Научная статья на тему 'Определение мочевой экскреции моноцитарного хемоаттрактивного протеина 1 при патологии почек у детей'

Определение мочевой экскреции моноцитарного хемоаттрактивного протеина 1 при патологии почек у детей Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
116
18
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Нефрология
ВАК
Область наук
Ключевые слова
ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЫ / ПОЧЕЧНАЯ НЕДОСТАТОЧНОСТЬ / МОНОЦИТАРНЫЙ ХЕМОАТТРАКТИВНЫЙ ПРОТЕИН-1 / МАРКЕРЫ АКТИВНОСТИ / ДЕТИ / GLOMERULONEPHRITIS / RENAL FAILURE / MONOCYTE HEMOATTRAKTIVNY PROTEIN-1 / MARKERS OF ACTIVITY / KIDS

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Кальметьева Л. Р., Хайруллина Р. М.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ изучение особенностей мочевой экскреции МСР-1 у детей с различными заболеваниями почек ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. Обследованы 25 здоровых детей, 22 пациента с нефротическим синдромом, 19 с хроническим гломерулонефритом с гематурией; 6 с нефритическим синдромом острого гломерулонефрита, 9 с острой почечной недостаточностью и 2 с хронической почечной недостаточностью. Наряду с традиционными методами, проводилось иммунологическое обследование, включавшее определение концентрации сывороточных антител (А, М, G,), уровня циркулирующих иммунных комплексов, комплемента, иммунофенотипирование лимфоцитов. По данным ДНК-цитометрии периферической крови оценивались плоидность и кинетика клеточного цикла. Уровень MСР-1 в моче определялся методом иммуноферментного анализа с использованием монои поликлональных антител (ЗАО «Вектор-Бест», г.Новосибирск). РЕЗУЛЬТАТЫ. Установлено, что в остром периоде при всех нозологических формах патологии почек отмечается повышение уровня МСР-1 в моче. В результате корреляционного анализа выявлены зависимости, раскрывающие этиопатогенетические механизмы прогрессирования заболевания. Выделены критерии, позволяющие мониторировать активность процесса, определять прогноз, тактику лечения и оценивать эффективность проводимой терапии. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Результаты проведенного исследования позволяют сделать заключение о перспективности определения уровня мочевой экскреции МСР-1 как для мониторирования активности процесса, так и для определения тактики лечения и оценки эффективности проводимой терапии при гломерулонефритах у детей.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Кальметьева Л. Р., Хайруллина Р. М.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Determination of urinary excretion of monocyte haemoattractive protein 1 in renal diseases in children

THE AIM OF THE STUDY to investigate the features of urinary excretion of MCP-1 in children with various kidney diseases PATIENTS AND METHODS. The study included 25 healthy children, 22 patients with nephrotic syndrome, 19 with chronic glomerulonephritis with hematuria, 6 with nephritic syndrome of acute glomerulonephritis, 9 with acute renal failure, and 2 -with chronic renal failure. Along with traditional methods it was conducted immunological examination including determination of the concentration of serum antibodies (A, F, G,); levels of circulating immune complexes, complement, lymphocyte immunophenotyping. According to the DNA-cytometry of peripheral blood there were assessed ploidy and cell cycle kinetics. The level of MSR-1 in urine was determined by enzyme immunoassay using mono-and polyclonal antibodies (ZAO Vector-Best Novosibirsk). RESULTS. It was established that in the acute period of all forms of renal pathology MCP-1 rise in the urine. As a result of correlation analysis it was revealed association opened the etiopathogenetic mechanisms of disease progression. It was identified criteria to monitor the activity of the process, determine prognosis, treatment strategy and evaluate the effectiveness of therapy. CONCLUSION. Results of the study suggest that detecting the level of urinary excretion of MCP-1 may be used for monitoring process activity and for determining treatment strategy and evaluating the effectiveness of therapy in glomerulonephritis in children.

