ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

эмбриотоксических, тератогенных, мутагенных, бластомогенных и аллергенных свойств химических веществ, рекомендуется изучать их вредное действие на культурах клеток человека.

Предлагаемый способ разработан и испытан в лаборатории токсикологии Киргизского научно-исследовательского института эпидемиологии, микробиологии и гигиены. С его помощью получены токсикологические характеристики 14 соединений (ДДТ, ГХЦГ, ТМТД, севина, цинеба, МС-14-ПА, хлорофоса, метафоса, метилмеркаптофоса, фосфамида, сольвент-нафта, окислов хрома, опия-сырца, компонентов тутового шелкопряда — серицина, кукочки, фиброина).

ЛИТЕРАТУРА. Анджапарид'зе О. Г. (Ред.) Культура ткани в вирусологических исследованиях. М., 1962. — Дрейзен Р. С. — В кн.: Руководство по лабораторной диагностике гриппа, парагриппозных и аденовирусных инфекций. М., 1960, с. 142. — Дубинин Н. П. Проблемы радиационной генетики. М., 1961. — Елизарова О. Н., Н у ж д и н а Д. Н. — «Гиг. и сан.», 1971, № 1, с. 83. — Л е в и М. И. Культура тканей в изучении полиомиелита. Ставрополь, 1957. — Пол Д. Культура клеток и ткани. М., 1963. — Прозоровский В. Б. — «Фармакол. и токсикол.», 1962, № 1, с. 115. — Соловьев В. Д., Б е к т е м и р о в Т. А. Тканевые культуры в вирусологии. М., 1963. — X е с и н Я. Е. Размеры ядер и функциональное состояние клеток. М., 1967. — Шпирт М. Б. — »Сов. здравоохр. Киргизии», 1972, № 6, с. 43.

Поступила 3/У1 1976 г.

УДК 616.45-001.1/.3-092.9.613.2

М. Г. Чистяков, Р. Д. Ильинская, А. П. Парахонский ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ

Кубанский медицинский институт, Краснодар

В настоящей работе исследовали способность организма крыс противостоять некоторым формам стресса после продолжительного содержания их на рационах, в которых основным источником белков и жиров являлись продукты питания, получаемые от сельскохозяйственных животных, потребляющих в составе корма определенное количество углеводородных дрожжей.

Опыты проведены на 80 крысах линии Вистар, животные были разделены на 3 группы. В рацион 1-й группы (30 животных) было включено 10 мл молока, 10 г обезжиренного творога, 1,5 г сливочного масла и 10 г яиц, получаемых соответственно от коров и кур, в корме которых 25% белка заменяли белком углеводородных дрожжей, выращенных на основе дизельного топлива (ДТ) Контролем служила равная по численности 2-я группа крыс, в рацион которой были включены в таком же количестве аналогичные продукты, получаемые от коров и кур, содержавшихся на обычных хозяйственных кормах. Молочные продукты и яйца обеспечивали

Т а^б л и ц а 1.

Продолжительность предельного плавания крыс разных групп в воде, нагретой до 40°

Группа животных Рационы, включающие Время пребывания на рационе (в мес.) Предельное время плавания (в мни)

1-Я Экспериментальные молочно-яичные 3 22,4±2,6

продукты 6 25,0—2,3

2-Я Контрольные молочно-яичные про- 3 24,12=3,4

дукты 6 22,2^:2,8

3-Я Углеводородные дрожжи 6 20,2— 1,9

1 Химический состав дрожжей: белка 53,75%, жира 1,67%, углеводов 20,13% и ос« таточных углеводородов 0,076%.

а s я ч о

Е +1 5

rt

X X

1 г

о X

В

I

X 8-X

г

н а

а

^

о С

<9 И S О. о ООО о о* о о о*о" VVVVV

* о и со а> и 1Л t4- ОТ о ю voons

S 4> и Л ч н СО V е- и т +1 +1 +1 +1 +1 00 СО 00 ю ОТ СО СО чг 00010)-' чг ТГ От от -о-

СО X о с до стресса оою г~ оо о 00 О СП — о о*—"о*—"о" +1 +1 +1 +1 +1 — СЧ -Г CT) — юю оЬсч д}-t^t^cpio тг т т т

О. <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05

и л X X о о ч и о 3

в стрессе t*- со от О) оо <N ТГ СМ 0*0*0*0*©" ¿1 +1 +1 +1 +1 О) — от_сч_ ю — СЧ СЯ СЧ CN

