CC BY
42
Текущий раздел: Молекулярная медицина
Определение риска локорегиональных рецидивов рака молочной железы после органосохраняющего лечения на основе анализа экспрессии генов
Пасько М.А., Захаренко М.В., Троценко И.Д., Кудинова Е.А, Чхиквадзе В.Д., Боженко В.К. ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, г. Москва.
Адрес документа для ссылки: http://vestnik-rncrr.ru/vestnik/v15/papers/Zakharenko_v15.htm Статья опубликована 17 декабря 2015 года.
Контактная информация:
Рабочий адрес: - 117997, Москва, ГСП-7, ул.Профсоюзная, д.86, ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России;
Троценко Иван Дмитриевич - к.м.н., н.с. лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточной терапии в онкологии, ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России E-mail: trotsenkoivan@mail.ru;
Пасько Максим Андреевич - очный аспирант ФБГУ "РНЦРР" Минздрава России, Тел.: 8(925)366-39-08, E-mail: phantom1908@mail.ru ;
Захаренко М.В. - м.н.с. лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточной терапии в онкологии, ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России;
Кудинова Елена Александровна - к.м.н., зав. к.д.л. ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России Тел.: 8(499)120-11-14 , E-mail: eakudiniva@rambler.ru;
Чхиквадзе Владимир Давидович - д.м.н., проф., заведующий научно-исследовательского отдела хирургии и хирургических технологий в онкологии, ФГБУ РНЦРР Минздрава России;
Боженко Владимир Константинович - д.м.н., проф., руководитель отдела молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ РНЦРР Минздрава России. E-mail: Vbojenko@mail.ru.
Резюме
Цель: Проанализировать уровень экспрессии 21 гена, участвующего в процессах апоптоза, пролиферации, дифференцировки при раке молочной железы, в случаях развития локорегионарных рецидивов и при длительной ремиссии. На основе этих данных попытаться создать прогностическую модель, оценивающую риск возникновения локорегионарных рецидивов после органосохраняющего лечения на основе уровня экспрессии генов.
Материалы и методы: Были исследованы 53 образца ткани первичной опухоли рака молочной железы (РМЖ), полученной от пациенток после органосохраняющего лечения (ОСЛ). 14 образцов были взяты у больных, у которых развился ЛРР, группу сравнения составили 39 пациентов с ремиссией в течение 5 лет.
Результаты: ПИзучена экспрессия 21 гена методом ПЦР в реальном времени, определены уровни экспрессии в группах прогрессирования и ремиссии. В 71,4 % случаев
дискриминантный анализ исследуемых генов позволяет спрогнозировать возникновение локорегионарного рецидива в исходной выборке и в 94,8 % исключить его появление.
Заключение: Анализ уровней экспрессии генов позволяет создать алгоритм, предсказывающий развитие локорегионарных рецидивов после органосохраняющего лечения рака молочной железы.
Ключевые слова: рак молочной железы, локорегионарный рецидив, органосохраняющее лечение, профиль экспрессии генов, дискриминантный анализ.
Prediction of locoregional recurrence in breast cancer after breast-conserving therapy based on genes expression analysis
Pas'ko M.A., Zakharenko M.V., Trotsenko I.D., Kudinova E.A., Chkhikvadze V. D., Bozhenko V.K.
Federal State Budget Establishment Russian Scientific Center of Roentgenoradiology (RSCRR) of Ministry of Health of Russian Federation (FSBE "RSCRR of Russian Ministry of Health"), 117997, GPS-7, Moscow, Profsoyuznaya, 86
Contact information:
Address: - 117997, Moscow, Profsoyuznaya str., 86, "RNCRR" ;
Bozhenko V.K. - prof. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health;
Chkhikvadze V. D. - prof. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health; ;
Trotsenko I.D. - PhD. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health;
Pas'ko M.A. - postgraduate student Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health;
Zakharenko M.V. - Jr. researcher of Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health;
Kudinova E.A. - PhD. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Summary
Purpose: to analyze the expression levels of 21 genes participating in cell proliferation control, apoptosis activation, cell differentiation and adhesion in FFPE in breast cancer (BC) tumor samples from patients with and without local relapse after breast-conserving surgery. Additionally we tried to develop prognostic model for local relapse risk assessment after breast-conserving surgery on the basis of tumor gene expression profile.
Materials and methods: Study included 53 BC samples received from patients after breast-conserving surgery. Locoregional relapse was observed in 14 (26%) cases.