Текст научной работы на тему «Определение мочевой экскреции моноцитарного хемоаттрактивного протеина 1 при патологии почек у детей»

© Л.Р.Кальметьева, Р.М.Хайруллина, 2011 УДК 616.61-053.32:616.633-008.6]-07:547.96

Л.Р. Калъметъева1, P.M. Хайруллина1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЧЕВОЙ ЭКСКРЕЦИИ МОНОЦИТАРНОГО ХЕМОАТТРАКТИВНОГО ПРОТЕИНА-1 ПРИ ПАТОЛОГИИ ПОЧЕК У ДЕТЕЙ

L.R. Kalmeteva, R.M. Hayrullina

DETERMINATION OF URINARY EXCRETION OF MONOCYTE HAEMOATTRACTIVE PROTEIN-1 IN RENAL DISEASES IN CHILDREN

1Иммунологическая лаборатория с отделением клинической иммунологии Республиканской детской клинической больницы, г. Уфа, Башкортостан, Россия

РЕФЕРАТ

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ - изучение особенностей мочевой экскреции МСР-1 у детей с различными заболеваниями почек ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ. Обследованы 25 здоровых детей, 22 пациента - с нефротическим синдромом, 19 - с хроническим гломерулонефритом с гематурией; 6 - с нефритическим синдромом острого гломерулонефрита, 9 - с острой почечной недостаточностью и 2 - с хронической почечной недостаточностью. Наряду с традиционными методами, проводилось иммунологическое обследование, включавшее определение концентрации сывороточных антител (А, М, G,), уровня циркулирующих иммунных комплексов, комплемента, иммунофенотипирование лимфоцитов. По данным ДНК-цитометрии периферической крови оценивались плоидность и кинетика клеточного цикла. Уровень МСР-1 в моче определялся методом иммуноферментного анализа с использованием моно- и поликлональных антител (ЗАО «Вектор-Бест», г.Новосибирск). РЕЗУЛЬТАТЫ. Установлено, что в остром периоде при всех нозологических формах патологии почек отмечается повышение уровня МСР-1 в моче. В результате корреляционного анализа выявлены зависимости, раскрывающие этиопатогенетичес-кие механизмы прогрессирования заболевания. Выделены критерии, позволяющие мониторировать активность процесса, определять прогноз, тактику лечения и оценивать эффективность проводимой терапии. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Результаты проведенного исследования позволяют сделать заключение о перспективности определения уровня мочевой экскреции МСР-1 как для мониторирования активности процесса, так и для определения тактики лечения и оценки эффективности проводимой терапии при гломерулонефритах у детей.

Ключевые слова: гломерулонефриты, почечная недостаточность, моноцитарный хемоаттрактивный протеин-1, маркеры активности, дети.

ABSTRACT

THE AIM OF THE STUDY - to investigate the features of urinary excretion of MCP-1 in children with various kidney diseases PATIENTS AND METHODS. The study included 25 healthy children, 22 patients with nephrotic syndrome, 19 - with chronic glomerulonephritis with hematuria, 6 - with nephritic syndrome of acute glomerulonephritis, 9 - with acute renal failure, and 2 -with chronic renal failure. Along with traditional methods it was conducted immunological examination including determination of the concentration of serum antibodies (A, F, G,); levels of circulating immune complexes, complement, lymphocyte immunophenotyping. According to the DNA-cytometry of peripheral blood there were assessed ploidy and cell cycle kinetics. The level of MSR-1 in urine was determined by enzyme immunoassay using mono-and polyclonal antibodies (ZAO Vector-Best Novosibirsk). RESULTS. It was established that in the acute period of all forms of renal pathology MCP-1 rise in the urine. As a result of correlation analysis it was revealed association opened the etiopathogenetic mechanisms of disease progression. It was identified criteria to monitor the activity of the process, determine prognosis, treatment strategy and evaluate the effectiveness of therapy. CONCLUSION. Results of the study suggest that detecting the level of urinary excretion of MCP-1 may be used for monitoring process activity and for determining treatment strategy and evaluating the effectiveness of therapy in glomerulonephritis in children.

Key words: glomerulonephritis, renal failure, monocyte hemoattraktivny protein-1, markers of activity, kids.

