CC BY
114
efficiency of erythropoietin for treatment of anemia associated with combination antiviral therapy in patients with chronic hepatitis C. Rossiyskiy zhurnal gastroenterology gepatologii, koloproktologii. 2007; 17 (1), pril. 29: 21 (in Russian).
52. McHutchison J.G., Manns M.P., Longo D.L. Definition and management of anemia in patients infected with hepatitis C virus. Liver Inter. 2006; 26: 389-98.
53. Colon-Otero G., Menke D., Hook C.C. A practical approach to the differential diagnosis and evaluation of the adult patient with macrocytic anemia. Med. Clin. North Am. 1992; 76: 581-97.
54. Davidson R.J., Hamilton P.J. High mean red cell volume: its incidence and significance in routine haematology. J. Clin. Pathol. 1978; 31: 493-8.
55. Lawrence A.C., Bevington J.M., Young M. Storage of blood and the mean corpuscular volume. J. Clin. Pathol. 1975; 28: 345-9.
56. Nathan D.G., Orkin S.H., Look A.T. et al. Nathan and Oski's hematology of infancy and childhood. Philadelphia: Saunders; 2003.
57. Kaferle J., Heryl C., Strzoda C.E. et al. Evaluation of macrocyto-sis. Am. Fam. Physician. 2009; 79 (3): 203-8.
58. Savage D.G., Ogundipe A., Allen R.H. et al. Etiology and diagnostic evaluation of macrocytosis. Am. J. Med. Sci. 2000; 319 (6): 343-52.
59. Gareev R.A. The summary of adsorption and transport function
research. Avaible at: http: / www.econfrae.ru/pdf/2010/08/ga-reev.pdf (in Russian).
60. Could rybavirin cause macrocytosis, and to whom? Avaible at: http://www.ehealthme.com/ds/ribavirin/macrocytosis.phtml
61. Could pegasys cause macrocytosis, and to whom? Avaible at: http://www.ehealthme.com/ds/pegasys/macrocytosis.phtml
62. Harriman GR, Smith PD, Horne MK, et al. Vitamin B12 malabsorption in patients with acquired immunodeficiency syndrome. Arch Intern Med. 1989; 149: 2039-41.
63. Remacha A.F., Cadafalch J. Cobalamin deficiency in patients infected with the human immunodeficiency virus. Semin. Hematol. 1999; 36: 75.
64. Borgia G., Reynanud L., Gentile I. et al. Pernicions anemia during INF-alpha treatment for chronic hepatitis C. J. Interferon Cytokine Res. 2003; 23 (1): 11-2.
Поступила 23.12.13 Received 23.12.13
Сведения об авторах:
Лысенко Ирина Валентиновна, канд. мед. наук, врач генконсульства, генеральное консульство Российской Федерации в Калькутте, Индия, email: lysirine@rambler.ru
В ПОМОЩЬ ВИРУСОЛОГУ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 616.98:578.833.28]-078
Азарян А.Р.1, Гришанова А.П.1, Иващенко Е.И.1, Шендо Г.Л.1, Ковтунов А.И.2, Неталиева С.Ж.3, Бабаева М.А.3, Буркин А.В.3, Аршба Т.Е.3, ЛаричевВ.Ф.4, Бутенко А.М.4
опыт применения ифа тест-систем для серологической диагностики лихорадки западного нила
1ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области», 414057, Астрахань, ул. Н. Островского/ Кирова, 122/89; 2Управление Роспотребнадзора по Астраханской области, 414057, Астрахань, ул. Н. Островского, 138; 3ГБУЗ АО «Областная инфекционная клиническая больница им. А.М. Ничоги», 414004, Астрахань, Началовское шоссе, 7; 4ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского» Минздрава России, 123098, Москва, ул. Гамалеи, 16
В результате сравнительного применения иммуноферментных тест-систем «Anti-West Nile virus ELISA-IgM» фирмы «Euroimmun AG» (Германия) и «БиоСкрин-ВЗН-IgM», производства ЗАО БТК «Биосервис» (Россия), предназначенных для серодиагностики лихорадки Западного Нила, установлена очень низкая специфичность системы Anti-West Nile ELISA-IgM, что выражается в регистрации ложноположительных результатов.
Ключевые слова: лихорадка Западного Нила; серодиагностика; тест-системы ИФА-IgM: Euroimmun AG (Германия), Биосервис (Россия); сравнение специфичности.
