CC BY
110
Таблица 2
Изменение инструментальных и гормональных показателей у больных с синдромом тиреотоксикоза на фоне базисного лечения и комбинированной терапии с эпифамином
Инстру-ментальные и гормональные показатели (п=27) Единицы измерения 1-я группа (п=12) 2-я группа (п=13)
До лечения я й ^ о * О ^ С л Р До лечения После лечения Р
Объем щитовидной железы (см3) 30,1±8,3 20,7±6,4 Р< 0,05 31,2±7,9 20,1±6,5 Р< 0,05
ТТГ мкМЕ/мл 0,02±0,01 0,019± 0,008 0,017± 0,009 0,016± 0,008
Т4 свободный пмоль/л 46,0±7,9 24,8±6,5 60,2±8,3 37,2±7,2
у всех пациентов с синдромом тиреотоксикоза. Очевидно, мелатонин, уровень которого возрастает при приеме эпифамина, проявляя снотворное и антидепрессивное действие, положительно влиял на общее состояние больных синдромом тиреотоксикоза [7, 9]. Известно, что под влиянием мелатонина повышается содержание гамма-аминомаслянной кислоты (ГАМК) и снижается уровень серотонина в среднем мозге и гипоталамусе. ГАМК является тормозным медиатором в центральной нервной системе, а снижение активности серотонинэргических механизмов приводит к уменьшению депрессивного состояния [8, 10]. При физикальном исследовании щитовидной железы наблюдалось уменьшение ее размеров у 69,3% больных. На фоне комбинированной терапии с эпифамином происходило уменьшение повышенной потливости у 69,3% больных. Характерно, что гипертермии кистей после проведения лечения не наблюдалось. Экзофтальма после проведения базисной терапии с эпифамином выявлено не было. Такой клинический признак, как снижение веса у больных с тиреотоксикозом, значительно не изменялся. После комбинированной терапии с эпифамином тахикардии не наблюдалось, и происходило уменьшение частоты сердечных сокращений в минуту на 20% (р<0,05). Более значимое изменение показателей числа сердечных сокращений у пациентов, принимающих эпифамин, может быть связано с тем, что при коррекции содержания мелатонина происходило торможение функции центральной нервной системы за счет повышения уровня ГАМК [10]. Кроме этого, мелатонин обладает ре-
лаксирующим действием на гладкую мускулатуру сосудов, действуя через рецепторы, находящиеся в мышечном слое и эндотелии [4]. По мнению некоторых авторов, мелатонин также может оказывать кардиопротекторное действие на сердечную мышцу [6, 11], что в свою очередь благоприятно влияет на функционирование сердечнососудистой системы у больных синдромом тиреотоксикоза. Анализ результатов клинической картины показал, что улучшение состояния при применении комбинированной терапии, включающей эпифамин, наблюдалось у 85% больных.
Во второй группе больных синдромом тиреотоксикоза средние значения систолического АД составляли 144 мм рт.ст., а диастолического АД -82 мм рт.ст. При проведении комбинированной терапии с эпифамином значительных отличий в изменении АД между группами больных не отмечалось. Так, после лечения с эпифамином средние значения систолического АД были 136 мм рт.ст., а диастолического АД - 81 мм рт.ст. (во всех случаях р>0,05).
Существенных изменений показателей электрокардиографического исследования у пациентов обеих групп не наблюдалось.
Показатели общего и биохимического анализов крови у больных первой и второй групп до лечения по сравнению с контрольным уровнем варьировали в основном в пределах нормы. После проведения курса лечения в первой группе больных, находящихся на традиционном лечении, и во второй группе пациентов, принимавших дополнительно к базисной терапии эпифамин, лабораторные показатели значительно не изменялись.
