CC BY
35
УДК 616-097-022
ОСОБЕННОСТИ ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ЗРЕЛОГО И СТАРЧЕСКОГО ВОЗРАСТА С ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЖЕЛУДКА И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ
М.Ю. Муслимова, Д.А. Альтман
Челябинский областной клинический терапевтический госпиталь ветеранов войн, г. Челябинск
Установлены достоверные различия в характере иммунного гомеостаза при Helicobacter pylori - ассоциированных заболеваниях желудочно-кишечного тракта у лиц старческого и зрелого возраста, характеризующиеся уменьшением с возрастом продукции специфических антител к Helicobacter pylori, процессов апоптоза лимфоцитов, ростом лабораторных маркеров воспаления (активности центрального компонента комплемента СЗ и уровня СОЭ) и перераспределением CD3, CD4, CD8 популяций лимфоцитов.
Ключевые слова: seasonal allergic rhinitis, students, sensibilization, specific immunotherapy, lymphocytes.
Язвенная болезнь (ЯБ) во многих странах мира, в том числе и в России, является самой распространенной среди заболеваний системы пищеварения. В последние годы можно отметить увеличение числа больных язвенной болезнью. Примерно 3 % взрослого населения страдает гастродуоденальными язвами и еще до 7 % болели этой формой патологии или находятся в группе риска [3, 5].
Известно, что язвенная болезнь чаще встречается в трудоспособном возрасте [8], однако в последние годы наблюдаются изменения в возрастной структуре заболеваемости. Ряд исследователей отмечают ювенизацию язвенной болезни, а по другим данным, она все чаще дебютирует у лиц пожилого возраста [4,10].
Уточнение состояния иммунной системы организма при ЯБ, и в первую очередь клеточного иммунитета, как важнейшего звена противомик-робной защиты и иммунорегуляции, ответственного за активность общих и местных защитных механизмов, необходимо не только для понимания закономерностей развития ЯБ, но и для обоснования критериев прогнозирования течения заболевания и показаний к применению иммунокорригирующей терапии ЯБ в разных возрастных группах.
Целью исследования явилась оценка иммунных показателей крови у пациентов с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки в двух возрастных группах - зрелом (35-60 лет) и старческом возрасте (75-90 лет).
Материалы и методы исследования
В исследование включено 43 пациента с ЯБ желудка и двенадцатиперстной кишки (ЯБДК). По возрасту, пациенты были разделены на две группы. В первую вошли 24 пациента в возрасте 35-60 лет, во вторую - 19 пациентов в возрасте 75-90 лет. Возрастная периодизация проведена в соответствии с классификацией периодов жизни
взрослого человека [6]. Таким образом, критериями включения были:
-верифицированный диагноз ЯБ в стадии обострения;
- зрелый возраст пациентов от 35 до 60 лет;
- старческий возраст пациентов от 75 до 90 лет.
Всем больным проводилось клиническое обследование по стандартной схеме, инструментальное исследование (фиброгастродуоденоскопия), лабораторное изучение иммунного статуса.
Изучались следующие показатели гуморального иммунитета: уровень специфических антител к антигенам Helicobacter pylori с помощью имму-ноферментного метода с использованием тест-системы («Вектор-бест» Новосибирск), уровни иммуноглобулинов А, М, G по Mancini G. et al. (1965) [11]; циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) по В. Гашковой с соавт., (1978); общая гемолитическая активность комплемента по 50 % гемолизу и активности его компонентов методом молекулярного титрования С1-С5 [2, 12].