Results: We analyzed expression level of 21 genes by RT-PCR and used those data to distinguish retrospectively the relapsed and nonrelapsed patients. Analysis allowed us to predict locoregianal recurrence in 71,4 % of the cases and we could exclude it in 94,8 % cases.
Conclusion: Comparative genes expression analysis allows to create the algorithm of locoregional recurrence prediction after breast-conserving surgery.
Keywords: breast cancer, locoregional recurrence, breast-conserving therapy, gene expression profiles, discriminant function analysis.
Введение
Рак молочной железы (РМЖ) является самым распространенным онкологическим заболеванием среди женщин. Несмотря на совершенствование подходов к лечению РМЖ, ежегодно в мире от этого заболевания погибает более 500 тыс. человек (Ferlay et al., 2013). При этом в мире отмечаются устойчивые тенденции к уменьшению объема хирургического лечения, возрастает роль адъювантных методик химио- и лучевого лечения. Несмотря на вполне сопоставимые отдаленные результаты лечения при органосохраняющих операциях (ОСО) и радикальных мастэктомиях (РМЭ), при выполнении экономных резекций увеличивается риск локорегиональных рецидивов (ЛРР). По данным английских ученых (Jeevan et al., 2012) 58% всех выявляемых случаев РМЖ подвергаются органосохраняющему лечению (ОСЛ), при этом риск повторных операций по поводу ЛРР достигает 20%. Похожие результаты демонстрируют данные мультицентрового исследования Европейской организации исследования и лечения рака (EORTC), в котором риск развития ЛРР после комбинированного ОСЛ РМЖ составляет 19,7%, в противоположность РМЭ, где этот риск статистически ниже - 11,8%. В обеих группах уровень общей и безрецидивной выживаемости показал статистически сопоставимые данные (Atalay, 2012). Результаты отечественных ученых также подтверждают более частое выявление ЛРР после ОСЛ (Вторушин и др., 2009). В то же время, данные клинических протоколов NSABP (B-15, B-16, B-18, B-22, B-25) свидетельствуют о том, что у пациентов с возникшими ЛРР поле ОСЛ отмечаются более низкие показатели выживаемости. Так, при возникновении локального рецидива в области послеоперационного рубца, общая 5-летняя выживаемость пациенток составила 59,9%, а при появлении регионарных рецидивов, данный показатель опустился до 24,1 % (Anderson et al., 2009). Среди всего разнообразия причин, влияющих на развитие ЛРР, можно выделить 3 основные группы. Первую группу составляют морфологические характеристики опухоли, такие как размер первичной опухоли, ее гистологическая структура, степень дифференцировки, мультцентрический рост, поражение регионарных лимфоузлов (л/у). Размер опухоли более 4 см почти в два раза увеличивает частоту возникновения ЛРР по сравнению c небольшими опухолями (менее 2 см). Риск развития регионарных рецидивов пропорционален числу пораженных л/у. Так при N1 он составляет 4,4%, при N2 - 7,2% и при N3 - 14,6% (Wapnir
et al., 2006). Вторая группа факторов связана с качеством проводимого лечения, включает в себя интраоперационный контроль краев резекции удаляемой опухоли и проведение адъювантной лучевой терапии (АЛТ), которая значительно снижает риск возникновения ЛРР (Молодикова и др., 2009; Onitilo et al., 2015). Третья группа факторов связана с иммуногистохимическими характеристиками опухоли, такими как наличие рецепторов эстрогена (РЭ), прогестерона (РП), экспрессия Her2/neu и Ki-67. В ряде исследований отмечается повышенный уровень локального рецидивирования при различных биологических типах опухоли (Соцкова и др., 2009; Синяков, Шаназаров, 2011; Metzger-Filho et al., 2013). В исследованиях (Arvold et al., 2011; Jia et al., 2014) показано, что "трижды негативный" и Her2 сверхэкспрессирующий подтипы, в отличие от люминальных подтипов РМЖ, дают наибольшее количество локорегионарных рецидивов. В последнее десятилетие учеными ведется широкий поиск генетических маркеров, способных оценивать риски как локорегионарного, так и отдаленного метастазирования. Оценивая генетический потенциал опухоли можно определить вероятность развития рецидивов и прогнозировать выживаемость пациентов (Van de Vijver et al., 2002). Такие генетические тесты, как Oncotype DX и Mammaprint, оценивающие риски отдаленного метастазирования, уже