CC BY
25Актуальность
Таксаны и соединения платины являются широко применяемыми при лечении рака шейки матки ци-тостатиками. В частности, в качестве системной химиотерапии первой линии рекомендуют сочетание 75 мг/м2 цисплатина и 175 мг/м2 паклитаксела, что соответствует соотношению 1:2,3. Хотя в клинических испытаниях этот режим хорошо себя зарекомендовал, о о его влиянии на биологию клеток рака шейки матки in vitro известно недостаточно.
Цель
Исследовать воздействие цисплатина и паклитак-села в соотношении доз 1:2,3 на клетки культуры HeLa.
Материалы и методы
Клетки культуры HeLa культивировали в среде DMEM (Gibco, США) с добавлением 10% FBS (HyClone, США). Клетки высаживали на 96-луноч-ный планшет (Eppendorf, Германия) в количестве 3000 клеток в 100 мкл среды на лунку и инкубировали 24 часа при температуре 37 °С в атмосфере, содержащей 5,0% СО2. Через 24 часа среду культивирования заменяли средой, содержащей цитостатические препараты в серии двукратных разведений в монорежиме или в сочетании: цисплатин от 0,03 до 32 мкг/мл, паклитаксел от 0,07 до 73,6 мкг/мл. Клетки инкубировали 2 часа, после чего среду заменяли средой без цитостатиков и инкубировали еще 72 часа. По окончании эксперимента определяли количество живых клеток с помощью МТТ-теста. Жизнеспособность определяли как количество живых клеток в процентах от контроля без добавления цитостатиков.
Результаты
Сочетание цисплатина с паклитакселом продемонстрировало достоверно большую эффективность, чем чистый цисплатин, в диапазоне концентраций от 0,03 до 8 мкг/мл в пересчете на чистый цисплатин. Разница между средними значениями жизнеспособности для каждой концентрации была достоверно значима на уровне а = 0,05 ^ = 14). Уменьшение жизнеспособности особенно драматично при нетоксичных концентрациях цисплатина (0,03-0,5 мкг/мл) и составляет около 60% на всем диапазоне концентраций, однако при переходе к токсичным концентрациям цисплатина (0,5-32 мкг/мл) разница в жизнеспособности клеток HeLa между чистым цисплатином и сочетание его с паклитак-селом линейно уменьшается с нарастанием концентрации цисплатина, становясь несущественной в диапазоне 8-32 мкг/мл в пересчете на цисплатин. Однако при сопоставлении кривых доза-эффект для чистого паклитаксела и его сочетания с цисплатином мы видим существенное снижение цитотоксической активности по сравнению с чистым паклитакселом. Разница в жизнеспособности клеток достигает максимума и равняется 45% при концентрации пакли-таксела в смеси 2,3 мкг/мл.
Выводы
Сочетанное применение цисплатина и пакли-таксела в соотношении доз 1:2,3 на культуре HeLa обладает большей цитотоксической активностью по сравнению с чистым цисплатином. Однако по сравнению с чистым паклитакселом эффективность его сочетания с цисплатином существенно ниже, что говорит об антагонизме двух веществ.
Список литературы
Rosen V M ., Guerra I ., McCormack M . et al . Systematic Review and Network Meta-Analysis of Bevacizumab Plus First-Line Topo-tecan-Paclitaxel or Cisplatin-Paclitaxel Versus Non-Bevacizumab-Containing Therapies in Persistent, Recurrent, or Metastatic Cervical Cancer // J Gynecol Cancer. 2017 . Jul . Vol . 27 (6) . Р 1237-1246 . DOI: 10 ,1097/IGC . 0000000000001000 . PMID: 28448304; PMCID: PMC5499964.
Опыт HRD-тестирования у пациенток с распространенной серозной карциномой яичников в Республике Башкортостан
Авторы
Меньшиков Константин Викторович, [email protected], ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Султанбаев Александр Валерьевич, [email protected], ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Фатихова Альфия Азатовна, [email protected], ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Мусин Шамиль Исмагилович, [email protected], ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Султанбаева Надежда Ивановна, [email protected], ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Измайлов Адель Альбертович, [email protected], ГАУЗ Республиканский клинический онкологический диспансер Минздрава РБ, Уфа
Меньшикова Ирина Асхатовна, [email protected], ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
Липатов Данила Олегович, [email protected], ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа
Ключевые слова:
рак яичников, мутации в генах НЯС, национальные особенности, BRCA1, BRCA2
Актуальность
Одна из рассматриваемых причин развития рака яичников — мутации в генах репарации. При лечении злокачественных новообразований необходимо учитывать наличие герминальных или соматических мутаций в генах репарации, что служит основанием для назначения PARP-ингибиторов. Данные о наличии герминальных мутаций в системе генов репарации являются основанием для проведения скрининго-вых мероприятий среди здоровых носителей.
