CC BY
420
Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3
Определение ПНГ-клона у больных апластической анемией на различных этапах
течения заболевания и лечения
З.Т. Фидарова ', Е.А. Михайлова ', С.А. Луговская 2, Е.В. Наумова 2, М.Е. Почтарь 2, Д.Г. Кисиличина 2, Е.Н. Паровичникова 1 1 ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России; 2 Кафедра клинической лабораторной диагностики ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздравсоцразвития России
Введение. Апластическая анемия (АА) у 10-15% больных осложнена развитием пароксизмальной ночной гемоглобину-рии (ПНГ). С внедрением в практическую медицину методов проточной цитофлюориметрии, позволяющей определить дефицит GPI-белков на мембранах эритроцитов, гранулоцитов и моноцитов, значительно повысились возможности раннего выявления ПНГ-клона у больных АА. Опубликованы первые результаты, свидетельствующие о том, что частота выявления клона при АА может варьировать от 30 до 70%, при этом, наличие минорных ПНГ-клонов у больных АА может оказаться благоприятным прогностическим критерием ответа на иммуносупрессивную терапию (ИСТ). Цель исследования - определение частоты встречаемости ПНГ -клона у больных АА на различных этапах течения заболевания и лечения. Были поставлены задачи выявить наличие или отсутствие ПНГ-клона у больных АА в начале заболевания, на фоне проводимой ИСТ, при рецидивах АА и в период ремиссии.
Материалы и методы. В исследование включены 38 больных АА (18 мужчин и 29 женщин), которые находились на обследовании и лечении в Гематологическом научном центре (ГНЦ) (май 2011 г - апрель 2012 г.). Медиана возраста у мужчин составила 30,3 года,- у женщин - 34,4 года.
Результаты и обсуждение. Обследование проводили у больных на разных этапах течения заболевания и лечения: 1-я группа (п = 12) - больные, обследованные до начала терапии; 2-я группа (п = 10) - больные, получавшие ИСТ на момент обследования; 3-я группа (п = 11) - больные в ремиссии; 4-я группа ( п = 7)- больные с рецидивом заболевания. Исследовали периферическую кровь, взятую с антикоагулянтом К.-ЭДТА на проточном цитофлюориметре Cytomics FC500 ("Beckman Coulter") с использованием гейтирующих антител CD45, CD15, CD64, CD235a, GPI-связывающих ан-
тител CD59, CD14, CD24 и FLAER. В случаях, когда величина клона не превышала 1%, диагностировался минорный ПНГ-клон. Из 38 больных АА ПНГ-клон был выявлен у 25 (64%), из них у 4 больных - минорный клон, у 19 - размер ПНГ-клона более 1%. В 1-й группе больных у 6 из 12 (50%) обнаружен ПНГ-клон. Величина клона среди эритроцитов -от 0,1% до 1,5%, гранулоцитов - от 0,1% до 27,6%, моноцитов от 1,8% до 97,3%. У больных 2-й группы ПНГ-клон определялся у 5 из 10 больных (50%). Размер клона среди эритроцитов от 1,5% до 3,6%, гранулоцитов от 1,6% до 94,6%, моноцитов от 2,5% до 97,6%. У 10 (91%) из 11 больных 3-й группы выявили ПНГ-клон, при этом у 4 больных -минорный ПНГ-клон. Величина клона варьировала среди эритроцитов от 0,1 до 3,6%, гранулоцитов от 0,4% до 81%, моноцитов от 0,1% до 20%. В 4-й группе больных с рецидивом АА ПНГ-клон обнаружен у 6 из 7 (85%). Размер клона среди эритроцитов от 0,2% до 18,7%, гранулоцитов от 0,4% до 98,8%, моноцитов от 0,2% до 97,5%.