Из представленных в таблице 2 данных видно, что различий в изменении такого показателя, как объем щитовидной железы, между группами больных, находящихся на традиционном лечении и на комбинированной терапии с эпифамином, не наблюдалось. Концентрация ТТГ в первой группе больных после базисной терапии уменьшалась на 5% (р>0,05), концентрация свободного Т4 снижалась на 46% (р<0,05) по сравнению с результатами до лечения в стационаре. Во второй группе пациентов концентрации ТТГ и свободного Т4 снижались на 9% (р>0,05) и 38% (р<0,05) соответственно по сравнению с данными полученными до проведения терапии с эпифамином.
Таким образом, на основании проведённого исследования можно сделать следующие выводы.
1. В результате проведенных исследований выявлено более значительное улучшение общего состояния больных при комбинированной терапии с эпифамином по сравнению с группой пациентов, находящихся на стандартном лечении, что, по-видимому, связано с положительным действием данного препарата на симпатическую нервную систему.
2. У пациентов, принимающих эпифамин, наблюдалось более существенное уменьшение числа сердечных сокращений по сравнению с контрольной группой, что очевидно связано с корригирующем эффектом данного препарата на уровень мелатонина, способного оказывать кар-диопротекторное действие. Однако показатели электрокардиографического исследования практически не изменялись.
3. Применение эпифамина на фоне базисной терапии у больных с синдромом тиреотоксикоза в
соответствии с общим и биохимическим анализами крови побочных эффектов не оказывало.
ЛИТЕРАТУРА
1. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Дифференциальная диагностика и лечение эндокринных заболеваний: Руководство. - М.: Медицина, 2002. - 248 с.
2. Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Фадеев В.В. Эндокринология: Учебник. - М.: Медицина, 2000. - 352 с.
3. Зефирова Г.С. Заболевания щитовидной железы. -М.: Библиотека ДиаМир. - 1999. - С. 60-90.
4. Мелатонин в комплексном лечении больных сердечно-сосудистыми заболеваниями / Под ред. Р.М. Заславской. - М.: ИД "Медпрактика-М", 2005. - 192 с.
5. Хавинсон В.Х., Шутак Т.С. Применение эпиталами-на при инсулиннезависимом сахарном диабете. -СПб.: ИКФ "Фолиант", 2000. - 61 с.
6.Abete P., Bianco S., Calabrese C. Effects of melatonin in isolated rat papillary muscle // FEBS Letters. -1997. -Vol. 412, N 1. - P. 79-85.
7. Levine I., Khanounov I., Tabeeva G. Influence of pho-toterapy and melatonin on sleep structure and clinical manifestation in fibromyalgia patients // Sleep Research online. - 1999. - Vol. 2. - Suppl. 1. - P. 392.
8. Pang S.F. Neuroendocrinology of melatonin in reproduction: recent developments // J. Chem. Neuroanat. -1998.-Vol. 14. - P. 157-166.
9. Ralph C.L., Pelham R.W., MacBride S.E. Persistent rhythms of pineal and serum melatonin in cockerels in continuous darkness // J. Endocrinol. - 1974. - Vol. 63, N 2. - P. 319-324.
10. Reiter R.J., Stankov B. The Pineal Gland and it's hormones. - N.Y., 1995. - 233 p.
11. Tengattini S., Reiter R.J., Tan D.-X. Cardiovascular diseases: protective effects of melatonin // J. Pineal Research. - 2008. - Vol. 44, N 1. - P. 16-25.
S2
УДК 616.97:616.523:578.827.1]-097
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА ПАЦИЕНТОВ С ГЕНИТАЛЬНЫМ ГЕРПЕСОМ В СОЧЕТАНИИ С ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
© Лукашов М.И., Бибичева Т.В., Исаенко Т.П., * Тарасова Т.К.
