CC BY
46
УДК 615.1:615.22
ЛИТЕРАТУРА
1. Беленький Л. М. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Рига, 1963. 116 с.
2. Зайцева К. К., Аксенов И. В. Антигипоксанты в коррекции гипоксических и ишемических состояний. М., 1992. 108 с.
3. Лукьянова Л. Д. (ред.). Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств. М., 1990. 18 с.
4. Самойлов Н. Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. Томск, 1970. 63 с.
5. Самойлов Н. Н. (ред.). Фармакологическая коррекция физической работоспособности. М., 2002. 120 с.
6. Kocic R., Kocic G., Pavlovic D. et al. The relation between susceptibility to stress and antioxidative capasiti during heperthyroidism // J. end. Investigation. 1998. Vol. 21 (4). Р 41.
7. Tsutsui Н. Oxidative stress in heart failure: the role of mitochondria // Intern. Med. 2001. Vol. 40 (12). Р 1177-1182.
N. P. KATUNINA, E. N. STRATIENKO, S. E. EGOROVA, M. V ZUBKOVA, V. P. GALENKO-YAROSHEVSKY
COMPARATIVE STUDY OF THE ANTIHYPOXIC ACTIVITY OF NEW ADAMANTILEDERIVA TIVES OF PYRIDINE AND ISOTIURONIEN DERIVATIVES OF 3-OXIPYRIDINE
The subject of our study was the influence of 9 new isotiuronien substituted derivatives of 3-oxipyridine, 21 adamantile substituted derivatives of pyridine and 2 well-known antihypoxants Emoxipine and Mexidolum on the life interval of mice under four models of acute hypoxia. Isotiuronien substituted derivative of 3-oxipyridine, CK-76 in cipher, and 2,3-substituted adamantile derivative of pyridine, CK-193 in cipher, produce an antihypoxic influence under four models of hypoxia and the influence produced exceeds other studied chemical compositions and well-known antihypoxants in comparison Emoxipine and Mexidolum. The compositions CK-76 and CK-193 may be recommended for further study as long-range antihypoxants.
С. П. ЛЫСЕНКОВ, А. А. БАРЧО, P. И. БГУАШЕВА, И. Ю. МАЛОВА, В. П. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ
ОРГАНОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА РЕКСОДА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО РЕПЕРФУЗИОННОГО СИНДРОМА
Краснодарский филиал Южного бюро РАМН, г. Краснодар
Реперфузионный синдром (РС) - часто встречаемая ситуация в различных областях медицины: сосудистой хирургии, трансплантологии, реанимации и др. Развитие РС значительно отягощает течение заболеваний, порой выступая уже в качестве основной причины гибели пациентов [2, 3, 4, 7, 8, 9].
В многогранных процессах реперфузионных повреждений особое и важное место занимают активация пе-рекисного окисления липидов (ПОЛ) и образование активных радикалов [6]. С этих позиций совершенно оправдан поиск средств, усиливающих антиоксидантную защиту. В этом плане повышенный интерес представляет супероксиддисмутаза (СОД).
Материалы и методы
Опыты проводились на нелинейных белых кры-сах-самцах массой 170-230 г под общим обезболиванием (внутрибрюшинное введение тиопентала натрия в дозе 40 мг/кг). Моделирование постишемического синдрома проводилось по методу С. П. Лысенкова, Л. 3. Тель [5] путем перевязки грудной части аорты без пневмоторакса с последующим восстановлением кровообращения.
Фармакологический препарат супероксиддисму-тазы - рексод вводился в одну из хвостовых вен из расчета 0,02 мг/кг В эксперименте было использовано четыре группы животных. Во всех группах пос-
ле 28-минутной ишемии кровоток по аорте восстанавливали путем снятия лигатуры. Контрольной группе (I гр.) внутривенно вводился физиологический раствор в дозе 2 мл/кг. Второй группе (II гр.) животных рексод вводили внутривенно в дозе 0,02 мг/кг в физиологическом растворе в объеме 2 мл/кг до наложения лигатуры. В третьей группе (III гр.) препарат вводился сразу после снятия лигатуры. В четвертой группе (IV гр.) введение рексода осуществлялось через 10 минут после восстановления кровотока в той же дозе.
Активность аланин-(АлАТ)аспартатаминотрансфе-разы (АсАТ), уровень кальция и калия определяли в плазме крови с помощью тест-наборов «Витал-Диагностика СПб» (г. Санкт-Петербург) на программируемом фотометре «Screen Master plus» (Hospitex Diagnostics str., Italy). Содержание миог-лобина в плазме крови определяли с помощью наборов ДС-эритромиоглобин (НПО «Диагностические системы», г. Нижний Новгород). Проводилась микроскопия органов и тканей в окраске гематоксилин-эозин; для количественной оценки выраженности патологических проявлений использовалась морфометрия [1].
Цифровой материал обработан методом вариационной статистики с использованием параметрических критериев по программе «Bio Stat».
