Научная статья на тему 'Особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -d-'

Особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -d- Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
136
23
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гематология и трансфузиология
WOS
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Область наук
Ключевые слова
ФЕНОТИП -D- / СИСТЕМА RH / PHENOTYPE -D- / RH SYSTEM

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Ламзин И.М., Соколова М.Н., Хайруллин Р.М., Минеева Н.В., Хапман М.Э.

Введение. Настоящее исследование посвящено редкому варианту фенотипа -D-. Впервые фенотип -Dобнаружили R. Race, R. Sanger и J. G. Selwyn в 1951 г. В России фенотип -Dбыл впервые обнаружен Мороковым в 1985 г. Обычно фенотип -Dобнаруживают при анализе причин посттрансфузионных осложнений или гемолитической болезни новорожденных, так как у таких больных выявляется высокий титр антител к отсутствующим антигенам. В настоящем исследовании фенотип -Dбыл выявлен в клинической лаборатории ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови» у первичного донора крови.Цель изучить особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -D-.Материалы и методы. Выявление фенотипа -Dиммуногематологическими методами проводилось с помощью автоматических анализаторов. Для подтверждения фенотипа -Dиспользовалось молекулярное типирование ДНК. Форма эритроцитов донора с фенотипом -Dоценивалась с помощью атомно-силового микроскопа, характеристики эритроидного ростка изучались с помощью автоматического гематологического анализатора. Результаты. Фенотип -Dбыл выявлен у первичного донора крови. Из-за крайней редкости фенотипа -Dи вследствие отсутствия запрограммированного алгоритма валидация результатов автоматическими анализаторами проходила некорректно. Решающее значение играла визуальная оценка гелевых ID-карт персоналом. Генотипирование подтвердило отсутствие специфичностей C, c, E, e, Cw гена RHCE. Гематологические показатели донора находились в пределах возрастной нормы. Оценка изображения цитологического препарата крови донора не выявила изменений формы эритроцитов и их размера.Заключение. Первичное определение фенотипа -Dс помощью автоматических иммуногематологических анализаторов может осложняться невозможностью валидации результатов, некорректной работой их программного обеспечения и необходимостью экспертной оценки проб крови персоналом. Рассматриваемый случай фенотипа -Dне сопряжен с изменениями формы эритроцитов и гематологических показателей крови.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Ламзин И.М., Соколова М.Н., Хайруллин Р.М., Минеева Н.В., Хапман М.Э.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Features of immunohematological and hematological parameters of a donor with a rare phenotype -D-

Background. This study is devoted to a rare variation of the -Dphenotype . The -Dphenotype was first discovered by R. Race, R. Sanger and J.G. Selwyn in 1951. In Russia, the phenotype -Dwas first discovered by V. Morokov in 1985. Typically, the -Dphenotype is detected when physicians examine post-transfusion complications or hemolytic disease of the newborn, since such patients demonstrate high antibody titres to absent antigens. In the present study, the -Dphenotype was detected in a primary blood donor at the clinical laboratory of the Ulyanovsk Regional Blood Transfusion Station (Ulyanovsk, Russia). Aim. To study specific features of immunohematological and hematological blood parameters in a donor with a rare variation of the -Dphenotype.Materials and methods. The detection of the -Dphenotype by immunohematological methods was carried out using automatic analysers. Molecular DNA typing was used to confirm the -Dphenotype. The shape of erythrocytes of the donor with the -Dphenotype was evaluated using an atomic force microscope. The characteristics of the erythroid lineage were studied using an automatic hematological analyser.Results. The -Dphenotype was detected in a primary blood donor. Due to the extreme rarity of the -Dphenotype and the lack of programmed algorithms, the validation of the results by automatic analysers was incorrect. Of critical importance was the visual assessment of gel ID cards by the medical staff. Genotyping confirmed the lack of C, c, E, e, Cw specificities in the RHCE gene. The hematological parameters of the donor were within the age norm. An assessment of the image of a cytological blood preparation did not reveal changes in the shape of erythrocytes and their size.Conclusions. The primary determination of the -Dphenotype using automatic immunohematological analysers can be complicated by the impossibility of validating the results, the incorrect operation of the installed software and the need for expert evaluation of blood samples by the staff. The presented case of the -Dphenotype was not associated with changes in the shape of erythrocytes and blood hematological parameters.