ВВЕДЕНИЕ

Одной из актуальных проблем теоретической и практической нефрологии остается прогрессиро-

Кальметьева Л.Р. 450106, г. Уфа, ул. Степана Кувыкина, д.98. Тел.: (347) 255 73 44; 8 917 34 57225; E-mail: l_kalmetieva@mail.ru

вание хронических заболеваний почек с последующим формированием почечной недостаточности [1]. Еще недавно считалось, что определяющую роль в развитии нарушений функции почек играют патологические изменения в клубочках [2]. В на-

стоящее время появляется все больше работ, показывающих, что снижение скорости клубочковой фильтрации коррелирует, главным образом, со степенью тубулоинтерстициальных повреждений, при этом выраженность и длительность этих изменений определяет неблагоприятный прогноз у пациентов с различными формами гломерулонефрита [3].

Согласно современным представлениям, патогенез развития тубулоинтерстициальных изменений в почках складывается из целого ряда механизмов, таких как протеинурия, тубулярная ишемия, гипоксия, влияние белковых и ферментных факторов, цитокинов, ростовых факторов и др. Во многих работах показано, что первостепенное повреждающее воздействие на тубулярные эпителиальные клетки оказывает высокая протеинурия, часто сопровождающая гломерулярные заболевания [1, 2]. Установлено, что любое повреждение клеток паренхимы почек, в том числе компонентами про-теинурии, приводит к продукции ими медиаторов воспаления. Под воздействием провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-1 ß и ФНО-а, стимулируется продукция моноцитарного хемоаттрактантного протеин-1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1), который обеспечивает приток лейкоцитов и моноцитов в область повреждения и формирование воспалительного инфильтрата. Основными источниками MCP-1 в моче считаются клетки тубу-лярного эпителия. Этот хемокин экспрессируется также мононуклеарами и эндотелиальными клетками сосудов [2].

MCP-1 является не только хемоаттрактантом, обеспечивающим миграцию мононуклеарных клеток в очаг воспаления, но и медиатором воспаления, активирующим резидентные клетки. В культуре клеток MCP-1 изменяет фенотип париетальных эпителиальных клеток, мезангиальных клеток клубочка (активирует их), интерстициальных фиб-робластов (стимулирует синтез коллагена), а также тубулярных клеток (индуцирует трансдифференциацию в миофибробласты) [4]. Под воздействием MCP-1 происходит пролиферация гладкомышечных клеток сосудов, секреция ими провоспалительных цитокинов, способствующих прогрессированию почечного заболевания за счет сосудистого повреждения [5]. Установлено вовлечение MCP-1 в процессы интерстициального фиброза и гломеру-лосклероза. Этот протеин вызывает повышение выработки тубулярными эпителиальными клетками основного профиброгенного цитокина - трансформирующего фактора роста ßt [1].

В последние годы появилась возможность определения отдельных медиаторов воспаления в моче методом ELISA. В настоящее время име-

ются единичные клинические работы по изучению особенностей мочевой экскреции МСР-1 у больных с различными заболеваниями почек. При этом особого внимания заслуживают исследования, касающиеся определения корреляции МСР-1 с другими маркерами активности процесса. При исследовании мочи больных гломерулонефритом выявлено повышение уровня МСР-1, коррелирующее со степенью активности тубулоинтерстициального повреждения и фиброза [1, 6]. Недостаточно изученным остается значение МСР-1 в прогрессиро-вании заболеваний почек у детей.

Целью данного исследования явилось исследование уровня МСР-1 в моче для оценки активности и стадии почечного процесса, определение возможности использования данного показателя в качестве диагностического и прогностического маркера тубулоинтерстициального поражения при различных заболеваниях почек у детей, установление взаимосвязей между различными маркерами активности воспалительного процесса и показателями функционального состояния почек.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

Обследовано 63 ребенка в возрасте от 6 до 17 лет. В контрольную группу вошли 25 здоровых детей, у которых отсутствовали жалобы, указывающие на наличие острых и хронических заболеваний, определялись нормальные общегематологические и мочевые показатели. Основную группу составили 58 больных с различными заболеваниями почек. Все пациенты были разделены на подгруппы на основании определения клинических вариантов: 22 пациента - с нефротическим синдромом (НС), 19 детей - с хроническим гломерулонефритом (ХГН) с гематурией; 6 детей - с нефритическим синдромом острого гломеру-лонефрита (ОГН), 9 - с острой почечной недостаточностью (ОПН) и 2 - с хронической почечной недостаточностью (ХПН) (рис. 1).