Сравнительная характеристика биохимических параметров плазмы крови при различных вариантах введения рексода (М ± т)
Показатели Характер эксперимента
Здоровые Контроль: ишемия+реперфузия (I гр.) Введение СОД до лигатуры (II гр.) Введение СОД после снятия лигатуры (III гр.) Введение СОД через 10 мин после снятия лигатуры (IV гр.)
АсАТ, 0,45±0,11 1,05± 0,18± 0,12± 0,34±
мМоль/л-ч 0,11*** 0 05***ллл 0,03***ллл 0,11ллл
АлАТ, 1,19±0,10 2,23± 1,68± 1,45± 2,34±
мМоль/л-ч 0,23*** 0 12***ллл 0,08***лл 0,26***
Миоглобин, 26,25±4,1 163,6± 30,0± 57,5± 60,1±
нг/мл 27,8*** 12,6ллл 12,6ллл 11 5*ллл
Кальций, 0,55±0,03 2,06± 4,83± 4,01± 5,35±
мМоль/л 0,26*** 0,22***ллл 0,56***ллл 0 18***ллл
Калий, 5,11 ±0,16 6,40± 4,71± 4,80± 5,16±
мМоль/л 0,12*** 0,15ллл 0,15ллл 0,11ллл
Примечание: * - р<0,05; *** - р<0,001 - достоверность по отношению к группе здоровых животных; ЛЛ - р<0,01; ллл - р<0,001 - достоверность по отношению к контролю.
Результаты исследования
Полученные в совокупности данные могли свидетельствовать о выраженном органопротекторном эффекте рексода. В первую очередь об этом свидетельствует показатель летальности опытных крыс, который оказался в 5,4 раза меньше, чем в группе контрольных крыс (13,2% и 72,9% соответственно).
Анализ биохимических показателей - маркеров повреждения указывал на то, что наиболее оптимальными сроками введения препарата является время до остановки кровообращения, а также непосредственно после восстановления кровообращения (табл. 1).
Оказалось, что на ферментативную активность АлАТ и АсАТ рексод действует избирательно. Так, по отношению к ферменту АлАТ рексод оказывал в опытных группах нормализующий эффект и определял явную тенденцию к нормализации этого параметра, хотя значения активности фермента не достигали показателей здоровых животных, но были достоверно ниже, чем контрольные показатели (р < 0,001). Наиболее эффективным снижение оказалось при профилактическом введении, а также при введении рексода сразу после восстановления кровообращения. Если препарат вводили через 10 минут, то активность фермента была такая же, как и в контрольной группе.
В отношении АсАТ рексод в значительной степени подавлял активность фермента, причем показатели активности были намного ниже, чем у здоровых и контрольных животных (р < 0,001). С учетом положительного влияния рексода на конечный результат - выживаемость подобное снижение активности фермента можно отнести к специфическим эффектам рексода
именно по отношению к ферменту АсАТ. Это можно также подтвердить значительным многократным снижением уровня миоглобина, характеризующего степень миолиза. В используемой модели значительная масса мышц попадала в зону ишемии и реперфузии. Концентрация калия (табл.1) как маркера клеточного повреждения, во многом повторяла динамику миоглобина, и наиболее эффективное снижение его уровня отмечалось при профилактическом введении препарата либо при его введении непосредственно после восстановления кровообращения.
Концентрация кальция в плазме крови изменялась в каждой группе по-разному, однако эти изменения оказались существенными. Так, если в контрольной группе уровень кальция возрастал в среднем в 3,7 раза, то во II группе он увеличивался в 8,7 раза, в III -в 7,3 раза, а в IV группе - в 9,7 раза. Такое повышение общего кальция могло быть связано либо с избирательной модификацией проницаемости кальциевых каналов, либо с поступлением кальция в общий кровоток из костного депо.
Анализ морфометрических показателей повреждения органов и тканей (табл. 2) позволил установить, что рексод проявлял наибольшую эффективность в легких, скелетных мышцах, тонком кишечнике, миокарде и почках. Наиболее выраженный эффект отмечен при введении рексода до моделирования ишемии и непосредственно после восстановления кровообращения. Этот факт может иметь важное практическое значение для дальнейшего планирования доклинических исследований.
