CC BY
16
© Рагимова Р.Р., 2023 Рагимова Р.Р.
Органоспецифические и органонеспецифические аутоантитела как маркеры аутоиммунного процесса у пациентов с различными формами гипотиреоза
Государственный азербайджанский медицинский университет Министерства здравоохранения Азербайджанской Республики, AZ 1022, г. Баку, Азербайджанская Республика
Резюме
Введение. Развитие аутоиммунного тиреоидита (АИТ) определяется дефектами иммунной системы у индивидуумов с генетической предрасположенностью к этому заболеванию.
Цели - изучение уровней аутоантител, как органоспецифических - антитела к ти-реопероксидазе (Ат-ТПО) и антитела к тиреоглобулину (Ат-ТГ), так и органонеспеци-фических - антитела к нативной ДНК (Ат -нДНК) и антитела к денатурированной ДНК (Ат-дДНК), у пациентов с различными формами АИТ; анализ корреляционной связи между уровнем Ат-нДНК и уровнем Ат-ТПО в зависимости от функционального состояния щитовидной железы.
Материал и методы. Проведено нерандомизированное исследование, в ходе которого проводилось комплексное обследование сыворотки крови 58 пациентов с АИТ (24 мужчины и 34 женщины в возрасте от 18 до 64 лет). Группу сравнения составили 32 человека без патологий щитовидной железы и других аутоиммунных заболеваний, 14 мужчин и 18 женщин в возрасте от 20 до 65 лет. Пациенты были разделены на 2 группы: группа пациентов с АИТ с субклиническим течением заболевания (субклинический гипотиреоз) и группа пациентов с манифестной формой заболевания. У пациентов с субклинической формой заболевания отмечались отдельные слабовыра-женные проявления гипотиреоза. У всех участников исследования определяли уровень Ат-нДНК и Ат-дДНК в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа на автоматическом анализаторе «EL 808 Bio-Tek Instruments, Inc.» (Diagnostic Products Corporation, CIIIA).
Результаты. Анализ уровня антител к ДНК показал их более высокие уровни у пациентов по сравнению со значениями в группе сравнения. Медиана уровня Ат-нДНК у пациентов с АИТ составила 4,4 (2,3; 9,9) Ед/мл, что было статистически значимо по по отношению к показателю группы сравнения, который составил 2,6 (1,5; 3,6) Ед/мл (р < 0,001). В то же время не выявлено достоверных межгрупповых отличий по уровням AT-дДНК у пациентов с различными формами гипотиреоза.
Заключение. Изучение содержания IgG-Ат к ДНК в сыворотке крови пациентов с АИТ в зависимости от функционального состояния щитовидной железы и уровня Ат-ТПО может иметь прогностическое значение и использоваться в качестве дополнительного критерия развития аутоиммунного процесса. По результатам нашего исследования уровень Ат -нДНК в сыворотке крови пациентов с АИТ положительно коррелирует с уровнем Ат-ТПО.
Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит; тиреопероксидаза; аутоантитела к нДНК; аутоантитела к дДНК; тиреоглобулин
Статья получена 21.11.2022. Принята в печать 20.03.2023.
Для цитирования: Рагимова Р.Р. Органоспецифические и органонеспецифические аутоантитела как маркеры аутоиммунного процесса у пациентов с различными формами гипотиреоза. Иммунология, 2023; 44 (3): 333-340. DOI: https://doi.org/10.33029/1816-2134-2023-44-3-333-340
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов.
Для корреспонденции
Рагимова Рена Руфат кызы -кандидат биологических наук, старший преподаватель кафедры биохимии АМУ Баку, Азербайджанская Республика E-mail: ilahashahverdiyeva@gmail.com https://orcid.org/0000-0001-6080-0622
Rahimova R.R.
Organ-specific and non-organ-specific autoantibodies as markers of the autoimmune process in patients with various forms of hypothyroidism
Azerbaijan State Medical University, Ministry of Health of Azerbaijan Republic, AZ 1022, Baku, Azerbaijan Republic
Absrtact
Introduction. The development of autoimmune thyroiditis (AIT) is determined by defects in the immune system in individuals with a genetic predisposition.
The aim of our study was to assess the levels of organ-specific autoantibodies - thyroper-oxidase antibodies (TPO-Ab), thyroglobulin antibodies (TG-Ab) and non-organ-specific autoantibodies - double-stranded DNA (Ab-dDNA) and single-stranded DNA (Ab-sDNA) antibodies in patients with various forms of autoimmune thyroiditis; analysis the correlation between the level of antibodies to DNA and the level of antibodies to thyroperoxidase, depending on the functional state of the thyroid gland.
Material and methods. Non-randomized study was performed, in which a comprehensive examination of blood serum samples from 58 patients (24 men and 34 women) with autoimmune thyroiditis, aged 18 to 64 years and 32 healthy persons (group of comparison, 14 men and 18 women) without thyroid pathologies and other autoimmune diseases aged 20 to 65 years, was conducted. Patients were equally divided into 2 groups: a group of patients with subclinical form of the disease (subclinical hypothyroidism) and a group of patients with a manifest form of the disease. In patients with a subclinical form of the disease, some mild manifestations of hypothyroidism were noted. All study participants were tested for the content of Ab-dDNA and Ab-sDNA in the blood serum by enzyme immunoassay using an automatic analyzer «EL 808 Bio-Tek Instruments, Inc.» (Diagnostic Products Corporation, USA).
Results. The levels of antibodies to DNA were higher in patients vs the group of comparison. The median concentration of Ab-dDNA in patients with AIT was 4.4 (2.3; 9.9) U/ml. It was statistically significantly higher compared to the group of comparison 2.6 (1.5; 3.6) U/ml (p < 0.001). There were no significant intergroup differences in the levels of Ab-sDNA in patients with various forms of hypothyroidism.
Conclusion. The study of the levels of IgG antibodies to DNA in the blood serum samples of patients with AIT depending on the functional state of the thyroid gland and the TPO-Ab level can be a prognostic marker and be used as an additional criterion for the development of an autoimmune process. According to the results of our study, the level of Ab-dDNA in the blood serum samples of patients with AIT positively correlates with the level of TPO-Ab.