AzaryanA.R.1, GrishanovaA.P.1, IvashchenkoE.I.1, Shendo G.L.1, KovtunovA.I.2, NetalievaS.Zh.3, BurkinA.V.3, Arshba T.E.3, Larichev V.F.4, Butenko A.M.4
1Center of Hygiene and Epidemiology in the Astrakhan region, 414057, Astrakhan, N. Ostrovskogo/Kirova str., 122/89; 2Rospotrebnadzor Manage-
ment in Astrakhan region, 414057, Astrakhan, N. Ostrovskogo str., 138; 3A. Nichogy region infection hospital, 414004, Astrakhan, Nachlovskoye highway, 7; 4D.I. Ivanovsky Institute of Virology, 16, Gamalei str., Moscow, Russian Federation, 123098
As a result of comparative application of enzyme immunoassay "Anti-West Nile virus ELISA-IgM" of the company "Euroimmun AG" (Germany) and "BioScrin-WNV-IgM", produced by ZAO Biotech company "Bioservice» (Russia), intended for serodiagnosis of West Nile fever there was established very low specificity of "Anti-West Nile ELISA-IgM", which is manifested in the registration of false positive results.
Key words: West Nile fever; serodiagnosis; ELISA-IgM test; "Euroimmun AG " (Germany), "Bioservice" (Russia) ELISA kits.
Контроль IgM+
Серологическая диагностика арбовирус-ных инфекций проводилась в Астраханской области с 1997 по 2013 г. в вирусологической лаборатории Центра гигиены и эпидемиологии (ЦГиЭ). В 1997-2011 гг. для этой цели использовали иммуноферментные (ИФА) тест-системы производства НИИ вирусологии им.Д.И.Ивановского (Москва), предназначенные для выявления специфических ^М в сыворотках крови больных [1]. В 2013 г. вирусологическая лаборатория ЦГиЭ перешла на применение ИФА-^М системы ЗАО БТК «Биосервис» (РУ № ФСР 2012/13840 от 10.09.12), которая является коммерческим аналогом тест-системы НИИ вирусологии.
В период с 1997 по 2013 г. в лаборатории было обследовано 13 863 сыворотки (а также пробы СМЖ) от 8464 больных с острыми сезонными лихорадочными заболеваниями с предварительными диагнозами: ОРВИ, серозный менингит, крымская геморрагическая лихорадка, Астраханская риккетсиозная лихорадка, ВИНЭ, лихорадка ку и др. В результате этой работы было верифицировано 544 случая лихорадки Западного Нила (ЛЗН), включая 95 случаев в 1999 г.
Тест-системы ИФА-^М НИИ вирусологии (до 2012 г.) и ЗАО «Биосервис» (в 2012 и 2013 гг.) были апробированы и с успехом применялись также в вирусологических лабораториях ЦГиЭ в Волгограде, Ростове-на-Дону и Краснодаре. При использовании этих диагностикумов предусматриваются обязательные положительные (К+) и отрицательные (к-) контроли, а также параллельное обследование сывороток со специфическим и нормальным антигенами. Учет реакции осуществляется на спектрофотометре при длине волны 450 нм. Положительными считаются пробы сывороток со следующими параметрами: оптическая плотность (ОП) в лунках со специфическим антигеном выше 0,350 о. е.; ОП в лунках со специфическим антигеном превышает ОП с нормальным антигеном в 3 раза и более. Все сыворотки, положительные при первичном скрининге в разведении 1:100, тестируются повторно для определения титра антител. диагностическим считается титр ^М > 1:800 (согласно МУ 3.1.3.2600 - 10 «Мероприятия по борьбе с лихорадкой Западного Нила (ЛЗН) на территории Российской Федерации»). Выявление специфических ^М возможно в первые дни заболевания, что позволяет проводить экспресс-диагностику ЛЗН сразу после госпитализации больных. При обследовании парных сывороток регулярно обнаруживается диагностически значимая сероконверсия ^М [1, 3]. Результаты тестирования в ИФА-^М полностью подтверждаются
Для корреспонденции: Алла Рудольфовна Азарян, зав. вирусологической лаб. ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области», e-mail: marineazaryan@mail.ru
Таблица 1
Результаты обследования сывороток крови 5 больных из ОИКБ в ИФА-тест-системах Euroimmun и Биосервис на антитела к вирусу ЗН
Диагностические лаборатории
Номер сыво- Больные День обследования от ОИКБ, Астрахань ЦгиЭ, Астраханской области Волгоградский НИПЧИ
ротки начала тест-системы ИФА
вания Euroimmun Биосервис Euroimmun
IgM IgM IgM IgG
127 Х.М. 14 +* (R±2,18) 0** 0 0
159 31 н/о *** 0 0 0
128 К. 3 + (R-2,56) 0 0 0
221 31 н/о 0 0 0
129 Я. 5 + (R-1,8) 1:800 ± (R-1,04) +(R-2,02)
133 10 +(R-1,84) 1:800 + (R-1,28) (R-1,92)
130 Х.А. 14 +(R-2,4) Отр. +(R-1,75) 0
180 28 н/о Отр. н/о н/о
131 Р.Н. 4 +(R-1,83) Отр. Погранич. ± (R-0,99) 0
н/о
н/о
н/о
н/о
Примечание. Здесь и в табл. 2: R - Ratio; * + - положительный результат; ** 0 отрицательный результат; *** н/о - не обследованы.
