CC BY
29УДК 576.344: 618.3 (584.3) doi: 10.31712/2221-7355-2019-9-2-152-158
ОСОБЕННОСТИ ГИСТОЛОГИИ ПЛАЦЕНТ И ЭКСПРЕССИИ ФАКТОРОВ АНГИОГЕНЕЗА У БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С РУБЦОМ НА МАТКЕ
!КАМИЛОВА М.Я., 2КОЛОБОВ А.В., 3ДЖУРАЕВ А.С., ТОНУСОВА С.Х.
ТУ «НИИ акушерства, гинекологии и перинатологии» МЗиСЗН РТ 2Санкт-Петербургский государственный университет 3ТГМУ им. Абуали ибн Сино
Цель исследования. Изучить гистологические особенности плацент и экспрессии маркеров ангиогенеза TGF-в1 и bFGF у беременных женщин с рубцом на матке.
Материал и методы. Проведены гистологические и иммуногистохимические исследования 10 плацент женщин с физиологическим течением беременности и родов и 12 плацент женщин с рубцом на матке, плацентацией по передней стенке.
Результаты. У женщин с рубцом на матке и плацентацией по передней стенке хроническая плацентарная недостаточность чаще проявляется гипопластической формой с выраженными циркуляторными нарушениями, а также выраженными или слабо выраженными компенсаторно-приспособительными изменениями. Установлена тенденция к снижению экспрессии bFGF и статистически значимое повышение экспрессии TGF-в1. Заключение. В основе патогенеза развития хронической плацентарной недостаточности у женщин с рубцом на матке и плацентацией по передней стенке лежат функциональные нарушения в эндотелиоцитах и макрофагах из-за дисбаланса между ангиогенными и антиангиогенными факторами роста.
Ключевые слова: рубец на матке, плацентарная недостаточность, гистологическая картина плацент, экспрессия факторов роста TGF-в1 и bFGF
THE HISTOLOGICAL SPECIALITIES OF PLACENTES AND ANGIOGENESIS GROWS FACTORS EXPRESSION IN WOMEN WITH UTERUS SUTURE
1KAMILOVA M.YA., 2KOLOBOV A.V., 3DZHURAEV A.S., 1YUNUSOVA S.KH.
!State Establishment "Tajik Scientific-Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Perinatology" of the Ministry of Health and Social Protection of population of the Republic of Tajikistan
2Saint Petersburg State University 3Avicenna Tajik State Medical University
Aim. To estimate histological features of placenta and degree of angiogenesis factors TGF-^1 u bFGF expression in woman with uterus suture.
Material and Methods. The histological and immunohistochemical studies of placenta of 10 healthy women and placenta of 12 women with suture in uterus, placentation on the front wall were conducted.
Results. The chronic placental insufficiently in women with uterus suture and placentation on the front wall more often manifests itself by hypoplastic form with circulation disorders of high degree, also light or acute form of adaptive reaction. The tendency to decreasing of bFGF expression and statistically significance increasing of TGF-^1 expression was estimated.
Conclusion. The pathogenesis of placental insufficiently in women with uterus suture, and placentation on the front wall characterizes with functional disorders in cells of endothelial, macrophages as results of angiogenesis factors TGF-^1 u bFGF disbalance.
Key words: uterus suture, placental insufficiently, histological features of placenta, expression angiogenesis factors TGF-^1 u bFGF
Актуальность
Одной из особенностей современного акушерства является прогрессирующий рост частоты кесарева сечения во всем мире. При этом появилась новая проблема, заключающаяся в необходимости обеспечения благоприятных акушерских и перинатальных исходов [3].
Одним из осложнений беременности у пациенток с рубцом на матке является плацентарная недостаточность. В России в структуре показаний для плановой повторной операции хроническая плацентарная недостаточность составляет 55%. Неблагоприятные факторы, одним из которых является рубец на матке, снижают возможности клеток эндотелия синтезировать оксид азота, в то время как сосудосуживающие вещества синтезируются в прежних количествах, в результате этой диспропорции развивается дисфункция эндотелия. Процесс ангиогене-за в плаценте нарушается из-за изменений регуляции ангиогенных факторов при плацентарной недостаточности [2, 4, 6].
Проблема рубца на матке актуальна для перинатальных исходов ввиду изменений тканей матки, являющихся причиной неполноценной плацентации и функционирования плаценты. Дистрофические изменения в области передней стенки прооперированной матки отражаются на её моторике и трофике передней стенки. Это приводит к нарушениям кровотока в сосудах матки и плаценты, более выраженных при локализации плаценты по передней стенке, что резко ухудшает прогноз беременности, касающийся как состоятельности рубца, так и развития плода ввиду развития плацентарной недостаточности и преэклампсии [5, 7].