Для оценки клеточного компартмента иммунной системы определяли абсолютное содержание популяций и субпопуляций лимфоцитов в крови непрямым иммунофлюоресцентным методом с моноклональными антителами производства объединения «Препарат» (Нижний Новгород). Определяли: количество Т лимфоцитов (CD3), Т хелперов (CD4), Т цитотоксических клеток (CD8), В лимфоцитов (CD22), естественных киллерных клеток (CD 16), число клеток с маркерами позитивной (CD25) и негативной (CD95) активации. Для морфологической оценки апоптоза окрашивание исследуемых лимфоцитов производили красителем Hoechst 33342 (Boehringer Mannheim) с учетом на микроскопе ЛЮМАМ - И1 числа клеток с морфологическими признаками апоптоза, к которым относится выраженная фрагментация ядра [13].
Проблемы здравоохранения
Статистическая обработка результатов производилась с использованием пакета программ STATISTICA vers. 6.
Результаты в таблице представлены в виде универсальной средней (медианы) и нижнего и верхнего квартилей. Достоверность различий установлена непараметрическим методом Манна-Уитни, при минимальном уровне достоверности < 0,05. Результаты исследования Общая группа обследуемых пациентов составила 43 человека. Это были больные, госпитализированные в гастроэнтерологическое отделение госпиталя. Общая характеристика пациентов, включенных в исследование, приведена в табл. 1. Как следует из табл. 1, число обследованных больных лица 35-60 лет (второй период зрелого воз-
раста по классификации периодов жизни взрослого человека) составило 24 человека. Несколько меньшей (19 больных), была группа пациентов старческого возраста.
Распределение больных по полу было в сравниваемых группах различным. У лиц 35-60 лет соотношение мужчин и женщин в группе было равно 23:1, у пациентов старше 75 лет соотношение мужчин и женщин оказалось приблизительно равным, и составило 10:9.
В 1 группе (35-60 лет) по локализации явно превалировала ЯБДК, которая встречалась в 20 случаях из 24. Во 2 группе (старше 75 лет) соотношение этих локализаций изменилось в пользу несколько более высокой частоты язвенной болезни желудка (7 случаев ЯБДК и 11 случаев ЯБЖ).
В 100 % случаев у больных обеих групп выявлен гистологически Helicobacter pylori. Результаты изучения характера иммунного ответа на развитие язвенной болезни, ассоциированной с Helicobacter pylori, у лиц сравниваемых возрастных групп представлены в табл. 2.
Как следует из приведенной таблицы, у пациентов сравниваемых возрастных групп достоверных различий в абсолютном содержании лейкоцитов, лимфоцитов крови и их основных популяций (Т, В, Т хелперов, Т цитотоксических клеток, NK-кпеток) не установлено.
При сопоставлении популяционно и субпопу-ляционного спектра лимфоцитов крови достоверно
отличались в сравниваемых группах лишь процентное содержание CD3, CD4, CD8 лимфоцитов. Относительное содержание этих популяций было существенно выше у пациентов старше 75 лет в сопоставлении с больными 35-60 лет. Рост процентного содержания иммунных клеток в крови без вариаций их абсолютного количества свидетельствует о перераспределении клеток в связи с усилением миграции и/или снижением их фиксации в очагах ульцерации.
В группе пациентов старческого возраста, в сопоставлении с больными зрелого возраста, произошло достоверное снижение абсолютного количества лимфоцитов, экспрессирующих маркер готовности к Fas-зависимому апоптозу (CD95), существенное, двукратное снижение численности
лимфоцитов с морфологическими признаками апоптоза в виде фрагментации ядра. Снижение числа клеток в циркуляции с готовностью к апоптозу и морфологическими признаками программированной клеточной смерти сопровождалось снижением индекса реализации апоптоза, который характеризует процент клеток, вступивших апоп-тоз, от общего числа лимфоцитов с готовностью к апоптозу. Установленная закономерность соответствует существующим представлениям, сложившимся в специальной литературе, об усилении риска развития аутоагрессивных процессов у стариков, исходя из ведущей роли апоптоза в элиминации аутореактивных клонов лимфоцитов [9].