U до стресса ООО ш — -ч< СО ОТ СМ_ОТ — о О 0*0 О 41 +1+1 +1 +1 cocicoco со

О ООО о о* о"©"© о VVVVV •

X ч 3 в а Е а о о. ¡й в стрессе СОСОМО) — г-со —1 -е- — — — <М_— тГ 0 0*0*0*0 ЯШ» о г— со ст> оо — со еч еч от in Ю in U5 Ю

о. О) до стресса Cj 00 — оо о 0*0*0*0*0 +1 +1 +1 +1 +1 BON-N — со t^ ei оо — — О О СЧ со со со со со

Срок кормления (в нес) от со со со со

Группа животных к к к —4 CS со

в рационе 3,35 г (64,9%) белков, 2,84 г (94 %) жиров, 0,6 г (5,45 %) углеводов и 45,2% общей калорийности. Недостающие количества белков, жиров и углеводов пополнялись за счет корнеплодов, хлеба, зерновой смеси и пивных дрожжей; последние обогащали рационы витаминами группы В.

Поскольку молочно-яичные продукты, включенные в рацион 1-й группы животных, были связаны через организм лактирующих коров и кур-несушек с вышеупомянутыми углеводородными дрожжами, то представлялось целесообразным провести параллельные исследования на группе крыс (3-я группа),i в общевиварном рационе которых 23,7% белка было заменено белком этих дрожжей. Этот рацион совпадал с предыдущими по общему содержанию белка (5,6 и 5,3 г) и имел незначительное превосходство в калорийности (101 ккал против 94,25 ккал).

Одна половина крыс каждой группы находилась на рационах в течение 3 мес, другая — 6 мес. По истечении указанных сроков подопытных крыс подвергали комбинированным стрессовым воздействиям, заключавшимся в сочетании ортостатичеекого и температурного воздействия с максимальной (предельной) физической нагрузкой. Животных в течение часа подвергали ортостатичес-кому воздействию по методу Л. Д. Сычевой и В. Д. Бубнова с последующим переключением на предельную физическую нагрузку и термическое воздействие путем вынужденного плавления в воде температуры 40°. До и после стрессовых воздействий у крыс определяли количество эритроцитов, уровень гемоглобина и показатель гематокрита, т. е. факторы, от которых зависит обеспечение тканей кислородом. После бескровного забоя у животных взвешивали надпочечники, селезенку и печень, так как эти органы наиболее активно реагируют на изменение состояния организма. По весовым данным рассчитывали коэффициент, представляющий собой отношение веса органа в миллиграммах к весу тела в граммах. В коре надпочечников гистохимически определяли содержание общих липидов, для этого ткань органа фиксировали в 10% растворе нейтрального ((юр-малина, срезы окрашивали Суданом III.

Наблюдения за общим состоянием и поведением крыс в течение опыта показали, что все животные хорошо развивались, прибавляли в весе в соответствии с возрастом, нормально реагировали^ на окружающие явления, охотно ели смесь каждого рациона. За период наблюдения не отмечено никаких

Таблица.3

Отношение веса органов к весу тела крыс после стресса

Вес тела (в г) Вес органов и коэффициент (К)

надпочечники селезенка печень

нг К мг К иг к

250,33 61.40 0,246 827.66 3.31 12727.00 50,84

7,44 3,44 0,008 22,69 0,06 259,67 0,96

273,00 43.73 0.160 712,00 2.60 9449,33 36.61

9.30 2.31 0.009 23,06 0.07 431.54 0.85

>0,5 >0.5 >0.1 >0.1 >0,5 >0.2

<0.01 <0.01 <0,01 <0.01 <0,01 <0.01

292,75 38 ,83 0. 133 718.33 2.45 10525.03 35.95

20,37 2.21 0,014 28,34 0.15 365.81 1 .56

>0.5 >0.5 >0,5 >0.5 >0,5 >0.5

<0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0,01 <0.01

268.66 45,13 0. 168 644,66 2.40 9239,33 34.39

6,32 2,08 0.009 26,32 0.11 273.80 1 .49

<0.01 <0.01 <0,01 <0.01 <0,01 <0.01

287.73 36,73 0. 127 719,69 2.50 9914.55 34.45

26.45 2,76 0,014 35,20 0.13 540,40 1 .74

<0,01 <0.01 <0.02 <0.01 <0.01 <0.01

226.40 36,75 0. 162 635,50 2.78 8626.00 38.22

6.90 2,64 0,016 34,5 0.13 402,87 1,22

>0.5 >0,1 >0.1 >0.1 >0.1 >0.1

- и <0,01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0,01

Группа животных

ёа

&Л

8 п V п

ь« л

Интактная без стресса. Рацион обычный— виварный (общий контроль)

1-я

2-я

3-я

М ±т

М

±т

Р1 "л?

