CC BY
27
ОПТИМИЗАЦИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ И ВРЕМЕНИ ЭКСПОЗИЦИИ ВОЗДЕЙСТВИЯ ХЛОРГЕКСИДИНА БИГЛЮКОНАТА НА ОДНОВИДОВЫЕ БИОПЛЕНОЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ ОБРАЗЦОВ ЗУБОВ
Чистякова Галина Геннадьевна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры общей стоматологии Белорусского государственного медицинского университета, Минск
Походенько-Чудакова Ирина Олеговна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой хирургической стоматологии Белорусского государственного медицинского университета, Минск
Galina Chistyakova, PhD, Associate Professor of the Department of General Dentistry of the Belarusian State Medical University, Minsk Irina Pohodenko-Chudakova, MD, Professor, Head of the Department of Oral Surgery of the Belarusian State Medical University, Minsk Optimization of concentration and exposure time effects with chlorhexidine bigluconate
on biofilm of monospecific culture samples of teeth
Цель. Оценить антимикробную активность хлоргексидина биглюконата в различных его концентрациях по отношению к одновидовым культурам биопленки, сформированным на шлифах образцов зубов.
Материалы. Объектами для исследования служили референтные штаммы S. aureus АТСС 6538и E. coli АТСС11229. Рабочие растворы хлоргексидина готовили путем разведения базового 2,0% раствора. Шлифы образцов были получены из зубов (интактных моляров), удаленных по медицинским показаниям.
Результаты. Показан высокий уровень антибактериальной активности 2,0% раствора антисептика можно получить при экспозиции 30-60 секунд, что обосновывает его применение в клинической практике.
Ключевые слова: антисептик, хлоргексидин биглюконат, биопленка, антимикробная активность, фактор редукции.
Современная стоматология. — 2021. — №1. — С. 76-80. Objective. The aim of the study was to evaluate the antimicrobial activity of chlorhexidine bigluconate in its various concentrations in relation to single-species biofilm cultures formed on the sections of tooth samples.
Materials. The objects for the study were the reference strains S. aureus ATCC 6538and E. coli ATCC11229. Working solutions of chlorhexidine were prepared by diluting the base 2.0% solution. Sections of the samples were obtained from teeth (intact molars) removed for medical reasons. Results.The results prove that a high level of antibacterial activity of a 2.0% antiseptic solution can be obtained at an exposure of 30-60 seconds which justifies its use in clinical practice.
Keywords: antiseptic, chlorhexidine bigluconate, biofilm, antimicrobial activity, the factor of reduction. Sovremennaya stomatologiya. — 2021. — N1. — P. 76-80.
В настоящее время исследователями поддерживается концепция развития воспалительного процесса в пульпе, сопряженного с воздействием микробного фактора. Установлено, что основным этиологическим фактором пульпита является инфекция околопульпарного пространства - кариозной полости, населенной микроорганизмами полости рта.
Как осложнение кариеса - пульпит всегда развивается в форме гиперерги-ческого воспаления на фоне предыдущей сенсибилизации пульпы продуктами распада органического вещества дентина и эндотоксинами микробов кариозного
очага. Выявлено наличие стрептококков, лактобактерий и стафилококков при воспалительных заболеваниях пульпы зуба.
Жизнеспособность пульпы важна для поддержания структурной целостности и нормальной физиологической характеристики зуба. По мере того, как понимание ее значения в сохранности зубов возрастает, методы для поддержания жизнеспособности пульпы в течение всего периода лечения глубокого кариеса становятся чрезвычайно востребованными. Микроорганизмы при глубоком кариесе, способны привести не только к тяжелым воспалительным реакциям внутри пульпы, но и к ее некрозу. Исследование Л.А. Елизовой
(2004) реакции пульпы зуба на микробное воздействие установило, что активизация патогенной микрофлоры происходит под воздействием различных методов обработки кариозной полости, включая механическую и антисептическую.