В группе стариков более выраженными, чем у пациентов зрелого возраста, были лабораторные маркеры воспаления, отмечен рост активности центрального компонента комплемента СЗ и СОЭ. Увеличение активности СЗ, учитывая его ведущую роль в развитии воспаления, может свидетельствовать о росте провоспалительного потенциала комплементарной системы в старческом возрасте в ответ на действие такого патогена, как Helicobacter pylori.
Наиболее выраженные различия по иммунологическим показателям в двух сравниваемых возрастных группах установлены в уровнях специфических антител к Helicobacter pylori. У лиц 75-90 лет уровень антител к Helicobacter pylori был восьмикратно ниже в сравнении с пациентами 35-60 лет, что свидетельствует о более низком специ-
Таблица 1
Распределение больных ЯБ в группах по полу, возрасту, локализации язвы
Возрастные группы Группа 1 (35-60 лет) Группа 2 '75-90 лет) Всего
Пол М Ж М Ж
Количество больных 23 1 10 9 43
ЯБДК 19 1 3 4 27
я м S ЯБЖ 3 - 7 4 14
§ язва анастомоза - - - 1 1
О сочетанная патология ЯБЖ и ЯБДК 1 - - 1
Выявление Helicobacter pylori 23 1 10 9 43
Муслимова М.Ю., Альтман Д. A.
Особенности иммунитета у больных зрелого и старческого возраста с язвенной болезнью желудка...
Таблица 2
Показатели иммунитета у пациентов зрелого и старческого возраста
Показатели Группа 1 (35-60 лет) n = 24 Группа 2 (75-90 лет) n= 19 Достоверность отличий согласно тесту Манна-Уитни
Me QL-QU Me QL-QU Р
Лейкоциты 6,50 5,60-7,60 6,20 5,20-7,40 0,328
Лимфоциты % 34,00 26,00-38,50 30,00 22,00-36,00 0,189
Лимф. абс. 194,00 159,65-287,00 172,00 138,00-241,00 0,085
СД4/СД8 1,60 1,50-1,70 1,60 1,50-1,70 0,429
CD3 % 57,00 45,50-62,00 62,00 52,00-66,00 0,034
CD3 абс. сод. 1,12 0,99-1,30 1,05 0,91-1,17 0,142
CD4 % 35,00 26,50-36,00 37,00 33,00-38,00 0,026
CD4 абс. сод. 0,66 0,58-0,78 0,62 0,52-0,68 0,195
CD8 % 20,00 17,50-22,00 24,00 20,00-24,00 0,031
CD8 абс. сод. 0,40 0,36-0,46 0,37 0,30-0,43 0,135
CD 22 % 18,50 17,00-22,00 18,00 17,00-22,00 0,637
CD22 абс. сод. 0,40 0,31-0,54 0,33 0,25-0,42 0,082
CD95 % 10,00 8,00-12,00 10,00 8,00-12,00 0,950
CD95 абс. сод. 0,24 0,16-0,31 0,18 0,12-0,22 0,050
CD25 % 12,00 12,00-15,00 12,00 8,00-17,00 0,801
CD25 абс. сод. 0,24 0,20-0,34 0,21 0,19-0,27 0,103
CD71 % 12,00 10,00-15,00 15,00 10,00-17,00 0,507
CD71 абс. сод. 0,27 0,23-0,33 0,24 0,18-0,31 0,126
CD16 % 15,00 12,00-17,00 17,00 12,00-18,00 0,320
CD16 абс. сод. 0,30 0,26-0,41 0,27 0,23-0,31 0,103
Апоптоз % 3,50 3,00-5,00 3,00 2,00-4,00 0,223
Апоптоз абс. сод. 0,08 0,05-0,13 0,04 0,02-0,09 0,020
IgA 1,70 1,25-2,20 1,80 0,90-3,00 0,951
IgM 1,90 1,18-2,30 1,30 1,15-2,30 0,556
IgG 10,75 10,40-11,55 11,30 10,30-11,60 0,556
СН50 60,25 51,90-65,75 62,70 52,60-70,90 0,240
Cl 68,50 59,00-74,00 69,00 63,00-73,00 0,912
C2 54,00 45,50-65,00 61,00 51,00-70,00 0,293
C3 59,00 41,00-67,00 71,00 59,00-90,00 0,010
C4 55,50 50,00-70,50 56,00 50,00-72,00 0,741
C5 46,50 37,50-70,00 58,00 46,00-73,00 0,114
ЦИК 41,00 31,50-51,00 51,00 32,00-70,00 0,163
Р-ры ЦИК 1,15 1,00-1,35 1,20 1,00-1,30 0,941
AT против HP 1/80 1/20-1/80 1/10 1/10-1/80 0,012
СОЭ 6,00 3,00-13,00 12,00 9,00-18,00 0,005
фическом гуморальном иммунном ответе на данный инфекционный агент в старческом периоде жизни.
