CC BY
91
© ПАНТЕЛЕЕВА Н. М., ИЛЛАРИОНОВА Е. А. — 2009
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕСТА «РАСТВОРЕНИЕ» ТАБЛЕТОК ЛОМЕФЛОКСАЦИНА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВНЕШНЕГО ОБРАЗЦА СРАВНЕНИЯ КАЛИЯ ХРОМАТА
Н. М. Пантелеева, Е. А. Илларионова (Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д. м. н., проф. И. В. Малов, кафедра фармацевтической и токсикологической химии, зав. — д. х. н., проф. Е. А. Илларионова)
Резюме. Определены оптимальные условия для проведения теста «растворение» ломефлоксацина в таблетках: среда растворения — 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты; объем среды растворения — 1000 мл; скорость вращения «корзинки» — 100 об/мин; время растворения 20 минут. Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения ломефлоксацина в среде растворения, отличающаяся использованием в качестве стандартного образца калия хромата. Обоснованы оптимальные условия определения: растворители — 0,1М растворы кислоты хлористоводородной и натрия гидроксида; аналитическая длина волны — 284 нм. Результаты определения ломефлоксацина в среде растворения показали, что за 20 минут растворения высвобождается не менее 80% ломефлоксацина от содержания в лекарственной форме.
Ключевые слова: ломефлоксацин, тест «растворение», спектрофотометрия, внешний образец сравнения, коэффициент пересчета, калия хромат.
DEFINITION OF THE TEST DISSOLUTION OF TABLETS OF LOMEFLOXACIN BY SPECTROFOTOMETRIC METHOD WITH USE OF THE EXTERNAL SAMPLE OF COMPARISON OF POTASSIUM CHROMATE
N. M. Panteleeva, E. A. Illarionova (Irkutsk State Medical University, Irkutsk)
Summary. Optimum conditions for carrying out of the test «dissolution» of lomefloxacin in tablets: the environment of dissolution — 0,1 M a solution acid hydrochloride, volume of the environment of dissolution — 1000 ml; speed of rotation — 100 rev/min; time of dissolution 20 minutes. The unified technique of spectrofotometric definition of basket lomefloxacin in the environment of the dissolution, differing by use as the standard sample of potassium chromate is developed. Optimum conditions of definition are proved: solvents — 0,1М solutions of an acid hydrochloride and of sodium hydroxide; Analytical length of a wave — 284 nanometers. Results of definition of lomefloxacin in the environment of dissolution have shown, that for 20 minutes of dissolution not less than 80% lomefloxacin from in the medicinal form is released.
Key words: lomefloxacin, the test «dissolution», spectrofotometric method, the external sample of comparison, factor of recalculation, potassium chromate.
Лекарственные вещества оказывают резорбтивное действие только после того, как они достигли системного кровотока, в связи с этим контроль биодоступности лекарственных препаратов является актуальной задачей фармацевтической науки.
При внутривенном введении лекарственного препарата его биодоступность принимается за 100%. Биодоступность лекарственных форм, предназначенных для энтерального введения может быть снижена из-за влияния различных фармацевтических факторов: природы и физического состояния вещества, природы и количества вспомогательных веществ, вида лекарственной формы, технологии изготовления [4]. При пероральном введении препарата на всасывание лекарственных веществ оказывает влияние рН среды, моторика, ферменты желудочно-кишечного тракта, способность веществ растворяться в содержимом желудка и кишечника, кроме того многие лекарственные вещества, перед тем как попасть в системный кровоток подвергаются весьма интенсивной элиминации при первом прохождении через печень.
Для определения биодоступности твердых лекарственных форм для внутреннего применения в условиях фармацевтических предприятий и лабораторий выполняется тест «растворение», результаты которого позволяют судить о соблюдении технологии изготовления препарата, его биологической доступности, не прибегая к проведению исследований над животными, что в условиях отделов контроля качества фармацевтический предприятий является затруднительным, так как влечёт привлечение дополнительных денежных средств, производственных площадей предприятия, увеличение количества вспомогательного персонала, а также персонала с соответствующей квалификацией.