Keywords: autoimmune thyroiditis; thyroperoxidase; autoantibodies to dDNA; autoantibodies to sDNA; thyro-globulin
Received 21.11.2022. Accepted 20.03.2023.
For citation: Rahimova R.R. Organ-specific and nonorgan-specific autoantibodies as markers of the autoimmune process in patients with various forms of hypothyroidism. Immunologiya. 2023; 44 (3): 333-40. DOI: https://doi. org/10.33029/1816-2134-2023-44-3-333-340 (in Russian)
Funding. The study had no sponsor support.
Conflict of interests. The author declares no conflict of interests.
For correspondence
Rena R. Rahimova -PhD, Assistant at the Department of Biochemistry, Azerbaijan State Medical University, Baku, Azerbaijan Republic E-mail: ilahashahverdiyeva@gmail.com http://orcid.org/0000-0001-6080-0622
Введение
К настоящему времени доказано, что развитие аутоиммунного тиреоидита (АИТ) у индивидуумов с генетической предрасположенностью к этому заболеванию определяется дефектами иммунной системы [1, 2]. Однако до сих пор ключевые звенья патогенеза АИТ понятны не в полной мере. К ограниченной способности организма правильно реагировать на антигены могут
привести возрастные структурные и функциональные изменения системы врожденного и приобретенного иммунитета. В то же время, согласно теориям эволюционного старения, большая часть параметров иммуностаре-ния также находится под генетическим контролем [3].
В большом количестве исследований показано, что у данного контингента пациентов обнаруживаются антитела (Ат) к различным аутоантигенам цитоплазмы тиро-
цита или поверхностной мембраны коллоида. Известно, что антигенная структура щитовидной железы (ЩЖ) насчитывает более 10 клеточных и коллоидных антигенов [2, 4-7], в результате чего в патогенез заболевания могут вовлекаться различные тиреоидные компоненты.
Установлено, что при АИТ в ткани ЩЖ выявляются В-лимфоциты, образующие лимфоидные фолликулы с терминальными центрами [8]. Эти лимфоциты продуцируют Ат, и, по данным исследований in vivo, подобные клетки могут выступать в качестве основного источника аутоантител (ААт) вместе c лимфоцитами из лимфоузлов, расположенных рядом с ЩЖ, а также с лимфоцитами костного мозга [5, 9].
Показано, что у пациентов с АИТ выявляются также ААт к ДНК, которые, вероятно, вносят вклад в патогенез заболевания, хотя их роль в поражении ткани ЩЖ и в проявлении заболевания неоднозначна [2, 4]. До настоящего времени среди исследователей нет единого мнения о роли поликлональных IgG-ААт к нативной ДНК (нДНК) в нарушении баланса процессов апоптоза при развитии АИТ.
Ранняя диагностика АИТ сложна, так как его симптомы часто неспецифичны и могут наблюдаться при широком спектре заболеваний. В связи с этим важнейшими задачами представляются поиск различных критериев степени выраженности аутоиммунных нарушений в организме, разработка подходов и методов прогнозирования течения патологического процесса, контроля эффективности комплексной терапии и мероприятий по профилактике аутоиммунных заболеваний. Для решения поставленной проблемы необходимы поиск и анализ маркера, обладающего свойствами, специфичными для аутоиммунных заболеваний, и отражающего дисфункцию иммунной системы задолго до развития полномасштабной картины патологического процесса.
Признание в настоящее время многими авторами мультифакторного патогенеза АИТ демонстрирует необходимость актуального алгоритма диагностики иммунологических нарушений, в том числе с определением концентраций различных ААт у данной категории пациентов. В то же время сведения о спектре уровней ААт, а также об их оценке в качестве маркеров аутоиммунных процессов в рамках обследования рассматриваемой категории пациентов в доступной литературе крайне скудны. Все это свидетельствует об актуальности исследований по оценке уровней как органоспецифических, так и органонеспецифических ААт.
Цель настоящего исследования - изучение ор-ганоспецифических и органонеспецифических ААт у пациентов с различными формами АИТ, анализ корреляционной связи между уровнем Ат-нДНК и уровнем Ат-ТПО в зависимости от функционального состояния щитовидной железы.
Материал и методы
Участники исследования. Было проведено нерандомизированное исследование, в ходе которого выполнялось комплексное обследование 58 пациентов
с АИТ (24 мужчины и 34 женщины в возрасте от 18 до 64 лет). Диагноз АИТ был установлен на основании данных анамнеза, результатов изучения тиреоидного статуса, данных ультразвукового исследования ЩЖ и оценки наличия Ат к рецептору тиреотропного гормона (ТТГ). Стаж аутоиммунной патологии у пациентов, включенных в исследование, насчитывал от 5 до 18 лет, но в данном исследовании не отмечена четкая зависимость между длительностью заболевания и манифестацией аутоиммунного процесса. Исследование одобрено этическим комитетом Азербайджанского медицинского университета (АМУ, протокол № 12 от 07.02.2020) и проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека, в том числе исследований биологических материалов или данных, допускающих идентификацию лица, от которого они были получены».
Критерии включения:
1. мужчины и женщины;
2. возраст 18 лет и старше;
3. пациенты с установленным первичным диагнозом АИТ;
4. отсутствие сопутствующих аллергических или других аутоиммунных, тяжелых соматических заболеваний.
Критерии исключения:
1. присутствие в анамнезе пациентов какого-либо сопутствующего заболевания;
2. присоединение связанных с АИТ единым патогенетическим механизмом коморбидной патологии в результате усугубления аутоиммунного процесса;
3. клинический анализ крови со значимыми отклонениями;
4. беременность и лактация;
5. острые и хронические воспалительные процессы, влияющие на иммунологический статус пациента.
Группу сравнения составили 32 человека без патологий ЩЖ и других аутоиммунных заболеваний, 14 мужчин и 18 женщин в возрасте от 20 до 65 лет.