гематурией; 19

Рис.1. Нозологическая форма основного заболевания почек у 58 пациентов.

Среди обследованных 22 пациентов с НС в 15 случаях отмечался стероидзависимый и в 7 - сте-роидрезистентный варианты.

При стероидзависимом НС длительность заболевания составила от 1 до 3 лет. Основными причинами возникновения рецидивов были: снижение дозы глюкокортикоидов, острые респираторные инфекции, а также обострения сопутствующих заболеваний, как правило, аллергической природы. Все пациенты этой группы на момент обследования получали гормональную, а 3 пациента -цитостатическую терапию циклоспорином А. Не-фробиопсия у пациентов с гормонзависимым НС не проводилась.

У больных со стероидрезистентным НС (7 из 22 пациентов) длительность заболевания составила от 2 до 6 лет. Все обследованные на момент наблюдения получали гормональные и цитостати-ческие препараты (циклоспорин А, хлорбутин). Всем больным проведена нефробиопсия. При гис-томорфологическом исследовании биоптатов в большинстве случаев установлен мембранопроли-феративный гломерулонефрит с умеренным или выраженным тубуловаскулярным компонентом (ТВК), в одном - мезангиопролиферативный с ТВК, в одном - фокально-сегментарный гломерулосклероз (ФСГС).

В группе с ХГН с гематурией (19 пациентов) большинство обследованных отмечали наличие минимальных патологических изменений в виде микрогематурии и микропротеинурии в моче еще задолго до развития гломерулонефрита. У 11 детей начало заболевания было острым с клиническими проявлениями в виде макрогематурии, артериальной гипертензии, отеков. Длительность заболевания у больных с ХГН с гематурией колебалась от 2 до 6 лет.

В этой группе также проведена нефробиопсия. При этом у 15 детей выявлен мембранопролифе-ративный гломерулонефрит с умеренным или выраженным ТВК, у 2 - мезангиопролиферативный гломерулонефрит с ТВК. При этом у 11 больных c ХГН с гематурией, по данным иммуногистохимии верифицирована IgA-нефропатия. В одном случае отмечалось отложение всех классов Ig (вариант «Full house»). Семь пациентов на момент обследования получали глюкокортикоиды, а 2 ребенка -двухкомпонентную иммуносупрессивную терапию (азатиоприн в комбинации с преднизолоном). У 5 детей этой группы проведен иммунологический мониторинг.

Выявление факторов, способствующих хрони-зации процесса, невозможно без определения особенностей развития заболевания в остром перио-

де. С этой целью дополнительно обследованы 6 пациентов с нефритическим синдромом ОГН, который развился после перенесенных острых респираторных заболеваний, ангин, стрептодермий. Течение заболевания характеризовалось внезапно развившейся макрогематурией (цвет «мясных помоев»), олигурией, артериальной гипертензией, па-стозностью лица, голеней. Учитывая этиопатоге-нетическую роль инфекционного фактора в развитии данного варианта ОГН, всем пациентам проводилась адекватная антибактериальная терапия. У большинства детей с ОГН осуществлялся мониторинг исследуемых показателей.

Для подтверждения роли МСР-1 в повреждении тубулоинтерстициальной ткани в исследование включены 11 детей с первично-интерстициальны-ми заболеваниями почек (см. рис. 1). У всех пациентов с тубулоинтерстициальными повреждениями течение заболеваний сопровождалось развитием почечной недостаточности. У 8 из 11 пациентов отмечалась острая почечная недостаточность на фоне геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). Еще в одном случае острая почечная недостаточность явилась проявлением ге-молитико-уремического синдрома (ГУС). Два ребенка наблюдались с хронической почечной недостаточностью, развившейся в результате перенесенных в анамнезе ГУС и ГЛПС. У всех пациентов с ГЛПС диагноз обоснован результатами ИФА в парных сыворотках. У 5 детей уровень МСР-1 определен в динамике с интервалом 2 нед.