Текст научной работы на тему «Особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -d-»

K>]

ОСОБЕННОСТИ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ДОНОРА С РЕДКИМ ФЕНОТИПОМ -Б-

Ламзин И. М.1*, Соколова М. Н.1, Хайруллин Р. М.2, Минеева Н. В.3, Хапман М.Э.1

1ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови», 43201/, Ульяновск, Россия 2ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет», 43201/ Ульяновск, Россия 3ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства» 191024, Санкт-Петербург, Россия

BY 4.0

Введение. Настоящее исследование посвящено редкому варианту фенотипа -D-. Впервые фенотип -D- обнаружили R. Race, R. Sanger и J. G. Selwyn в 1951 г. В России фенотип -D- был впервые обнаружен Мороковым в 1985 г. Обычно фенотип -D- обнаруживают при анализе причин посттрансфузионных осложнений или гемолитической болезни новорожденных, так как у таких больных выявляется высокий титр антител к отсутствующим антигенам. В настоящем исследовании фенотип -D- был выявлен в клинической лаборатории ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови» у первичного донора крови.

Цель — изучить особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -D-.

Материалы и методы. Выявление фенотипа -D- иммуногематологическими методами проводилось с помощью автоматических анализаторов. Для подтверждения фенотипа -D- использовалось молекулярное типирование ДНК. Форма эритроцитов донора с фенотипом -D- оценивалась с помощью атомно-силового микроскопа, характеристики эритроидного ростка изучались с помощью автоматического гематологического анализатора. Результаты. Фенотип -D- был выявлен у первичного донора крови. Из-за крайней редкости фенотипа -D- и вследствие отсутствия запрограммированного алгоритма валидация результатов автоматическими анализаторами проходила некорректно. Решающее значение играла визуальная оценка гелевых ID-карт персоналом. Генотипирование подтвердило отсутствие специфичностей C, c, E, e, Cw гена RHCE. Гематологические показатели донора находились в пределах возрастной нормы. Оценка изображения цитологического препарата крови донора не выявила изменений формы эритроцитов и их размера.

Заключение. Первичное определение фенотипа -D- с помощью автоматических иммуногематологических анализаторов может осложняться невозможностью валидации результатов, некорректной работой их программного обеспечения и необходимостью экспертной оценки проб крови персоналом. Рассматриваемый случай фенотипа -D- не сопряжен с изменениями формы эритроцитов и гематологических показателей крови.

Ключевые слова: фенотип -D-, система Rh

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирование: исследование не имело спонсорской поддержки.

Для цитирования: Ламзин И.М. Соколова М.Н., Хайруллин Р.М., Минеева Н.В., Хапман М.Э. Особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -D-. Гематология и трансфузиология. 2020; 65(1): 52-60. https://doi.org/10.35754/0234-5730-2020-65-1-52-60

FEATURES OF IMMUNOHEMATOLOGICAL AND HEMATOLOGICAL PARAMETERS OF A DONOR WITH A RARE PHENOTYPE -D-

Lamzin I. M.1*, Sokolova M. N.1, Khayrullin R. M.2, Mineeva N. V.3, Khapman M. E.1

'Ulyanovsk regional blood transfusion station, 432017 Ulyanovsk, Russian Federation 2Ulyanovsk State University, 432017 Ulyanovsk, Russian Federation

3Russian Research Institute of Hematology and Transfusiology, 191024, St. Petersburg, Russian Federation

Background. This study is devoted to a rare variation of the -D- phenotype . The -D- phenotype was first discovered by R. Race, R. Sanger and J.G. Selwyn in 1951. In Russia, the phenotype -D- was first discovered by V. Morokov in 1985. Typically, the -D- phenotype is detected when physicians examine post-transfusion complications or hemolytic disease of the newborn, since such patients demonstrate high antibody titres to absent antigens. In the present study, the -D- phenotype was detected in a primary blood donor at the clinical laboratory of the Ulyanovsk Regional Blood Transfusion Station (Ulyanovsk, Russia). Aim. To study specific features of immunohematological and hematological blood parameters in a donor with a rare variation of the -D- phenotype.