Анализ клинико-лабораторных исследований с определением уровней ТТГ, свободного тироксина (Т4) и свободного трийодтиронина (Т3) позволил разделить пациентов на 2 группы: группа пациентов с АИТ с субклиническим течением заболевания и группа пациентов с манифестной формой заболевания.
В состав обеих групп входили пациенты как молодого, так и среднего возраста. Группу с субклинической формой АИТ составили пациенты, у которых наблюдались отдельные слабовыраженные проявления гипотиреоза, но повышенный уровень ТТГ при нормальных уровнях гормонов Т3 и Т4. Клиническая картина при этой форме заболевания стертая. У пациентов, составляющих 2-ю (манифестную) группу, результаты лабораторных исследований показали повышение уровня ТТГ, снижение уровня гормонов Т3 и Т4. Увеличенные титры Ат к тиреоглобулину (Ат-ТГ) и тиреопероксидазе (Ат-ТПО) наблюдались в обеих группах.
Таблица 1. Концентрации тиреотропного гормона (ТТГ) и гормонов щитовидной железы у пациентов с аутоиммунным тирео-идитом (АИТ) в состоянии гипотиреоза,Ме ^25; Q75)
Показатель Группа сравнения (n = 32) АИТ (n = 58) Субклиническая (n = 29) Манифестная (n = 29)
T3 св, пг/мл 2,4 (2,1; 2,6) 1,5* (1,1; 2,7) 2,4 (1,9; 2,7) 1,2 *# (1,1; 1,2)
T4 св, нг/дл 1,9 (1,5; 2,3) 1,6* (0,7; 2,1) 1,9 (1,8; 2,1) 0,8 *# (0,7; 0,8)
ГГГ, Ед /л 2,1 (1,3; 2,3) 7,5* (3,5; 24,3) 4,2* (3,5; 4,6) 19,0*# (16,1; 24,3)
Примечание. * - различия статистически значимы (р < 0,05) относительно значений в группе сравнения; # - различия статистически значимы (р < 0,05) при сравнении со значением в группе пациентов с субклинической формой заболевания.
У пациентов с манифестной формой заболевания наблюдались такие симптомы, как общая слабость, апатия, частая смена настроения. Нередко отмечались кожная сыпь и сухость кожи, а также нарушения сна и ухудшение памяти. У женщин обнаруживались признаки нарушения репродуктивной функции, в частности, отсутствие овуляции, задержка менструаций, проблемы с зачатием.
Для группы пациентов с манифестной формой заболевания была характерна следующая клиническая картина: ожирение, уменьшение температурных показателей тела, желтизна кожи, микседематозные отеки -круги под глазами, эмоциональность, относительное изменение некоторых печеночных показателей, заторможенность мышления и речи; зябкость - перманентное ощущение холода, затрудненное дыхание, изменение голоса, сонливость, одышка, временами болезненные ощущения в сердце и загрудинной области, урежение сердечных сокращений, склонность к запорам, диарея, истончение и выпадение волос. 13 пациентов с манифестной формой заболевания наблюдались одновременно у кардиолога с диагнозом «нарушение ритма сердца» и периодически получали соответствующую терапию.
Лабораторные исследования. У пациентов всех групп определяли уровни IgG-Ат к нДНК (Ат-нДНК) и денатурированной ДНК (Ат-дДНК) в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа на автоматическом анализаторе «EL 808 Bio-Tek Instruments, Inc.» (Diagnostic Products Corporation, CIIIA). Сравнивали уровни гормонов ЩЖ и уровни ААт в плазме крови пациентов разных групп исследования. Также был проведен анализ распределения пациентов в зависимости от уровней Ат в сыворотке крови, при этом пациенты обследуемой выборки были ранжированы в зависимости от уровней Ат к ДНК: до 2 Ед/мл, от 2 до 4 Ед/мл и свыше 4 Ед/мл.
Статистическая обработка. Статистический анализ результатов исследования был выполнен с помощью пакета Statsoft. STATISTICA 12. Для представления количественных параметров рассчитывали медианы, верхний и нижний квартиль. Межгрупповые сравнения по количественным показателям проводили с применением рангового непараметрического критерия Манна-Уитни с учетом отличия распределения анализируемых показателей от нормального. Различия считались значимыми при недостижении р порогового значения уровня статистической значимости нулевой гипотезы (а), равного 0,05.
Результаты
Проведенные исследования показали, что уровень гормонов ЩЖ у пациентов с АИТ в состоянии гипотиреоза отличался от аналогичных показателей в группе сравнения. При этом выявленные различия были статистически значимыми. Так, уровни свободного Т4 и свободного Т3 в группе пациентов с аутоиммунным гипотиреозом оказались статистически значимо ниже (р < 0,05) соответствующих показателей группы сравнения, а именно 1,5 (1,1; 2,7) пг/мл для Т3 и 1,6 (0,7; 2,1) пг/мл для Т4, в то время как у здоровых людей эти значения составили соответственно 2,4 (2,1; 2,6) и 1,9 (1,5; 2,3) пг/мл (табл. 1).
Уровень ТТГ напротив, был существенно выше (р < 0,05) в группе пациентов с гипотиреозом, составив 7,5 (3,5; 24,3) Ед/л относительно концентрации данного гормона в группе сравнения - 2,1 (1,3; 2,3) Ед /л
Следует отметить существенные различия уровней гормонов ЩЖ у пациентов с разными клиническими форами гипотиреоза. Так, у пациентов с манифестной формой гипотиреоза концентрации Т3 и Т4 были статистически значимо ниже соответствующих показателей, наблюдаемых у лиц с субклинической формой заболевания. Медианы концентраций Т3 и Т4 при манифестной форме гипотиреоза составили соответственно 1,2 (1,1; 1,2) пг/мл и 0,8 (0,7; 0,8) нг/дл, а при субклинической форме заболевания - соответственно 2,4 (1,9; 2,7) пг/мл (р < 0,001) и 1,9 (1,8; 2,1) нг/дл (р < 0,001). Медиана уровня ТТГ была статистически значимо выше в группе пациентов с манифестной формой гипотиреоза (19,0 Ед/л) относительно группы с субклинической формой заболевания - 4,2 (3,5; 4,6) Ед /л (р < 0,001).