Цель
Определение спектра и частоты мутаций в генах HRD при первичной серозной карциноме яичников методом NGS в многонациональном регионе Российской Федерации.
Материалы и методы
Спектр и частота мутаций в генах HRD у больных раком яичников были определены методом NGS. В период с 2021 по 2022 г. на HRD-тестирование было направлено 26 образцов биоматериала пациенток. Материалом для исследования служили биоптат опухоли в виде архивного парафинового блока. С учетом национальных особенностей населения Республики Башкортостан тестирование проводилось методом NGS.
Результаты
Исследован материал 26 пациенток с серозной карциномой яичников. Все пациентки были первичными, до проведения какого-либо лечения. Средний
возраст составил 56,4 года. Все пациентки имели первичную серозную карциному яичников стадии III-IV по FIGO. При исследовании материала выявлено наличие мутаций в гене BRCA1 в 5 (19,2%) случаях, BRCA2 — в 3 (11,5%), RAD50 — в 1 (3,8%) случае. Суммарно у первичных пациенток в 34,5% случаев выявлены мутации в генах репарации ДНК. В 4 случаях мутации выявлены у пациенток татарской национальности, в 4 —славянской, в 2 — башкирской. Самым частым вариантом мутации в гене BRCA1 был вариант NM_007294.4:exon20:c.5266dup:p. (Q1756Pfs*74) — 3 случая, реже встречался вариант NM_007294.4:exon15:c.4675G>A:p.(E1559K), в гене BRCA2 — NM000059.3:exon11:c.3436_3455del :p.(E1146Kfc*5):p.(Glu1146LysfsTer5).
Выводы
Исследование методом NGS позволило повысить эффективность выявления наследственного рака яичников. Отмечено наличие территориальной особенности встречаемости в Республике Башкортостан высокопенетрантных мутаций в генах BRCA1, BRCA 2, а также мутаций в гене RAD50. Результаты позволяют рассмотреть необходимым более широкий охват тестирования методом NGS пациенток с диагнозом «рак яичников» с целью оптимизации терапии и скрининга здоровых носителей мутаций. По данным проведенного исследования частота выявления мутаций методом NGS значительно превышает частоту выявления методом ПЦР. Этот факт характерен для регионов со смешанным национальным составом.
Список литературы
1. Frey M . K. , Pothuri B . Homologous recombination deficiency (HRD) testing in ovarian cancer clinical practice: a review of the literature // Gynecol Oncol Res Pract. 2017 . Feb 22 . Vol . 4. Р 4. DOI: 10 . 1186/s40661-017-0039-8.
2 . Sultanbaev A . V , Menshikov K . , Nasretdinov A . et al . Local features of germinal mutations incidence in cancer patients in
the Republic of Bashkortostan // Annals of Oncology. 2021. Т 32 . № S6 . С . S1367 . 10 ,1016/j . annonc . 2021. 08 . 2066 .
3 . Sultanbaev A . V , Lipatov O ., Sultanbaeva N . et al . Germinal mutations landscape, which is responsible for cancer predis-
position in multinational Republic of Bashkortostan // Journal of Clinical Oncology. 2021. Vol . 39 (15_suppl) . Р e22504-e22504. 10 . 1200/jco . 2021.39 . 15_suppl . e22504.
4 . Risch H .A . , McLaughlin J . R ., Cole D . E . et al . Population BRCA1 and BRCA2 mutation frequencies and cancer penetrances:
a kincohort study in Ontario, Canada // J Natl Cancer Inst . 2006 . Vol . 98 . Р 1694-1706 .
5 . Cunningham J . M . , Cicek M . S . , Larson N . B . et al . Clinical characteristics of ovarian cancer classified by BRCA1, BRCA2,
and RAD51C status // Sci Rep . 2014 . Vol . 4 . Р 4026 .