Наиболее частой причиной развития осложнений лечения кариеса является неполное удаление инфицированного дентина. Однако наряду с этим в специальной литературе присутствует информация о том, что после препарирования глубокой кариозной полости зуба его твердые ткани остаются инфицированными (А.А. Бритова, 2007). В данной ситуации очевидна острая необходимость
эффективных и доступных для врача-стоматолога антисептических средств. В связи с широким распространением заболеваний пульпы и периодонта лечение кариеса глубоких полостей приобретает особое значение в современной стоматологии, успех которого во многом зависит от эффективности воздействия на микробный фактор [1].
По данным специальной литературы, многовидовые биопленки значительно более устойчивы к антибактериальной терапии и дезинфекции, чем однови-довые. На современном этапе особое внимание уделяется антибактериальным лекарственным средствам (ЛС) и их минимальной подавляющей концентрации (МПК), обладающей способностью эффективно разрушать и удалять поливидовые биопленки с поверхности твердых тканей зубов [5, 9, 13].
Хлоргексидин - антисептическое средство, активное в отношении вегетативных форм грамположительных и грамотри-цательных микроорганизмов, грибов рода Candida, липофильных вирусов, золотистого стафилококка, пародонтопа-тогенных микроорганизмов. Данный антисептик может использоваться в разных концентрациях от 0,01% до 5,0% водных и спиртовых растворов. В зависимости от используемой концентрации он проявляет бактериостатическую или бактерицидную активность. Действие хлоргексидина основано на способности находиться в длительном контакте с отрицательно заряженными бактериями (сам он обладает выраженным положительным зарядом), что приводит к разрыву клеточной мембраны, которая при его влиянии оказывается неспособной поддерживать осмотический баланс.
В немногочисленных публикациях отмечено, что значимых различий антимикробного воздействия 0,5% и 1,0% растворов хлоргексидина на S. aureus и E. coli по зоне задержки роста не установлено [12]. В связи с изложенным выше материалом, очевидно, что определение оптимальной концентрации хлоргексиди-на биглюконата и экспозиции воздействия на дентин коронковой части зуба при кариозном поражении последнего на
текущий момент остается весьма актуальной задачей [4, 7, 8].
Цель исследования - оценить антимикробную активность хлоргексидина би-глюконата (суспензионным и контактным методом) в различных его концентрациях по отношению к одновидовым культурам биопленки, сформированным на шлифах образцов зубов.
Объекты и методы
Исследования антимикробной активности хлоргексидина биглюконата проведены на базе научно-исследовательской части Белорусского государственного медицинского университета.
В работе в качестве модели был использован один из самых актуальных для современной медицины возбудителей -золотистый стафилококк, который относится к наиболее мощным возбудителям, образующим биопленки. Объектами для исследования служили референтные штаммы S. aureus АТСС 6538 и E. coli АТСС 11229. Рабочие растворы хлор-гексидина готовили путем разведения базового 2,0% раствора.
Шлифы образцов были получены из зубов (интактных моляров), удаленных по медицинским показаниям. Такой выбор, во-первых, был обусловлен морфологией дентина, отличной при кариозном поражении, во-вторых, идентичностью размеров образцов. Всего для проведения
Рис. 1. Шлифы образцов зубов для формирования биопленочных культур
Рис. 2. Образцы со сформированной биопленочной культурой после воздействия хлоргексидина биглюконата
исследования подготовили 60 образцов: 12 - для контрольных групп; 48 - для формирования биопленки с грамполо-жительной и грамотрицательной культурами в зависимости от концентрации и экспозиции воздействия хлоргексидина биглюконата.
Оценку антимикробной активности хлоргексидина выполняли на биопленочных культурах S. aureus и E. coli, сформированных на образцах зубов. В качестве тест-культур использовали эталонные штаммы S. aureus и E. coli. Суспензии эталонных 24 часовых тест-культур, выращенные на скошенном агаре, готовили смывом, осуществляемым физиологическим раствором с последующей стандартизацией по McFarland до 1,5x108 КОЕ/мл.