Результаты оценки уровней Ат-ТГ и Ат-ТПО приведены в табл. 2. Нами не выявлено статистически значимых межгрупповых различий по данному показателю у пациентов с разными клиническими формами гипотиреоза.
У пациентов с манифестной формой гипотиреоза выявлены достоверно высокие уровни Ат-ТГ и Ат-ТПО, медианы которых равны соответственно 470 (381; 527) Ед/мл и 531 (458; 566) Ед/мл, по отношению к аналогичным показателям группы сравнения: 16 (13; 30) Ед/мл (р < 0,001) и 20 (13; 25) Ед/мл (р < 0,001) соответственно.
В группе с субклинической формой гипотиреоза уровни Ат-ТГ и Ат-ТПО составили соответственно 456 (395; 544) Ед/мл и 523 (464; 568) Ед/мл и были статистически значимо выше показателей в группе сравнения (р < 0,001).
Таблица 2. Уровни антител к тиреоглобулину (Ат-ТГ) и к тироксинпероксидазе (Ат-ТПО) в сыворотке крови пациентов с аутоиммунным тиреоидитом (АИТ), Ме ^25; Q75)
Показатель Группа сравнения (п = 32) АИТ (п = 58) Субклиническая (п = 29) Манифестная (п = 29)
Ат-ТГ, Ед /мл 16 (13; 30) 458* (381; 544) 456* (395; 544) 470* (381; 527)
Ат-ТПО, Ед /мл 20 (13; 25) 525* (458; 568) 523* (464; 568) 531* (458; 566)
Примечание. * - различия статистически значимы (при р < 0,05) относительно значения в группе сравнения.
Анализ Ат к ДНК показал их более высокие уровни у пациентов по отношению к показателям у здоровых лиц, составляющих группу сравнения. Как видно из табл. 3, медиана уровня Ат-нДНК у пациентов с АИТ составила 4,4 (2,1; 16,4) Ед/мл, что было статистически значимо выше этого показателя здоровых лиц, который составлял 2,6 (1,5; 3,6) Ед/мл (р < 0,001). В то же время не выявлено достоверных межгрупповых отличий по уровням Ат-дДНК у пациентов с различными формами гипотиреоза.
Для уточнения значимости исследуемых ААт в диагностике АИТ был рассчитан коэффициент отношения уровней АТ-нДНК к АТ-дДНК (Ат-нДНК/Ат-дДНК) в сыворотке крови пациентов и здоровых лиц, включенных в исследование.
Оценка соотношений уровней Ат-нДНК/Ат-дДНК выявила статистически значимое (р < 0,05) повышение данного коэффициента у пациентов с АИТ 1,5 (1,3; 2,2) по отношению к соответствующему показателю в группе сравнения, где его значение составило 0,6 (0,5; 1,2).
Анализ содержания Ат-нДНК в сыворотке крови пациентов с различными клиническими формами гипотиреоза показал, что медиана уровня Ат-нДНК при манифестной форме заболевания составила 8,6 (5,4; 16,4) Ед/мл, при этом статистически значимо превышала значения данного показателя в группе пациентов с субклиническим течением гипотиреоза - 6,8 (2,1; 13,8) Ед/мл (р < 0,05) и в группе сравнения - 2,6 (1,5; 3,6) Ед/мл (р < 0,001).
При манифестной форме гипотиреоза также статистически значимо более высокой была медиана уровня Ат-дДНК - 4,9 (3,4; 10,1) Ед/мл по сравнению как с пациентами с субклинической формой заболевания 4,0 (1,6; 6,0) Ед/мл (р < 0,05), так и с соответствующим значением в группе сравнения - 4,6 (1,3; 5,9) Ед/мл (р < 0,001).
Анализ отношения Ат-нДНК/Ат-дДНК выявил его повышение при манифестной форме гипотиреоза
[1,6 (1,4; 2,2)] в сравнении с показателем у здоровых лиц [0,6 (0,5; 1,2)], р < 0,001. Не отмечено статистически значимых межгрупповых отличий по значению соотношения Ат-нДНК/Ат-дДНК в зависимости от клинической формы гипотиреоза.
Медиана уровня Ат-нДНК у пациентов с субклинической формой заболевания, составляющая 6,8 (2,1; 13,8) Ед/мл, достоверно превышала соответствующее значение в группе сравнения - 2,6 (1,5; 3,6) Ед/мл (р < 0,001). Также значение соотношения Ат-нДНК/Ат-дДНК у пациентов с субклинической формой заболевания было статистически значимо выше, чем в группе сравнения - соответственно 1,6 (1,3; 2,0) и 0,6 (0,5; 1,2), р < 0,01. При этом не отмечено статистически значимых различий уровней Ат-дДНК между группой пациентов с субклинической формой заболевания и группой сравнения, значения которых составили 4,0 (1,6; 6,0) Ед/мл и 4,6 (1,3; 5,9) Ед/мл соответственно.
Оценивая результаты распределения пациентов в зависимости от концентраций ААт, надо сказать, что значения показателей ранжировали по уровням Ат к ДНК: до 2 Ед/мл, от 2 до 4 Ед/мл и > 4 Ед/мл. Анализ распределения по уровню Ат-нДНК показал, что в группе пациентов с субклинической формой гипотиреоза уровень Ат-нДНК до 2 Ед/мл встречается у 25,0 % пациентов, от 2 Ед/мл до 4 Ед/мл - у 17,85 % пациентов и > 4 Ед/мл - у 57,1% пациентов с гипотиреозом.
У пациентов с манифестной формой заболевания уровень АТ-нДНК от 2 до 4 Ед/мл был выявлен в 13,8 % случаев, а доля пациентов с уровнем антител > 4 Ед/мл составила 86,2 %. Ни у кого из пациентов манифестной группы величина этого параметра не была < 2 Ед/мл. В группе сравнения значения уровня Ат-нДНК < 2 Ед/мл наблюдались в 39,3 % случаев, от 2 до 4 Ед/мл - у 53,6 % лиц и > 4 Ед/мл - у 7,1 % лиц.