Обследование детей с ренальными заболеваниями включало тщательный сбор соматического анамнеза; проведение общеклинических лабораторных и инструментальных исследований. Особенности иммунологической реактивности оценивались в процессе иммунологического мониторинга (обследование от 2 до 5 раз) на основании характеристики гуморальных факторов [определения концентрации сывороточных иммуноглобулинов (1§) классов М, О, А; уровня циркулирующих иммунных комплексов; общего уровня комплемента]; показателей Т-клеточного звена (иммунофе-нотипирование лимфоцитов методом проточной ци-тометрии). Для характеристики плоидности и кинетики клеточного цикла проводилась ДНК-ци-тометрия периферической крови, при этом учитывался процент клеток, находящихся в 8-фазе - фазе пролиферации. Бактериологическое исследование включало исследование посевов материала из зева и мочи с определением чувствительности к антибиотикам. Полученные данные были использованы для анализа корреляционных взаимосвязей с МСР-1.

Определение мочевой экскреции МСР-1 про-

Уровень мочевой экскреции МСР-1 у детей с заболеваниями почек, пг/мл

Показатели Контрольная группа СЗНС СРНС ХГН с гематурией ОГН с нефритическим синдромом

В острый период Через 3 недели после лечения

Медиана, пг/мл 178 95 671 626 631 201

25-75 перцентили, 150-210 56-168 530-132С 209-707 554-822 148-257

пг/мл

водилось у практически здоровых детей и у пациентов с заболеваниями почек методом твердофазного «сендвич»-варианта иммуноферментного анализа с использованием моно- и поликлональных антител к МСР-1 человека (МСР-1-ИФА-БЕСТ) производства ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Концентрацию МСР-1 измеряли в утренней, средней порции мочи, взятой с 9 до 11 ч. Диапазон измеряемых концентраций составил 0-2000 пг/мл, чувствительность анализа -15 пг/мл. Содержание МСР-1 в моче оценено по соотношению уровней указанного цитокина (пг/мл).

Статистический анализ проводился с использованием пакета компьютерных программ «Statistica-7», «Excel 8,0». Исследования проводились выборочным методом. Для установления взаимосвязей между изучаемыми параметрами полученные данные подвергались корреляционно-регрессионному анализу. При значительных отклонениях закона распределения от нормального использовались непараметрические методы анализа взаимосвязи показателей и достоверности различий (ранговый коэффициент корреляции Спирмена и Mann Whitney Test). В ходе исследования нами было установлено ненормальное внутригрупповое распределение признака у больных с заболеваниями почек, поэтому для описания групп мы использовали медиану и квартили (25-й и 75-й).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Для определения контрольных показателей МСР-1 в моче обследовано 25 практически здоровых детей. В контрольной группе установлено нормальное распределение признака. Уровень мочевой экскреции изучаемого цитокина у здоровых детей составил 184,5 ± 34,7 пг/мл. Для проведения корректного сравнительного анализа данный показатель был оценен также с помощью непараметрических методов статистики. При этом были определены медиана и 25-75 перцентили, которые составили 178 пг/мл и 150 - 210 пг/мл соответственно (таблица, рис. 2).

В остром периоде у всех обследованных детей с заболеваниями почек выявлено достоверное повышение экскреции МСР-1 с мочой (р<0,005).

У пациентов со стероидзависимым НС коле-

бания изучаемого показателя составили от 15 до 385 пг/мл, медиана 95 (56-158) пг/мл. В целом, при сравнении с контрольной группой у детей со сте-роидзависимым НС отмечается достоверно более низкая экскреция МСР-1 (см. таблицу, рис. 2).

Однако при более детальном анализе были выявлены следующие особенности. У 60% обследованных установлена очень низкая концентрация МСР-1 в моче (от 15 до 95 пг/мл), что является характерной особенностью данной группы и обусловливает снижение усредненных показателей. Поскольку проксимальные канальцевые клетки -это основные источники цитокинов и факторов роста, уменьшение уровня мочевой экскреции МСР-1 свидетельствует, очевидно, о недостаточной функциональной активности этих клеток и является проявлением вторичной иммунологической недостаточности, развившейся в результате длительной гормональной терапии. Наиболее высокие значения исследуемого показателя (более 300 пг/мл) обнаружены у 3 детей, поступивших с обострением ХГН, характеризовавшимся массивной проте-инурией, гипопротеинемией, гипоальбуминемией, гиперхолестеринемией.