Materials and methods. The detection of the -D- phenotype by immunohematological methods was carried out using automatic analysers. Molecular DNA typing was used to confirm the -D- phenotype. The shape of erythrocytes of the donor with the -D- phenotype was evaluated using an atomic force microscope. The characteristics of the erythroid lineage were studied using an automatic hematological analyser.

Results. The -D- phenotype was detected in a primary blood donor. Due to the extreme rarity of the -D- phenotype and the lack of programmed algorithms, the validation of the results by automatic analysers was incorrect. Of critical importance was the visual assessment of gel ID cards by the medical staff. Genotyping confirmed the lack of C, c, E, e, Cw specificities in the RHCE gene. The hematological parameters of the donor were within the age norm. An assessment of the image of a cytolog-ical blood preparation did not reveal changes in the shape of erythrocytes and their size.

Conclusions. The primary determination of the -D- phenotype using automatic immunohematological analysers can be complicated by the impossibility of validating the results, the incorrect operation of the installed software and the need for expert evaluation of blood samples by the staff. The presented case of the -D- phenotype was not associated with changes in the shape of erythrocytes and blood hematological parameters.

Keywords: phenotype -D-, Rh system

Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest. Financial disclosure: the study had no sponsorship.

For citation: Lamzin I.M., Sokolova M.N., Khayrullin R.M., Mineeva N.V., Khapman M.E. Features of immunohematological and hematological parameters of a donor with a rare phenotype -D-. Russian Journal of Hematology and Transfusiology (Gematologiya i transfuziologiya). 2020; 65(1): 52-60 (in Russian). https:// doi.org/10.35754/0234-5730-2020-65-1 -52-60

Введение

В настоящее время учреждения службы крови на основании существующих нормативных документов проводят определение антигенов эритроцитов, в том числе и антигенов системы Rh, у всех доноров РФ [1]. При использовании обозначения фенотип -D- имеются в виду следующие типированные специфичности: D+, C-, c-, E-, e. Обычно фенотип -D- обнаруживают при выявлении причин посттрансфузионных осложнений или гемолитической болезни новорожденных, так как у таких больных выявляется высокий титр антител к отсутствующим антигенам [2]. В настоящем исследовании фенотип -D- был выявлен в клинической лаборатории ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови» у первичного донора крови, а в последующем у его родного брата.

Впервые фенотип -D- обнаружили R. Race, R. Sanger и J.G. Selwyn в 1951 г. [3]. В России фенотип -D- был впервые обнаружен В. А. Мороковым в 1985 г. и исследован Т. М. Пискуновой и соавт. [4] при разборе клинического случая привычного невынашивания беременности женщины, также проживавшей на территории Ульяновской области. Для уточнения фенотипа было проведено молекулярное типирование ДНК исследуемого донора крови и его ближайших родственников. Кроме иммуногематологического выявления фенотипа и его генетического подтверждения были изучены некоторые показатели крови исследуемых лиц. Был проведен общий анализ крови с помощью автоматического гематологического анализатора для уточнения состояния эритроидного ростка. Для оценки формы эритроцитов в настоящей работе был применен атом-но-силовой микроскоп, который ранее уже использовался для исследования качества эритроцитов донорской крови, заготовленной на базе ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови» [5].

Цель — изучить особенности иммуногематологиче-ских и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -D-.

Материалы и методы

Исследование выполнено в ГУЗ « Ульяновская областная станция переливания крови» в соответствии с требованиями этических норм и принципов Декларации Хельсинки (1964 г.) со всеми последующими изменениями и дополнениями, а также действующего законодательства РФ. Все первичные документальные данные исследованных образцов крови были обезличены в соответствии с требованиями п. 3 ст. 6 действующего Федерального закона РФ 152-ФЗ «О персональных данных».

Для иммуногематологического исследования донора крови и его ближайших родственников (мать, отец, брат) был проведен сбор четырех образцов крови в вакуумные пробирки Vacuette с К3ЭДТА фирмы Greiner-

Bio-One (Австрия). Исследования на наличие антигенов AB0 и антигенов системы Rh (D, С, с, Е, е) проводились двумя методами. Первый метод — агглютинация эритроцитов в геле на иммуногематологическом анализаторе HEMOS SP компании Bio Rad (США). Выбор метода был обусловлен тем, что принцип гелевого метода позволяет с высокой степенью достоверности трактовать полученный результат при визуальной оценке. Второй метод — магнитизация эритроцитов на автоматизированном иммуногематологическом анализаторе QWALYS компании Diagast (Франция). Принцип метода магнитизации эритроцитов основан на использовании магнитных частиц в процессе подготовки образцов крови для исследований, которые абсорбируются на эритроцитах. Под действием магнитного поля эритроциты с абсорбированными магнитными частицами перемещаются в дно лунки и вступают в реакцию с сухим реагентом (агглютинация) [6].