Проведение теста «растворение» отличается доступностью для фармацевтических лабораторий, экс-прессностью, экономичностью, доступностью для фармацевтических лабораторий не требует специаль-
ной подготовки персонала, результаты, полученные при проведении теста «растворение» коррелируют с результатами, полученными при определении биологической доступности препарата биологическими методами.
Определение теста «растворение» унифицировано и изложено в общей фармакопейной статье, которая включена в Государственную Фармакопею XI издания [5]. Данная унифицированная методика была взята нами за основу при разработке методики определения растворения таблеток ломефлоксацина. Испытания проводили на приборе типа «вращающаяся корзинка». Объем среды растворения — 1000 мл, температура — 37±1° С. Скорость перемешивания среды растворения варьировали от 100 до 150 об/мин.
Целью исследования являлся выбор состава среды растворения, времени отбора пробы и разработка методики количественного определения ломефлоксацина в среде растворения.
Материалы и методы
Использовали таблетки ломефлоксацина, отвечающие требованиям фармакопейных статей [6], калия хромат квалификации «х.ч.», 0,1М растворы кислоты хлористоводородной и натрия гидроксида, приготовленные из фиксаналов, воду очищенную.
Оптическую плотность растворов регистрировали на спектрофотометре SHIMADZU UV — 1601, UV — VISIBLE в кюветах 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального ионо-метра ЭВ — 74.
Результаты и обсуждение
Ломефлоксацин обладает способностью поглощать в ультрафиолетовой области спектра, поэтому были изучены спектральные характеристики данного лекар-
Рис. 1. Спектры поглощения ломефлоксацина при различных значениях рН
ственного вещества в области от 220 до 340 нм в интервале рН 1,1-12,5. Спектр поглощения ломефлоксацина в 0,1М растворе натрия гидроксида (рН 12,5) характеризуется тремя максимумами поглощения при длинах волн 234 нм, 284 нм, 328 нм (рис. 1). Исследование зависимости оптических характеристик ломефлоксацина от рН в течение трех суток показало, что раствор ломефлоксацина в данном растворителе устойчив.
были подобраны экспериментально. Среду растворения выбирали, учитывая природу исследуемого лекарственного вещества, его ионизацию и участок пищеварительного тракта, в котором должно происходить растворение. Исходя из того, что всасывание ломефлоксацина происходит в желудке, в качестве среды растворения использовали 0,1М раствор хлористоводородной кислоты, рН которой составил 1,0. Выбранная среда растворения по составу соответствует желудочному соку.
Время отбора пробы определяли экспериментально. Для этого провели исследование кинетики высвобождения ломефлоксацина из таблеток. Оптимальным временем растворения для таблеток ломефлоксацина является 20 минут (табл. 1).
Незначительные отклонения от времени отбора пробы (± 5 минут) влияния на результаты определения оказывать не будут. Установлено, что оптимальная скорость перемешивания среды растворения для таблеток ломефлоксацина, составляет 100 об/мин.
На основании проведенных исследований была разработана методика определения растворения таблеток Таблица 1 ломефлоксацина.
Кинетика высвобождения ломефлоксацина из таблеток
Высвобождение действующего вещества, % Время отбора пробы, минуты
15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
Таблетки ломефлоксацина по 0,4 г 80,16 83,30 86,54 88,78 91,78 93,78 96,03 98,77 99,67 99,75
Учитывая требования, предъявляемые к образцам сравнения [2], в качестве внешнего образца сравнения для спектрофотометрического определения ломефлок-сацина был выбран калия хромат. Спектр поглощения калия хромата в 0,1 М растворе натрия гидроксида характеризуются наличием максимума при длине волны 275±1 нм. Оптимальный интервал, при котором его можно использовать в качестве внешнего образца сравнения 264 — 286 нм [1].
Аналитическая длина волны ломефлоксацина при рН 12,5 (284 нм) входит в интервал, оптимальный для калия хромата (264-286 нм). Это дает основание предполагать, калия хромат является оптимальным внешним образцом сравнения для спектрофотометрического определения ломефлоксацина при использовании в качестве растворителя 0,1М раствора гидроксида натрия.