Особого внимания заслуживают выявленные положительные корреляционные взаимосвязи МСР-1 с СОЭ, протеинурией и микрогематурией, являющихся маркерами активности процесса. Полученные данные подтверждают результаты других исследователей о повреждающем действии выраженной протеинурии на тубулярные клетки, приводящей к повышению продукции исследуемого хемокина [2].

| 800

Контроль СЗНС ХГН о гематурией СРНС

Рис. 2. Уровень МСР-1 в моче у здоровых детей и детей с хроническими гломерулонефритами в пг/мл: * различия достоверны по сравнению с контрольной группой, р<0,005.

ОГН с НиС I ]

ХГН с гематурией I

О СРНС I I

о

8 I-1

т СЗНС I-1

Контроль ^^Н

--1-1-1-1-1

0 500 1000 1500 2000 2500

пг/мл

Рис. 3. Показатели концентраций МСР-1 в моче у детей с заболеваниями почек в пг/мл.

Выявленная корреляция свидетельствует, по нашему мнению, о том, что именно протеинурия является основным этиопатогенетическим механизмом формирования тубулоинтерстициального компонента при стероидзависимом НС.

У больных со стероидрезистентным НС колебания уровня МСР-1 в моче составили от 327 до 1876 пг/мл (рис. 3), выявлено существенное по сравнению с контрольной группой повышение медианы МСР-1: 671 (530-1320) пг/мл, р< 0,005 (см. таблицу, рис. 2). У 4 пациентов этой группы проведен мониторинг исследуемого показателя с интервалом от 2 нед до 2 мес, по результатам которого установлено стойкое повышение или незначительное снижение уровня мочевой экскреции МСР-1 на фоне проводимой комбинированной иммуносупрес-сивной терапии. Как известно, этот хемокин индуцирует продукцию тубулярными клетками трансформирующего фактора роста р который считается основным профиброгенным цитокином, способствующим формированию гломерулосклеро-за. По-нашему мнению, сохранение высокого уровня МСР-1 в моче, несмотря на проводимую терапию, указывает на высокий риск быстрого прогрес-сирования заболевания с развитием терминальной почечной недостаточности, что согласуется с данными других авторов [1, 9].

Корреляционный анализ выявил положительную взаимосвязь МСР-1 с билирубином. При этом повышение уровня билирубина коррелировало с иммунологическими маркерами гепатобилиарной дисфункции (гипоиммуноглобулинемией М). Установленные взаимосвязи, очевидно, указывают на развитие печеночной недостаточности у пациентов со стероидрезистентным НС, в результате длительного приема цитостатиков и глюкокортикоидов. Кроме того, выявлены связи креатинин - СОЭ (0,79), креатинин - холестерин (-0,72), креатинин - протеинурия (-0,8), креатинин - цитоста-тики (-0,86), характеризующие влияние различных факторов на функцию почек.

В группе детей с ХГН с гематурией при срав-

нении с контрольной группой также было выявлено значительное повышение концентрации МСР-1 в моче, при этом медиана исследуемого показателя в этой группе составила 626 (209 - 707) пг/мл (см. таблицу, рис. 2), уровень МСР-1 в моче колебался от 125 до 2068 пг/мл (см. рис. 3). У 5 пациентов этой группы обследование проведено дважды - в периодах обострения и ремиссии. Считаем необходимым отметить, что при сравнении с другими группами у детей с обострением ХГН были установлены самые высокие значения МСР-1 в моче.

Особого внимания заслуживают корреляционные взаимосвязи, выявленные в данной группе. Высокую активность воспалительного процесса, по-нашему мнению, характеризуют следующие положительные взаимосвязи: МСР-1 - 1§М (0,53), МСР-1 - 8-фаза (0,61), ЦИК - 8-фаза (0,73), протеинурия -СОЭ (0,56), 1§М - холестерин (0,51). При этом повышение мочевой экскреции хемокина сопровождается активацией первичного иммунного ответа (1§М), элиминационных механизмов защиты (ЦИК), повышением пролиферативной активности клеток (8-фаза). Об эффективности проводимой гормональной терапии в виде снижения уровня мочевой экскреции МСР-1 свидетельствует отрицательная связь МСР-1 - гормоны (-0,47).

