CC BY
6Материалы VIII Петербургского международного онкологического форума «Белые ночи • 2022»
Онкоиммунология: клиническая онкоиммунология
Функциональная активность NK-клеток при разработке способа адоптивной иммунотерапии онкологических больных
Авторы
Рыбачук Виктория Александровна, rybachuk2016@list.ru, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва Попова Любовь Ильинична, ljubovprokudina@gmail.com, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва Борисов Михаил Александрович, borisov.mikhail2011@yandex.ru, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва Петрикина Анастасия Петровна, anpetra@bk.ru, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва Михайловский Николай Васильевич, nickmikh.mrrc@gmail.com, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва Абакушина Елена Вячеславовна, abakushina@mail.ru, ООО «Текон Медицинские приборы», Москва
Ключевые слова:
маркеры активации лимфоцитов, МЫК-клетки, адоптивная иммунотерапия
Актуальность
Область разработки современных способов иммунотерапии онкологических больных получила новое развитие, включая метод адоптивной иммунотерапии (АИТ) с участием T- и NK-клеток [1]. Для активации и генерации NK-клеток наиболее часто используется метод длительного культивирования в присутствии цитокинов и/или фидерных клеток [1, 2].
Цель
Цель данного исследования — оценка литической активности и экспрессия маркеров активации на NK-клетках человека.
Материалы и методы
Мононуклеарные клетки выделяли из периферической крови 6 доноров на градиенте плотности и культивировали в среде RPMI-1640 (Sigma-Aldrich) с добавлением ИЛ-2, ИЛ-15 и ИЛ-21 с фидерными клетками K-562 в течение 21 дня.
Подсчет клеток и оценку жизнеспособности осуществляли каждые 7 дней. Цитофлуориметрический анализ проводили на 0-й и 21-й дни культивирования на цитометре Image Stream MkII (Luminex). Применяли
7-цветную панель меченых антител к CD45/3/56/16 и маркерам активации CD335/337/314 (BD Bioscience»). Цитотоксическую активность определяли в соотношении 1:15 на xCelligence (Agelent). Статистический анализ осуществляли с помощью MS Excel 2016.
Результаты
В процессе in vitro культивирования NK-клеток коэффициент пролиферации составил 2092,8 раза. Содержание NK-клеток на 21-й день культивирования достигало 76,5% (на 0-й день — 8,1%), а увеличение экспрессии маркеров активации CD335/337/314 —в 2,5; 5 и 4,7 раза. Цитотоксическая активность NK-клеток по отношению к клеточным линиям К562, AsPC, MCF-7 составила 51-82%, а жизнеспособность — более 87%.
Выводы
При генерации NK-клеток происходила значительная экспансия NK-клеток и увеличение экспрессии маркеров активации при сохранении высокой жизнеспособности. Данный подход отличается отсутствием этапа сепарации NK-клеток с помощью магнитных частиц и позволяет оценить функциональную активность после активации in vitro.
Список литературы
1. Curiel T J . (ed . ) . Cancer immunotherapy: Paradigms practice and promise: Springer Science & Business Media, 2012 . 2 . Abakushina E . V , Popova L ., Zamyatin A . et al . The advantages and challenges of anticancer dendritic cell vaccines and NK cells in adoptive cell immunotherapy //Vaccines . 2021. Vol . 9 . № 11. P. 1363.