Для формирования биопленочных культур шлифы образцов зубов (рис. 1) помещали в пробирки с суспензиями тест-культур S. aureus и E. coli в концентрации 1,0х106 КОЕ/мл, приготовленными на триптиказо-соевом бульоне (ТСБ) и выдерживали в термостате при 37 °С в течение 2 суток. После извлечения из термостата образцов со сформированной биопленочной культурой в течение 1 минуты их подвергали воздействию различных концентраций хлоргексиди-на биглюконата путем внесения 1,0 мл 0,05%, 0,5% и 2,0% его водных раство-
Рис. 3. Смыв биопленочных культур
Таблица 1 Результаты определения количества жизнеспособных микроорганизмов (КОЕ/мл) интактной культуры биопленки (контроль) в 1 мл смывов биопленки и после воздействия различных концентраций водного раствора хлоргексидина биглюконата
Концентрация хлоргексидина биглюконата (%) S. aureus E. coli
1 2 3 1 2 3
Контроль 1,3х108 1,3х108 1,3х108 1,1х108 1,1х108 1,1х108
0,05 1,3х106 1,7х106 3,3х105 5,0х106 3,5х106 1,4х106
0,2 6,0х105 9,0х105 8,0х104 3,5х105 1,1х105 8,0х105
0,5 2,9х105 1,3х104 3,3х104 2,9х104 8,0х104 4,3х105
2,0 8,0х102 1,6х102 5,0х102 9,0х102 1,0х103 2,6х103
Таблица 2 Результаты определения количества жизнеспособных микроорганизмов (^КОЕ/мл) в смывах биопленки после воздействия различных концентраций водного раствора хлоргексидина биглюконата
Концентрация хлоргексидина биглюконата (%) S. aureus E. coli
Lg Lg Lg Lg Lg Lg
КОЕ/мл КОЕ/мл КОЕ/мл КОЕ/мл КОЕ/мл КОЕ/мл
Контроль 8,11 8,11 8,11 8,04 8,04 8,04
0,05 6,11 6,23 5,52 5,70 6,54 6,15
0,2 5,78 5,95 4,90 5,54 5,04 4,90
0,5 5,46 4,11 4,52 4,46 4,90 5,63
2,0 2,90 2,20 2,70 2,95 3,00 3,41
ров. После этого каждый из образцов переносили в отдельную стерильную чашку Петри (рис. 2) с удалением избытка антисептика стерильным ватным тампоном и дальнейшим высушиванием образцов в закрытой чашке в термостате при 37°С в течение 1 часа. Затем образцы переносили из чашек в пробирки с 1,0 мл ТСБ и выдерживали в термостате при 37 °С в течение суток. После извлечения из термостата, для ресуспендирования биопленочных культур (рис. 3), пробирки с образцами встряхивали на шуттель-аппарате, с последующим высевом ТСБ в объеме 100,0 мкл на чашки с плотной питательной средой для определения наличия жизнеспособных бактерий.
Для оценки возможного высвобождения хлоргексидина биглюконата из зубной ткани, в ТСБ с образцами, дополнительно вносили по 100,0 мкл суспензии тест-культур S. aureus и E. coli в объеме 100,0 мкл в концентрации 1,0х107 КОЕ/мл и тщательно перемешивали. После инкубации в термостате в течение 24 часов, с целью установления пролонгированного действия, по 100,0 мкл ТСБ высевали на плотные питательные среды для определения наличия жизне-
способных бактерий. Количество КОЕ/мл рассчитывали по формуле: КОЕ/мл = п^ФДП ФР где п - число колоний на чашке с определенным разведением; ФДП - фактор посевной дозы (посевная доза 100 мкл -0,1 мл); ФР - фактор разведения (10п) [11].
Для качественной оценки жизнеспособных особей в биопленке, смоделированной на поверхности твердых тканей зубов, после воздействия 0,2%, 0,5% и 1,0% раствора хлоргексидина биглюко-ната шлифы образцов высушивали и помещали на среды чашек Петри для стафилококка на желточно-солевой агар (ЖСА), для кишечной палочки - на среды Левина, с последующей инкубацией в термостате в течение суток.
Антимикробную активность оценивали по фактору редукции - определяемому по разнице количества десятичных логарифмов КОЕ/мл в опыте по сравнению с контролем [6].