данными ИФА-IgG [3]. При учете результатов реакции рассчитывается отношение (Ratio) ОП в лунках с сыворотками больных к ОП в лунке с калибратором. Результат считается положительным при Ratio > 1,1, отрицательным при Ratio < 0,8, пограничным (сомнительным) в интервале от 0,8 до 1,1.
В период с 17 мая по 3 июля 2013 г. в лаборатории ОИКБ с использованием наборов Anti-West Nile virus (IgM) фирмы Euroimmun AG были обследованы сыворотки 535 госпитализированных больных. 16 проб от 15 больных с положительным результатом ИФА на IgM-антитела к вирусу ЗН были направлены в вирусологическую лабораторию ЦГиЭ для подтверждения диагноза (согласно МУ 4.2.3009 - 12 «Порядок организации и проведения лабораторной диагностики ЛЗН для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней»). Первые 6 сывороток от 5 больных поступили 29 мая. Раннее появление больных в мае-середине июня вызвало настороженность, так как предшествующими многолетними исследованиями было установлено, что первые случаи ЛЗН в Астраханской области появляются в конце июня и регистрируются до октября месяца, а пик заболеваемости приходится на август-сентябрь [1, 2].
При проверке в лаборатории ЦГиЭ из 6 сывороток, положительных в тест-системе Euroimmun AG, позитивными в тест-системе ЗАО «Биосервис» оказались только две (№ 129 и 133), взятые у больной Я. на 5-й и 10-й дни заболевания. При этом титр IgM антител в обеих пробах составил 1:800. Результаты обследования четырех сывороток (№ 127, 128, 130, 131), а также
+
Таблица 2
Результаты обследования сывороток 11 больных из ОИКБ в ИФА-тест-системах Euroimmun и Биосервис на IgM антитела к вирусу ЗН
Номер сыворотки Больные День об- Диагностические лаборатории
следования от начала заболевания ОИКБ, Астрахань ЦгиЭ, Астраханской области
174 К. 1 +* (R-7,84) 0**
215 11 н/о*** 0
175 Г. 7 + (R-2,5) 0
182 12 н/о 0
176 И. 1 + (R-2,4) 0
184 8 н/о 0
177 Л. 11 + (R-1,9) 0
178 Ч. 4 + (R-7,0) 0
198 А.А. 9 + (R-2,19) 0
275 25 н/о 0
199 д.д. 8 + (R-7,0) 0
213 12 н/о 0
245 А.Д. 3 + (R-9,5) 0
244 7 н/о 0
247 С. 6 + (R-3,5) 0
258 11 н/о 0
248 Н. 9 + (R-1,6) 0
181 Д.Е. 7 + (R-1,7) 0
249 18 н/о 0
Контроль IgM+ н/о +
проб, полученных от больных Х.М., К. и Х.А. в более поздние сроки (через 31, 31 и 28 дней от начала болезни) были отрицательными (табл. 1). В связи с расхождением полученных данных 04.06.13 г. 6 образцов сывороток были направлены в Волгоградский противочумный институт (являющийся Референс-центром Роспотребнадзора по мониторингу за возбудителем ЛЗН) для проведения дополнительного обследования на IgM- и IgG-антитела к вирусу ЗН, выполненного с использованием тест-систем Euroimmun. В этом случае положительными оказались сыворотки № 133 (на IgM- и IgG-антитела) и № 130 (на IgM при отсутствии IgG), сомнительными на IgM - № 129 и 131 (при отрицательном результате обследования на IgG) (см. табл. 1). Таким образом, с применением наборов Euroimmun диагноз ЛЗН был установлен в 5 случаях в лаборатории ОИКБ Астрахани и в 2 случаях в лаборатории Волгоградского НИПЧИ, а с использованием тест-системы «Биосервис» (в лаборатории ЦГиЭ) только в одном случае. Эти данные свидетельствуют о ложноположительном характере выявления IgM-антител в сыворотках № 127, 128, 130, и 131 с помощью диагностикума Euroimmun.