Для подтверждения фенотипа было проведено молекулярное типирование ДНК [7]. Исследование проводилось в лаборатории изосерологии ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России. Для анализа использовали лейкоцитарную ДНК, которую выделяли с помощью набора ДНК-сорб-В («Амплипрайм») из образцов крови, отобранных в вакуумные пробирки Vacuette с К3ЭДТА фирмы Greiner-Bio-One (Австрия). Типирование проводили с помощью анализатора FluoVista. Молекулярная система детекции FluoVista основана на методе полиме-разной цепной реакции (ПЦР) с аллель-специфическими праймерами SSP и флуоресцентной детекцией «по конечной точке» производства компании Inno-train Diagnostik GmbH (Германия). Детекцию флуоресценции до и после проведения ПЦР осуществляли с помощью термоциклера С1000 Touch компании Bio Rad (США).

Для оценки состояния эритроидного ростка исследуемых лиц с фенотипом -D- был проведен общий анализ крови с помощью автоматического гематологического анализатора Sysmex 1000i (Япония). Образцы капиллярной крови, полученные путем прокола скарификатором кожи дистальной фаланги пальца, отбирали в микропробирки фирмы Sarstedt-Microvttte® 200 КЗ Е (Германия). Далее микропробирки устанавливали в специальные разъемы анализатора.

Исследование формы поверхности эритроцитов и их размера проводили с помощью атомно-си-лового микроскопа на базе лаборатории Научно-исследовательского технологического института ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет» Минобрнауки РФ. Атомно-силововая микроскопия — метод, основанный на измерении положения микрозонда, движущегося по поверхности образца, и обработке этой информации с помощью специальной компьютерной программы с построени-

ем изображения [8]. Для исследования образцов крови с помощью атомно-силового микроскопа готовили цитологические препараты: каплю капиллярной крови, полученную путем прокола скарификатором кожи ди-стальной фаланги пальца, наносили на чистое обезжиренное предметное стекло и равномерно распределяли краем пластикового шпателя. Препарат фиксировали методом высушивания на воздухе в течение 20 минут при комнатной температуре. Возможность сканирования с помощью атомно-силового микроскопа цитологических препаратов эритроцитов с фиксацией методом высушивания на открытом воздухе и получением корректных результатов приводится в работе M. Takeuchi и соавт. [9], при этом авторами отмечали, что высушивание эритроцитов практически не изменяло их форму. В данной работе использовали атомно-силовой микроскоп фирмы NT-MDT (Россия), модель Solver P47-Pro. Для создания изображений образцов применяли резонансный метод с генерируемой частотой 300 kHz. Сканируемая площадь образцов составляла 120 х 120 мкм. С помощью программы NOVA строили изображения поверхности препаратов. Далее на компьютерных моделях сканированных препаратов оценивали форму эритроцитов и их размер [10].

Результаты

Первоначальная диагностика антигенной структуры эритроцитов проводилась с помощью иммуногемато-логических методов. На рисунке 1 представлен протокол исследования, полученный с помощью автоматизированного иммуногематологического анализатора QWALYS, на котором можно увидеть, что в образцах крови пробанда и его брата (образцы C и D) отсутствуют антигены С, с, Е, е и К. При этом анализатор при валидации проведенного фенотипирования крови донора с отсутствующими антигенами системы Rh в графе «Результат» выводит ******* (рис. 1). Аппарат корректно интерпретировал фенотипы матери и отца, содержащие антигены системы Rh (образцы А и В). Предположительно это произошло из-за того, что вследствие исключительной редкости фенотипа -D- в программное обеспечение не был заложен алгоритм интерпретации подобного результата. При проведении исследования с использованием иммуноге-матологического анализатора Hemos SP обнаружили похожую проблему валидации результатов. Фенотипы пробанда и его брата были расценены программой