Курский областной клинический кожно-венерологический диспансер, Курск; кафедра дерматовенерологии Курского государственного медицинского университета, Курск; кафедра внутренних болезней № 1 с курсом дерматовенерологии медицинского факультета Белгородского государственного университета, Белгород
E-mail: tbibitcheva@yandex.ru
В ходе исследования проведено изучение особенностей иммунного статуса пациентов с герпесвирусной инфекцией в сочетании с папилломавирусной инфекцией. Установлено, что для больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией наиболее характерны следующие изменения иммунного статуса: значительно увеличено содержание NK-клеток и изменен их фенотип в пользу CD16-56+ NK клеток; умеренно увеличено содержание CD8+ Т-клеток с существенным возрастанием их активационного состояния, что проявляется усиленной экспрессией молекул HLA-DR, альфа-цепи рецептора ИЛ-2 (CD25) и появлением клеток несущих одновременно молекулы CD45RA и CD45RO; снижено относительное содержание CD4+ Т-клеток (вследствие гиперплазии NK клеток) со сдвигом в пользу клеток "памяти" CD4+CD45RA-/RO+ и регуляторных CD4+25+ клеток; умеренный моноцитоз и повышение содержания палочкоядерных нейтрофилов; умеренное повышение уровня IgG и ЦИК. Данные изменения иммунного статуса свидетельствуют о хронической активной реакции иммунной системы на вирусную инфекцию, а также о начавшейся декомпенсации некоторых звеньев противоинфекционной защиты.
Ключевые слова: герпесвирусная инфекция, папилломавирусная инфекция, иммунная система.
SPECIFIC FEATURES OF IMMUNE STATUS OF PATIENTS WITH COMBINED HERPES SIMPLEX VIRUS
AND PAPILLOMA VIRUS INFECTION Lukashov M.I., Bibicheva T. V., Isaenko T.P., Tarasova T.K.
Kursk Regional Clinical Dermatovenerologycal Dispensary, Kursk;
Dermatovenerology Department of the Kursk State Medical University, Kursk;
Internal Diseases N 1 & Dermatovenerology Department of the Medical Faculty of the Belgorod State University, Belgorod The research was devoted to specific features of immune status of patients with combined herpes simplex virus and papilloma virus infection (HSV/HPV). The following changes has been revealed: significantly increased amount of NK-cells with prevalence of CD16-56+ NK phenotype; moderately increased amount of CD8+ Т-cells with expression of HLA-DR, а-chain of Il-2 (CD25) receptor and formation of cells carrying both CD45RA and CD45RO types of molecules; decreased relative amount of CD4+ Т-cells (as a result of hyperplasia of NK-cells) with shifted content of "memory" CD4+CD45RA-/RO+ cells and regulatory CD4+25+ cells; moderate monocytosis and increasing of band-formed neutrofiles; shifted levels of IgG and CIC. These changes are an evidence of a chronic active reaction of immune system on a viral infection as well as a beginning decompensation of some mechanisms of antiinfectious defense.
Keywords: herpes simplex virus infection, papilloma virus infection, immune system.
В 90-х годах ХХ столетия в России произошла эпидемия инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), которая по масштабам не имеет аналогов в индустриальных странах и наиболее четко документированная в отношении сифилиса. Считается, что в странах, где функционируют программы профилактики и лечения венерических заболеваний, распространение и спектр преобладающих инфекций постепенно меняются. Этот процесс получил название "эпидемиологического перехода инфекций, передаваемых половым путем". Как правило, сначала удается достигнуть контроля над бактериальными ИППП (мягкий шанкр, сифилис), затем уменьшается заболеваемость гонореей и трихомониазом, а при внедрении соответствующих программ - и хла-
мидиозом. После этого на переднем плане остаются вирусные ИППП (ВПГ, ВПЧ, ВИЧ). Однако именно элиминация этих возбудителей представляет собой наиболее сложную задачу [1].
Доказано, что микст-инфицирование, особенно вирус-вирусные (ВПГ - ЦМВ, ВПГ - ВПЧ) и полимикробные ассоциации способствуют суб-клиническому течению ГГ, а также являются кофакторами диспластических и неопластических процессов [5].