В сравниваемых группах пациентов наибольшее значение количества антител к нДНК - > 4 Ед/мл, установлено у 86,2 % пациентов с манифестной формой гипотиреоза, что статистически значимо выше, чем
Таблица 3. Уровни антител к ДНК класса ^О в сыворотки крови пациентов с аутоиммунным тиреоидитом (АИТ), Ме ^25; Q75)
Показатели Группа сравнения (п = 32) АИТ (п = 58) Субклиническая (п = 29) Манифестная (п = 29)
Ат-нДНК, Ед/мл 2,6 (1,5; 3,6) 4,4* (2,1; 16,4)* 6,8* (2,1; 13,8) 8,6*# (5,4; 16,4)
Ат-дДНК, Ед/мл 4,6 (1,3; 5,9) 4,5 (1,6; 10,1) 4,0 (1,6; 6,0) 4,9# (3,4; 10,1)
Соотношение Ат-нДНК/Ат-дДНК 0,6 (0,5; 1,2) 1,5* (1,3; 2,2) 1,6* (1,3; 2,0) 1,6* (1,4; 2,2)
Примечание. * - различия статистически значимы (при р < 0,05) по отношению к соответствующим показателям группы сравнения; # - различия статистически значимы (при р < 0,05) при сравнении с соответствующими показателями группы пациентов с субклинической формой гипотиреоза.
при субклинической форме заболевания, а также превышает уровень данного показателя в группе сравнения, которые составляют 57,1 и 7,1 % соответственно (р < 0,01). Также в исследуемых группах значимая разница наблюдалась в отношении числа пациентов с уровнем Ат-нДНК < 2 Ед/мл, что достоверно реже встречалось у пациентов с субклинической формой гипотиреоза (25 %) по сравнению с группой здоровых лиц. Следует отметить, что подобный уровень антител не выявлен у пациентов с манифестной формой заболевания.
Сопоставление уровней АТ-дДНК в группах пациентов с разными формами заболевания не выявило статистически значимых различий по числу пациентов с уровнем антител > 4 Ед/мл. Достоверные различия обнаружены при сравнении числа пациентов с уровнями Ат-дДНК от 2 до 4 Ед/мл: в группе пациентов с манифестной формой гипотиреоза этот уровень антител наблюдался статистически значимо чаше, чем при субклинической форме заболевания и в группе сравнения (р < 0,01).
Обсуждение
Роль нарушений клеточного и гуморального иммунитета в развитии аутоиммунных заболеваний ЩЖ, в том числе АИТ в настоящее время общепризнана. Накопленные данные позволяют большинству исследователей считать, что баланс между стимулирующими и блокирующими Ат определяет клиническую картину (гипер- или гипотиреоз) и объясняет колебания уровня тиреоидных гормонов у некоторых пациентов с аутоиммунными заболеваниями ЩЖ [10-13]. На этот баланс влияет ряд факторов, в том числе беременность и терапия антитиреоидными препаратами или левоти-роксином [12-14]. Описан клинический случай, в котором у 80-летнего пациента, длительно страдавшего АИТ, на фоне появления стимулирующих антител развилась болезнь Грейвса [14].
Накоплен большой материал о роли различных биологически активных веществ, которые индуцируют нарушения регуляции сигнальных каскадов, что приводит к проявлению заболевания. Такие молекулы могут выступать одновременно в качестве различного рода маркеров и факторов прогноза АИТ. К настоящему времени установлено, что важнейшую роль в иммунопатогенезе заболевания играют различные виды ААт, циркулирующие в плазме крови пациентов с АИТ и принимающие участие в механизмах положительной обратной связи (порочных кругах патогенеза), что в конечном итоге способствует поддержанию аутоиммунного процесса [3, 6, 8, 11, 17]. Большое внимание в современных исследованиях уделяется описанию элементов двухцепо-чечной ДНК и фрагментов хроматина в качестве стимуляторов В- и Т-клеток при аутоиммунной патологии. В прогрессировании АИТ немаловажная роль отводится также органонеспецифическим ААт, а именно Ат против ДНК.
Проведенная в рамках нашего исследования оценка уровней Ат к ДНК у пациентов с различными клини-
ческими формами гипотиреоза показала более высокие уровни ААт у пациентов с субклинической и манифестной формой гипотиреоза по отношению к показателям в группе сравнения. При этом уровни Ат-нДНК и Ат-дДНК у пациентов с манифестной формой заболевания были статистически значимо выше, чем при субклинической форме. Следует также отметить, что у большинства пациентов с манифестной формой гипотиреоза (86,2 %) уровень Ат-нДНК превышал 4 Ед/мл. При субклинической форме заболевания доля пациентов с подобными значениями АТ-нДНК составила только 57,1 %. В группе сравнения эта концентрация антител была выявлена только у 7,1 % обследуемых.
Ни у одного пациента с манифестной формой заболевания не выявлен уровень Ат-нДНК < 2 Ед/мл, тогда как при субклиническом гипотиреозе доля пациентов с уровнем антител < 2 Ед/мл составила 25 %. Высокое содержание Ат-нДНК у пациентов АИТ имеет диагностическую значимость. Менее выраженные различия были отмечены по уровню Ат-дДНК в группах пациентов с различными формами гипотиреоза. Уровень Ат-дДНК > 4 Ед/мл установлен у 69 % пациентов с манифестной формой и у 57,1 % пациентов с субклинической формой гипотиреоза. Концентрация Ат-дДНК < 2 Ед/мл наблюдалась у 31 % пациентов с манифестной формой и у 14,3 % пациентов с субклинической формой гипотиреоза. По нашему мнению, эти данные подтверждают патогенетическую роль Ат-нДНК при АИТ, в частности при развитии гипотиреоза в процессе течения этого заболевания.
