CC BY
55
сократимостью ЖП и секрецией ТТГ (г=-0,375, р=0,032) и Т3 (г=-0,58, р=0,009) была отрицательной. С увеличением содержания в крови тироксина уменьшается объем пузырной желчи (г=-0,5, р=0,012) [2]. Нами обнаружена отрицательная корреляция между уровнем ТТГ и сократимостью ЖП (г=-0,7, р=0,003).
Таким образом, в результате исследования выявлена выраженная взаимосвязь между состоянием гепатобил-
ЛИТЕРАТУРА
1. Бекк Н.Д., Шпагина Л.А., Зюбина Л.Ю. Частота и особенности поражения желчевыделительной системы у больных с патологией щитовидной железы // VI съезд научного общества гастроэнтерологов России: материалы конференции. - М., 2006. - С.114.
2. Вахрушев Я.М., Петрова Л.И., Сучкова Е.В., Муфаздалова И.В. Изучение уровня гормонов в крови у больных с деформацией желчного пузыря // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2003. - № 2-3. - С.31-33.
3. Вихрова Т.В. Сократительная способность желчного пузыря у больных с билиарным сладжем // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол. - 2004. - №5. -С.95-96.
4. Вовк Е.И. Желчнокаменная болезнь в XXI веке: лечение или профилактика? // Consilium medicum. - 2010. - №2.
- С.37-44.
5. Григорьева И.Н. Билиарный сладж // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол. - 2010. - №3. -С.32-37.
6. Ильченко А.А. Заболевания желчного пузыря и желчных путей. - М.: Анахарсис, 2006. - 448 с.
7. Лузина Е.В., Алексенко Ю.И., Стовба Е.С., Бакшеева Е.В. Изменения тиреоидного статуса у больных с различной патологией билиарного тракта // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2004. - №2-3. - С.82-83.
8. Максимов В.А., Чернышев А.Л., Тарасов К.М., Неронов В.А. Билиарная недостаточность. - М.: ИТ «АдамантЪ», 2008.
- 232 с.
9. Подымова С.Д., Уланова И.Н., Ляпон Д.О., Кузнецов Н.Е. Тиреоидный статус при хронических заболеваниях печени // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол.
- 1997. - №5. - С.156-157.
10. Скворцова Т.Э. Оценка моторно-эвакуаторной функ-
лиарной системы и функции ЩЖ, которая, возможно, модифицируется под влиянием различных экзогенных и эндогенных факторов. Разработка дифференцированных подходов к диагностике, профилактике и лечению ЖКБ в сочетании с дисфункцией ЩЖ требует дальнейшего углубленного изучения патогенетических механизмов, лежащих в основе взаимосвязей этих заболеваний.
ции желчного пузыря по данным УЗИ у больных с желчнокаменной болезнью // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга.
- 2004. - №2-3. - С.135-136.
11. Слесаренко С.С., Коссович М.А. Сочетанные мало инвазивные операции при патологии щитовидной железы и желчнокаменной болезни // Эндоскопическая хирургия. -2001. - №5. - С.123-125.
12. Тюрюмин Я.Л. Закономерности морфофункциональных нарушений в желчном пузыре и печени в патогенезе холестеринового холелитиаза: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук.
- Иркутск, 2000. - 19 с.
13. Федоров Н.Е., Немцов Л.М., Солодков А.П., Кичигина Т.Н. Показатели секреции холецистокинина, вегетативной регуляции сердечного ритма и уровень тревожности у больных с моторной дисфункцией желчного пузыря // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. -
2003. - №1. - С.53-56.
14. Chen O., Amaral J., Biancani P., Behar J. Excess membrane cholesterol alters human gallbladder muscle contractility and membrane fluidity // Gastroenterol. — 1999. - V 116. - P.678-685.
15. Jacuna M. Interaction between gall blade bile and mucosa; relevance to gall formation // Gut. — 1990. - Vol. 31. - P.568-570.
16. Laukkarinen J., Sand J., Saaristo R., Salmi J. Is bile flow reduced in patients with hypothyroidism? // Surgery. - 2003. - Vol. 133. - P.288-293.
17. Lee S.P., La Mont J. Т., Carey M. C. Role of gallbladder mucus hyper secretion in the evolution of cholesterol gallstones: studies in prairie dog // J. Clin. Invest. - 1981. - Vol. 67. - P.1712-1723.