Таблица 1. Антигены эритроцитов пробанда и его родственников Table 1. Red blood cells antigens of the proband and his relatives

Исследуемые образцы: Test samples: Антигены эритроцитов: Red blood cells antigens:

Отец (Father) Oaß (I) D+ С+ с- Е- е+ К-

Мать (Mother) Oap (I) D+ С- с+ Е- е+ К-

Пробанд (Proband) Oaß (I) D+ C- c- E- e- K-

Брат (Brother) Oaß (I) D+ C- c- E- e- K-

как ошибочные, и протокол зафиксировать не удалось. Для демонстрации фенотипа образца крови пробанда приводилось изображение гелевой ID-карты компании Bio Rad (рис. 2). Результаты, полученные при исследовании образцов крови с помощью иммуногемато-логических методов, представлены в таблице 1.

Результаты, полученные с помощью молекулярного типирования ДНК, подтвердили отсутствие специ-фичностей C, c, E, e, Cw гена RHCE у пробанда и его брата. Ген RHD при этом в обоих случаях присутствовал. Типирование родителей полностью подтвердило фенотипы, выявленные иммуногематологическими методами. К сожалению, техническая возможность поиска всего разнообразия вероятных аллелей гена RHCE в рамках этого исследования отсутствовала. На рисунке 3 приведена фотография протокола молекулярного типирования ДНК пробанда c помощью наборов фирмы Inno-train Diagnostik GmbH (Германия). Исходя из теории сцепленного двухгенного наследования и учитывая то, что дети, вероятно, имеют гаплотип -D- в гомозиготном состоянии, можно предположить, что родители имеют гаплотип -D- в гетерозиготном состоянии [11]. Генотип исследованных в настоящей работе лиц можно представить следующим образом: отец: CDe/-D- или Cde/-D-; мать: cde/-D- или cDe/-D-; про-банд и его брат: -D-/-D-.

Для оценки состояния эритроидного ростка было проведено исследование образцов крови с помощью автоматического гематологического анализатора. Результаты стандартных гематологических показателей приведены в таблице 2. У исследуемых лиц с фенотипом -D- не выявлено отклонений показателей, характеризующих состояние эритроцитов: количество

Таблица 2. Гематологические показатели крови пробанда и его брата Table 2. Hematological blood indicators of the proband and his brother

RBC (1012/l) HGB (g/l) HCT (%) MCV (fl) MCH (pg) MCHC (g/l) RDW-SD (fl) RDW-CV (%)

Пробанд (Proband) 5,45 155 44,4 81,5 28,4 349 39,0 13,4

Брат (Brother) 5,29 154 42,7 80,7 29,1 361 40,8 14,0

эритроцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит, средний объем эритроцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците и его концентрация, стандартное отклонение и коэффициент вариации распределения популяции эритроцитов по величине находились в пределах возрастной нормы. Изображения цитологических препаратов крови пробанда и его брата, полу-

ченные с помощью атомно-силового микроскопа, подтвердили отсутствие изменений формы эритроцитов и их размера (рис. 4 и 5). Большинство эритроцитов имели двояковогнутую форму и типичный для этого типа клеток размер 7—9 мкм. Для сравнения приведено контрольное изображение цитологического препарата донора крови с фенотипом 0+ С+ с— Е+ е- (рис. 6).

Больной Patient Номер пробы Sample Результат Result

A 078 050608 078 050608 078 050608 O+D+C+c-E-e+K-

B 077 050608 077 050608 077 050608 O+D+C-c-E-e+K-

C 076 050608 076 050608 076 050608 XX XXXX X

D 075 050608 075 050608 075 050608 XX XXXX X

Реагенты Reagents Штрихкод Barcode Номер партии Lot number Срок годности Storage time

Плашка № (Plate #) 6830021980201765 802 гггг.ММ.дд

MagneLys 116270493158 627 гггг.ММ.дд

BromeLine 107210980392 721 гггг.ММ.дд

HemaLys A1 S1 204309040418 43 гггг.ММ.дд

HemaLys B S1 224309040178 43 гггг.ММ.дд

Рисунок 1. Изображение протокола исследования образцов крови пробанда и его родственников, полученного с помощью автоматического иммуногематологическогс анализаторе

Figure 1. The protocol of the study of blood samples from the proband and his relatives using an automatic immunohematological analyser

