CC BY
4
1 фективное решение задач по обеспечению благоприят-' ной среды обитания человека, снижению риска заболеваний и охране здоровья. Ранжирование поселений является важным для стратегического планирования, осуществляемого, например, в субъекте Федерации или при разработке социальных программ. Для руководителя поселения важно знать внутренние причины ухудшения состояния здоровья населения и механизмы управления санитарно-эпидемиологическим благополучием. Для этого необходимо вести СГМ с учетом функционального зонирования территории поселения и создания санитарного кадастра по типу градостроительного. Это позволит интегрировать санитарно-эпидемиологические требования в процессы управления санитарно-эпидемиологическим благополучием жителей поселения.
Литература
1. Каминский Л. С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Применение статистики в научной и практической работе врача. — М., 1964.
2. Креймер М. А. // Актуальные вопросы социально-ги-гиенического мониторинга в Сибирском федераль-
ном округе: Материалы науч.-практ. конф., посвящ. 75-летию образования ФГУН "Новосибирский НИИ гигиены" Роспотребнадзора (22—23 сентября 2005 года). - Новосибирск, 2005. - С. 19-26.
3. Креймер М. А. // Общественное здоровье: инновации в экономике, управлении и правовые вопросы здравоохранения: Материалы I Международной науч.-практ. конф. — Новосибирск, 2005. — С. 231 — 234.
4. О порядке ведения социально-гигиенического мониторинга. Приказ Роспотребнадзора от 26.04.2005 № 385. - М., 2005.
5. Рокицкий П. Ф. Биологическая статистика. — Минск, 1967.
6. Сепетлиев Д. Статистические методы в научных медицинских исследованиях: Пер. с болг. — М., 1968.
7. Сидоренко Г. И., Новиков С. М. // Проблемы гигиенического нормирования и оценки химических загрязнений окружающей среды в XXI веке: Материалы пленума от 15—16 декабря 1999 г. Москва. — М., 2000. - С. 68-70.
Поступила 08.12.05
Методы гигиенических исследований
® Н. В. ДУДЧИК, Л. А. МЕЛЬНИКОВА, 2007 УДК 614.31:[637.12.047:577.182.22
Н. В. Дудник, Л. А. Мельникова
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕНИЦИЛЛИНА В МОЛОКЕ ИМПЕДАНСНЫМ МЕТОДОМ
ГУ Республиканский научно-практический центр гигиены Минздрава Республики Беларусь, Минск
Антибиотики широко используют для профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных и птицы, при переработке и хранении пищевых продуктов животного происхождения. Количество и спектр антибиотиков, применяемых в сельском хозяйстве, увеличивается из года в год. Превышение предельно допустимых концентраций остаточных количеств антибиотиков, в частности пенициллина, в пищевых продуктах может приводить к неблагоприятным для человека последствиям — сенсибилизации организма, аллергическим реакциям, дисбактериозу, образованию и циркуляции в природных популяциях резистентных форм микроорганизмов. В связи с изложенным разработка методов экспрессного определения остаточных количеств антибиотиков в продуктах питания является важной и актуальной задачей [2].
Использование методов импедансной технологии в указанных целях представляется весьма перспективным. Импедансные методы характеризуются хорошей воспроизводимостью и высокой чувствительностью, они могут применяться для скринингового анализа показателей безопасности продуктов животноводства, а также служить арбитражными методами в аккредитованных лабораториях [3—5].
В работе использовали микробиологический анализатор Bactometer М64 NT и культуральные среды МРСА, S PYE, PMA SPYEB фирмы "bioMerieux Vitec Inc." (Франция), суспензию спор Bacillus subtilis BGA фирмы "Merck" (ФРГ), пенициллин фирмы "Merck".
Среды готовили согласно рекомендациям фирмы-из-готовителя, автоклавировали при 12 ГС в течение 15 мин, инокулировали спорами В. subtilis BGA до конечной концентрации 1 • 105 спор/мл, разливали в ячейки модуля по 1,5 мл.
Измерение проводимости среды в ячейке постоянно отслеживали при 30°С с использованием пакета программного обеспечения фирмы "bioMerieux Vitec Inc.". Электрохимические параметры считывались каждые 6 мин. Основным критерием при проведении теста служило время детекции, а также график изменения кондук-тометрических показателей среды при росте тест-микро-организма. Результаты представляли в виде таблицы времени детекции (в ч) или в виде графика изменения проводимости среды (в %).
При построении калибровочной кривой положительным контролем служило восстановленное сухое молоко, содержащее пенициллин, отрицательным — среда МРСА.
Для статистической обработки полученных результатов рассчитывали относительную погрешность определения и коэффициент линейной регрессии.
При разработке метода были оптимизированы следующие параметры: состав культуральной среды, рабочая концентрация спор, тип теста (параметры измерения).
Выбор среды культивирования являлся критическим для успешной разработки импедансного метода [3—5]. Основное требование к среде культивирования — это качественная кривая роста, имеющая стабильную базовую линию, выраженную фазу быстрого роста культуры и высокое значение изменений электрохимических показателей среды (см. рисунок).
Время детекции на среде МРСА оказалось наименьшим (4,2 ч), поэтому она была выбрана для проведения дальнейших исследований.