Р,

"А

±т

±т

а

±т

Р,

П р и м е ч а н в е. Р, и Р,— вероятности различия весовых ' показателей внутренних органов: Рщ—рассчитан по отношению к данным, полученным в группе животных, находившихся на рационе с контрольными молочно-яичными продуктами; 4Р«—по отношению к данным, полученным у нн-тактных животных.

интеркуррентных заболеваний, свойственных данному виду животных.

Способность крыс каждой группы переносить продолжительное орто-статическое воздействие и предельную физическую нагрузку в условиях повышенной температуры, а также данные, характеризующие общие функциональные возможности организма, представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, предельное время, в течение которого крысы способны плавать, во всех группах примерно равнозначно. Достоверных различий, свидетельствующих о меньшей или большей физической выносливости той или иной группы животных, не имеется. Однако следует заметить, что 3-я группа животных отличалась от 1-й и 2-й более низкой способностью организма противостоять данной форме стресса. Предельное время вынужденного плавания после предшествовавшего ортостатического воздействия, безусловно, является интегральным показателем функциональных возможностей организма: усиленная мышечная работа невозможна в течение продолжительного времени без достаточного кровообращения и резервной функции внешнего и тканевого дыхания.

Результаты исследований крови приведены в табл. 2, из которой видно, что между данными, полученными до и после стрессового воздействия на организм, в каждой группе крыс имеются достоверные различия в сторону уменьшения рассматриваемых показателей. Стрессовые воздействия вызывали в организме животных уменьшение количества эритроцитов и уровня гемоглобина, снижение показателя гематокрита. Эта реакция была выражена в одинаковой степени во всех группах. Ее умеренный характер находится в соответствии с литературными данными, касающимися изменения крови при стрессе в стадии тревоги или в начале стадии истощения (П. Л. Горизонтов и Т. Н. Протасова).

В табл. 3 представлены сравнительные данные об относительном весе органов интактных и подвергавшихся стрессу животных. Как видно из табл. 3, между группами крыс, организм которых находился под воздействием стрессоров, выраженных различий в относительном весе органов не имеется (Р>0,1), однако каждая из этих групп достоверно отличается

(/'<0,01) от группы интактных животных. Отличие заключается в уменьшении отношения абсолютного веса органа к весу тела (коэффициент К), что свидетельствует об активном участии надпочечников, печени и селезенки в общем адаптационном синдроме, в I стадии которого (реакция тревоги), как известно, приводятся в действие механизмы, способствующие сохранению гомеостаза.

Особо важная роль в этом процессе принадлежит надпочечникам, в которых содержится значительное количество липидов, главным образом в виде свободного и связанного холестерина (Ф. Л. Лейтес). А так как холестерин является одним из предшественников кортикостероидных гормонов, то содержание его в надпочечниках служит показателем их функционального состояния (Bloch).

При гистохимическом исследовании надпочечников крыс, содержавшихся на экспериментальных и контрольных молочно-яичных рационах, отмечалось очень незначительное уменьшение липидов. При этом соотношение между суданофильными и суданофобными зонами не изменялось, но наблюдалась трата липидов клетками пучковой и сетчатой зон коры надпочечников, где редуцируются главным образом крупные капли липидов. В цитоплазме клеток клубочковой зоны сохранялись крупные, яркие, суданофнльные гранулы, а цитоплазма клеток пучковой зоны содержала мелкие, хорошо окрашенные липидные капли, плотность расположения которых варьировала от клетки к клетке.

У крыс, содержавшихся на рационе, в состав которого входили углеводородные дрожжи, наблюдалась несколько иная гистохимическая картина. Клубочковая зона была значительно насыщена липидами. Крупные липидные капли, ярко окрашенные в оранжевый цвет, до предела наполняли цитоплазму клеток этой зоны. В пучковой зоне как наружные, так и внутренние части или не имели липидов совершенно, или содержали их в небольшом количестве, мелкораспыленном состоянии и слабо окрашенном виде. В результате этого суданофобная зона была расширена, граница между узким суданофильным клубочковым слоем и широкими суданофобными пучковым и сетчатым слоями резко выражена.

Состояние стресса, как известно, гистохимически выражается уменьшением суданофильных липидов из пучковой и сетчатой зон коры надпочечников. Если в группах экспериментальных и контрольных животных, содержавшихся на молочно-яичных рационах, отмечено одинаково незначительное уменьшение липидов, свидетельствующее о наличии компенсаторных возможностей, с помощью которых организм может противостоять неблагоприятным факторам внешней среды, то совсем о другом говорит гистохимическая картина надпочечников крыс, содержавшихся на рационе с углеводородными дрожжами. Фокальное, а иногда и диффузное липоидное истощение с увеличением суданофобной зоны свидетельствует о резком снижении адаптационных ресурсов организма крыс данной группы.

