Л. Г., д. вет. н., професор
Льв1вський нащональнийутверситет еетеринарног медицины та бютехнологт
гменг С. 3. Ржицького
ВПЛИВ ПРЕМ1КСУ MAPMIKC НА ПОКАЗНИКИ ОБМ1НУ МАКРОЕЛЕМЕНТ1В В ОРГАН13М1 ЖЕРЕБНИХ КОБИЛ
У сироватщ Kpoei жеребних кобил естаноелено гтеркальщемт (20 %), гтофосфатемт (100 %), порушення калъще-фосфорного обмту, тдвищення aKmuenocmi лужног фосфатази. Корекщя eMicmy макроелемент1в за згодоеуеання м1нерально-в1там1нного премшсу Марм1кс жеребним кобилам прояеляетъся нормал1зац1ею eMicmy загалъного калъщю у сироватц1 Kpoei, калъще-фосфорного ствв1дношення, тдвищення eMicmy неоргатчного фосфору та спричиняе позитиений еплие на активмстъ лужног фосфатази. Згодоеуеання премшсу лiкeiдoeye порушення функцИ' юстково-отрного апарату, дозеоляе нopмaлiзyeamu мemaбoлiчнi процеси i тдвищити працездаттстъ кобил.
Ключовг слова: кобили, сироеатка Kpoei, загалъний калъцт, неоргатчний фосфор, лужна фосфатаза.
УДК 636.1:636.084:636.087.7:577.118
Щербатый А. Р., к.вет.н., старший преподаватель, [email protected] Сливинская Л. Г., д. вет. н., профессор
Львовский национальныйуниверситет ветеринарной медицины и биотехнологий
имени С. 3. Гжицкого
ВЛИЯНИЕ ПРЕМИКСА МАРМИКС НА ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА МАКРОЭЛЕМЕНТОВ В ОРГАНИЗМЕ ЖЕРЕБНЫХ КОБЫЛ
В сыворотке крови жеребных кобыл установлено гиперкалъциемию (20 %), гипофосфатемию (100 %), нарушение калъция-фосфорного обмена, повышение активности щелочной фосфатазы. Коррекция содержания макроэлементов при скармливании минерально-витаминного премикса Мармикс жеребным кобылам проявляется нормализацией содержания общего кальция в сыворотке крови, кальций-фосфорного соотношения, повышением содержания неорганического фосфора и положительно влияет на активность щелочной фосфатазы. Скармливания премикса ликвидирует нарушения функции костно-опорного
© Щербатий А. Р., ^вшська Л. Г., 2015
225