включены в международные рекомендации для оценки необходимости назначения адъювантоной химиотерапии (Coates et al., 2015). Однако возможности генетических сигнатур не ограничиваются способностью определять лишь риск отдаленных рецидивов. В ряде работ предприняты попытки установить связь между уровнем экспрессии онкогенов и развитием ЛРР (Nuyten et al, 2006; Mamounas et al., 2010; Solin et al., 2013). Так, при использовании 21-генной сигнатуры Oncotype DX, ученым удалось выделить 3 группы риска развития ЛРР в группах пациенток РМЖ, при этом соотношение составило 4,3%, 7,2% и 15,8% для групп низкого, среднего и высокого риска развития ЛРР (Mamounas et al., 2010). В другом исследовании проводилось изучение экспрессии генов на основе 70-генной сигнатуры, при этом удалось выделить группы низкого (5%) и высокого (29%) риска развития ЛРР. Чувствительность данного метода составила 87,5%, а специфичность - 75% (Nuyten et al, 2006). Все это создает предпосылки для более глубокого изучения проблемы локорегионарного рецидивирования при РМЖ. Мы исследовали профиль экспрессии 21 гена в ткани операционного материала рака молочной железы для оценки возможности построения модели прогноза локального рецидивирования. Материал и методы
В исследовании были изучены данные историй болезни и образцы опухолевой ткани у 53 пациенток, перенесших комплексное органосохраняющее лечение по поводу I-II стадии рака молочной железы в ФБГУ "РНЦРР" Минздрава России за период с 2003 по 2010 гг. При 5-летнем наблюдении отмечено прогрессирование в виде локорегионарных рецидивов у 14 пациенток. Анализировался уровень экспрессии мРНК следующих генов - Ki-67, STK-15, CCNB1, CCND1, MYC, MYBL2, P16INK4A, PTEN, BIRC5, BCL2, BAG1, TERT, NDRG1, ESR1, PGR, HER2, GRB7, MGB1, MMP11, CTSL2, CD68. Выделение РНК из материала опухоли выполнялось согласно инструкции с помощью наборов реагентов для выделения РНК RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, USA). Реакция обратной транскрипции и ПЦР в реальном времени проводились с использованием наборов НПО «ДНК Технология» согласно
инструкции. Статистический анализ проводился при помощи программы StatSoft Statistica 6.0.
Результаты
В исследовании был выполнен сравнительный анализ экспрессии 21 гена в образцах опухолей у больных без локорегионарного прогрессирования и при местном рецидиве опухоли методом ПЦР в реальном времени. Среди исследованных пациенток у 14 (26%) было отмечено локальное прогрессирование в течение 5 лет после хирургического лечения. В таблице 1 представлены отличия уровней экспрессии исследованных генов.
Таблица 1. Уровни экспрессии (отн. ед.) мРНК генов в ткани рака молочной железы в группах с локальным рецидивом и без локального рецидива
Значение Значение экспрессии
экспрессии гена при ЛРР (отн. ед.) со стандартным отклонением гена в опухолевой ткани без рецидива (отн. ед.) со стандартным отклонением P
KI67 5,5(2,2) 4,2(2,2) 0,05
STK15 5,6(1,9) 6,1(2,1) 0,46
CCNB1 3,1(1,8) 2,8(1,6) 0,44
CCND1 2,7(0,8) 3,1(1,4) 0,29
MYC 2,6(1,5) 3,3(1,6) 0,12
MYBL2 4,3(1,3) 3,2(1,5) 0,02
P16INK4A 2,7(2,8) 2,4(2) 0,59
PTEN 3,2(1,8) 3,2(1,6) 0,98
BIRC5 5,3(2,3) 5,1(2,8) 0,74
BCL2 3,3(1,5) 4,3(1,9) 0,06
BAG1 2,1(0,9) 2,3(1,4) 0,63
TERT 3,4(2,4) 3,3(2,7) 0,82
NDRG1 2,5(2,1) 1,43(2,2) 0,08
BESR1 6,4(2,4) 8,2(3,1) 0,04
PGR 5,8(2,8) 6,7(2,5) 0,26
HER2 3,8(2) 4,2(2,3) 0,48
GRB7 5,2(3,7) 5(3,3) 0,85
MGB1 13,1(5,4) 12,6(5) 0,75
MMP11 6,5(3,9) 6,4(3,7) 0,92
CTSL2 3,7(2,3) 3,2(2,1) 0,4
CD68 3,6(1,7) 3,4(1,8) 0,72
Можно отметить различия в уровнях экспрессии генов в группе пациенток с ЛРР и группе с устойчивой ремиссией. В группе пациенток с ЛРР наблюдается статистически значимое повышение экспрессии гена MYBL2 (р<0,05) и тенденция к повышению Кь67 (р~0,05); в то же время отмечается снижение уровня экспрессии ESR1 (р<0,05) и тенденция к снижению экспрессии В^2 (р=0,06). При этом для обнаруженных отличий характерны следующие закономерности: для группы ЛРР характерно более высокое значение уровня экспрессии генов, отвечающих за пролиферативную активность клеток и более низкое для генов, ответственных за апоптоз и дифференцировку. На рисунке 1 приведены графики, отражающие отличия уровней экспрессии в зависимости от течения заболевания.