18. Qi-Wei Xu, Shatter A. The potential site of impaired gallbladder contractility in animal model of cholesterol gallstone disease // Gastroenterol. - 1999. - Vol. 110. - P.251-257.
19. Volzke H., Robinson D.M., John U. Association between thyroid function and gallstone disease // World J. Gastroenterol. -2005. - Vol. 11. - P.5530-5534.
Информация об авторе: 420012, г. Казань, ул. Муштари, 11, (843) 236-87-86; заместитель директора по лечебной части МСЧ ОАО «Татнефть» и г. Альметьевска, 423450 г. Альметьевск ул. Радищева, 67, тел. (8553) 311321, e-mail: [email protected] Трифонова Элла Викторовна - к.м.н., м.н.с. ЦНИЛ ГБОУ ДПО «КГМА»
Минздравсоцразвития России,
© САВЧЕНКО А.А., ГРИНШТЕЙН Ю.И., ПОТАПОВА М.В. - 2012 УДК 612.017: 616.72-002.77
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ И УРОВНЕЙ АКТИВНОСТИ НАД(Ф)-ЗАВИСИМЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ ЛИМФОЦИТОВ У СЕРОНЕГАТИВНЫХ И СЕРОПОЗИТИВНЫХ БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ
АРТРИТОМ
Андрей Анатольевич Савченко1'2, Юрий Исаевич Гринштейн2, Маргарита Валерьевна Потапова1 ('НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, директор - член-корр. РАМН, профессор В.Т. Манчук; 2Красноярский государственный медицинский университет имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ректор -
д.м.н., проф. И.П. Артюхов)
Резюме. При различных серовариантах ревматоидного артрита выявлены различия в иммунологическом состоянии и в уровнях активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов. Для серопозитивного варианта характерно более низкое содержание лимфоцитов, выраженное повышение ЦИК, снижение реакций липидного обмена, НАД-зависимого субстратного взаимодействия между циклом трикарбоновых кислот и реакциями аминокислотного обмена, понижением интенсивности малат-аспартатного шунта и вспомогательной дегидрогеназ-ной реакций цикла Кребса. Только при серонегативном варианте ревматоидного артрита понижается активность НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназы. Данные изменения отражают роль иммуно-воспалительных механизмов в генезе заболевания и являются метаболическими маркерами серовариантов ревматоидного артрита.
Ключевые слова: ревматоидный артрит, серопозитивный, серонегативный, НАД(Ф)-зависимые дегидрогеназы, лимфоциты.
THE IMMUNOLOGICAL STATE FEATURES AND LEVELS NAD(P)-DEPENDENT DEHYDROGENASES ACTIVITIES OF LYMPHOCYTES AT SERONEGATIVE AND SEROPOSITIVE PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS
A.A. Savchenko1,2, Yu.I. Grinstein2, M.V. Potapova1 ('Institute of Medical Problems of the North, Siberian Division, Russian Academy of Medical Sciences;
Krasnoyarsk State Medical University named after Prof. V.F. Voyno-Yasenetsky)
Summary. At various serovariants rheumatoid arthritis revealed differences in the immunological state and of NAD(P)-dependent dehydrogenases activities of lymphocytes. For seropositive variant is characterized by lower content of lymphocytes, pronounced increase in the CIC, reduction reactions of lipid metabolism, NAD-dependent substrate interaction between the citric acid cycle and the reactions of amino acid metabolism, decreasing the intensity of the malate-aspartate shunt, and an auxiliary dehydrogenase reactions of the Krebs cycle. Only with seronegative rheumatoid arthritis is reduced of NADP-dependent dehydrogenase glutamate activity. These changes reflect the role of immuno-inflammatory mechanisms in the genesis of the disease and metabolic markers are serovariants of rheumatoid arthritis.
Key words: rheumatoid arthritis, seropositive, seronegative, NAD(P)-dependent dehydrogenases, lymphocytes.
Ревматоидный артрит (РА), несмотря на достигнутые успехи в изучении и лечении, остается центральной проблемой современной ревматологии [2,9]. Это обусловлено, безусловно, большей распространенностью по сравнению с другими ревматическими заболеваниями, высоким процентом ранней инвалидизации больных и значительными социально-экономическими потерями для общества в целом, и семьи больного, в частности [2,5]. Указанные причины побуждают не только к постоянному поиску новых эффективных препаратов для лечения, но и к раскрытию патогенеза заболевания, который до настоящего времени остаётся полностью не изученным.