Основная роль в формировании противогер-петическоо иммунитета принадлежит клеточным механизмам, состояние которых во многом определяет как исход первичного инфицирования, так и частоту, и напряженность рецидивов заболевания [2]. Клеточный иммунитет играет и критиче-
скую роль в развитии ВПЧ-инфекции. Известно, что пациенты с нарушенным клеточным иммунитетом имеют более высокий уровень ВПЧ, индуцирующий как доброкачественные, так и злокачественные опухоли. Установлено, что цитотокси-ческая реакция Т-лимфоцитов на онкоиндуцирующие протеины более часто выявляется у пациенток с ВПЧ без неоплазии. Это подтверждает роль клеточного иммунитета в предотвращение развития заболевания [3, 4, 6].
Целью настоящего исследования явилось изучение иммунного статуса пациентов с герпесвирусной инфекцией в сочетании с папилломави-русной инфекцией (ПВИ).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Подбор пациентов в группу исследования осуществлялся на основании следующих критериев: добровольное информированное согласие пациента на участие в исследовании; мужчины и женщины в возрасте от 18 до 65 лет; объективно подтвержденный характер типичной формы и рецидивирующего течения герпетической инфекции гениталий; тяжелое течение генитального герпеса (обострения один раз в месяц и чаще; давность тяжелого течения заболевания не менее 1 года; подтверждение диагноза герпетической инфекции методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) и/или прямой иммунофлюоресценции (типирова-ние ВПГ-1/2 не проводилось); объективно подтвержденный характер экзофитной формы папил-ломавирусной инфекции (ПВИ); подтверждение диагноза ПВИ методом ПЦР; давность предшествующей противовирусной и/или иммуномодулирующей терапии более четырех месяцев.
При комплексном обследовании на ИППП 203 пациентов, страдающих рецидивирующим генитальным герпесом, ПВИ была диагностирована у 81 пациента (39,9%). В группу исследования были включены 22 человека в период рецидива герпетической инфекции и экзофитной формой ПВИ. Следует отметить, что у всех пациентов в анамнезе имело место рецидивирование ПВИ после различных методов деструкции па-пилломатозных элементов.
Исследование иммунного статуса проводили в отделе активации иммунитета ГНЦ Институт иммунологии Минздрава РФ. Кровь для системных иммунологических исследований получали из локтевой вены натощак в день исследования. Иммунный статус исследовали методами лазерной цитометрии, иммунодиффузии. Количество клеток и фенотип лимфоцитов, относящихся к различным популяциям, а также молекулярные маркеры активации, зрелости и функциональной
специализации клеток анализировали методом иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител и проточного лазерного цито-флюориметра FACSCalibur фирмы Becton Dickinson. Определение зрелых цитолитических CD8+ Т-лимфоцитов и NK-клеток ex vivo проводили по содержанию внутриклеточного перфорина методом проточной лазерной цитофлюорометрии. Концентрацию иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM определяли турбодиметрическим методом с помощью наборов фирмы Human, иммуноглобулина IgE - иммуноферментным методом с помощью наборов "Диа Плюс", циркулирующие иммунные комплексы - турбодиметрическим методом по скорости образования агрегатов в 3% и 4% поли-этиленгликоле.
При описании иммунного статуса мы использовали следующие показатели:
- процент случаев в анализируемой группе больных со значением показателя выше верхней границы нормы (ВН) или ниже нижней границы нормы (НН);
- m - среднее значение показателя в анализируемой группе;
- sd - стандартное отклонение показателя в анализируемой группе;
- коэффициент отклонения среднего значения показателя в анализируемой группе от среднего значения нормы (Km = m / mn, где mn - среднее значение нормы).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
У больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией имела место умеренная активация фагоцитарного звена. Это проявлялось увеличением количества моноцитов и палочкоядерных нейтрофилов. Гиперплазия звена моноцитов (474±185 кл./мкл) имела место у 67% (К=1,9) больных. Содержание палочкоядерных нейтрофилов (529±389 кл./мкл) было увеличено у 78% больных (К=3,1).