В целом, полученные данные, свидетельствуют об изменении иммунного гомеостаза у пациентов при Helicobacter pylori - ассоциированной язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у лиц старческого возраста.
Выводы
Иммунный гомеостаз при Helicobacter pylori -ассоциированных заболеваниях желудочно-кишечного тракта в старческом возрасте в сопоставлении
с пациентами зрелого периода характеризуется более низким уровнем специфических антител к Helicobacter pylori, ростом лабораторных маркеров воспаления, процентного содержания CD3, CD4, CD8 и снижением процессов апоптоза лимфоцитов крови.
Литература
1. Белозерова, Л.М. Онтогенетический метод определения биологического возраста человека / Л.М. Белозерова // Успехи геронтологии. - 1999. -№ 3. - С. 147.
2. Кэбот, Е. Экспериментальная иммунохи-
Проблемы здравоохранения
мия: пер. с нем. /Е. Кэбот, М. Майер. - М.: Медицина, 1968. - С. 140-270.
3. Мараховский, Ю.Х. Общая гастроэнтерология: Основная терминология и диагностические критерии / Ю.Х. Мараховский. - Минск, 1995.
4. Пальцев, А.И. Особенности клиники, диагностики и лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у лиц пожилого возраста / А.И. Пальцев и др. // Сиб. журн. гастро-энтерол. и гепатол. - 1999. -№9.-С. 131.
5. Пиманов, С.И. Эзофагит, гастрит и язвенная болезнь / С.И. Пиманов. - М., 2000.
6. Смирнова, В.М. Физиология человека /
В.М. Смирнова. - М.: Медицина, 2001.
7. Проблемы нормы в токсикологию / И.М. Трахтенберг, P.E. Сова, В. О. Шефтель, Ф.А. Оникиенко. - М.: Медицина, 1991. - С. 208.
8. Циммерман, Я.С. Хронический гастрит и язвенная болезнь / Я.С. Циммерман. - Пермь: Перм. гос. мед. акад., 2000.
9. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. -1996.-№6.-С. 10-23.
10. Сравнительная характеристика течения язвенной болезни в различные возрастные периоды / ЯМ. Вахрушев, Л.Н Ефремова, Е.В. Белова, Т.П. Романова // Терапевтический архив. - 2004. -№ 2. -
С. 15-18.
11. Mancini, G. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion / G. Mancini, A.O. Carbonara, G.F. Heremans//Inf. lmmunochem. -1965. - Vol. 2. -P. 235-254.
12. Tanaka, S. Assay of classical and alternative pathway activities of murine complement using antibody-sensitized rabbit erythrocytes / S. Tanaka, T. Suzuki, K. Nishioka // J. Immunol. Methods. —1986. -Vol. 3. -P. 161-170.
13. Vermes, I. Flow cytometry of apoptotic cell death /1. Vermes, С. Haanen, C. Reutelingspreger // J. Immunol. Methods.-2000. - Vol. 243. -P. 167-190.