На сегодняшний день, исходя из определения ревматоидного фактора (РФ) в сыворотке крови больных, сохраняется разделение РА по серологическому варианту на серопозитивный и серонегативный. Гетерогенность РА по принадлежности к сероварианту отражается на клиниколабораторных проявлениях, характере течения заболевания, ответе на базисную терапию. При серопозитивном варианте РА (при повышении уровня изотипа 1§С-РФ) чаще встречаются системные проявления (васкулит, поражение слизистых, сердечно-сосудистой системы, ревматоидные узлы, синдром Фелти), выше уровень протеолитических ферментов сыворотки крови [4].
Констатируется, что развитие серологических вариантов РА определяется иммунными механизмами [7,9]. Однако иммунопатогенез заболевания требует уточнения. Одним из перспективных направлений, позволяющих охарактеризовать нарушения реактивности иммунной системы, является изучение метаболизма клеток иммунной системы. На сегодняшний день установлено, что функциональные проявления лимфоцитов, например, такие как дифференцировка, пролиферация, синтез рецепторов и цитокинов, осуществляются только при соответствующем изменении их метаболизма [3,12].
Целью данного исследования явилось изучение особенностей иммунологического состояния и активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов в зависимости от серологического варианта РА.
Материалы и методы
В исследование были включены 129 больных (женщин) с диагнозом РА, установленным в соответствии с критериями Американской коллегии ревматологов 1987 года с учетом дополнений, выпущенных в 2010 году (АСЯ) [6,8]. В группу с серонегативным вариантом были включены 65 больных, с серопозитивным - 64. На момент исследования больные находились на стационарном лечении в ревматологическом отделении ГКБ №20 (г. Красноярск), госпитализация была связана с усиле-
нием активности ревматоидного процесса. В каждой из групп были больные, поступившие на базисном лечении (64% и 64,6%) и не принимавшие такового более 1,5-2 лет (36% и 33,4%). Группы были сопоставимы по клиническим параметрам (табл. 1). Информированное согласие больных на участие в исследовании получено.
Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8 и CD19. Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли соотношение CD4+/CD8+. Концентрацию иммуноглобулинов А, М
и О в сыворотке крови определяли методом радиальной иммунодиффузии в агарозном геле по Манчини. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови изучали методом селективной преципитации в полиэтиленгликоле. Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови проводили биолюминесцентным методом [3], которым определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФМДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАДи НАДН-зависимой реакции малатдегидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ- и НАДФН-зависимой глута-матдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД- и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратде-гидрогеназ (НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ, соответственно) и глутатионредуктазы (ГР). Активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови выражали в ферментативных едини-
Таблица 1
Клиническая характеристика обследованных больных с серонегативным и серопозитивным вариантом РА
Показатели Количество больных РА
Серонегативный вариант Серопозитивный вариант
абс. % абс. %
Количество больных 65 50,4 64 49,6
Средний возраст, годы 46,2 50,4
Длительность болезни, мес. 71,8 106,0
Активность заболевания по DAS, баллы
Умеренная 4 6,2 1 1,6
Высокая 61 93,8 63 98,4
Клиническая стадия
Ранний 5 7,7 5 7,8
Промежуточный 11 16,9 7 10,9
Длительный 49 75,4 52 81,3
Рентгенологическая стадия
I 8 12,3 4 6,3
II 26 40,0 23 35,9
III 25 38,5 32 50
IV 6 9,2 5 7,8
ВАШ, баллы 68,5 64,0
Среднее количество припухлых суставов 7 7
Среднее количество болезненных суставов 18 20
Средняя скованность, мин 244 313
HAQ, баллы 28,5 30,8
Таблица 3
Состояние клеточного иммунитета у серонегативных и серопозитивных больных РА (Ме, С25-С75)
Показатели Контроль n=156 1 Серонегативные n=65 2 Серопозитивные n=64 3
Ме С25<75 Ме С25-С75 Ме С25<75
Ig A, г/л 2,13 1,32-3,20 3,15 2,20-3,90 3,10 2,55-3,60
р1=0,008 р1<0,001
Ig M, г/л 1,25 | 0,60-1,80 1,75 | 1,60-1,95 1,70 | 1,35-1,90
р1<0,001 р1<0,001
Ig G,г/л 11,20 | 8,60-15,00 14,90 | 13,90-16,60 15,90 | 13,80-17,55
р1=0,001 р1<0,001
ЦИК, о.е. 30,0 | 15,0-70,0 71,00 | 47,00-95,00 93,00 | 70,00-140,00
р1<0,001 р1<0,001 р2=0,010
Примечание: р1 - статистически значимые различия с показателями контрольной группы; р2 - -*- с показателями серонегативных больных РА.