Изучение механизмов развития плацентарной недостаточности у беременных с рубцом на матке заслуживает особого внимания в связи с необходимостью прогнозирования, своевременной диагностики, необходимостью правильного подбора препаратов для профилактики и терапии данного осложнения беременности.
Вопросы терапии плацентарной недостаточности в настоящее время широко изучаются. Однако взгляды специалистов акушерского сообщества на возможности её лечения весьма противоречивы [1]. Для определения возможностей терапии и профилактики плацентарной недостаточности у беременных с рубцом на матке важно изучение непосредственных механизмов патогенеза развития плацентарной недостаточности.
Цель исследования
Изучить гистологические особенности плацент и экспрессии маркеров ангиогене-за TGF-|31 и bFGF у беременных женщин с рубцом на матке.
Материал и методы исследования
Обследованы 10 последов женщин с физиологически протекавшими беременностью и родами (контрольная группа) и 12 последов женщин с рубцом на матке и плацентаци-ей по передней стенке (основная группа). Критериями включения в основную группу явились: репродуктивный возраст, кесарево сечение по Старку в анамнезе. Критериями включения в контрольную группу явились: репродуктивный возраст, повторная беременность, отсутствие экстрагенитальной патологии и осложнений беременности. Критериями исключения из обеих групп явилась такая соматическая патология, как сахарный диабет, сердечно-сосудистые заболевания, метаболический синдром, хронические заболевания почек.
Для гистологического исследования готовили парафиновые срезы толщиной 3-5 мкм. Для обзорной окраски использовали гематоксилин и эозин. При световой микроскопии с помощью микроскопа Olympus CX-31 оценивали: соответствие строения виллезного дерева сроку гестации, циркуля-торные нарушения, наличие воспалительных изменений и стадии их распространения, степень компенсаторно-приспособительных изменений в плаценте. При наличии хронической плацентарной недостаточности определяли форму и стадию процесса. Изучение экспрессии белков иммуногистохимическим методом проводили на препаратах, приготовленных из плацент (парафиновые срезы толщиной 5 мкм). Оценка иммуногистохи-мической реакции выполнялась по стандартной методике (Петров С.В., Райхлин Н.Т., 2004). Иммуногистохимическая реакция проводилась с использованием моноклональных мышиных антител к TGF-|31 (Novocastra, 1:40) и bFGF (Santa Cruz Biotechnology, 1:50). Для количественного анализа кровеносных сосудов оценивали экспрессию в эндоте-лиальных клетках сосудистого компонента ворсинчатого хориона. Морфометрическим исследованием оценивали результаты окрашивания и использовали компьютерный анализ изображений, полученных на фотографиях с использованием цифровой камеры Olympus-BX46 (Olympus Corp., Япония) (программное обеспечение «CellSensEntry»). В материале от каждой женщины проводили анализ в 5 полях зрения. Расчет количе-
ственных характеристик осуществляли при помощи программы «Морфология 5.0» (Видео-Тест, Россия). Экспрессию маркеров ангиогенеза оценивали по площади экспрессии, рассчитанной как отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками, к общей площади клеток в поле зрения в процентах.
Статистическую обработку полученных результатов выполняли с использованием пакета статистического анализа «STATGRAPHICS 6.0» (Statgraphics Technologies, Inc., США). Методы дескриптивной статистики включали в себя определение относительных показателей (долей в %) и вычисление абсолютных величин с вычислением оценки среднего арифметического (М) и его средней ошибки среднего значения (m). Дисперсионный анализ проводился по Манну-Уитни. Нулевая гипотеза отвергалась при а =0,05.
Результаты и их обсуждение
В плацентах контрольной группы в структуре ворсинчатого хориона преобладали терминальные зрелые ворсины, численность которых составила 70% от общего количества ворсин. Ворсины промежуточного типа составили 18%, стволовые ворсины - 12% от общего количества ворсин. В плацентах женщин с рубцом на матке и плацентацией по передней стенке строение виллезного дерева плаценты соответствовало сроку гестации в 3 (25 %) случаев. Хроническая плацентарная недостаточность гистологически диагностирована у 9 (75%) женщин. У 4 (44,4%) женщин с рубцом на матке и пла-центацией по передней стенке имело место субкомпенсированное диссоциированное развитие плаценты. Отмечены нарушения формирования терминальных ворсин с преобладанием промежуточных зрелых ворсин, что подтверждает незрелость виллезного дерева.