Фактор редукции для каждого опыта рассчитывали, как разность логарифмов числа жизнеспособных бактерий (КОЕ/мл) смывной жидкости. Средние значения и 95% доверительные интервалы (ДИ)
оценивали на основе модели смешанных эффектов [10]. Частные сравнения (по группам и временным точкам) поводили на основании полученных моделей поведения фактора редукции с помощью t-критерия c аппроксимацией степеней свободы по Саттервейту. Все расчеты выполняли в статистическом пакете R, версия 3.6. Результаты анализа считали статистически значимыми при р<0,05 [2].
Результаты и обсуждение
В количественном суспензионном методе для биопленочных культур S. aureus и E. coli, сформированных на шлифах образцов зубов определены КОЕ/мл и RF числа биопленочных микробов в опыте по сравнению с контролем. Испытаны концентрации водного раствора антисептика хлоргексидина биглюконата 0,05%; 0,2%, 0,5% и 2,0% при экспозиции 60 секунд.
Результаты определения числа жизнеспособных клеток интактной культуры биопленки S. aureus и E. coli, культивированной на образцах зубов (контроль) и после воздействия различных концентраций хлоргексидина биглюконата в течение 60 секунд, представлены в таблицах 1 и 2.
Интактные культуры биопленки имеют высокое логарифмическое число, которое носит стационарный характер и свидетельствует о высоком уровне жизнеспособности клеток. Результаты определения количества жизнеспособных особей биопленочных культур образцов зубов в смывах после воздействия различных концентраций хлоргексидина биглюконата показывают, что антисептик характеризуется определенным уровнем антимикробной активности, находящимся в прямой зависимости от концентрации.
Выявлено снижение логарифмического числа интенсивности деления биопленочных культур S. aureus и E. coli в зависимости от концентрации хлоргексидина биглюконата. Наибольшая депрессия деления клеток зарегистрирована у культуры S. aureus. При воздействии 2,0% раствором хлоргексидина биглюконата установлено среднее значение lg2,6 КОЕмл, дальнейший рост культуры биопленки не отмечали. Наиболее устойчивой к воздействию антисептика оказалась куль-
Таблица 3 Результаты антимикробной активности растворов хлоргексидина биглюконата различной концентрации на биопленочные культуры
образцов зубов по зактору редукции, среднее 95% ДИ)
Биопленочные культуры Концентрация Среднее Нижний 95% ДИ Верхний 95% ДИ р
E. coli 0,05% 1,58 1,13 2,03 <0,001
E. coli 0,2% 2,88 2,43 3,33 <0,001
E. coli 0,5% 3,04 2,59 3,49 <0,001
E. coli 2,0% 4,92 4,47 5,37 <0,001
S. aureus 0,05% 2,16 1,71 2,61 <0,001
S. aureus 0,2% 2,57 2,12 3,02 <0,001
S. aureus 0,5% 3,42 2,97 3,86 <0,001
S. aureus 2,0% 5,51 5,07 5,96 <0,001
Таблица 4 Результаты попарного сравнения антимикробной активности растворов хлоргексидина биглюконата различных концентраций на биопленочные культуры образцов зубов
Пары сравниваемых концентраций растворов хлоргексидина биглюконата Р
0,05% 0,20% <0,001
0,05% 0,50% <0,001
0,05% 2,00% <0,001
0,20% 0,50% 0,023
0,20% 2,00% <0,001
0,50% 2,00% <0,001
тура биопленки E. coli логарифмическое число составило lg3,12 КОЕ/мл. Однако с увеличением концентрации антисептика фаза деления клеток снижалась. При концентрации 2,0% прирост клеток принял стационарную фазу.