В июне 2013 г. из ОИКБ в вирусологическую лабораторию ЦГиЭ поступили еще 11 сывороток от 11
больных, позитивных на IgM-антитела к вирусу ЗН (по данным обследования в тест-системе Euroimmun). Все эти пробы, так же как и 8 других, взятых у больных той же группы в более поздние сроки (на 8-25-й день от начала заболевания), оказались отрицательными в тест-системе ЗАО «Биосервис» (табл. 2).
Таким образом, на первом этапе нашей работы серологически было обследовано 16 больных, госпитализированных в ОИКБ Астрахани. Даты их заболевания приходились на период с 6 мая по 29 июня 2013 г. Диагнозы при госпитализации: вирусный менингит и менингит в 5 случаях, вирусная инфекция неясной этиологии в 4 случаях, Астраханская риккетсиозная лихорадка у 3, ОРВИ у 3, аденовирусная инфекция в 1 случае. Возрастное распределение: 1-8 лет - 11; 17 лет - 2; 48-51 год - 3. Дети в возрасте от 1 года до 5 лет были госпитализированы с диагнозами: менингит (4), ВИНЭ (1), ОРВИ (1). Совпадение результатов обследования этой группы пациентов с применением ИФА-тест-систем производства Euroimmun AG и ЗАО Биосервис для выявления IgM-антител к вирусу ЗН составило всего 6,2%. С учетом этих данных ОИКБ в июле 2013 г. приобрела тест-системы БиоСкрин-ВЗН производства компании ЗАО Биосервис, с помощью которых было обследовано 1109 пациентов, при этом IgM-антитела к вирусу ЗН выявлены у 33. При обследовании сывороток крови этих больных в вирусологической лаборатории ЦГиЭ этот результат подтвердился в 32 (97%) случаях.
На основании полученных данных можно сделать заключение, что использованные в работе тест-системы Anti-West Nile virus ELISA-IgM производства фирмы Euroimmun AG не отвечают требованиям специфичности и они не должны применяться для диагностики ЛЗН.
ЛИТЕРАТУРА
1. Азарян А.Р., Гришанова А.П., Бутенко А.М., Ларичев В.Ф., Чалов В.В., Инкина Т.Е., Шендо Г.Л., Джаркенов А.Ф. Серологическая диагностика арбовирусных инфекций в Астраханской области. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции. Материалы расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и научно-практической конференции «Арбовирусы и арбовирусные инфекции», Астрахань, 17-20 октября 2006 г М.: «Гриф и Ко»; 2007: 115-21.
2. Ковтунов А.П., Юстратов В.Б., Никешина Н.Н., Славина А.М., Джаркенов А.Ф., Азарян А.Р., Чалов В.В. Эпидемиологическая характеристика лихорадки Западного Нила в Астраханской области. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции. Материалы расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и научно-практической конференции «Арбовирусы и арбовирусные инфекции», Астрахань, 17-20 октября 2006 г. М.: «Гриф и Ко»; 2007: 114-5.
3. Шишкина Е.О. Серологическая диагностика лихорадки Западного Нила: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М.; 2003.
REFERENCES
1. Azarian A.R., Grishanova A.P., Butenko A.M., Larichev V.F., Chalov V.V., Inkina Т.Е., Shendo G.L., Dzharkenov A.F. Serologic diagnosis of arbovirus infections in the Astrakhan region. In: Arboviruses and arboviral infections. Materials of the Problem
commission «Arboviruses» and scientific-practical conference «Arboviruses and arboviral infections», Astrakhan, 17-20 October 2006. Moscow: "Grif and Co"; 2007: 115-21 (in Russian).
2. Kovtunov A.I., Yustratov V.B., Nikishina N.N., Slavina A.M., Dzharkenov A.F., Azarian A.R., Chalov V.V. Epidemiological characteristic of West Nile fever in the Astrakhan region. In: Arboviruses and arboviral infections. Materials of the Problem commission «Arboviruses» and scientific-practical conference «Arboviruses and arboviral infections»,Astrakhan, 17-20 October 2006. Moscow: "Grif and Co"; 2007: 114-5 (in Russian).