В 5 (55,5%) случаях диагностирован гипо-пластический тип развития плаценты. Он характеризовался маленькими размерами ворсин хориона и уменьшением числа терминальных ворсин и капилляров.
В плацентах женщин контрольной группы в 4 (40%) случаях установлены циркулятор-ные нарушения умеренной степени, которые характеризовались умеренным кровенаполнением промежуточных ворсин хориона.
Выраженная степень циркуляторных нарушений, характеризующаяся диффузной гиперваскуляризацией венозно-капиллярно-го типа и неравномерным кровенаполнением сосудистого русла терминальных и промежуточных ворсин хориона, диагностирована в
1 зрелой плаценте из контрольной группы (рис. 1).
Рис. 1. Г-э. *100. Циркуляторные нарушения в плаценте контрольной группы
В плацентах женщин основной группы нами обнаружена выраженная степень цир-куляторных нарушений - в 9 случаях, которая проявлялась неравномерной гиперваскуля-ризацией и неравномерным полнокровием сосудов всех уровней без формирования артерио-венозных анастомозов и уменьшением количества синцитио-капиллярных мембран.
Компенсаторно-приспособительные изменения в плацентах контрольной группы проявлялись умеренной степенью и характеризовались единичными синтициальными узелками.
В плацентах (3 случая) с гипопластиче-ской формой ХПН имелись слабо выраженные компенсаторно-приспособительные изменения, в 2 плацентах - выраженные изменения с обилием синцитиальных узелков.
В плацентах с диссоциированной формой плацентарной недостаточности (4 случая) установлена умеренная степень приспособительных реакций.
Воспалительные изменения в последах женщин основной группы выявлены в 2 случаях, что составило 16,6%. Воспалительные изменения характеризовались мембранитом и фуникулитом.
Согласно полученным нами результатам гистологического исследования, у беременных с рубцом на матке, плацентацией по передней стенке и захватом области нижнего маточного сегменте развивается хроническая плацентарная недостаточность в 75% случаев, что объясняет неблагоприятные условия развития плодов и возникновение синдрома задержки разви-
тия плода. При изучении перинатальных исходов у этих женщин установлено, что у всех новорожденных от матерей с рубцом на матке, плацентацией по передней стенке и развившейся хронической плацентарной недостаточностью антропометрические показатели были ниже должных (диагностирована гипотрофия 2-й степени). Оценка этих новорожденных при рождении по шкале Апгар была низкой (в 2 случаях - 6 баллов, в 4 случаях - 5 баллов, в 3 случаях - 4 баллов). В двух случаях произошла ранняя неонатальная смерть из-за дыхательной недостаточности, обусловленной асфиксией при рождении.
Таким образом, у женщин с рубцом на матке и плацентацией по передней стенке хроническая плацентарная недостаточность чаще проявлялась гипопластической формой со значительными циркуляторными нарушениями и выраженными или слабо
выраженными компенсаторно-приспособительными изменениями.
Изучение клинико-лабораторно-гисто-логических параллелей показало, что у беременных с рубцом на матке, плацентацией по передней стенке условия для развития плаценты являются неблагоприятными, формируется хроническая плацентарная недостаточность с нарушением гормональной, гемодинамической функций плаценты и, соответственно, условия пренатального развития плода также являются неблагоприятными, что приводит к развитию СЗРП, асфиксии плода, повышению показателей перинатальной заболеваемости и смертности.
Анализ данных иммуногистохимического исследования степени экспрессии TGF-|31 установил, что экспрессия данного маркера отмечалась в плацентарных макрофагах и эндотелиоцитах сосудов ворсин хориона.
- " / и
I"
* д
1. -У *.
I» I* "Ч *
Ч м .А"..■•>/,'
Г- к . * Л Г.
"ъ I
^ 4' *
■
а Ч 'V л Г*! ч Л ■" ■ — А.-
(1) (2) Рис. 2. ИГХ х 400. Экспрессия TGF-в1 в строме ворсинок хориона у женщин основной (1) и контрольной групп (2)
Установлено статистически значимое (р<0,05) повышение относительной площади экспрессии TGF-|31 (12,24±1,36%) у
женщин с рубцом на матке и плацентацией по передней стенке, по сравнению с
соответствующим показателем у здоровых женщин (2,83±0,54%) - и-критерий Ман-на-Уитни равен 0 при критическом значении заданной численности сравниваемых групп 29 (рис. 3).