Таким образом, гистохимическими исследованиями коры надпочечников в группах крыс, содержавшихся на рационах с экспериментальными и контрольными молочно-яичными продуктами, обнаружен больший резерв адаптационных ресурсов, нежели в группе животных, находившихся на рационе с углеводородными дрожжами. Следовательно, животные последней группы противостояли стрессорным воздействиям с предельными возможностями.

В этом аспекте обретает значение установленное незначительное понижение способности крыс 3-й группы переносить максимальную физическую нагрузку (см. табл. 1), несмотря на отсутствие статистической достоверности в обнаруженном различии.

Таким образом, можно прийти к заключению об отсутствии существенных различий в способности организма крыс, содержавшихся на рационах с экспериментальными и контрольными молочно-яичными продуктами, противостоять стрессу. Полученные результаты позволяют также отметить, что

рацион с углеводородными дрожжами хотя и уступает молочно-яичному, однако при содержании крыс на нем обеспечивается достаточный уровень устойчивости организма к стрессу.

ЛИТЕРАТУРА. Горизонтов П. Д., Протасова Т. Н. Роль АКТГ и кортикостероидов в патологии. М., 1968. — Лейтес Ф. Л. Гистохимия липолити-ческих ферментов в норме и при патологии липидногообмена.'М., 1967. —Сычева Л. Д., Бубнов В. Д. — В кн.: Вопросы реактивности приТстрёссе. Пенза, 1967, с. 3—11. — Bloch К. — »J. biol. Chem.», 1945, v. 157, р. 174.

Поступила 9/1X 1975 г.

УДК 614.72:547.412.63

А. JI. Кучинский

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРХЛОРЭТИЛЕНА И ТРИХЛОРЭТИЛЕНА В ВОЗДУХЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Могилевская областная санэпидстанция

Существующие методы анализа перхлорэтилена (тетрахлорэтилена) и трихлорэтилена основаны на образовании полиметинового красителя — дианилнда глутаконового альдегида (А. А. Беляков). Метод недостаточно специфичен, так как хлор и некоторые другие органические хлорсодержащие соединения мешают определению. Раздельное определение трихлорэтилена и перхлорэтилена затруднительно. При анализе используются высокотоксичные реактивы (пиридин, анилин).

Учитывая селективную чувствительность детекторов постоянной скорости рекомбинации к галогенсодержащим органическим соединениям, мы разработали условия раздельного газохроматографического определения трихлорэтилена и перхлорэтилена.

Методику отрабатывали на отечественном газовом хроматографе «Цвет 106». Полное разделение растворителя, трихлорэтилена и перхлорэтилена достигается на колонке длиной 2 м, наполненной силанизированным диметилхлорснланом хроматоном N — AW DMCS с жидкой фазой SE-30 5% от веса носителя при температуре колонки 35° и скорости газа-носителя 30 мл/мин. Для определения эффективности поглощения использовали эксикаторы, в которых вместо крана вставлена пробка с двумя отводными трубками: одна — не доходящая до дна на 5 см, другая — оканчивающаяся под пробкой. В эксикаторы вводили стандартные растворы перхлорэтилена и трихлорэтилена с таким расчетом, чтобы создать концентрацию в воздухе от 1 до 5мкг на 1 л. На концы отводных трубок надевали резиновые трубки с зажимами, и эксикатор помещали в горячую воду на 20 мин, после чего выдерживали при комнатной температуре 2 ч. Во избежание конденсации гексана стандартные растворы готовили таким образом, чтобы объем вносимого стандарта не превышал 0.4 мл на 1 л объема эксикатора. К отводной трубке подсоединяли поглотительный прибор с пористой пластинкой, наполненной гексаном, и протягивали 50—100 мл воздуха. Расчетным путем готовили стандартные растворы, содержащие перхлорэтилен и трихлорэтилен в концентрациях, соответствующих содержанию этих веществ в поглотителях при условии полного поглощения. Сравнение хроматограмм поглотительных и стандартных растворов показало высокую степень поглощения гексаном перхлорэтилена и трихлорэтилена.

При обработке методики возникла необходимость производить дополнительную очистку гексана, так как на хроматограммах, полученных при низкой температуре колонки, определяются дополнительные пики, в некоторых случаях мешающие анализу. В круглодонную колбу на 1 л гексана добавляли 20 мл 10% раствора гидроокиси калия в этиловым спирте и кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения в гексан добавляли 100 мл дистиллированной воды, взбалтывали и водно-спиртовый