цах (1 Е=1 мкмоль/мин [1]) на 104 клеток.
Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 про-центилей (С25 и С ). Статистическая значимость различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 8.0 (StatSoft Inc., 2007). Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез р=0,05.
Результаты и обсуждение
При исследовании состояния клеточного звена иммунной системы у серонегативных и серопозитивных больных РА обнаружено сходство в изменении показателей в зависимости от контрольных уровней (табл. 2). Так, независимо от серологического варианта РА у больных снижается относительное содержание cDз+-лимфоцитов и величина соотношения CD4+/CD8+. Также независимо от серологического варианта у больных РА понижается процентное и абсолютное количество CD4+-клеток и повышается относительное и абсолютное содержание CD19+-лимфоцитов. Только у больных с серопозитивным вариантом РА в периферической крови снижается процентное и абсолютное количество лимфоцитов и аб-
солютный уровень CD3+-клеток.
При исследовании гуморального звена иммунной системы при РА выявлено большее сходство изменений исследуемых показателей у больных с обоими серова-риантами РА относительно контрольных уровней (табл. 3). Независимо от серологического варианта РА у больных обнаружено повышение концентрации А, М,
О и ЦИК в сыворотке крови. Однако количество ЦИК у больных с серопозитивным вариантом РА повышается статистически значимо выше, чем у больных с серонегативным вариантом РА.
Исследование активности НАД-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови позволило установить, что
независимо от сероварианта РА у больных снижается активность Г3ФДГ, ЛДГ и МДГ (рис. 1). Однако активность ЛДГ в лимфоцитах больных с серопозитивным РА понижается статистически значимо ниже, чем у серонегативных больных. Только у серопозитивных больных РА статистически значимо относительного контрольного диапазона понижается активность НАДГДГ.
Уровни активности НАДФ-зависимых у больных РА изменяются в зависимости от серологического варианта заболевания (рис. 2). Только у больных с серопозитивным вариантом РА в лимфоцитах крови снижается активность НАДФМДГ и НАДФИЦДГ. Только у больных с серонегативным вариантом РА понижается активность НАДФГДГ.
При исследовании уровней активности НАДН-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови больных РА обнаружено, что независимо от серологического варианта заболевания снижается активность НАДН-ЛДГ (рис. 3). Только у серопозитивных больных РА в лимфоцитах крови понижается активность НАДН-МДГ и НАДН-ГДГ.
Анализ полученных результатов позволяет охарактеризовать состояние иммунной системы и метаболизма лимфоцитов у больных РА, в том числе с учётом серологического варианта. Со стороны клеточного звена иммунной системы у больных РА выявляется дисбаланс популяционного состава лимфоцитов крови: снижение содержания Т-лимфоцитов и повышение количества В-лимфоцитов. Причем снижение количества Т-лимфоцитов осуществляется за счет фракций Т-хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов, но с более выраженным понижением последних, в результате чего снижается величина коэффициента CD4+/CD8+. Такие изменения в популяционном составе лимфоцитов крови характерны для больных РА [10,14]. Высокий уровень иммуноглобулинов связан с увеличением количества В-лимфоцитов. Патогенетически определяется высокий уровень ЦИК.
Выраженных характерных особенностей со стороны иммунологических показателей у больных с серопозитивным вариантом РА не обнаружено. Характерным для данного типа заболевания является снижение содержания лимфоцитов в периферической крови и более высокая, чем у больных с серонегативным вариантом РА, концентрация ЦИК.