Полученные результаты антимикробной активности исследованного антисептика по отношению к биопленочным культурам образцов зубов свидетельствуют о различных значениях коэффициента редукции в зависимости от его концентрации. Высокую антимикробную активность проявил раствор хлоргекси-дина биглюконата в 2,0% концентрации по отношению к культурам биопленки S. aureus и E. coli, фактор редукции составил 5,51 и 4,92 соответственно. Менее выраженной антимикробной активностью характеризовался раствор хлоргексидина биглюконата в рабочей концентрации 0,5% по отношению к культурам биопленки S. aureus и E. coli, для которой фактор редукции составил 3,42 и 3,04 соответственно. Наименьшей антимикробной активностью характеризовался раствор хлоргексидина биглюконата в рабочей концентрации 0,2% по отношению к биопленочным культурам S. aureus и E. coli,
для которой установлен фактор редукции 2,57 и 2,88 соответственно. Самой наименьшей антимикробной активностью характеризовался раствор хлоргексидина биглюконата в рабочей концентрации 0,05% по отношению к биопленочным культурам S. aureus и E. coli, для которой установлен фактор редукции 2,16 и 1,58 соответственно. Представленные результаты иллюстрирует таблица 3.
При попарном сравнении воздействия тестируемых концентраций растворов хлоргексидина биглюконата на биопленочные культуры образцов зубов установлены статистически значимые различия (табл. 4).
Следующий аспект исследования диктовался определением антибактериальной активности 2,0% раствора хлоргексидина биглюконата от времени его воздействия на биопленочные культуры образцов зубов.
В ходе анализа результатов исследования было установлено, что хлоргексидин биглюконат в 2,0% концентрации проявил высокую антимикробную активность по отношению к культурам биопленки S. aureus и E. coli. Результаты фактора редукции антимикробной активности протестиро-
ванного антисептика в отношении указанных биопленочных культур на образцах зубов были следующими. При экспозиции 30 секунд антимикробная активность исследуемой концентрации хлоргексидина биглюконата для S. aureus составила 4,9 (4,8-5,1) и E. coli4,9 (4,8-5,0) (р<0,001). При экспозиции 60 секунд - 5,3 (5,1-5,5) и 5,0 (4,9-5,1) (р<0,001).
Однако при попарном сравнении воздействия 2,0% концентрации хлоргек-сидина биглюконата на биопленочные культуры S. aureus и E. coli образцов зубов с экспозицией 30 и 60 секунд установить статистически значимые различия не представилось возможным. В данной ситуации речь может идти только о тенденции к достоверному различию.
Результаты качественной оценки жизнеспособных микроорганизмов в биопленке, смоделированной на поверхности твердых тканей зубов, после воздействия 0,2% раствором хлоргексидина биглю-коната выявили зоны роста бактерий на среде ЖСА для стафилококка и на среде Левина - для кишечной палочки.
Полученные данные иллюстрируют, что после обработки биопленочных культур на поверхности твердых тканей образцов зубов 1,0% раствором хлоргексидина биглюконата зона роста бактерий на среде ЖСА для стафилококка не выявлено, но констатировано на средах Левина для кишечной палочки.
Таким образом, проведенное исследование антибактериальной активности хлоргексидина биглюконата в различных концентрациях и по времени экспозиции на культуры биопленки, культивированные на образцах зубов, позволило установить следующее.
Во-первых, 2,0% раствор хлоргекси-дина биглюконата обладает высоким уровнем антибактериальной активности по отношению к биопленочным культурам образцов зубов S. aureus и E. coli (р<0,001). Во-вторых, при воздействии 2,0% концентрации хлоргексидина биглюконата на биопленочные культуры образцов зубов S. aureus и E. coli с экспозицией 30 и 60 секунд статистически значимые различия не выявлены (р=0,086).
Установлены статистически значимые различия по эффекту чувствительности одновидовых биопленочных культур образцов зубов к воздействию 2,0% раствора хлоргексидина биглюконата (р=0,007). Так как в соответствии с данными специальной литературы известно, что в кариозной полости одновидовых биопленочных культур не существует [3], считаем, что высокий уровень антибактериальной активности можно получить при воздействии 2,0% раствором хлоргексидина биглюконата
с экспозицией от 30 до 60 секунд. Эти данные представляют собой принципиально новые оригинальные результаты, обладающие высоким уровнем научной новизны и имеющие как фундаментальное, так и прикладное значение.