Рисунок 1. Сравнение уровней экспрессии маркеров пролиферации в группах с локальным рецидивом («локальный») и без локального рецидива («нет»)
Обнаруженные статистически значимые различия позволили предположить существование биологических предпосылок, характеризующих высокий риск локорегионарного рецидивирования. Мы использовали эти отличия для создания модели прогноза с целью дифференцировки группы с повышенным риском локального рецидивирования при использовании органосохраняющих операций. С целью построения модели оценки риска рецидивирования значения уровней экспрессии исследованных генов, а также морфологические характеристики распространенности опухоли (Т, К) были проанализированы с помощью дискриминантного анализа. В таблице 2 представлены результаты анализа - значения коэффициентов для двух дискриминантных функций.
Таблица 2. Значение коэффициентов переменных дискриминантных функций, классифицирующих риск развития локорегионального рецидива после орагносохраняющего лечения (Т, N -стадия по ТЫМ) на основании уровня экспрессии генов в ткани опухоли, стадии заболевания и возраста пациенток
Без С
Критерий прогрессирования прогрессирования
T 17,3597 20,6616
N -0,7985 -0,7908
Возраст на момент операции 1,7737 1,8113
KI67 0,0352 0,0448
STK15 -0,0462 -0,0382
CCNB1 0,5666 0,5444
CCND1 0,4943 0,3319
MYC -0,0726) -0,1310
MYBL2 0,1430 0,2410
P16INK4A 0,0009 0,0301
PTEN 0,1733 0,2387
BIRC5 0,0069 0,0045
NBCL2 0,2422 0,2006
BAG1 -0,3765 -0,1468
TERT 0,0273 0,0189
NDRG1 -0,0664 -0,0805
ESR1 -0,0056 -0,0046
PGR -0,0009 -0,0030
HER2 0,1325 0,1101
GRB7 -0,0061 -0,0064
MGB1 0,0000 0,0000
MMP11 0,0010 0,0011
CTSL2 -0,4768 -0,5837
CD68 -0,0942 -0,0521
Константа -56,4819 -65,5074
Полученные дискриминантные функции позволяют распознать локорегионарный рецидив для 71,4 % случаев пациентов в выборке (верно классифицировано 10 пациенток с прогрессированием из 14) и исключить развитие локорегионарного рецидива в 94,8 % случаев (верно классифицировано 37 пациенток без прогрессирования из 39). Общая диагностическая ценность представленной модели составляет 88,7% (Таблица 3).
Таблица. 3 Прогностическая эффективность дискриминантной модели оценки риска развития ЛРР при органосохранящих ва
риантах хирургического лечения
Прогностические Прогноз Прогноз Процент
данные отсутствия ЛРР появление ЛРР
(кол-во чел.) (кол-во чел.)
Клинические
Группы
Ремиссия 37 2 94,8%
ЛРР 4 10 71,4%
Всего 41 12 88,7%
Обсуждение
Данные нашего исследования позволяют высказать предположение о том, что развитие ЛРР при РМЖ может быть во многом детерминировано молекулярным фенотипом опухоли. Для группы пациентов, у которых в отдаленные сроки был диагностирован ЛРР, исследование профиля экспрессии группы генов в ткани удаленной опухоли выявило достоверно высокие значения для генов MYBL2 и Ki-67. Данные гены контролируют процессы деления в клетке и, по-видимому, отражают не только уровень пролиферации в ткани опухоли, но и степень нарушения контроля деления. В этой же группе отмечается и снижение экспрессии BCL2 и ESR1, генов, высокий уровень экспрессии которых характерен для дифференцированных тканей.