14,00% 12.00% 10,00% 8,00% 6,00% 4,00% 2,00% 0,00%
1-2,24%-
1
У ' "
1
относительная площадь экспрессии ТбРконтроль
относительная площадь экспресииТСР основной группы
Рис. 3. Показатели экспрессии TGF
TGF-|31 контролирует пролиферацию, клеточную дифференцировку и другие функции в большинстве клеток, участвует в иммунном ответе. Обладает антипролиферативным действием. Этот белок выделяется клетками в частности макрофагами во внеклеточное пространство.
Иммуногистохимическое исследование экспрессии bFGF выявило экспрессию дан-
ного маркера ангиогенеза в строме ворсин хориона, фибробластах, макрофагах и эндо-телиоцитах.
Статистически значимого различия в степени экспрессии bFGF в строме вормин хориона женщин контрольной (5,98±0,89%) и основной групп (4,56±0,23%) не установлено.
(1) (2) Рис. 4. ИГХ х 400. Экспрессия bFGF в строме ворсинок хориона у женщин контрольной группы (1) и основной групп (2)
Заключение
Таким образом, у женщин с рубцом на матке, плацентацией по передней стенке отмечается дисбаланс между ангиогенными (bFGF) и антиангиогенными (TGF-|31) факторами роста - тенденция к снижению bFGF и повышение TGF-|31, в результате чего отмечаются функ-
циональные нарушения в эндотелиоцитах и макрофагах, что лежит в основе патогенеза развития хронической плацентарной недостаточности у данного контингента пациенток.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов
ЛИТЕРАТУРА
1. Абдурахманов Ф.М., Расулова Г.Т., Бойматова З.К. и др. Пренатальное развитие плода при беременности высокого риска.- Душанбе.: Азия-Принт, 2010. - 159 с.
2. Баринов С.В., Биндюк А.В., Ралко В.В. и др. К вопросу о родоразрешении беременных с рубцом на матке // Российский вестник акушера-гинеколога. -2015. - №4. - С. 29-33
3. Доброхотова Ю.Э., Кузнецова П.А., Копылева Ю.В. Кесарево сечение: прошлое и будущее // Гинекология.- 2015. - №3. - С. 24-31.
4. Ковалёв Е.В., Занько Ю.В., Яроцкая Н.Н. Оценка показателей перекисного окисления липидов, антиоксидантной системы крови и состояния эндотелия у пациентов при формировании задержки роста плода // Вестник ВГМУ. - 2014. - Т.13, №5. - С. 74-80.
REFERENCES
1. Abdurakhmanov F. M., Rasulova G. T., Boymatova Z. K., Prenatalnoe razvitie ploda pri beremennosti vysokogo riska [Prenatal development of the fetus in high-risk pregnancy]. Dushanbe, Aziya-Print Publ., 2010; 159.
2. Barinov S. V., Bindyuk A. V., Ralko V. V., K voprosu o rodorazreshenii beremennykh s rubtsom na matke [On the issue of delivery of pregnant women with uterine scar]. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa - Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist, 2015; 4: 29-33.
3. Dobrokhotova Yu. E., Kuznetsova P. A., Kopyleva Yu. V. Kesarevo sechenie: proshloe i budushchee [Caesar-ean section: past and future]. Ginekologiya - Gynecology, 2015; 3: 24-31.
4. Kovalev E. V., Zanko Yu. V., Yarotskaya N. N. Otsenka pokazateley perekisnogo okisleniya lipidov, antioksidantnoy sistemy krovi i sostoyaniya endo-teliya u patsientov pri formirovanii zaderzhki rosta ploda [Evaluation of lipid peroxidation, antioxidant system of blood and endothelial state in patients with formation of fetal growth retardation]. Vestnik VGMU - Journal "Vestnik of Vitebsk State Medical University", 2014; 13(5): 74-80.
5. Chaiworapongsa T., Romero R., Korzeniewski S.J. et al. Maternal plasma concentrations of angiogenic/anti-angiogenic factors in the third trimester of pregnancy to identify the patient at risk for stillbirth at or near term and severe late preeclampsia // Am. J . Obstet. Gynecol.- 2013. -Vol. 208 (4). - P. 287
6. Hsieh T-T., Chen S-F., Lo L-M. et al. The Association Between Maternal Oxidative Stress at Mid-Gestation and Subsequent Pregnancy Complications // Reproductive Sciences. - 2015. - Vol. 19 (5). - P. 505-512.
7. Pregnancy outcome in women with previous one Caesarean section. // J. Clin. Diagn. Res.- 2014. - Vol. 8 (2). - P. 99-102.