Рисунок 2. Изображение гелевой ID-карты донора с фенотипом делеций Figure 2. The gel ID-card of the donor 'with the deletion phenotype

Fie Order Organisation Ejtiai e ~

Iг validation

ЮОГаа 119

P Older Vi'l.^.i

mama явс^ипг

oapa RBC^EFmr

геоелок | RBC-vERVly I 28 09 201S 00 49 13

RHD ЕжтОЗ ExonlC E*cn5 RHCE

Ket KEL2(k|

K*M JK1(A) JKi(B)

Oirdy FY1(A) FY2(8)

МЫ MNS1(M)

Ss MliS3(S] MHS1(.) Dombrock 001(A)

pti

С £ W e * KEL1[K)

FY* FY null MHSiiHJ

U«ai(MY) U«JI(P2)

ооги

t ННОЕяМВ

• fttHOEBHitO

• ИНОЕплА

I PHCrpii

2 RHCEC

2 RHCE E

2 ЯНСЕИ

2 ЯНСЕс

2 DHCEl

1 KSIhELlOC

• KrtklUiU

• XXHJklW

• ПИЙЖЗ®

а

■ DuflFtm

X amrtx

■ i OAFYn«

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

:■

i irnimem

а Si «еда

t Ssiwsafl)

i Ssli-am«)

t аОчаг^П

■ DwiftM^ 001(4

i

Рисунок 3. Изображение протокола молекулярного типирования ДНК донора с фенотипом делеций Figure 3. Molecular DNA typing protocol of the donor with the deletion phenotype

Рисунок 4. Изображение цитологического препарата крови пробанда, полученное с помощью атомно-силового микроскопа

Figure 4. An atomic force microscope image of a cytological blood preparation from the proband

Рисунок 5. Изображение цитологического препарата крови брата пробанда, полученное с помощью атомно-силового микроскопа

Figure 5. An atomic force microscope image of a cytological blood preparation from the proband's brother

Рисунок 6. Изображение цитологического препарата крови донора с фенотипом D+ С+ с- Е+ е-, полученное с помощью атомно-силового микроскопа Figure 6. An atomic force microscope image of a cytological blood preparation from a donor 'with the phenotype D+ С+ с- Е+ е-

Обсуждение

В настоящей работе продемонстрированы особенности выявления фенотипа -D- с помощью современного оборудования и интерпретации полученных результатов специализированным программным обеспечением. Несмотря на укомплектованность современных центров крови и лечебных учреждений соответствующими анализаторами, квалификация и опыт персонала могут сыграть решающую роль в принятии решений в нетипичных ситуациях. В случаях ошибок, выявляемых в работе автоматической аппаратуры иммуногематологических лабораторий, необходимо производить визуальную оценку гелевых ID-карт и анализ полученных результатов.

Учитывая редкость выявления фенотипа -D-, представлялось интересным проанализировать этиологию его возникновения. По данным R. Race и R. Sanger [12], у большинства выявленных лиц с фенотипом -D-родители состояли в родстве. При подробном сборе анамнеза у родителей пробанда выявлено, что их близкие родственники проживают на территории небольшого населенного пункта Ульяновской области, в котором они познакомились и создали семью. Принимая во внимание тот факт, что традиционно представители национальности, к которой принадлежат оба родителя, вступают в брак предпочтительно с представителями той же национальности, предположение о дальнем родстве родителей исследуемых лиц полностью исключить невозможно. Это может объяснять наличие у обоих родителей редкого гаплотипа -D-.

Антигены системы Rh являются структурными частями мембраны эритроцитов и принимают участие в обменных процессах, а их полное отсутствие, так называемый фенотип Rh , сопровождается изменением формы эритроцитов и склонностью к гемолизу [13]. Проведенные исследования образцов крови с помощью автоматического гематологического анализатора и атомно-силового микроскопа не выявили изменений эритроидного ростка и формы эритроцитов. Отсутствие патологии мембраны эритроцитов в рассматриваемом случае, вероятно, связано с наличием других специфичностей системы Rh.

Наличие редкого фенотипа -D- сопровождается опасностью выработки высокого титра антиэритроци-тарных аллоантител к отсутствующим антигенам C, с, E, e, Cw при трансфузии донорских эритроцитов [14].