Полученные нами данные согласуются с результатами, полученными другими авторами. В частности, к настоящему времени известно, что Ат-ТГ и Ат-ТПО присутствуют практически у всех пациентов с АИТ [7]. Помимо диагностической роли, оценка уровней АТ-ТПО позволяет прогнозировать развитие гипотиреоза, особенно в сочетании с определением уровня ТТГ [11]. Вариант ]^04-связанного склерозирующего аутоиммунного заболевания ЩЖ (тиреоидит Риделя) был впервые описан почти более 20 лет назад [15]. Показано, что этот вариант патологии характеризуется выраженной инфильтрацией органов ]^04-положительными плазматическими клетками.
Различные исследовательские группы описали отдельные варианты АИТ, при которых ткань ЩЖ инфильтрирована ]^04-положительными клетками. При этом было показано, что при гистологическом исследовании для ]^04-положительных желез был характерен выраженный фиброз и более распространенная дегенерация фолликулярных клеток по сравнению с тканями ЩЖ при тиреоидите, не связанном с Наличие этих антител также имеет клиническое значение, поскольку для ]^04-положительной формы более характерна высокая заболеваемость у мужчин, более выраженная диффузная гипоэхогенность ЩЖ, ускоренное прогрес-сирование с развитием гипотиреоза и более высокие концентрации Ат [16-18]. Установлено, что тиреоидит
Риделя относится к IgG4-ассоциированным системным фиброзирующим заболеваниям, однако данный вопрос нуждается в дальнейшем изучении [16].
Определение содержания Ат-ТПО используют для диагностики тиреоидита и иных заболеваний ЩЖ [17]. Этот вид циркулирующих Ат выявляется примерно у 80-90 % пациентов с АИТ и у 50-60 % пациентов с болезнью Грейвса. Чувствительность определения Ат-ТПО при диагностике АИТ составляет 90 %. Положительный результат теста на Ат-ТПО является предиктором прогрессирования субклинического гипотиреоза и развития симптомов заболевания [4]. Механизм развития патологии сводится к тому, что Ат-ТПО способствуют усилению цитотоксичности, опосредованной НК-клетками, и комплемент-зависимой цитотоксично-сти. Эти изменения, в свою очередь, приводят к гибели тиреоцитов и атрофии железы. Кроме того, установлено, что у женщин с Ат-ТПО наблюдается повышенный риск развития послеродового тиреоидита [17].
Известно, что синтез тиреоидных гормонов (T4 и T3) зависит от активности ТПО, которая представляет собой гликозилированный гемопротеин с молекулярной массой 107 кДа. Функцией данного фермента является йодирование ТГ и соединение йодотирониновых остатков. Ат-ТПО распознают конформационные эпитопы, расположенные, в частности, в иммуногенной области, которая состоит из двух пересекающихся регионов А и В [19]. Последний представляет собой основную мишень для Ат-ТПО. Вероятнее всего, он выступает в качестве стартового эпитопа в патогенезе АИТ [2].
Ат-ТГ выявляются у 60-80 % пациентов с АИТ и у 40-60 % пациентов с болезнью Грейвса. Чувствительность теста на Ат-ТГ варьирует пределах 30-50 %. По данным проспективного исследования, Ат-ТГ не обладают прогностической ценностью в отношении прогрессирования субклинического гипотиреоза. Низкоаффинные IgG и IgM к ТГ определяются у людей, не страдающих АИТ. IgG1- и IgG4-Ат-ТГ не способны к активации комплемента и, как следствие, не способствуют развитию гипотиреоза при АИТ [17].
Рецепторы к ТТГ (рТТГ), расположенные на базо-латеральной поверхности фолликулярных клеток ЩЖ, выступают в качестве основного регулятора метаболизма ткани железы, клеточного роста и секреции ти-реоидных гормонов. Рецептор состоит из внеклеточ-
■ Литература
1. Ragusa F., Fallahi P., Elia G., Gonnella D. et al. Hashimotos' thyroiditis: Epidemiology, pathogenesis, clinic and therapy. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2019; 33 (6): 101367. DOI: https://doi.org/10.1016/j.beem.2019.101367
2. Ralli M., Angeletti D., Fiore M., D'Aguanno V. et al. Hashimoto's thyroiditis: An update on pathogenic mechanisms, diagnostic protocols, therapeutic strategies, and potential malignant transformation. Autoimmun Rev. 2020; 19 (10): 102649. DOI: https://doi.org/10.1016/j.autrev.2020.102649
3. Артемьева О.В., Ганковская Л.В. Роль полиморфных вариантов генов врожденного иммунитета в долголетии и возраст-ассоциированных заболеваниях. Иммунология. 2022; 43 (3): 333-42. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-3-333-342
4. Рагимова Р.Р. Аутоиммунный тиреоидит (обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2022; 67 (5): 286-91. DOI: https://doi. org/10.51620/0869-2084-2022-67-5-286-291
ной субъединицы (А) с молекулярной массой ~ 55 кДа и трансмембранной субъединицы (В) с молекулярной массой ~ 40 кДа, которые соединены дисульфидными связями. Возможно разделение субъединиц, что приводит к потере внеклеточного компонента рецепторов и оказывает определенное влияние на иммунную систему. Выявление Ат к рТТГ рассматривается в качестве патогномоничного признака болезни Грейвса. В 5 % случаев при этом заболевании Ат к рТТГ отсутствуют, однако определяются Ат-ТПО. Ат к рТТГ связываются с определенными доменами рецепторов, однако точный механизм их активации до настоящего времени не установлен. Как правило, эти Ат активируют рецепторы и стимулируют продукцию тиреоидных гормонов, что приводит к типичному для болезни Грейвса гипер-тиреозу. В то же время в редких случаях вырабатываемые Ат к рТТГ действуют как антагонисты - блокируют рецепторы и вызывают гипотиреоз [20, 21].
В целом, несмотря на значительный прогресс, достигнутый в изучении АИТ и механизмов его развития, до настоящего времени остаются невыясненными звенья патогенеза, обусловливающие развитие толерантности иммунной системы с последующим развитием аутоиммунной реакции в ткани железы. Дальнейшие исследования, направленные на изучение триггерных механизмов аутоиммунной реакции и роли отдельных сигнальных путей в патогенезе АИТ, в том числе изучение спектра и уровней ААт и сопоставление этих параметров с другими иммунологическими показателями, позволили бы выявить молекулы, которые могут рассматриваться в качестве мишеней для терапевтического воздействия с целью терминации аутоиммунного процесса.
