ОПРЕДЕЛЕНИЕ РИБОФЛАВИНА В ВОДЕ ВОДОЕМОВ ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Результаты анализа контрольных проб БМИДФМ и ФМИ

Вещество

Введено, мкг/мл

. Найдено, (Aí±m. мкг/мл)

БМИДФМ ФМИ

9,00 15,00 3,00 9,00

9,20±0,30 14,90±0,09 3,40±0,98 9,02±0,38

1 мл с концентрацией 2 мкг/мл, затем вносят определенное количество БМИДФМ или ФМИ и общий объем пробы доводят до 10 мл фосфатным буфером рН 6,86. Кинетические измерения проводят для каждой концентрации имида на протяжении 3 мин, отсчеты оптической плотности производят через 15 с. Далее определяют тангенс угла наклона кинетической зависимости и по методу наименьших квадратов с применением микроЭВМ ДВК-3 и программы на языке Бейсик рассчитывают уравнения градуировочных графиков, которые имеют следующий вид:

у= 1,2±0,06 х — для БМИДФМ, у= 1,2±0,012 х — для ФМИ,

где у — скорость реакции, х — концентрация малеини-мнда (в мкг/мл). Из-за ограниченной растворимости малеини-мидов в воде в качестве растворителей использовали диоксан, диметилформамид и диметилсульфоксид (ДМСО). Найдено, что оптимальным растворителем является ДМСО, поэтому все дальнейшие исследования проводили в нем.

На рисунке приведены результаты исследований влияния

ФМИ и БМИДФМ на скорость катализируемой ионами меди (II) индикаторной реакции окисления гидрохинона перокси-дом водорода. Как видно из рисунка, ФМИ и БМИДФМ активируют каталитические свойства меди (II) пропорционально введенному количеству малеинимида в области концентраций

0.5.15,0 и 0,5—20,0 мкг/мл соответственно. Следовательно, в области приведенных значений концентраций можно определять ФМИ и БМИДФМ. Результаты анализа контрольных проб обоих малеинимидов приведены в таблице. Установлено, что малеиновый ангидрид не мешает определению обоих ма-4 леинимидов 4,4'-диаминодифенилметан БМИДФМ в количествах до 15 %.

Таким образом, кинетические определения ФМИ и БМИДФМ характеризуются высокой чувствительностью, превосходя известные методики определения [3] на 2 порядка. Точность определения бисмалеинимида выше, чем малеинимида, вероятно, из-за наличия 2 малеинимидных группировок. Результаты исследований показали, что кинетический метод может быть положен в основу определений БМИДФМ и ФМИ в атмосфере рабочей зоны производства малеинимидов.

Литература

1. А. с. 747864 СССР: Композиция на основе полнолифина // Открытия — 1980,—№ 26,—С. 101.

2. A.c. 1506336 СССР: Способ определения дималеинимидов // Открытия,— 1989.—№ 33,— С. 206.

3. Долманова И. Ф.. Золотова Г. А. и др. //>KvpH. аналит. химии,— 1980,—Т. 35, № 7,—С. 1372.

4. Синтезы органических препаратов.— М., 1964,—С. 162.

5. Bartos J. // Talanta.— Vol. 7, N 7,— P. 580.

Пос-упила 07.09.92

© Е. Е. БЕКЖАНОВА, М. Т. ТАХИРОВ, 1993 УДК 614.777:615.356:577.164.12|-074

Е. Е. Бекжанова, М. Т. Тахиров ОПРЕДЕЛЕНИЕ РИБОФЛАВИНА В ВОДЕ ВОДОЕМОВ ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ

НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний Минздрава Республики Узбекистан, Ташкент

Витамин Вг (рибофлавин) относится к основным ингредиентам, выделяемым в воду заводами, вырабатывающими белково-витаминные концентраты и витаминные препараты.

Производство витаминных препаратов нуждается в постоянном контроле за содержанием рибофлавина в воде. ПДК рибофлавина в воде водоемов утверждена на уровне 0,06 мг/л.