Литература

1. Постановление Правительство Российской Федерации от 22 июня 2019 г. № 797 «Об утверждении правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов».

2. Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека: Руководство по им-муносерологии. М.: ИП Скороходов В.А., 2011. 243 с.

3. Race R., Sanger R., Selwyn J.G. A possible deletion in a human Rh chromosome: a serological and genetical study. Brit. J. Exp. Path. 1951; 32: 124-35.

4. Пискунова Т.М., Мороков В.А., Шамшина Н.М., Тананов А.Т., Зотиков Е.А. Редкий генотип системы Резус Rh (-D-/-D). Гематология и трансфузио-логия. 1988; 34(10): 45-47.

5. Lamzin I, Khayrullin R. The quality assessment of stored red blood cells probed using atomic force microscopy. Anat Res Int. 2014; 869683. DOI: 10.1155/2014/869683.

6. Минеева Н.В., Бутина Е.В. Иммуногематологическое обследование доноров крови и (или) ее компонентов и реципиентов: Методологические указания. СПб., 2017 45 с.

7 Каландаров Р.С., Головкина Л.Л., Васильева М.Н. и др. Генотипирование групп крови систем АВО и резус у пациентов после множественных гемо-трансфузий. Онкогематология. 2017; 12(2): 70-9. DOI: 10.17650/18188346-2017-12-2-70-79.

8. Горшкова Е., Плескова С., Михеева Э. Атомно-силовая микроскопия клеток крови человека. Наноиндустрия. 2012; 34(4): 50-3.

9. Takeuchi M, Miyamoto H, Sako Y. et al. Structure of the erythrocyte membrane skeleton as observed by atomic force microscopy. Biophys J. 1998; 74(5): 2171-83.

10. Ламзин И.М., Хайруллин Р.М., Хапман М.Э. Оценка структуры популяции эритроцитсодержащих сред, находящихся на хранении в банке крови, по данным атомно-силовой микроскопии. Вестник современной клинической медицины. 2014; (7): 16-20.

11. Tippett P. Rh Blood group system: genes 1,2 or 3? Biotest Bulletin. 1997; 5: 393-8.

12. Race R., Sanger R. Blood Groups in Man. 6-th ed. Blackwell scientific publications. 1975. 659 p.

13. Cartron, J.P. RH blood group system and molecular basis of Rh-deficiency. Best Pract Res Clin Haematol. 1999; 12(4): 655-89. DOI: 10.1053/beha.1999.0047

14. Оловникова Н.И., Николаева Т.Л., Митерев Г.Ю. Иммуногематологическое обследование больных перед трансфузией донорских эритроцитов: пути оптимизации и улучшения качества тестирования. Справочник заведующего КДЛ. 2014; (6): 34-6.

В связи с этим для исключения потенциальной иммунизации исследуемым лицам было рекомендовано проведение процедуры аутодонорства с последующим замораживанием эритроцитов. Этот метод позволяет хранить эритроциты в течение нескольких лет и осуществлять аутотрансфузию в случае возникновения показаний.

Таким образом, первичное определение фенотипа -D- с помощью автоматических иммуногематоло-гических анализаторов может осложняться невозможностью валидации результатов, некорректной работой их программного обеспечения и необходимостью экспертной оценки проб крови персоналом. Рассматриваемый случай фенотипа -D- не сопряжен с изменениями формы эритроцитов и гематологических показателей крови.

References

1. Resolution of the Government of the Russian Federation of June 22, 2019, No. 797 "On approval of the rules for the producing, storing, transportation and clinical use of donor's blood and its components" (in Russian).

2. Donskov S.I., Morokov V.A. Human blood types: a guide to immuno-serology. Moscow: IP Skorokhodov V.A., 2011. 243 p. (in Russian).

3. Race R., Sanger R., Selwyn J.G. A possible deletion in a human Rh chromosome: a serological and genetical study. Brit. J. Exp. Path. 1951; 32: 124-135.

4. Piskunova T.M., Morokov V.A., Shamshina N.M., Tananov A.T., Zotikov E.A. Rare Rh genotype of the system Rh (-D-/-D). Gematologiya i transfuziologiya. 1988; 34(10): 45-7 (in Russian).