Заключение
Изучение содержания ^в-Ат-ДИК в сыворотке крови пациентов с АИТ в зависимости от функционального состояния ЩЖ и уровня Ат -ТПО может иметь прогностическое значение и использоваться в качестве дополнительного диагностического критерия усугубления АИТ и присоединения вторичной патологии. По результатам нашего исследования содержание Ат-нДНК в сыворотке крови пациентов с АИТ положительно коррелирует с уровнем Ат-ТПО.
5. Рожко В.А. Современное состояние проблемы аутоиммунного тиреоидита. Проблемы здоровья и экологии. 2019; (2): 4—13. DOI: https://doi. org/10.51523/2708-6011.2019-16-2-1
6. Goilav B., Putterman C. The role of anti-DNA antibodies in the development of lupus nephritis: a complementary, or alternative, viewpoint?. Semin Nephrol. 2015; 35 (5): 439-43. DOI: https://doi.org/10.1016/j.semnephrol.2015.08.005
7. Weetman A.P. The immunopathogenesis of chronic autoimmune thyroiditis one century after Hashimoto. Eur. Thyroid. J. 2013; 1: 243-50. DOI: https://doi. org/10.1159/000343834
8. Куклина Е.М., Смирнова Е.Н., Байдина Т.В., Некрасова И.В., Балашова Т.С., Сурсякова Н.В., Данченко И.Ю. В-лимфоциты как антигенпрезентиру-ющие клетки при аутоиммунных патологиях. Вестник Пермского федерального исследовательского центра. 2017; 3: 36-41. URL: https://journal.permsc.ru/index. php/pscj/article/view/PSCJ2017n3p5
9. Valencia-Sanchez C., Pittock S.J., Mead-Harvey C., Dubey D. et al. Brain dysfunction and thyroid antibodies: autoimmune diagnosis and misdiagnosis. Brain Commun. 2021; 3 (2): fcaa233. DOI: https://doi.org/10.1093/bramcomms/fcaa233
10. Granito A., Muratori L., Tovoli F., Muratori P. Diagnostic role of anti-dsD-NA antibodies: do not forget autoimmune hepatitis. Nat Rev Rheumatol. 2021; 17 (4): 244. DOI: https://doi.org/10.1038/s41584-021-00573-7
11. Keyhanian M., Sarvghadi F., Mehran L., Amouzegar A. et al. Long-Term variations of antithyroperoxidase antibodies and its clinical significance. Hormone and Metabolic Research. 2019; 51 (06): 347-52. DOI: https://doi. org/10.1055/a-0887-6213
12. McLachlan S.M., Rapoport B. Thyrotropin-blocking autoantibodies and thyroid-stimulating autoantibodies: potential mechanisms involved in the pendulum swinging from hypothyroidism to hyperthyroidism or vice versa. Thyroid. 2013; 23: 14-24. DOI: https://doi.org/10.1089/thy.2012.0374
13. McLachlan S.M., Rapoport B. Breaking tolerance to thyroid antigens: Changing concepts in thyroid autoimmunity. Endocrine Reviews. 2014; 35 (1): 59105. DOI: https://doi.org/10.1210%2Fer.2013-1055
14. Kamath C., Young S., Kabelis K., Sanders J. et al. Thyrotrophin receptor antibody characteristics in a woman with long-standing Hashimoto's who developed Graves' disease and pretibial myxoedema. Clin Endocrinol (Oxf). 2012; 77 (3): 46570. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1365-2265.2012.04397.x
15. Deshpande V. IgG4 related disease of the head and neck. Head and neck pathology. 2015; 9 (1): 24-31. DOI: https://doi.org/10.1007/s12105-015-0620-6
16. Покровская Е.В., Бельцевич Д.Г., Абросимов А.Ю., Лищук С.В. и др. Тиреоидит Риделя. Наблюдение из практики. Эндокринная хирургия. 2019; 13 (3): 133^0. DOI: https://doi.org/10.14341/serg10324
17. Orgiazzi J. Thyroid autoimmunity. Presse medicale. 2012; 41: 611-25. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lpm.2012.10.002
18. Li Y., Wang X., Liu Z., Ma J. et al. Hashimoto's thyroiditis with increased IgG4-positive plasma cells: using thyroid-specific diagnostic criteria may identify early phase IgG4 thyroiditis. Thyroid. 2020; 30 (2): 251-61. DOI: https://doi. org/10.1089/thy.2019.0063
19. Onalan E., Donder E. Neutrophil and platelet to lymphocyte ratio in patients with hypothyroid Hashimoto's thyroiditis. Acta Bio Medica: Ate-nei Parmensis. 2020; 91 (2): 310. DOI: https://doi.org/10.23750%2Fabm.v91i2.8592
20. Furmaniak J., Sanders J., Sanders P., Miller-Gallacher J. et al. Practical applications of studies on the TSH receptor and TSH receptor autoantibodies. Endocrine. 2020; 68 (2): 261-4. DOI: https://doi.org/10.1007%2Fs12020-019-02180-9
21. Rotondi M., Carbone A., Coperchini F., Fonte R. et al. Diagnosis of endocrine disease: IgG4-related thyroid autoimmune disease. European Journal of Endocrinology. 2019; 180 (5): 175-83. DOI: https://doi.org/10.1530/eje-18-1024
■ References
1. Ragusa F., Fallahi P., Elia G., Gonnella D., et al. Hashimotos' thyroiditis: Epidemiology, pathogenesis, clinic and therapy. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2019; 33 (6): 101367. DOI: https://doi.org/10.1016/j.beem.2019.101367
2. Ralli M., Angeletti D., Fiore M., D'Aguanno V., et al. Hashimoto's thyroid-itis: An update on pathogenic mechanisms, diagnostic protocols, therapeutic strategies, and potential malignant transformation. Autoimmun Rev. 2020; 19 (10): 102649. DOI: https://doi.org/10.1016/j.autrev.2020.102649