3. Shishkina E.O. Serological diagnosis of West Nile fever: Diss. Moscow; 2003 (in Russian).
Поступила 14.02.14 Received 14.02.14
Сведения об авторах:
Гришанова А.П., врач-вирусолог вирусологической лаб. ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области»; Иващенко Е.И., биолог вирусологической лаб. ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области»;
Шендо Г.А., гл. врач ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области»; Ковтунов А.И., руководитель Управления Роспотребнадзора по Астраханской области, гл. государственный санитарный врач Астраханской области, канд. мед. наук, засл. врач РФ; Неталиева С.Ж., врач КДЛ ГБУЗ АО «Областной инфекционной клинической больницы им. А.М. Ничоги», г Астрахань; Бабаева М.А., зав. лаб. Областной инфекционной клинической больницы им. А.М. Ничоги; Буркин А.В., гл. врач ГБУЗ АО «Областной инфекционной клинической больницы им. А.М. Ничоги», проф., д-р мед. наук, Астрахань; Аршба Т.Е., зам. гл. врача ГБУЗ АО «Областной инфекционной клинической больницы им. А.М. Ничоги», засл. врач РФ, Астрахань; ЛаричевВ.Ф., вед. науч. сотр. лаб. биологии и индикации арбовирусов ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского» Минздрава РФ, канд. мед. наук, Москва; Бутенко А.М., зав. отделом арбовирусов и лаб. биологии и индикации арбовирусов ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского» Минздрава РФ, проф., д-р биол. наук, Москва
ИСТОРИЯ МЕДИЦИНЫ
© БЛОХИНА Н.Н., 2014
УДК 616.98:579.842.23]-084:614.2]:93(470+571)
Блохина Н.Н.
становление противочумной службы дореволюционной роССии
ФГБУ «Национальный НИИ общественного здоровья РАМН», 105064, Москва, ул. Воронцово поле, 12, стр. 1
Статья посвящена становлению противочумной службы Российской Империи. Проанализированы действия государственных деятелей Российской Империи и практических врачей- эпидемиологов по борьбе с чумой.
Ключевые слова: эпидемия чумы; противоэпидемические мероприятия; история медицины.
Blokhina N.N.
DEVELOPMENT OF THE ANTIPLAGUE SERVICE IN PRE-REVOLOUTIONARY RUSSIA
National Research Institute ofPublic Health, 12/1, building 1, Vorontsovo Pole St., Moscow, Russian Federation, 105064
The article is devoted to the formation of anti-plague service in the Russian Empire. There have been analyzed the actions of public figures of the Russian Empire and practical epidemioligists in the struggle against the plague. Key words: plague outbreak; plague control measures; history of medicine.
Благодаря действиям такого замечательного учреждения, которым являлся Императорский институт экспериментальной медицины, была создана целая сеть противочумных лабораторий на юго-востоке России: Бактериологическая противочумная лаборатория в Астрахани, в 1912-1914 гг. было организовано еще 6 лабораторий: в Ханской ставке (Астраханская губерния - г. Урда 1909), Новой Казанке (Уральская область), Царицыне, Новоузенске, затем в Александрове-Гае (Самарская губерния) , Джамбейте (Уральская область). Впоследствии в 1914-1915 гг. прибавилось еще 2 лаборатории - в Заветном и Владимировке (Астраханская губерния). Кроме того, не нужно забывать о том, что в Сибири была
Для корреспонденции: Блохина Наталия Николаевна,
канд. мед. наук, ст. науч. сотр.
организована еще в 1910-1911 гг. постоянная противочумная лаборатория в Чите. Первоначально в ней работали 2 врача, причем одновременно наблюдательные функции по чуме и холере были возложены на Иркутскую Пастеровскую станцию, находившуюся в ведении железнодорожного ведомства.
Эта сеть противочумных станций дала возможность уже большему числу ученых включиться в изучение природы чумных эпидемий. Достаточно сказать, что в этих пунктах работали такие специалисты своего дела, как погибший от лабораторного заражения чумой И.А. Демин-ский (1864-1912), Н.А. Гайский (1884-1947), С.М. Никано-ров (1885-1942), А.А. Чурилина (1882-1940), Г.И. Кольцов (1875-1920), И.И. Шушкевич (1869-1919) и др.
Несмотря на интенсивную проводимую предупредительную противоэпидемическую работу, чумная инфекция не