Методом наименьших квадратов определено уравнение градуировочного графика для спектрофотометрического определения ломефлоксацина при п=10, P=95%,
Методика определения растворения таблеток ломефлоксацина по 0,4 г: среда растворения — 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты; объем среды растворения — 1000 мл;
А=(0,0697±0,0004)С, Sд=0,002 (рН 12,5) при аналитиче-
ской длине волны 284 нм (А — оптическая плотность растворов, С — концентрация растворов, мкг/мл).
Для разработки методики спектрофотометрического определения ломефлоксацина по калия хромату необходимо было определить коэффициент пересчета. Значение коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения ломефлоксацина калия хромату составило 0,214, относительная ошибка определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения ломефлоксацина по внешнему образцу сравнения не превышает 0,77%.
Разработанная методика была использована для количественного определения ломефлоксацина в субстанции и таблетках по 0,4 г [3].
Данная методика была применена для количественного определения ло-мефлоксацина в среде растворения.
Методика была модифицирована с учетом особенностей приготовления испытуемого раствора.
Условия для проведения теста «растворение» таблеток ломефлоксацина
скорость вращения «корзинки» — 100 об/мин; время растворения 20 минут.
Точную массу калия хромата (0,1700г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл 0,1М раствора натрия гидроксида, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки 0,1М раствором натрия гидроксида и перемешивают. 2 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора до метки 0,1М раствором натрия гидроксида до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 284 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1 М раствор натрия гидроксида. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора внешнего образца сравнения хромата калия.
Анализируемые серии таблеток ломефлоксацина отвечают требованиям НД по показателю «растворение» (табл. 2). За 20 минут растворения высвобождается не менее 75% действующего вещества от содержания в лекарственной форме.
Таким образом, были определены оптимальные условия для проведения теста «растворение» ломефлоксаци-на в таблетках, разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения ломефлоксаци-на в среде растворения, отличающаяся использованием в качестве стандартного образца калия хромата.
Таблица 2
Результаты контроля теста «растворение» таблеток ломефлоксацина
Наименование препарата и № серии А вос а г вос, А х Высвобождение действующего вещества, %
Таблетки ломефлоксацина 0,4365 0,14990 0,4634 85,10
по 0,4 г 0,4609 84,64
150308 0,4597 84,42
0,4389 0,15000 0,4672 85,38
190607 0,4698 86,33
0,4660 85,17
070606 0,4377 0,14955 0,4572 83,53
0,4559 83,30
0,4597 84,19
ЛИТЕРАТУРА
1. Артасюк Е. М., Илларионова Е.А., Сыроватский И.П. Спектрофотометрическое определение диклофенака натрия // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. — 2006. — Т. 72. № 4. — С. 15-18.
2. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Плетенёва Т.В. Модифицированный метод сравнения в спектрофотометрическом анализе лекарственных средств // Вестник РУДН. Сер.: Медицина. — 2003. — № 5 (24). — С. 66-70.
3. Пантелеева Н.М., Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Никонович О.Л. Количественное определение 1-этил-6,8-дифтор-1,4дигидро-7-(3-метил-1-пиперазинил)-4-оксохинолин-карбоновой кислоты спектрофотометрическим
методом // Известия ВУЗов. Сер.: Химия и химическая технология. — 2008. — Т. 51. — Вып. 12. — С. 6-9.
4. Тенцова А.И., ГраковскаяЛ.К., Киселёва Г.С. Оценка качества таблеток и касул по скорости растворения действующих веществ // Современные аспекты создания и исследования лекарственных форм: Тез. докл. Всесоюз. науч. конф. — Баку, 1984. — С. 12-14.
5. Общая фармакопейная статья 42-0003-04. Растворение. — Россия, 2004. — 22 с.
6. Нормативный документ 42 — 02636217 — 05. Ломефлоксацин таблетки, покрытые оболочкой 400 мг. — ОАО «Фармасинтез», Россия, 2006. — 6 с.