Известно, что такие макроскопические признаки как размер опухоли, локализация (в параареолярной зоне), степень лимфогенной диссеминации являются факторами риска локорегионарного рецидива после органосохраняющих операций (Fukutomi et al., 1993) В нашем исследовании также продемонстрировано значение размера опухоли и объема поражения регионарных лимфоузлов как факторов прогноза рецидива. Очевидно, что эти макроскопические признаки отражают фенотипическую природу опухоли, степень ее агрессивного поведения и именно поэтому должны приниматься во внимание при выборе тактики лечения. Однако с позиций биологии опухоли предпосылками макроскопических изменений являются отличия молекулярной природы, реализуемые, в частности, на уровне экспрессии генов (Боженко и др., 2012). Известно, что размер опухоли коррелирует с уровнем пролиферативной активности клеток ее образующих, распространенность локо-регионарных метастазов - со степенью дифференцировки опухоли, уровнем экспрессии маркеров дифференцировки (рецепторы эстрогена, прогестерона, маммаглобина и т.д.) (Троценко и др., 2012). Сопоставление особенностей экспрессионного профиля опухоли с ее морфологической картиной, а также исходом заболевания дает возможность прогнозировать результаты лечения и более обоснованно оценивать риск развития рецидива заболевания в случае выбора той или иной тактики лечения. Молекулярно-биологические методы, в частности, анализ экспрессии генов, использованный в настоящей работе, дают возможность максимально рано (и в данном случае время ограничено возможностями методов визуализации образования для получения биопсийного материала, а не чувствительностью моделей анализа экспрессии генов, для устойчивой работы которых необходимо всего несколько тысяч клеток) не только диагностировать опухоль, но и одновременно, на основе анализа большого количества маркеров, оценивать риск прогрессирования заболевания, выбирая максимально адекватную тактику лечения. Использование экспрессионных данных для решения различных задач прогноза широко исследуется в настоящее время в различных областях молекулярной диагностики и особенно в онкологии. Ряд экспрессионных профилей нашел применение в клинической практике (Arpiño et al., 2013; Baxter et al., 2015; Gyorffy et al., 2015; Rakovitch et al., 2015). Как правило, эти методы применимы к узким группам пациентов, но не учитывают
характер проведенного хирургического лечения. Мы использовали анализ экспрессионных данных для решения конкретной задачи - прогноза локального рецидивирования при экономных резекциях. Сопоставление полученных данных путем дискриминантного анализа позволило нам разработать математическую модель, распознающую локорегионарные рецидивы в 71,4 % случаев в исходной выборке пациентов и позволяющую исключить развитие локорегионарного рецидива в 94,8 % случаев. Эти результаты позволяют высказать предположение о возможном практическом их применении после проведения валидации полученной модели на расширенной группе пациентов. Применение алгоритма позволит оптимизировать программы комплексного и комбинированного лечения пациентов РМЖ, включающие органосохраняющий вариант хирургического этапа.
Список литературы
1. Боженко В.К., Солодкий В.А., Харченко Н.В. и др. Определение экспрессии мРНК маммаглобина как маркер раннего рака молочной железы Вестник РУДН. 2013. № 2. С. 71-78.
2. Вторушин С.В., Завьялова М.В., Перельмутер В.М. и др. Особенности рецидивирования рака молочной железы в послеоперационном рубце и вне его у больных с разным состоянием менструальной функции. Сибирский онкологический журнал. 2009. №5. С. 5-10.
3. Молодикова Н.Р., Нечушкин М.И., Уйманов В.А. и др. Прогностические факторы местного рецидива после органосохраняющего лечения ранних стадий рака молочной железы. Состояние проблемы. Опухоли женской репродуктивной системы 2009. № 1-2. C. 16-20.
4. Синяков А.Г., Шаназаров Н.А. Проблема определения прогностических факторов возникновения рецидивов у больных РМЖ в современной литературе. Медицинская наука и образование Урала. 2011. № 3. C.129-134.
5. Соцкова Е.А., Петровский А.В., Поддубная И.В. и др. Роль прогностических факторов в развитии рецидива рака молочной железы центральной локализации. Опухоли женской репродуктивной системы 2009. № 3-4. C. 11-14.
6. Троценко И.Д., Рожкова Н.В., Харченко Н.В. и др. Оценка связи экспрессии рецепторов стероидных гормонов методом ОТ-ПЦР с уровнем пролиферации и апоптоза в ткани рака молочной железы. Вестник РНЦРР. 2012. №12.
7. Anderson S.J., Wapnir I., Dignam J.J., et al. HPrognosis after ipsilateral breast tumor recurrence and locoregional recurrences in patients treated by breast-conserving therapy in five national surgical adjuvant breast and bowel project protocols of node-negative breast cancer. Journal of Clinical Oncology. 2009. V. 27 N. 15. P. 2466-2473.