В то же время со стороны метаболизма лимфоцитов обнаружены более выраженные различия в зависимости от серологического варианта РА. В целом, метаболизм лимфоцитов крови у больных РА характеризуется низкой активностью Г3ФДГ - фермента, который осуществляет перенос продуктов липидного катаболизма на реакции гликолиза [1,13]. При этом низкая активность субстратного потока по гликолизу характеризуется пониженным уровнем анаэробной реакции ЛДГ. Только при серопозитивном варианте РА в цитоплаз-
Таблица 2
Состояние клеточного иммунитета у серонегативных и серопозитивных больных РА (Ме, С25-С75)
Показатели Контроль n=156 1 Серонегативные n=65 2 Серопозитивные n=64 3
Ме С25-С75 Ме С25-С75 Ме С25-С75
Лейкоциты, 109/л 5,75 4,80-7,60 6,50 5,00-7,90 6,50 5,30-7,80
Лимфоциты, % 36,0 29,0-45,0 30,5 24,0-33,0 27,0 23,0-34,0
р1<0,001
Лимфоциты, 109/л 2,10 | 1,52-2,75 2,15 | 1,60-2,49 1,80 | 1,30-2,45
р1=0,042
CD3+, % 66,0 | 60,0-72,0 50,0 | 48,0-65,0 58,0 | 42,5-67,5
р1=0,027 р1<0,001
CD3+, 109/л 1,31 | 0,95-1,82 1,14 | 0,94-1,29 1,10 | 0,60-1,54
р1=0,005
CD4+, % 42,0 | 34,0-48,0 23,0 | 20,0-31,0 27,0 | 19,0-37,5
р1<0,001 р1<0,001
CD4+, 109/л 0,77 | 0,53-1,20 0,49 | 0,35-0,62 0,48 | 0,33-0,73
р1=0,007 р1<0,001
CD8+, % 27,0 21,0-34,0 27,0 19,0-38,0 25,0 17,5-37,5
CD8+, 109/л 0,55 0,36-0,83 0,56 0,48-0,78 0,51 0,27-0,71
CD19+, % 14,0 10,0-17,0 21,4 17,6-25,6 21,5 15,9-28,3
р1=0,001 р1<0,001
CD19+, 109/л 0,27 | 0,18-0,39 0,41 | 0,29-0,60 0,35 | 0,27-0,52
р1=0,020 р1=0,002
CD4+/CD8+ 1,50 | 1,10-1,88 0,89 | 0,74-1,20 1,16 | 0,87-1,37
р1=0,002 р1<0,001
Примечание: р1 - статистически значимые различия с показателями контрольной группы.
а)
б)
Р!=0,047 Р1<0,001
,-4—,
120,0
100,0
80,0
60,0
ч
ч
40.0
20.0 0,0
Р1<0,001
Р1<0,001 Р2=0,018
□ Контроль □Серонегативные В Серопозитивные
□ Контроль □Серонегативные ОСеропозигивные
в)
г)
160,0
140.0
120.0 Ы 100,0
г
80,0 2 60,0
40.0
20.0 0,0
Р!=0,022 р!<0,001
у _
□ Контроль □ Серонегативные □ Серо позитивные
Р1=0,022
□ Контроль □Серонегативные В Серопозитивные
Примечание: р1 - статистически значимые различия с показателями контрольной группы; р2 - -*- с показателями серонегативных больных РА.
Рис. 1. Активность НАД-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов у серонегативных и серопозитивных больных РА.
матическом компартменте лимфоцитов обнаружено снижение активности НАДФМДГ - фермента, который определяется как ключевой в реакциях липидного анаболизма [15]. Следовательно, у больных серопозитивным вариантом РА в лимфоцитах крови нарушены реакции липидного обмена.
Лимфоциты являются клетками, энергетические потребности которых реализуются не только за счет анаэробных процессов, но и аэробного дыхания. При этом субстратный поток для ферментативных реакций митохондриального компартмента связан не только с аэробным гликолизом (снижен у больных РА), но и аэробной реакций ЛДГ, активность, которой понижена в лимфоцитах больных, и минимальный её уровень выявляется у больных с серопозитивным РА. В связи с недостаточностью субстратных потоков неудивительно, что в лимфоцитах больных РА выявляется низкая активность МДГ - фермента цикла трикарбоновых кислот. Особенностью метаболизма митохондриального компартмента лимфоцитов у больных серонегативным вариантом РА является низкая активность НАДФГДГ, которая осуществляет НАДФ-зависимый перенос субстратов с реакций аминокислотного обмена на цикл трикарбоновых кислот.