Адрес для переписки: 664003, Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, Иркутский государственный медицинский университет, кафедра фармацевтической и токсикологической химии — Илларионова Елена Анатольевна — заведующая кафедрой, профессор, Пантелеева Надежда Михайловна — аспирант. Тел. (3952) 243447
© КУВАЕВА О.В., ВАСИЛЬЕВА Л.С. — 2009
ОТЛИЧИЯ В СТРУКТУРЕ ПОДНИЖНЕЧЕЛЮСТНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЖЕНЩИН И МУЖЧИН В ПЕРВОМ ПЕРИОДЕ ЗРЕЛОГО ВОЗРАСТА
О.В. Куваева, Л.С. Васильева
(Иркутский государственный медицинский университет — ректор д.м.н., проф. И.В.Малов, кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, зав. — д.б.н., проф. Л.С.Васильева)
Резюме. Выявлены половые отличия в структуре подчелюстной железы человека в первый период зрелого возраста. У мужчин сильнее развита внедольковая строма, наиболее прочными являются капсула и междолевая строма, доля паренхимы и внутридольковой стромы меньше, липоцитов больше, кровоснабжение хуже. У женщин наибольшую прочность имеет междольковая строма, доля паренхимы и внутридольковой стромы больше, липоцитов мало, кровоснабжение лучше.
Ключевые слова: подчелюстная железа, морфогенез слюнных желез, половые отличия структуры слюнных желез.
DIFFERENCES IN STRUCTURE OF SUBMANDIBULARY SALIVARY GLAND OF WOMEN AND MEN
IN THE FIRST MATURE AGE
Kuvaeva O.V., Vasilyeva L.S.
(Irkutsk State Medical University, Irkutsk)
Summary. Sexual differences in structure of submandibullary gland of the person during the first period of mature age are revealed. At men it is more strongly developed the extralobular stroma, the strongest are a capsule and interlobus stroma, the share of parenchyma and intralobular stroma is less, the share of lipocytes is more, blood supply is worse. In women the interlobular stroma has greatest durability, the share of parenchyma and intralobular stroma is bigger, the share of lipocytes is not large, blood supply is better.
Key words: submandibulary gland, morphogenesis of salivary glands, sexual differences of salivary gland structure.
В процессах морфогенеза и регенерации паренхиматозных органов общепризнана ведущая роль, наравне с механизмами центральной регуляции, стромально-паренхиматозных взаимоотношений, нарушение которых может приводить к развитию опухолей, склероза и других патологических процессов в паренхиматозных органах [6, 8, 11]. Слюнные железы издавна используются как удобный объект для изучения механизмов регуляции морфогенеза, эпителио-мезенхимных взаимоотношений. В рамках этой проблемы относительно полно изучен эпителиальный компонент и значительно меньше — стромальный компонент этих органов, которому многие авторы отводят приоритетную роль в регуляции морфогенеза [6, 7, 9, 10]. Сведения о половых различиях в структуре поднижнечелюстной слюнной железы (ПЧЖ) человека немногочисленны.
Цель исследования. Выявление закономерностей стромально-паренхиматозных взаимоотношений и половых различий в структуре поднижнечелюстной слюнной железы человека в первом периоде зрелого возраста.
Материалы и методы
Проведено морфологическое исследование структуры 40 поднижнечелюстных желез (ПЧЖ) жен-
щин и мужчин в период первой зрелости (22-35 лет). Морфологические методы включали макро-микроскопическое препарирование, гистотопографи-ческое исследование, гистологические методы (окраска гематоксилин-эозином, морфометрия), гистохимические методы (пикрофуксином по ван Гизону для выявления коллагеновых волокон, орсеином по Унна-Тенцеру для выявления эластических волокон, импрегнация азотно-кислым серебром по Карупу и Гордону-Свитсу для выявления ретикулярных волокон, щелочным суданом по Герксгеймеру для выявления жировых клеток, толуидиновым синим по Hale для выявления гликоза-миногликанов, ШИК-реакция по Шимицу-Куманото с контролями и сочетанная окраска по Риттеру-Олесону для выявления гликопротеинов). Морфометрически оценивали (по Г.Г. Автандилову [1]) объемные доли паренхимы и соединительнотканной стромы, внедоль-ковой и внутридольковой соединительной ткани, волокнистых структур и основного вещества, жировых клеток, толщины структурных элементов соединительнотканной стромы (оболочек, межоболочечных прослоек, волокон и их пучков), мукоцитов и сероцитов в концевых отделах, внутридолькового и внедолькового сосудистого русла. Для оценки напряженности меж-структурных отношений и механической прочности
