Научная статья на тему 'ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВАЛЕКСОНА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ'

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВАЛЕКСОНА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
29
6
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — А.А. Красных, Д.А. Швец

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВАЛЕКСОНА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ»

показателя клеточных реакций) отражает уровень сенсибилизации подопытных животных, они могут быть использованы не только для выявления аллергенных свойств химических соединений, но и для оценки их аллергенной активности и выяснения сенсибилизирующего эффекта при различных путях воздействия на организм. Применение в реакциях in vitro аллергенных ингредиентов полимерных материалов или других сложных по составу химических продуктов при тестировании животных, сенсибилизированных полными композициями, позволяет подойти к решению вопроса гигиенической регламентации их состава с целью снижения аллергенной активности (3. А. Волкова и соавт.). В то же время зависимость уровня сенсибилизации от дозы химического аллергена и путей его воздействия дает основание для использования специфических иммунологических тестов при гигиеническом нормировании химических соединений с учетом порога аллергенного действия (О. Г. Алексеева и Л. А. Дуева; Т. В. Жукова и Г. Я. Ильченко). При этом более высокая чувствительность реакций in vitro по сравнению с кожными тестами позволяет более строго подойти к величине Limai , тем более что при слабо выраженной сенсибилизации возможно исчезновение замедленной гиперчувствительности при сохранении продукции гуморальных антигаптенных антител. Применение в токсиколого-аллергологическом эксперименте различных специфических иммунологических тестов помогает не только решению гигиенических вопросов, но и более глубокому пониманию механизмов индукции иммунного ответа на воздействие химических аллергенов.

ЛИТЕРАТУРА

Алексеева О. Г., Дуева Л. А. Аллергия к промышленным химическим соединениям. М., 1978.

Алексеева О. Г., Дуева Л. А., Поляк Н. Р. и др. — Гиг. и сан., 1976, № 6, с. 51—53. Волкова 3. А., Дуева Л. А., Зильфян 3. Н. — Там же, 1975, № 4, с. 45—48. Гришина Т. И., Мюллер С. — Бюлл. экспер. биол., 1978, № 4, с. 503—506. Жукова Т. В., Ильченко Г. #. — В кн.: Химический фактор — внешняя среда —

здоровье человека. Ростов-н/Д., 1975, с. 24—26. Русаков Н. В.— В кн.: Гигиена воды и санитарная охрана водоемов. М., 1973, с. 20—21.

Поступила 22/1X 1978 г.

УДК 615.285.7.074:543.544

A.A. Красных, Д. А. Швец ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВАЛЕКСОНА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Воронеж

Валексон (волатон, байтион, ромин) — о,о-диэтилтиофосфорил-о-(а-ци-анобензальдоксим) — инсектицид с широким спектром действия. Для идентификации валексона применяют газожидкостную хроматографию (В. В. Ле-щев и Б. А. Королев) и хроматографические методы (А. И. Быховец; Т. М. Петрова), однако это затруднительно при работе с зерном, травой и почвой, которая содержит большое количество гумуса.

Предлагаемый метод основан на экстракции препарата органическим растворителем, осаждении коэкстрактивных веществ коагулирующим раствором и хроматографировании в тонком слое силикагеля Л5/40м («Хема-пол», ЧССР).

Место локализации пестицида обнаруживают после опрыскивания хро-матограммы одним из следующих проявляющих реактивов:

— 0,2 % раствором хлористого палладия в 0,01 н. HCl. Пластинку после обработки облучают УФ-светом до четкого выявления пятен валексона желтого цвета с коричневой окантовкой;

— 0,2 % раствором 2,6-дибром-Ы-хлор-хинонимином в хлороформе с последующей обработкой хроматограммы парами концентрированной НС1 или нагреванием в сушильном шкафу при 110 °С в течение 10 мин. Валек-

► сон проявляется в виде ярких красных пятен;

— 0,05 % раствором бромфенолового синего с 1 % азотнокислым серебром в смеси вода — ацетон (1 : 3) с последующим обесцвечиванием фона 5 % уксусной кислотой. Пятна инсектицида имеют синюю окраску.

Из 200 мл воды валексон экстрагируют хлороформом или н-гексаном трижды по 15 мин порциями по 80, 50 и 40 мл. Органический растворитель отделяют от воды в делительной воронке и сушат безводным сернокислым натрием. Объединенный экстракт помещают в колбу для отгонки растворителей, концентрируют до объема 0,2—0,3 мл при температуре воды около 50 °С и хроматографируют.

Из 100 г измельченной почвы валексон экстрагируют 90 мл н-гексана или хлороформа путем энергичного встряхивания в течение 2 ч. Экстракт отфильтровывают через складчатый фильтр со слоем безводного сернокислого натрия, колбу дважды промывают тем же растворителем порциями по 20 мл. Объединенный экстракт концентрируют до объема 1—3 мл и переносят на хроматографическую колонку, которую заполняют следующим образом: снизу кладут кусочек ваты, затем слой безводного сернокислого натрия (3—4 г), далее слой окиси алюминия (5 г) для хроматографирова-ния, 2 г активированного угля БАУ и опять слой безводного сернокислого натрия. Колонку промывают 40 мл хлороформа. Валексон элюируют L00 мл хлороформа со скоростью 2,0—2,5 мл/мин. Элюат концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2—0,3 мл и хроматографируют.

Из 20 г измельченной растительной массы (зерно, трава, овощи) инсектицид экстрагируют 40—50 мл гексана, хлороформа или петролейного эфи-^ ра путем встряхивания в течение 1 ч. Экстракт отфильтровывают в колбу для отгонки растворителей, сушат безводным сернокислым натрием. Оставшуюся пробу дважды промывают тем же растворителем порциями по 10 мл. Объединенный экстракт отгоняют досуха. Сухой остаток растворяют в 3—5 мл охлажденного ацетона, затем прибавляют 30—40 мл охлажденной коагулирующей смеси, которую готовят следующим образом: 5 г хлористого аммония растворяют в 100 мл дистиллированной воды, смешивают с 10 мл 85 % ортофосфорной кислоты и доливают до 1 л водой. Раствор фильтруют через плотный бумажный фильтр.

Фильтрат нейтрализуют аммиаком или водным раствором едкого натра, доводят рН до 8,0 по лакмусу. Далее выполняются те же операции, что и при определении валексона в воде.

Пробу помещают на пластинку «Силуфол UV-254» или на стеклянную пластинку со слоем силикагеля, скрепленного гипсом. Колбу несколько раз обмывают небольшими порциями хлороформа, которые наносят в центр пятна. Для дополнительной очистки применяют двумерную хроматографию, используя в качестве 1-й подвижной фазы гексан — хлороформ (1 : 1), а в качестве 2-й — гексан — ацетон (4 : 1). После хроматографирования пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают одним из проявляющих реактивов. Rf валексона в данных условиях хроматографирования 0,6—0,7, при работе с пластинками «Силуфол» — 0,25— 0,30. Количественное определение проводят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб и стандартных растворов. Чувствительность метода 1—3 мкг препарата в пробе. Процент извлечения 90—95.

ЛИТЕРАТУРА

^ Лещев В. В., Королев Б. А. — Химия в сельском хоз-зе, 1975, № 9, с. 50.

Быховец А. И. — В кн.: Актуальные вопросы защиты растений в БССР. Минск, 1974, с. 81.

Петрова Т. М. Определение инсектицидов и продуктов их превращения в растительном материале (Метод, указания). Л., 1978, с. 25.

Поступила 20/III 1979 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.