Характерным только для серопозитивного варианта РА является выраженное снижение активности НАД-зависимого субстратного взаимодействия между циклом Кребса и реакциями аминокислотного обмена через НАДГДГ. Также только в лимфоцитах больных серопозитивным вариантом РА снижена ключевая реакция малат-аспартатного шунта - НАДН-МДГ [1,11]. Можно предположить, что у больных серопозитивным вариантом РА в митохондриальном компар-тменте лимфоцитов нарушен комплекс НАД- и НАДН-зависимых ферментативных реакций, что, безусловно, отрицательно повлияет на уровень аэробной энергетики. Кроме того, только при серопозитивном варианте РА снижена одна из вспомогательных дегидрогеназных реакций цикла трикарбоновых кислот - НАДФИЦДГ, что уменьшает компенсаторные возможности при нарушении НАД-зависимого субстратного потока по циклу
Кребса. Можно предположить, что при серопозитивном РА развиваются регуляторнокомпенсаторные процессы, направленные на ингибирование функциональной активности лимфоцитов. При этом мишенью таких процессов является митохондриальный компар-тмент, который за счет аэробных процессов и интеграции всех видов обмена во многом определяет функционально-метаболические возможности лимфоцитов.
Таким образом, РА в целом характеризуется дисбалансом популяционного состава лимфоцитов крови (снижение содержания Т-лимфоцитов и повышением количества В-лимфоцитов) и увеличением концентрации иммуноглобулинов основных классов и ЦИК. При серопозитивном варианте РА отмечается низкое количество лимфоцитов крови и более выраженное увеличение содержания ЦИК. Изменения в метаболизме лимфоцитов крови у больных РА определяются недостаточностью субстратного переноса продуктов липидного обмена на гликолиз, интенсивностью терминальных реакций самого гликолиза и снижением активности МДГ. Характерной особенностью метаболизма лимфоцитов при серопозитивном варианте РА является снижение реакций липидного обмена, НАД-зависимого субстратного взаимодействия между циклом трикарбо-новых кислот и реакциями аминокислотного обмена, понижением интенсивности малат-аспартатного шун-
та и вспомогательной дегидрогеназной реакций цикла Кребса. Данные изменения отражают роль иммуно-воспалительных механизмов в генезе заболевания и являются метаболическими маркерами серовариантов ревматоидного артрита.
ЛИТЕРАТУРА
1. Биохимия / под ред. Е. С. Северина. - М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 784 с.
2. Насонова В.А., Фоломеева О.М., Эрдес Ш.Ф. Ревматические заболевания в Российской Федерации в начале XXI века глазами статистики // Тер. архив. - 2009. - №6.
- С.5-10.
а)
б)
Р1<0,001
р2=0,036
Р!=0,015
Ш ш
□ Контроль □ Серонегативные О Серопозитивные
□ Контроль □Серонегативные □ Серопозитивные
в)
70.0
60.0 ^ 50,0
40.0 | 30,0 X 20,0
10.0
Р1<0,001
ш
□ Контроль В Серонегативные □ Серопозитивные
Примечание: р1 - статистически значимые различия с показателями контрольной группы; р2 - -*- с показателями серонегативных больных РА.
Рис. 2. Активность НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов у серонегативных и серопозитивных больных РА.
О Контроль н Серонегативные В Серопозитивные
Примечание: р1 - статистически значимые различия с показателями контрольной группы; р2 - -*- с показателями серонегативных больных РА.
Рис. 3. Активность НАДН-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов у серонегативных и серопозитивных больных РА.
3. Савченко А.А., Сунцова Л.И. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом // Лаб. дело. - 1989. - №11. - С.23-25.
4. Сигидин Я.А., Гусева Н.Г., Иванова М.М. Диффузные болезни соединительной ткани (Системные ревматические заболевания): Руководство для врачей. - М.: Медицина, 2004.
- 640 с.
5. Эрдес Ш., Фоломеева О.М. Проблема ревматических заболеваний в России // Российский медицинский журнал. -
2004. - Т. 20. - С.1121-1122.
6. Aletaha D., Neogi T., Silman A.J., et al. 2010 Rheumatoid
arthritis classification criteria: an American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative // Ann. Rheum. Dis. - 2010. - Vol. 69. - P1580-1588.