ОНКОИММУНОЛОГИЯ: ФУНДАМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
Особенности экспрессии маркера ZEB1 при разных формах
рака вульвы
Авторы
Бусарова Ангелина Владимировна, ellina_ue@bk.ru, ГБУЗ «Клинический онкологический диспансер № 1» Минздрава Краснодарского края, Краснодар
Порханова Наталья Владимировна, porhanova.nat@mail.ru, ГБУЗ «Клинический онкологический диспансер № 1» Минздрава Краснодарского края, Краснодар
Материалы VIII Петербургского международного онкологического форума «Белые ночи • 2022»
Онкоиммунология: фундаментальная онкология
Ульянова Елена Петровна, uljanova_elena@lenta.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Сагакянц Александр Борисович, asagak@rambler.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Петрусенко Наталья Александровна, petrusenko-natulya@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Ключевые слова:
иммуногистохимическое исследование, рак вульвы, эпителиально-мезенхимальный переход, экспрессия Zeb1
Актуальность
Рак вульвы — это редкое гинекологическое злокачественное новообразование, которое составляет около 2 случаев на 100 тыс. населения РФ и занимает четвертое место после рака шейки матки, эндометрия и яичников. Данный тип опухоли характеризуется быстрым ростом и ранним метастазированием. Одним из факторов, способствующих агрессивному поведению при плоскоклеточном раке вульвы, считается эпителиально-мезенхимальный переход (EMT). Белок ZEB1 входит в ряд ключевых регуляторов данного процесса.
Цель
Оценить экспрессию ZEB1 в качестве прогностического фактора у пациентов с раком вульвы.
Материалы и методы
В исследование включены в группы по 15 человек больные раком вульвы в возрасте от 39 до 70 лет, в среднем 52 года: контрольная группа — пациентки с раком вульвы T1-2N0-M0 (G2); основная группа — пациентки с раком вульвы T1-2N1-M0 (G2) с метастазами в паховые лимфоузлы. Для иммуногистохимического метода использовались поликлональные кроличьи антитела к ZEB1 (Biorbyt Ltd.) в разведении 1:200 и система детекции UltraVision Quanto Detection System HRP DAB. Оценивали процентное содержание и интенсивность окрашивания: 0, 1+ (слабое), 2+ (умеренное), 3+ (сильное). Экспрессия белка ZEB1 опре-
Список литературы
делялась как положительная, когда окрашивание было выявлено в более чем 10% (cut-off) опухолевых клеток с интенсивностью 2+ и 3+. Статистический анализ результатов проводился с помощью программы STATISTICA 13.0 (StatSoft Inc., США), определяли U критерий Манна-Уитни и критерий X2 Пирсона.
Результаты
Максимальное окрашивание маркером ZEB1 было обнаружено в опухолях пациенток основной группы (у 14%). В опухолях пациенток контрольной группы у 33% отмечалось минимальное окрашивание. Медиана значений экспрессии данного маркера в контрольной группе составила 57 (40-70), в основной — 35 (17-60). Таким образом, было обнаружено статистически значимое преобладание в 1,6 раза (p = 0,012) экспрессии маркера ZEB1 в опухолях пациенток из группы с метастазами по сравнению с таковыми из группы без метастатического поражения. При распределении х2 Пирсона статистически значимых отличий не установлено (p = 0,491), видимо, из-за ограниченности выборки.
Выводы
Проведенное иммуногистохимическое исследование выявило особенности экспрессии ZEB1 при разных формах рака вульвы, которые могут в дальнейшем быть применимы в качестве прогностического фактора, определяющего прогрессирование данной патологии.
1. Меньшиков К . В . , Липатов О . Н ., Пушкарев В А. Непосредственные результаты расширенных и комбинированных операций при раке вульвы // Медицинский вестник Башкортостана . 2020 . Т 15 . № . 1 (85) . С . 18-22 .
Экспрессия MUM1 у больных грибовидным микозом на фоне
терапии ПУВА и УФB-311
Авторы
Нефедова Мария Андреевна, nefedova.maria.arb@gmail.com, ФГБУ «ГНЦДК» Минздрава России, Москва Воронцова Анастасия Александровна, nastasia08@bk.ru, ФГБУ «ГНЦДК» Минздрава России, Москва Карамова Арфеня Эдуардовна, karamova@cnikvi.ru, ФГБУ «ГНЦДК» Минздрава России, Москва Кубанов Алексей Алексеевич, alex@cnikvi.ru, ФГБУ «ГНЦДК» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
грибовидный микоз, мим1, ПУВА, УФВ-311