Заключение. Выявлена высокая частота встречаемости ПНГ-клона у больных АА на различных этапах течения заболевания и лечения (от 50 до 91%). У большинства больных наличие ПНГ-клона не ассоциировалось с признаками внутрисосудистого гемолиза (повышение ЛДГ, свободного билирубина) Развитие клинически значимого ПНГ-синдрома при сохранении умеренной панцитопении, очаговой гипоплазии костного мозга, было обнаружено у 2 больных. Обращает на себя внимание высокая частота выявления клона у больных АА, обследованных на момент ремиссии. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости тестирования всех больных АА на наличие ПНГ-клона, с целью определения значения этого показателя для оценки течения АА, ответа на лечение, подбора оптимальной тактики терапии этих больных.
Длительность циркуляции антигранулоцитарных антител при нейтропениях у детей и инфицированность вирусами герпеса
Н.А. Финогенова 1, Е.А. Мамедова 2, Т.В. Половцева1, И.Н. Лаврентьева 1, Н.В. Каражас 3,
М.Ю. Калугина 3, М.Н. Васильева 4, Т.Н. Рыбалкина 3
'Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздравсоцразвития России, Москва; 2Морозовская детская городская клиническая больница;
3НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва
Введение. Как самостоятельные заболевания нейтропе-нии по этиологии и патогенезу гетерогенны. Тяжесть клинической картины разнообразна и обусловлена восприимчивостью к инфекционным агентам. В раннем возрасте чаще диагностируются иммунная и хроническая доброкачественная нейтропения детского возраста, которые имеют сходную клинико-гематологическую картину. Преимущественным патогенетическим механизмом иммунных нейтропений является разрушение нейтрофилов антигранулоцитарными антителами (АГАТ). В последние годы возрос интерес к герпетическим инфекциям (ГИ) в связи с их широкой распространенностью, тропностью к клеткам иммунной системы и, как следствие, их возможной триггерной роли в развитии аутоиммунных нарушений, в том числе иммунных нейтропе-ний. Цель работы - выявление взаимосвязи между частотой выявляемости, длительностью циркуляции АГАТ у детей раннего возраста с нейтропениями и их инфицированностью ГИ.
Материалы и методы. Обследованы 63 ребенка в возрасте от 2,5 мес до 3 лет с нейтропенией. У всех пациентов проводили определение показателей периферической крови в динамике, наличие и определение уровня АГАТ (в гранулоцитотоксическом тесте); определение маркеров цитоме-галовируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), вируса герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-6), вируса простого герпеса (ВПГ) - методом ИФА определяли в сыворотке крови антитела (АТ) различных классов, для выявления антигена (АГ) возбудителей в лейкоцитах крови применяли непрямую ре-
акцию иммунофлюоресценции (НРИФ), в том же материале определяли ДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Критерием острой ГИ являлось выявление АТ класса IgМ, наличие АГ и ДНК герпес-вирусов в лейкоцитах. Анализ данных выполнен с помощью программы Statistica 6.1. Различия считались статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты и обсуждение. Группу детей с нейтропе-ниями, у которых были выявлены АГАТ в различных титрах (от 1:2 до 1:64) составили 30 пациентов. Среди них маркеры острых ГИ определялись у 23 детей. Группу детей с АГАТ и без маркеров острых ГИ составили 7 больных. Среди детей с нейтропениями, наличием АГАТ и маркерами острых ГИ, маркеры ВЭБИ определялись у 4 детей, маркеры ЦМВ-инфекции у 1 человека, маркеры ВГЧ-6 у 6, маркеры ВПГЧ у 2, микст-инфекции у 10 детей. Группу детей с нейтропениями и без АГАТ составили 33 ребенка. Длительность циркуляции АГАТ среди больных с маркерами ГИ была выше, чем в группе без маркеров ГИ, однако, статистически значимых различий между группами не получено (р = 0,189). У 50% пациентов в обеих группах длительность циркуляции АГАТ не превышала 6 мес. При выявлении у пациентов АГАТ более 6 мес, в группе с маркерами ГИ, длительность циркуляции АГАТ была статистически значимо выше (р = 0,027), чем в группе без ГИ. Длительность циркуляции АГАТ у детей с маркерами ВГЧ-6 и микст-инфекциями была выше, чем в группах маркерами других ГИ. Наименьшая длительность циркуляции АГАТ была в группе детей с маркерами ВПГ.
84