8. Arpino G., Generali D., Sapino A., et al. Gene expression profiling in breast cancer: a clinical perspective. Breast. 2013. V. 22. P. 109-20.
9. Arvold N.D., Taghian A.G., Niemierko A., et al. Age, Breast Cancer Subtype Approximation, and Local Recurrence After Breast-Conserving Therapy. Journal of Clinical Oncology. 2011. V. 29 N. 29. P. 3885-3891.
10. Atalay C. Breast conserving therapy. Gland Surgery. 2012. V. 1. №. 2. P. 84-86.
11. Baxter E., Gondara L., Lohrisch C., et al. Using proliferative markers and Oncotype DX in therapeutic decision-making for breast cancer: the B.C. experience. Current Oncology. 2015. V. 22. P. 192-198.
12. Coates A.S., Winer E.P., Goldhirsch A., et al. Tailoring therapies—improving the management of early breast cancer: St Gallen international expert consensus on the primary therapy of early breast cancer 2015. Annals of Oncology. 2015. V. 26. P.1533-1546.
13. Ferlay J., Soerjomataram I., ErvikM., et al. GLOBOCAN 2012, Cancer Incidence and Mortality Worldwide. International Agency for Research on Cancer. IARC Cancer Base. 2013. №11.
14. Fukutomi T., Yamamoto H., Nanasawa T., et al. Prognostic factors for local recurrence in breast conservation therapy: residual cancers after lumpectomy. Surgery Today. 1993. V23 (5). P. 402-406.
15. Gyorffy B., Hatzis C., Sanft N., et al. Multigene prognostic tests in breast cancer: past, present, future. Breast Cancer Research. 2015. URL: http:breast-cancer-research.com/content/17/1/11.
16. Jeevan R., Cromwell D.A., Trivella M., et al. Reoperation rates after breast conserving surgery for breast cancer among women in England: retrospective study of hospital episode statistics. British Medical Journal. 2012. P. 1-9. URL: http:dx.doi.org/10.1136/bmj.e4505.
17. Jia W.-J., Jia H.-X., Feng H.-Y., et al. HER2-enriched Tumors Have the Highest Risk of Local Recurrence in Chinese Patients Treated with Breast Conservation Therapy. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention. 2014. V.15. P.315-320.
18. Mamounas E.P., Tang G., Fisher B., et al. Association between the 21-gene recurrence score assay and risk of locoregional recurrence in node-negative, estrogen receptor-positive breast cancer: results from NSABP B-14 and NSABP B-20. Journal of Clinical Oncology. 2010. V. 28 N. 10. P. 1677-1683.
19. Metzger-Filho O., Sun Z., Viale G., et al. Patterns of recurrence and outcome according to breast cancer subtypes in lymph node-negative disease: results from international breast cancer study group trials VIII and IX. Journal of Clinical Oncology. 2013. V. 31. № 25. P.3083-3091.
20. Nuyten D.A., Kreike B., Hart A.H., et al. Predicting a local recurrence after breast-conserving therapy by gene expression profiling. Breast Cancer Research. 2006. URL: http : breast-cancer-research.com/content/8/5/R62.
21. Onitilo A.A., Engel J.M., Stankowsk R.V., et al. Survival comparisons for breast conserving surgery and mastectomy revisited: community experience and the role of radiation therapy. Clinical Medicine and Research. 2015. V. 13. № 2. P.65-73.
22. Rakovitch E., Nofech-Mozes S., Hanna W., et al. A population-based validation study of the DCIS score predicting recurrence risk in individuals treated by breast-conserving surgery alone. Breast Cancer Research and Treatment. 2015. V. 152. № 2. P.389-98.
23. Solin L.J., Gray R., Baehner F.L., et al. A multigene expression assay to predict local recurrence risk for ductal carcinoma in situ of the breast. Journal of the National Cancer Institute. 2013. V. 105. № 10. P. 701-710.
24. Van de Vijver M.J., Yudong D.H., D. Van't Veer L., et al. A gene-expression signature as a predictor of survival in breast cancer. The New England Journal of Medicine. 2002. V. 347. № 25. P. 1999-2009.
25. Wapnir I.L., Anderson S.J., Mamounas E.P., et al. Prognosis after ipsilateral breast tumor recurrence and locoregional recurrences in five National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project node-positive adjuvant breast cancer trials. Journal of Clinical Oncology. 2006. V. 24. № 13. P. 2028-2037.