Сведения об авторах: Камилова Мархабо Ядгаровна - руководитель акушерского отдела ТНИИ АГиП МЗиСЗН РТ, д.м.н., доцент; тел.: (+992) 935009425; e-mail: marhabo1958@mail.ru
Колобов Андрей Викторович - зав. кафедрой патологоанатомии; e-mail: kolobochek71@ mail.ru
Джураев Олим Салимович - зав. патологоа-натомическим отделением ГУ НМЦ «Шифо-бахш»; e-mail: alim-jouraev@mail.ru Юнусова Сураё Хурсандовна - зав. отделением ТНИИ АГиП МЗиСЗН РТ
5. Chaiworapongsa T., Romero R., Korzeniewski S. J., Maternal plasma concentrations of angiogenic/anti-angiogenic factors in the third trimester of pregnancy to identify the patient at risk for stillbirth at or near term and severe late preeclampsia. Am. J . Obstet. Gynecol., 2013; 208 (4): 287.
6. Hsieh T-T., Chen S-F., Lo L-M., The Association Between Maternal Oxidative Stress at Mid-Gestation and Subsequent Pregnancy Complications. Reproductive Sciences, 2015; 19(5): 505-512.
7. Pregnancy outcome in women with previous one Caesarean section. J. Slin. Diagn. Res., 2014; 8(2): 99-102.
Information about authors:
Kamilova Markhabo Yadgarovna - Manager of Obstetrics Division of the State Establishment "Tajik Scientific-Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Perinatology" of the Ministry of Health and Social Protection of population of the Republic of Tajikistan, Doctor of Medical Sciences; e-mail: mar-habo1958@mail.ru
Kolobov Andrey Viktorovich - Head of the Department of Pathological Anatomy; e-mail: kolobo-chek71@mail.ru
Dzhuraev Olim Salimovich - Head of the Patholo-goanatomic Division of the State Establishment "National Medical Center «Shifobakhsh»"; e-mail: alim-jouraev@mail.ru
Yunusova Surae Khursandovna - Head of the Department of of the State Establishment "Tajik Scientific-Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Perinatology" of the Ministry of Health and Social Protection of population of the Republic of Tajikistan
ХУСУСИЯТХОИ ГИСТОЛОГИИ ХДМРОХДК ВА ЭКСПРЕССИЯИ ОМИЛХОИ АНГГИОГЕНЕЗ ДАР ЗАНОНИ ХОМИЛАИ ДОРОИ ЧДРОХДТ ДАР БАЧАДОН
1КОМИЛОВА М.Я., 2КОЛОБОВ А.В., 3^УРАЕВ А.С., 1ЮНУСОВА С.Х.
!МД «Пажудишгоди акушерй, гинекологй ва перинатологй»- и ВТ ва Х,ИА ЧТ 2Донишгоди давлатии Санкт-Петербург 3ДДТТ ба номи Абуалй ибни Сино
Мацсади тадкццот. Омузиши хусусиятцои гистологии цамроцак ва экспрессияи омилцои антигенези TGF-ß1 ва iFGF дар занони цомилаи дорои цароцат дар бачадон.
Мавод ва усул;ои тадцщот. Тац^и^оти гистологи ва иммуногистокимиёвии 10 цамроцакцои занони дорои цомиладории физиологи ва таваллуд ва 12 цамроцащои заноне, ки дар бачадон цароцат дошта, цамроцак дар деворчаи пеш цойгир аст, гузаронида шуданд.
Натицщо. Дар защое, ки дар бачадон цароцат дошта, цамроцак дар деворчаи пеш цойгир аст, норасо-ии музмини цамроцак одатан аз руи шакли гипопластики бо ихтилоли пасти шиддатноки тагйироти компенсатори- мутобщшаванда нишон дода шуданд. Механизми паст кардани шиддатнокии FGF ва баланд бардоштани омори муцими нишондицандацои TGF-ß1 му^аррар карда шуд. Хулоса. Асосан патогенези пацншавии норасоии музмини цамроцак дар защое, ки дар бачадон цароцат дошта, цамроцак дар деворчаи пеш цойгир аст, аворизцои функтисионали дар эндотелиотситцо ва ма-крофаразцо бо сабаби норасоии байни омилцои инкишофи антигеногени ва антигениогени ба амал меояд. Калима;ои асосй: цароцат дар бачадон, норасоии цамроцак, манзараи гистологии цамроцак, омилцои экпрессияи афзоиши TGF - ß1 ва iFGF