Морфометрические показатели (усл. ед.) органов и тканей в реперфузионном периоде в зависимости от времени введения рексода
Исследуемый орган Патологический признак Группы опытов
I группа -контроль II опытная группа (рексод+ишем ия+репер-фузия) III опытная группа (введение рексода непосредственно после восстановления кровообращения) IV опытная группа (введение рексода спустя 10 мин после начала реперфузии)
Мозг Отек и дистрофия нейроцитов 4,42±0,17 3,97±0,15*** 3,97±0,15 4,34±0,10
Легкие Микроателектазы 3,07±0,15 1,02±0,08*** 1,01 ±0,12*** 1,04±0,14***
Полнокровие венул интерстиция 3,15±0,13 1,49±0,15** 2,66±0,12** 2,96±0,14
Сердце Отек кардиомиоцитов 4,38±0,16 3,32±0,17** 3,87±0,16** 4,10±0,13
Отек интерстиция 4,39±0,19 3,76±0,15* 4,02±0,13 4,12±0,15
Полнокровие венул 2,23±0,18 1,24±0,2** 1,43±0,20** 1,70±0,14*
Печень Полнокровие венул 2,91±0,16 2,38±0,15* 2,71 ±0,14 2,80±0,17
Отек эндотелия капилляров 3,88±0,16 3,69±0,17 3,76±0,14 3,65±0,13
Почки Полнокровие венул 2,06±0,18 1, 7 5± 0,11 * 1,94±0,10 2,04±0,18
Отек и дистрофия эпителия канальцев 2,83±0,13 2,26±0,09** 1,85±0,12** 2,76±0,13
Микротромбоз клубочков 1,22±0,17 0,69±0,07** 0,69±0,09 1,00±0,12
Тонкий кишечник Отек и десквамация эпителия ворсин 3,15±0,19 1,52±0,13** 1,55±0,19*** 2,18±0,19**
Скелетные мышцы Отек мышечных волокон 1,57±0,01 1,16±0,24* 0,69±0,13*** 1,00±0,14*
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001 - достоверность по отношению к контролю.
ЛИТЕРАТУРА
1. Автандилов Г. Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина. 1990. С. 58-102.
2. Афанасьев С. А., Вечерский Ю. Ю., Ласукова Т. В., Пономаренко И. В., Чернявский А. М. Возможности коррекции ре-перфузионного синдрома при операциях аортокоронарного шунтирования // Грудная и сердечно-сосудистая хирургия. 2003. № 1. С. 66.
3. Берштейн Л. Л., Новиков В. И., Гришкин Ю. Н. Оценка эффективности реперфузии при остром инфаркте миокарда: современные концепции и методы // Российский кардиологический журнал. 2005. № 1. С. 73-80.
4. 3олотокрылина Е. С. Постреанимационная болезнь // Анестезиология и реанимация. 2000. № 6. С. 68-72.
5. Лысенков С. П., Тель Л. 3. Способ моделирования острого нарушения магистрального кровотока в грудной аорте // Рес-
Эти эксперименты показывают, что в течение столь короткого времени после восстановления кровообращения осуществляется запуск основных патофизиологических механизмов, обеспечивающих повреждение органов и тканей.
Таким образом, рексод обладает выраженным органопротекторным действием, увеличивает выживаемость животных и оказывает нормализующий эффект на комплекс биохимических показателей. Максимальный эффект рексода проявляется при его введении непосредственно перед эпизодом ишемии либо сразу после восстановления кровообращения. В том и в другом случае наибольшую селективность препарат проявляет по отношению к легким, скелетным мышцам, почкам и сердцу. Выявленная органоселективность может служить основанием для расширения показаний к назначению препарата при развитии полиорган-ной недостаточности.
Поступила 18.10.2006
публика Казахстан. Предварительный патент № 2705. 1995.
6. Шанин Ю. Н., Парамонов Б. А., Зиновьев Е. В., Сидель-ников В. О. Окислительный стресс как типовой патологический процесс // Клиническая патофизиология. 2002. № 2. С. 3-7.
7. Шевантаева О. Н., Косюга Ю. И. Влияние актавегина на сперматогенез самцов белых крыс после моделирования клинической смерти // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006, Т. 69, № 2. С. 40-43.
8. Park J. W., Oi W. N., Liu J. O., Urbaniak J. R., Folz R. J., Chen L. E. Inhibition of iNOS attenuates skeletal muskle reperfusion injury in extracellular superoxide dismutase knockout mice // Microsurgery. 2005. № 11. P. 11-13.
9. Prasad A., Gersh B. J. Monagement of microvascular dysfunction and reperfusion injury // Heart. 2005. V. 91, № 12. P. 1530-1532.
S. P. LYSENKOV, A. A. BARCHO, R. I. BGUASHEVA, I. Yu. MALOVA, V. P. GALENKO-YAROSHEVSKY
ORGAN PROTECTORS PROPERTIES OF REKSOD INCONDITIONS OF EXPERIMENTAL REPERFUSION SYNDROME
In experiments on nonlinear rats, there were determined evident organ protecting properties of rexode (enzymatic agent of superoxide dismutase) under conditions of reperfusion syndrome modeled by temporary clamping of thoracic aorta. Intravenous introduction of rexode (25 mg/kg) reduced the animals’ lethality by 5,4 times and produced a normalizing effect on the activity of hepatic enzymes, level of potassium and myoglobin in bloodplasma. The most marked body-protecting effect of rexode was revealed after its prophylactic introduction or immediately after reperfusion.