Заключение
Полученные результаты дают основание заключить, что высокий уровень антибактериальной активности 2,0% раствором хлоргексидина биглюконата можно получить при воздействии с экс-
ЛИТЕРАТУРА
1. Зотова А.С., Коннов С.В., Микаилова В.А. Антиспетики для обработки корневых каналов, используемые при пульпитах и периодонтитах: разновидности и особенности // Бюлл. мед. интернет-конф. - 2016. - Т.6, №6. - С.1099-1100.
2. Зубов Н.Н., Кувакин В.И. Методы многомерного статистического анализа данных в медицине: учебное пособие. - СПб: Изд-во ООО «Литография Принт», 2017. - 348 с.
3. Ипполитов Е.В., Николаева Е.Н., Царев В.Н. Биопленка полости рта -индукторы сигнальных систем врожденного иммунитета // Стоматология. -
2017. - Т.96, №4. - С.58-62.
4. Квашнина Д.В., Ковалишена О.В. Распространенность устойчивости микроорганизмов к хлоргексидину по данным систематического обзора и анализа регионального мониторинга резистентности // Фундаментальная и клиническая медицина. - 2018. - Т.3, №1. - С.63-71.
5. Луцкая И.К., Лопатин О.А. Диагностика и лечение зуба при хроническом апикальном периодонтите со свищом // Эндодонтия Today. - 2018. - №1. - С.66-70.
6. Методы культивирования и изучения бактериальных биопленок / И.Р. Симонова [и др.] // Известия высших учеб. завед. Северо-Кавказ. регион. Естеств. науки. - 2017. - Т.193, №1. - С.73-79.
7. Погосян М.А. Хлоргексидин - антисептик, не приводящий к бактериорези-стентности // Бюлл. мед. интернет-конф. - 2015. - Т.5, №10. - С.1234-1235.
8. Хрянин А.А., Кнорринг Г.Ю. Современные представления о биопленках // Фарматека. - 2020. - Т.27, №6. - С.34-43.
9. Чувствительность к антисептикам биопленочных форм Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa, выделенных из ожоговых ран / С.В. Андреева [и др.] // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. -
2018. - Т.20, №3. - P.249-256.
10. Экспериментальная оценка методов определения антимикробной активности препаратов хлорфиллипта / Ю.В. Олефир [и др.] // Ведомости Науч. центр. экспертиз средств медицинского примененения. - 2015. - №4. - С.47-50.
11. A potential biofilm metabolite signature for caries activity - a pilot clinical study / F Zandona [et al.] // Metabolomics. - 2015. - Vol.5, N1. - P.140.
12. Chandki R., Nikhil V, Kalyan S.S. Comparative evaluation of substantivity of two biguanides - 0,2% polyhexanide and 2% chlorhexidine on human dentin // J. Conserv. Dent. - 2020. - Vol.23, N1. - P.46-50.
13. l-Arginine modifies the exopolysaccharide matrix and thwarts Streptococcus mutans outgrowth within mixed-species oral biofilms / J. He [et al.] // J. Bacteriol. -2016. - Vol.198, N19. - P.2651 -2661.
REFERENCES
1. Zotova A.S., Konnov S.V., Mikailova V.A. Antispetiki dlya obrabotki kornevykh kanalov, ispol'zuyemyye pri pul'pitakh i periodontitakh: raznovidnosti i osobennosti [Antispecifics for the treatment of root canals used for pulpitis and periodontitis: varieties and features]. Byullmed internet-konf, 2016, vol.6, no.6, pp.1099-1100. (in Russian)
2. Zubov N.N., Kuvakin V I. Metody mnogomernogo statisticheskogo anallza dannykh v meditsine: uchebnoye posobiye [Methods of multivariate statistical analysis of data
Адрес для корреспонденции
Кафедра общей стоматологии
Белорусский государственный медицинский университет
г. Минск, ул. Сухая, 28
220004, Республика Беларусь
тел.: + 375 17 226-50-92
Чистякова Глина Геннадьевна, e-mail: commonstom@bsmu.by
позицией 30-60 секунд, а также дают основание для использования их в клинической практике с целью повышения эффективности лечения кариеса. Это будет способствовать уменьшению числа его осложнений и снижению показателя острой одонтогенной инфекции, что, с одной стороны, соответствует основному направлению медицины - профилактике, с другой стороны, повышает уровень оказания специализированной медицинской помощи населению в целом.