Описанный в литературе флюоресцентный метод определения рибофлавина в биологических жидкостях [2] не позволяет выявлять его в природных водах и сточных жидкостях производства из-за присутствия в них смолистых компонентов нефти и нефтепродуктов, а также гуминовых веществ, имеющих аналогичные диапазоны флюоресценции. В связи с этим разработка высокоэффеткивного и избирательного метода определения рибофлавина в воде водоемов представляется актуальной.

Предлагаемый метод основан на способности раствора рибофлавина давать в ультрафиолетвых лучах яркую желто-зеленую флюоресценцию, интенсивность которой прямо пропорциональна концентрации рибофлавина.

Ввиду разрушения рибофлавина под действием света отбор проб производят в бутыли из темного стекла, срок хранения отобранных проб не более 2 ч. Всю дальнейшую работу проводят при неярком освещении в отдалении от окон.

Ход анализа. Исследуемую воду фильтруют от механических примесей через фильтр «синяя лента» и помещают в делительную воронку. Приливают 30 мл гексана и энергично встряхивают в течение 1—2 мин для удаления смолистых компонентов нефти и нефтепродуктов. Гексановую фракцию отбрасывают, а анализируемую воду переносят в коническую колбу.

Приготовление стандартного раствора. Из основного раствора рибофлавина, содержащего 100 мкг рибофлавина в 1 мл, в день опыта готовят путем разведения рабочий раствор, в 1 мл которого содержится 3 мкг/мл (3 мг/л).

Одновременно готовят воду для холостого опыта. Для этого отбирают 5 мл исследуемой воды в мерную пробирку вместимостью 10 мл, приливают 1 мл 30 % раствора гидрокси-да натрия и кипятят на электроплите в течение 10 мни до разрушения витамина. Охлажденный раствор нейтрализуют

20 % раствором серной кислоты до нейтральной реакции, контролируя pH раствора по индикаторной бумаге. После нейтрализации доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Выполнение измерений. В 5 мерных пробирок вместимостью 10 мл приливают: в 1-ю и 2-ю по 5 мл дистиллированной воды, в 3-ю — 5 мл стандартного раствора, в 4-ю — 5 мл воды холостого опыта и в 5-ю — 5 мл исследуемой воды.

Для окисления посторонних флюоресцирующих веществ в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл ледяной уксусной кислоты и по 1,5 мл 4 % раствора марганцовокислого калия, затем в каждую пробирку добавляют 2—4 капли переоксида водорода, содержимое пробирок хорошо встряхивают и оставляют на 10—15 мин (до окончания выделения пузырьков газа).

Содержание рибофлавина определяют на отечественном флюориметре ФМ-Ц-2 со светофильтром возбуждения с максимумом светопропускания на длине волны 450 им и светофильтром люминесценции с максимумом светопропускания на длине волны 550 им.

Измеряют интенсивность флюоресценции исследуемой воды и холостого опыта к этой воде по отношению к стандартному раствору рибофлавина. В качестве холостого опыта к стандартному раствору служит дистиллированная вода.

Результаты измерений концентраций рибофлавина в воде вычисляют по формуле:

А-(а-2Ь)

Е 1 9

где С — содержание рибофлавина (в мг/л), А — содержание рибофлавина в стандартном растворе (в мг/л), а — показания флюориметра для пробы с исследуемой водой, 26 — показания флюориметра для холостого опыта с поправкой на разведение, Е — показания флюориметра для стандартного раствора рибофлавина.

Для опробации методики в натурных условиях исполь- » зовали метод добавок в сочетании с разбавлением пробы [1|. Метод основан на определении концентраций ри-

бофлавина в пробах реальных поверхностных вод и сточной жидкости производства бел ково-вита минных концентратов вблизи нижней, средней и верхней границ диапазона с последующим разведением исследуемых пробв в 2 раза и добавлением к каждой разведенной пробе заданных концентраций рибофлавина.

Количественное определение рибофлавина в отобранных образцах показало высокую точность определений витамина в природной речной воде и сточной жидкости.

Таким образом, разработан высокоэффективный флюоресцентный метод определения рибофлавина в природной речной воде и сточной жидкости. Минимально определяемые концентрации в воде до 0,03 мг/л, точность определения 14,1 %,

длительность анализа 30 мин. Разработанный метод рекомендован для использования в гигиенических исследованиях.