3. Artemyeva O.V., Gankovskaya L.V. Polymorphic variants of innate immunity genes in longevity and age-associated diseases. Immunologiya. 2022; 43 (3): 333-42. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-3-333-342 (in Russian)
4. Rahimova R.R. Autoimmune thyroiditis (review of literature). Klini-cheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics). 2022; 67 (5): 286-91. DOI: https://dx.doi.org/10.51620/0869-2084-2022-67-286-291 (in Russian)
5. Rozhko V.A. Current state of the autoimmune thyroiditis problem. Health and Ecology Issues. 2019; (2): 4-13. DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2019-16-2-1(in Russian)
6. Goilav B., Putterman C. The Role of Anti-DNA antibodies in the development of lupus nephritis: a complementary, or alternative, viewpoint?. Semin Nephrol. 2015; 35 (5): 439^3. DOI: https://doi.org/10.1016/j.semnephrol.2015.08.005
7. Weetman A.P. The immunopathogenesis of chronic autoimmune thyroiditis one century after Hashimoto. Eur Thyroid J. 2013; 1: 243-50. DOI: https://doi. org/10.1159/000343834
8. Kuklina Ye.M., Smirnova Ye.N., Baydina T.V., Nekrasova I.V., Balashova T.S., Sursyakova N.V., Danchenko I.Yu. B-lymphocytes as antigen-presenting cells in autoimmune pathologies. Bulletin of the Perm Federal Research Center. 2017; 3: 36-41. URL: https://journal.permsc.ru/index.php/pscj/article/view/PSCJ2017n3p5 (in Russian)
9. Valencia-Sanchez C., Pittock S.J., Mead-Harvey C., Dubey D., et al. Brain dysfunction and thyroid antibodies: autoimmune diagnosis and misdiagnosis. Brain Commun. 2021; 3 (2): fcaa233. DOI: https://doi.org/10.1093/braincomms/fcaa233
10. Granito A., Muratori L., Tovoli F., Muratori P. Diagnostic role of anti-dsD-NA antibodies: do not forget autoimmune hepatitis. Nat Rev Rheumatol. 2021; 17 (4): 244. DOI: https://doi.org/10.1038/s41584-021-00573-7
11. Keyhanian M., Sarvghadi F., Mehran L., Amouzegar A., et al. Long-Term variations of antithyroperoxidase antibodies and its clinical significance.
Hormone and Metabolic Research. 2019; 51 (06): 347-52. DOI: https://doi. org/10.1055/a-0887-6213
12. McLachlan S.M., Rapoport B. Thyrotropin-blocking autoantibo-dies and thyroid-stimulating autoantibodies: potential mechanisms involved in the pendulum swinging from hypothyroidism to hyperthyroidism or vice versa. Thyroid. 2013; 23: 14-24. DOI: https://doi.org/10.1089/thy.2012.0374
13. McLachlan S.M., Rapoport B. Breaking tolerance to thyroid antigens: Changing concepts in thyroid autoimmunity. Endocrine Reviews. 2014; 35 (1): 59105. DOI: https://doi.org/10.1210%2Fer.2013-1055
14. Kamath C., Young S., Kabelis K., Sanders J., et al. Thyrotrophin receptor antibody characteristics in a woman with long-standing Hashimoto's who developed Graves' disease and pretibial myxoedema. Clin Endocrinol (Oxf). 2012; 77 (3): 465-70. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1365-2265.2012.04397.x
15. Deshpande V. IgG4 related disease of the head and neck. Head and neck pathology. 2015; 9 (1): 24-31. DOI: https://doi.org/10.1007/s12105-015-0620-6
16. Pokrovskaya Ye.V., Beltsevich D.G., Abrosimov A.Yu., Lishchuk S.V., Vos-koboynikov V.V., Sheve A. Riedel's thyroiditis. Observation from practice. Endocrine Surgery. 2019; 13 (3): 133^0. DOI: https://doi.org/doi.org/10.14341/serg10324 (in Russian)
17. Orgiazzi J. Thyroid autoimmunity. Presse medicale. 2012; 41: 611-25. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lpm.2012.10.002
18. Li Y., Wang X., Liu Z., Ma J., et al. Hashimoto's thyroiditis with increased IgG4-positive plasma cells: using thyroid-specific diagnostic criteria may identify early phase IgG4 thyroiditis. Thyroid. 2020; 30 (2): 251-61. DOI: https://doi. org/10.1089/thy.2019.0063
19. Onalan E., Donder E. Neutrophil and platelet to lymphocyte ratio in patients with hypothyroid Hashimoto's thyroiditis. Acta Bio Medica: Ate-nei Parmensis. 2020; 91 (2): 310. DOI: https://doi.org/10.23750%2Fabm.v91i2.8592
20. Furmaniak J., Sanders J., Sanders P., Miller-Gallacher J., et al. Practical applications of studies on the TSH receptor and TSH receptor autoantibodies. Endocrine. 2020; 68 (2): 261-4. DOI: https://doi.org/10.1007%2Fs12020-019-02180-9
21. Rotondi M., Carbone A., Coperchini F., Fonte R., et al. Diagnosis of endocrine disease: IgG4-related thyroid autoimmune disease. European Journal of Endocrinology. 2019; 180 (5): 175-83. DOI: https://doi.org/10.1530/eje-18-1024
Сведения об авторе
Рагимова Рена Руфат кызы - канд. биол. наук, старший преподаватель каф. биохимии АМУ Минздрава Азербайджанской Республики, Баку, Азербайджан E-mail: ilahashahverdiyeva@gmail.com https://orcid.org/0000-0001-6080-0622
Author's information
Rena R. Rahimova - PhD, Assistant at the Dept. of Biochemistry, AMU, MOH of Azerbaijan Republic, Baku, Azerbaijan Republic E-mail: ilahashahverdiyeva@gmail.com http://orcid.org/0000-0001-6080-0622