in medicine: a tutorial]. SPb: Izd-vo OOO «Litografiya Print», 2017, 348 p. (in Russian)
3. Ippolitov Ye.V., Nikolayeva Ye.N., Tsarev V.N. Bioplenka polosti rta - induktory signal'nykh sistem vrozhdennogo immuniteta [Oral cavity biofilm - inducers of innate immunity signaling systems]. Stomatologiya, 2017, vol.96, no.4, pp.58-62. (in Russian)
4. Kvashnina D.V., Kovalishena O.V. Rasprostranennost' ustoychivosti mikroorganizmov k khlorgeksidinu po dannym sistematicheskogo obzora i analiza regional'nogo monitoringa rezistentnosti [The prevalence of microorganism resistance to chlorhexidine according to a systematic review and analysis of regional monitoring of resistance]. Fundamental'nayaiklinicheskayameditsina, 2018, vol.3, no.1, pp.63-71. (in Russian)
5. Lutskaya I.K., Lopatin O.A. Diagnostika i lecheniye zuba pri khronicheskom apikal'nom periodontite so svishchom [Diagnostics and treatment of a tooth in chronic apical periodontitis with fistula]. Endodontiya Today, 2018, no.1, pp.66-70. (in Russian)
6. Metody kul'tivirovaniya i izucheniya bakterial'nykh bioplenok [Methods of cultivation and study of bacterial biofilms]. I.R. Simonova [i dr.]. Izvestiya vysshikh ucheb zaved Severo-Kavkazregion YestestNauki, 2017, vol.193, no.1, pp.73-79. (in Russian)
7. Pogosyan M.A. Khlorgeksidin - antiseptik, ne privodyashchiy k bakteriorezistentnosti [Chlorhexidine is an antiseptic that does not lead to bacterioresistance]. Byull med internet-konf, 2015, vol.5, no.10, pp.1234-1235. (in Russian)
8. Khryanin A.A., Knorring GYu. Sovremennyye predstavleniya o bioplenkakh [Modern concepts of biofilms]. Farmateka, 2020, vol.27, no.6, pp.34-43. (in Russian)
9. Chuvstvitel'nost' k antiseptikam bioplenochnykh form Staphylococcus aureus i Pseudomonas aeruginosa, vydelennykh iz ozhogovykh ran [Sensitivity to antiseptics of biofilm forms of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa isolated from burn wounds]. S.V. Andreyeva [i dr.] // Klinicheskaya mikrobiologiya iantimikrobnaya khimioterapiya, 2018, vol.20, no.3, pp.249-256. (in Russian)
10. Eksperimental'naya otsenka metodov opredeleniya antimikrobnoy aktivnosti preparatov khlorfillipta / YU.V Olefir [i dr.] [Experimental evaluation of methods for determining the antimicrobial activity of chlorophyllipt preparations]. Vedomosti Nauch. tsentr. ekspertiz sredstv meditsinskogo primeneneniya, 2015, vol.4, pp.47-50. (in Russian)
11. A potential biofilm metabolite signature for caries activity - a pilot clinical study / F Zandona [et al.]. Metabolomics, 2015, vol.5, no.1, pp.140.
12. Chandki R., Nikhil V., Kalyan S.S. Comparative evaluation of substantivity of two biguanides - 0,2% polyhexanide and 2% chlorhexidine on human dentin. J Conserv Dent, 2020, vol.23, no.1, pp.46-50.
13. l-Arginine modifies the exopolysaccharide matrix and thwarts Streptococcus mutans outgrowth within mixed-species oral biofilms / J. He [et al.]. J Bacteriol, 2016, vol.198, no.19, pp.2651-2661.
Конфликт интересов
Согласно заявлению авторов, конфликт интересов отсутствует.
Поступила 09.04.2020 Принята в печать 15.01.2021
Address for correspondence
Department of General Dentistry
Belarusian State Medical University
28, Sukhaya street, Minsk
220004, Republic of Belarus
phone: + 375 17 226-50-92
Galina Chistyakova, e-mail: commonstom@bsmu.by