Литература

1. Панев В. И., Назаров А. А., Короткое О. Б. и др. Метрологическая аттестация методик выполнения измерений содержания компонентов проб поверхностных вод суши: Руководящий документ: Временные метод, указания.— Л., 1986.

2. Покровский А. А. // Биохимические методы исследования в клинике.—М., 1969,—С. 479—484.

Поступила 14.09.92

© Г. М. БАСОВА. В. Е. БАСОВ. 1993 УДК 615.47.03:628.542

Г. М. Басова, В. Е. Басов УСТАНОВКА ДЛЯ СЖИГАНИЯ ФИЛЬТРОВ

Воронежский областной центр Госсанэпиднадзора

При анализе проб, отобранных на фильтры, применяют методы сжигания проб, в том числе с помощью различных установок. Например, для сжигания фильтров при определении серы рекомендуется установка, состоящая из колбы вмести-

Установка для сжигания фильтров.

I — проводник, 2 — стеклянная трубка. 3 — пробка. 4 — колба. 5 — фнльтродержатель. 6 — электронагревательная спираль.

мостью 200 мл, пробки и стеклянного завитка. Фильтр с отобранной пробой вставляют в стеклянный завиток, на него наносят каплю спирта, фильтр зажигают и помещают в колбу. Попытка воспроизвести данную методику на заданном количестве серы и провести количественное сжигание ведет к потерям до 50 %. Смоченный спиртом фильтр мгновенно воспламеняется и часть серы окисляется за пределами колбы.

Мы предлагаем следующую установку (см. рисунок). Колба 4 закрывается пробкой 3, через которую проходят 2 проводника из нержавеющей стали /, помещенные в стеклянные трубки 2, герметично смонтированные на пробке. Проводники в стелянных трубках загерметизированы эпоксидной смолой в верхней части пробки. Внутри колбы к концам проводников подсоединена электронагревательная спираль 6. Для подвешивания фильтра с отобранной пробой в пробке закреплен держатель фильтра 5 в виде проволоки из нержавеющей стали или стекла, нижний загнутый конец которой расположен над спиралью на расстоянии, примерно равном радиусу фильтра. Фильтр с отобранной пробой подвешивают на фильтродержателе, помещают в колбу, предварительно наполненную кислородом. Колбу герметично закрывают пробкой. Подают электрический ток. От раскаленной спирали фильтр возгорается.

Разработанная упрощенная схема обеспечивает электробезопасность исследований и облегчает отбор образовавшегося газообразного продукта.

Поступила 19.08.92

Дискуссии и отклики читателей

© А. М. БОЛЬШАКОВ. А Д. ДМИТРИЕВ. 1993 УДК 616-055.5/.7-02:614.71-07

А. М. Большаков, А. Д. Дмитриев

ВКЛАД ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ В ОСОБЕННОСТИ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ

Московская медицинская академия им. И. М. Сеченова

Сведений о влиянии различных антропогенных факторов на организм человека накоплено много [1, 2, 14, 20, 23]. Однако данная научная информация основана преимущественно на результатах исследования выборочной (типологической) совокупности отдельных групп населения [18]. При этом большинство авторов ориентируются на изучение детского контингента, исходя из представления о том, что дети — это «критические» популяции [17, 20, 23]. Признавая информационную значимость данного принципа, следует все же отметить, что в развитии гигиенического изучения системы организм человека — окружающая среда заметное место должно принадлежать онтогенетическим исследованиям.

Цель настоящего обзора — представить сложную панораму воздействия факторов окружающей среды на организм человека от временного состояния его внутренней среды и показать необходимость использования онтогенетических принципов в гигиене окружающей среды. Причина такого способа рассмотрения проблематики системы человек — окружающая среда достаточно очевидна, так как онтогенетическое прослеживание развития организма позволяет выявить содержание причинно-следственных явлений с установлением отдельных эффектов действия вредных факторов окружающй среды.

Вначале следует уточнить отдельные теоретические положения учения об онтогенезе. Термин «онтогенез» был вве-