7. Araujo J, Zocher M, Wallace K., et al. Increased rheumatoid factor interference observed during im-munogenicity assessment of an Fc-engineered therapeutic antibody // J. Pharm. Biomed. Anal. - 2011.
- Vol. 55. №5. - P1041-1049.
8. Arnett F.C., Edworthy S.M., Bloch D.A., et al. American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis // Arthr. Rheum. - 1988. - Vol. 31. - P315-324.
9. Barra L., Pope J., Bessette L., et al. Lack of seroconversion of rheumatoid factor and anti-cyclic citrullinated peptide in patients with early inflammatory arthritis: a systematic literature review. // Rheumatology (Oxford). - 2011. - Vol. 50. №2. -P.311-316.
10. Coaccioli S., Pinoca F., Giuliani M., et al. Definition of adult-onset rheumatoid arthritis from elderly-onset rheumatoid arthritis by studying T-lymphocyte subpopulations, their soluble receptors and soluble receptor of interleukin-2. // Clin Ter.
- 2007. - Vol. 158. №4. - P303-306.
11. Contreras L., Gomez-Puertas P., Iijima M., et al. Ca2+ activation kinetics of the two aspartate-glu-tamate mitochondrial carriers, aralar and citrin: role in the heart malate-aspartate NADH shuttle // J. Biol. Chem. - 2007. - Vol. 282. №10. - P7098-7106.
12. Jacobs S.R., Rathmell J.C. Lymphocyte selection by starvation: glucose metabolism and cell death // Trends Immunol. - 2006. - Vol. 27. №1. - P4-7.
13. Jeong D.W., Cho I.T., Kim T.S. Effects of lactate dehydrogenase suppression and glycerol-3-phosphate dehydrogenase overexpression on cellular metabolism // Mol. Cell. Biochem. - 2006. - Vol. 284. №1-2. - P1-8.
14. La D.T., Collins C.E., Yang H.T., et al. B lymphocyte stimulator expression in patients with rheumatoid arthritis treated with tumour necrosis factor alpha antagonists: differential effects between good and poor clinical responders // Ann. Rheum. Dis. -2008. - Vol. 67. №8. - P1132-1138.
15. Ohno Y., Nakamori T., Zheng H., Suye S. Reverse reaction of malic enzyme for HCO3-fixation into pyruvic acid to synthesize L-malic acid with enzymatic coenzyme regeneration // Biosci. Biotechnol. Biochem. - 2008. - Vol. 72. №5. -P1278-1282.
Информация об авторах: 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 3Г, e-mail: [email protected], Савченко Андрей Анатольевич - д.м.н., профессор руководитель лаборатории НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, заведующий кафедрой; Гринштейн Юрий Исаевич - д.м.н., профессор, заведующий кафедрой, e-mail: [email protected]; Потапова Маргарита Валерьевна - научный сотрудник, e-mail: [email protected]
© ДЬЯКОВИЧ О.А., ЧЕРНЯК Ю.И. - 2012 УДК: 615.9:577.1
ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ 2-Й ФАЗЫ БИОТРАНСФОРМАЦИИ КСЕНОБИОТИКОВ У КРЫС В УСЛОВИЯХ ИНГАЛЯЦИОННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ВИНИЛХЛОРИДА
Ольга Александровна Дьякович, Юрий Ильич Черняк (Научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека, Ангарск, директор - чл.-корр. РАМН, д.м.н., проф. В.С. Рукавишников)
Резюме. Исследовано состояние 2-й фазы биотрансформации ксенобиотиков печени крыс, подвергнутых хроническому ингаляционному воздействию винилхлорида. В изученных условиях установлено влияние данного соединения на содержание конечных продуктов основных реакций конъюгации в моче и уровень конъюгирующих агентов в гомогенате печени. Разнонаправленные изменения показателей, характеризующих состояние названной фазы биотрансформации, могут быть результатом компенсаторных механизмов.
Ключевые слова: винилхлорид, 2-я фаза биотрансформации ксенобиотиков, продукты реакций конъюгации, конъюгирующие агенты.
ASSESSMENT OF THE PHASE II XENOBIOTICS BIOTRANSFORMATION IN RATS EXPOSED TO
VINYL CHLORIDE INHALATION
O.A. Dyakovich, Yu.I. Chernyak (Institute of Occupational Health & Human Ecology SB RAMS, Angarsk, Russia)