5. Lamzin I, Khayrullin R. The quality assessment of stored red blood cells probed using atomic force microscopy. Anat Res Int. 2014; 869683. DOI: 10.1155/2014/869683.

6. Mineeva N.V., Butina E.V. Immunohematological research of blood donors and /or its components and recipients: Methodological guidelines. St. Petersburg, 2017 45 p. (in Russian).

7. Kalandarov R.S., Golovkina L.L., Vasil'eva M.N. i dr. Genotyping of ABO blood groups and rhesus of patients after multiple blood transfusions. Onkoge-matologiya. 2017; 12(2): 70-9. DOI: 10.17650/1818-8346-2017-12-2-70-79 (in Russian).

8. Gorshkova E., Pleskova S., Mikheeva E. Atomic force microscopy of human blood cells. Nanoindustriya. 2012; 34(4): 50-3 (in Russian).

9. Takeuchi M. et al. Structure of the erythrocyte membrane skeleton as observed by atomic force microscopy. Biophys J. 1998; 74(5): 2171-83.

10. Lamzin I.M., Khayrullin R.M., Khapman M.E. Evaluation of the population structure of the storing in a blood bank erythrocytes using atomic force microscopy. Vestnik sovremennoy klinicheskoy meditsiny. 2014; 7(5): 16-20 (in Russian).

11. Tippett P. Rh Blood group system: genes 1,2 or 3? Biotest Bulletin. 1997; 5: 393-8.

12. Race R., Sanger R. Blood Groups in Man. 6-th ed. Blackwell scientific publications. 1975. 659 p.

13. Cartron, J.P. RH blood group system and molecular basis of Rh-deficiency. Best Pract Res Clin Haematol. 1999; 12(4): 655-89. DOI: 10.1053/beha.1999.0047

14. Olovnikova N.I., Nikolaeva T.L., Miterev G.Yu. Immunohematological examination of patients before transfusion of donor red blood cells: ways to optimize and improve the quality of testing. Spravochnik zaveduyushchego KDL. 2014; (6): 34-6 (in Russian).

Информация об авторах

Ламзин Иван Михайлович*, кандидат медицинских наук, заведующий

отделением заготовки крови и ее компонентов ГУЗ «Ульяновская областная

станция переливания крови»,

e-mail: ivanlamzin@gmail.com;

ORCID: https://orcid.org/00 00-00 02-7660-8843

Соколова Марина Николаевна, врач клинической лабораторной диагностики высшей категории, заведующая клинической лабораторией ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови», e-mail: marina.sokol-mare@yandex.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3327-7706

Хайруллин Радик Магзинурович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой анатомии человека ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет», e-mail: prof.khayrullin@gmail.com; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2796-7508

Минеева Наталья Витальевна, доктор биологических наук, профессор, руководитель лаборатории изосерологии ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», e-mail: a_mineev@mail.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7137-8877

Хапман Марат Эрикович, кандидат медицинских наук, главный врач ГУЗ «Ульяновская областная станция переливания крови», e-mail: hme19191@gmail.com; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-6144-1019

* Автор, ответственный за переписку

Поступила: 21.09.19 Принята к печати: 25.12.2019

Information about the authors

Ivan M. Lamzin*, Cand. Sci. (Med.), Head of Blood Component Production Department, Ulyanovsk Regional Blood Transfusion Station e-mail: ivanlamzin@gmail.com

Marina N. Sokolova, Pathologist the Highest Qualification Category, Head of the Clinical Laboratory, Ulyanovsk Regional Blood Transfusion Station e-mail: marina.sokol-mare@yandex.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3327-7706

Radik M. Khairullin, Dr. Sci. (Med.), Prof., Head of the Department of Human Anatomy, Ulyanovsk State University, e-mail: prof.khayrullin@gmail.com; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2796-7508

Natalya V. Mineeva, Dr. Sci. (Biol.), Prof., Head of the Isoserology Laboratory, Russian Research Institute of Hematology and Transfusiology, e-mail: a_mineev@mail.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7137-8877

Marat E. Hapman, Cand. Sci. (Med.), Chief Doctor, Ulyanovsk Regional Blood

Transfusion Station

e-mail: hme19191@gmail.com;

ORCID: https://orcid.org/0000-0001-6144-1019

* Corresponding author

Received 21 Sep 19 Accepted 25 Dec 2019

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.