Для оптимизации концентрации инокулята в выбранную среду культивирования вносили 6 концентраций бактериальных спор (1 • 102—5 • 10s спор/мл). Показано,
что время детекции было обратно пропорционально используемой концентрации спор в диапазоне 1 • 102— 1 • 105 спор/мл. Дальнейшее увеличение концентрации споровой суспензии не приводило к уменьшению времени детекции, поэтому в дальнейшей работы использовали оптимальную концентрацию спор — 1•105спор/мл.
Для отработки типа теста изучали электрохимические параметры детекции: импеданс, емкость и проводимость. Кондуктометрические параметры измерения обеспечивали наиболее четкие результаты, поэтому были использованы в настоящей работе.
Полученные результаты показали, что в отрицательном контроле время детекции составило 4,2 ч. По мере возрастания концентрации антибиотика увеличивается и время детекции, а крутизна кондуктометрической кривой уменьшается. При концентрации пенициллина 1 ед/ мл и выше ингибирование роста В. subtilis BGA было столь значительным, что время детекции составляло более 24 ч. При концентрации антибиотика 0,0005 ед/мл определение времени детекции было затруднено вследствие малой крутизны подъема кривой.
Чувствительность предложенного кондуктометриче-ского метода составила 0,0005 ед/мл пенициллина. При этой концентрации антибиотика время детекции (среднее из 6 повторов) составило 6,3 ч, что значительно больше времени в отрицательном контроле (4,2 ч). Чувствительность метода в 20 раз выше таковой применяемых микробиологических методов, для которых она составляет примерно 0,01 ед/мл [1].
Линейная зависимость между временем детекции и концентрацией пенициллина сохранялась в интервале 0,001—0,01 ед/мл с коэффициентом регрессии г = 0,9964.
Уравнение регрессии имело следующий вид:
Y= 0,0015л: - 0,0085,
где У— концентрация пенициллина (в ед/мл); х — время детекции (в ч).
Точность методики (для 6 повторов) была достаточно высокой; относительная погрешность определения составила 7,9, 6,3, 7,1, 8,2 и 8% для концентраций пенициллина 0,001, 0,005, 0,01, 0,05, 0,1 ед/мл соответственно. Большие значения относительной погрешности для более высоких концентраций антибиотика могут быть следствием меньшей крутизны кондуктометрических кривых [3, 4]. Следует отметить, что в пределах сохранения линейной зависимости времени детекции от кон-
%
График времени детекции роста тест-штамма (по оси абсцисс) в контроле (без антибиотика; кривая 1) и опыте (с 0,01 ед/мл пенициллина; кривая 2). По оси ординат — электрохимические изменения среды.
центрации антибиотика (0,001—0,01 ед/мл) значения относительных погрешностей определения не превышали 10%, что соответствует требованиям для методов анализа остаточных количеств антибиотиков.
J1 итература
1. МУК 3049—84. Методические рекомендации по определению остаточных количеств антибиотиков в продуктах животноводства. — М., 1984.
2. Шевелева С. А. // Вопр. пит. — 1994. — № 4. — С. 23-28.
3. Chen Н. С., Chang Т. С. // J. Dairy sei. - 1994. -Vol. 77, N 6. - P. 1515-1520.
4. Okigbo О. N., Richardson G. H. // J. Food Protect. -1985. - Vol. 48, N 11. - P. 979-981.
5. Wawerla M., Stolle A., Schalch В., Eisgruber H. // J. Food Protect. - 1999. - Vol. 62, N 12. - P. 1488-1496.
Поступила 02.11.05
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 2037 УДК 613.63-07:616.632.791-074
В. В. Сакович, В. Н. Бойков, А. М. Лазарева
ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРАНА В МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА АТОМНО-ЭМИССИОННЫМ МЕТОДОМ
НПООО "Бслинтераналит", Минск
Известно [1], что в производственных условиях соединения естественного урана проникают в тело человека главным образом через органы дыхания. Количество урана, задержавшегося в организме в результате ингаляции, зависит от размеров частиц аэрозолей, их химического состава, плотности и ряда других факторов. Из легких уран со временем переходит в кровь и далее в костную ткань и почки, другая часть проникает в легочные лимфатические узлы, где остается надолго. При ингаляции относительно большого количества транспортабельных соединений урана возникает опасность химического повреждения почек. Так как интенсивность радиоактивного излучения естественного урана слишком низка [2], определение содержания депонированного урана путем радиометрического контроля весьма сомнительно. В то же время в литературе [5] есть данные о скорости экскреции урана с мочой, по которым можно оценить величину инкорпорации.
В настоящее время наиболее известным методом определения содержания естественного урана в жидкостях является метод люминесценции в вариантах флуоримет-рии [1] и кинетическом [3]. Разработаны анализаторы, применяемые для определения урана в питьевых и сточных водах методом кинетической люминесценции, но для определения урана в моче они непригодны из-за тушения люминесценции [4]. Известная методика флуори-метрического определения урана в моче [ 1 ] предполагает трудоемкий способ пробоподготовки посредством сплавления золы мочи со фторидно-литиевой смесью. При этом точность анализа также во многом определяется концентрацией различных химических элементов в моче — тушителей люминесценции — и временными параметрами сплавления и охлаждения плава.
Целью данной работы являлась разработка методики выполнения измерений по определению содержания