В целом, изменения звена фагоцитов у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией соответствовали наличию хронической инфекции.
Популяция NK-клеток у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией была существенно изменена (табл. 1).
Общее количество NK-клеток было увеличено у 78% (К=2,2) больных. При этом гиперплазия в основном затрагивала фенотип CD3"16"56+ NK-клеток (ВН=78%, К=2,5) и сопровождалась снижением удельного содержания основного фенотипа CD3"16+56+ NK-клеток (НН=72%, К=0,8).
Важно отметить, что у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией размножение и активация NK-клеток приводили к их дифференцировке в цитолитиче-ские NK-клетки с перфорином (ВН=57%, К=2,1).
Таблица 1
Свойства NK-клеток у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией
Тип клеток Единицы измерения Границы нормы т sd НН (%) ВН (%) Кт
СБ3"16/56+ КК-клетки процент от лимфоцитов 10-22 26 9 0 61 1,6
СБ3"16/56+ КК-клетки кл./мкл 170-400 616 300 0 78 2,2
Активированные HLA-DR+ КК- клетки процент от КК-клеток 5-16 16 15 11 28 1,5
Фенотип CD3"16+56" КК-клеток процент от КК-клеток 2,2-10 7 5 6 28 1,2
Фенотип CD3"16+56+ КК-клеток процент от КК-клеток 67-87 59 14 72 6 0,8
Фенотип CD3"16"56+ КК-клеток процент от КК-клеток 6,8-20 34 15 0 78 2,5
Цитолитические NK-клетки, содержащие перфорин процент от лимфоцитов 9-20 20 8 7 36 1,4
Цитолитические NK-клетки, содержащие перфорин кл./мкл 80-340 435 245 0 57 2,1
Таблица 2
Свойства CD4+ Т-клеток у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией
Тип клеток Единицы измерения Границы нормы т sd НН (%) ВН (%) Кт
CD4+ Т-клетки процент от лимфоцитов 33-49 32 6 67 0 0,8
CD4+ Т-клетки кл./мкл 480-950 759 258 17 28 1,1
"Наивные" CD4+CD45RA+/RO" Т-клетки процент от CD4+ Т-клеток 27-47 28 8 39 0 0,8
Активированные HLA-DR+ CD4+ Т-клетки процент от CD4+ Т-клеток 0 "Г 5 8 4 22 22 1,0
Активированные CD4+CD45RA+/RO+ Т-клетки процент от CD4+ Т-клеток 0-5 4 2 0 22 1,5
CD4+28" Т-клетки после активации процент от CD4+ Т-клеток 05 4 3 0 22 1,5
CD4+CD45RA"/RO+ Т-клетки "памяти" процент от CD4+ Т-клеток 46-66 68 9 0 50 1,2
Регуляторные CD4+CD25+ Т-клетки процент от CD4+ Т-клеток 14-20 41 6 0 100 2,4
В таблице 2 представлены данные о содержании и свойствах популяции СБ4+ Т-клеток в крови больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией.
Из представленных данных следует, что у больных ВПГ/ВПЧ-инфекцией общее количество СБ4+ Т-клеток находилось в пределах нормы, однако была существенно снижена доля СБ4 Т-клеток в популяции лимфоцитов (НН=67%, К=0,8). Уменьшение относительной доли СБ4+ Т-
клеток происходило вследствие увеличения относительной доли КК-клеток (табл. 2).
Был изменен и состав популяции СБ4 Т-клеток, а именно, снижалось содержание "наивных" СВ4+СБ45КА+/ЯО" Т-клеток (НН=39%, К=0,8) и возрастала доля СБ4+ Т-клеток "памяти" СВ4+СБ45КА"/ЯО+ (ВН=50%, К=1,2), что свидетельствовало об активном участии СБ4+ Т-клеток в иммунном ответе.