Определение уровня исследуемого цитокина у детей с нефритическим синдромом ОГН проводилось дважды, с интервалом 3-4 нед, в острой и подострой стадиях заболевания. В остром периоде установлено ожидаемое умеренное повышение медианы МСР-1 в моче до 631 (554-822) пг/мл (см. таблицу). После лечения выявлено достоверное снижение уровня мочевой экскреции цитокина до 201 (148-257) пг/мл. В одном случае мы наблюдали сохранявшийся в течение месяца стабильно высокий уровень МСР-1 в моче. При этом клиническая картина заболевания характеризовалась затяжным торпидным течением, сопровождавшимся длительной гематурией, микропротеинурией, гипертензионным синдромом.

У больных с ОПН, развившейся на фоне ГЛПС и ГУС, установлена выраженная мочевая экскреция МСР-1, коррелирующая с повышением уровня креатинина и мочевины в крови. Концентрация изучаемого протеина в моче детей с ОПН в остром периоде достигала 2048 пг/мл и была близка максимальным значениям МСР-1 у больных с обострением ХГН с гематурией. Динамика исследуемого цитокина у пациентов с ОПН характеризовалась достаточно быстрым снижением уровня - уже через 2 нед у всех пациентов отмечались нормальные показатели МСР-1. Кроме того, нами уста-

новлена взаимосвязь между уровнем мочевой экскреции МСР-1 и степенью тяжести заболевания. Так, у больного с диагнозом ГЛПС, подтвержденным методом ИФА и умеренным повышением изучаемого показателя (473 пг/мл), отмечалось легкое течение заболевания, характеризовавшееся небольшим снижением диуреза и незначительным повышением уровня кре-атинина и мочевины. Больному проводилась инфу-зионная и противовирусная терапия. У пациента с таким же диагнозом и с выраженным повышением МСР-1 в моче (1986 пг/мл) наблюдались анурия, гиперкреатининемия (181 ммоль/мл), гиперазотемия. При этом лечебные мероприятия проводились в условиях реанимационного отделения с подключением гемодиализа.

В исследование включены также 2 больных с ХПН. При патоморфологическом исследовании биоптатов в одном случае установлен мембраноп-ролиферативный гломерулонефрит с резко выраженным тубулярным и умеренно выраженным ин-терстициально-васкулярным компонентом, гиали-ноз 80% клубочков. У второго больного выявлена редукция капсулы клубочков, нефрогидроз, атрофия канальцев почки, олигонефрония. В сохранных клубочках - картина мезангиопролиферативного гломерулонефрита. При определении мочевой экскреции МСР-1 были выявлены нормальные значения хемокина, что, по-нашему мнению, характеризует отсутствие воспалительного тубулоинтерсти-циального инфильтрата, поэтому у этих больных проведение противовоспалительной терапии нецелесообразно. Однако небольшое число наблюдений не позволили нам провести более подробный статистический анализ.

ОБСУЖДЕНИЕ

В настоящее время в патогенезе тубулоинтер-стициальных изменений при патологии почек установлена ведущая роль МСР-1 как локального медиатора, образованного непосредственно в почечной ткани [1, 2, 7]. Установлено повышение экскреции МСР-1 с мочой по мере возрастания тяжести тубулоинтерстициальных повреждений (инфильтрацией СБ68+-макрофагами, тубулярной атрофией, интерстициальным фиброзом), выраженности мезангиальной пролиферации, увеличения количества полулуний и макрофагов в клубочках [7-9].

В задачи нашей работы входило определение возможностей использования МСР-1 в качестве скринингового теста для выявления интерстициаль-ных поражений при различных заболеваниях почек. В ходе исследования было показано, что при всех

нозологических формах патологии почек в остром периоде заболевания отмечается повышение экскреции МСР-1 с мочой. В частности, самые высокие значения МСР-1 в моче, а следовательно, наиболее выраженные тубулоинтерстициальные изменения были установлены у пациентов с ХГН с гематурией и ОПН. В результате корреляционного анализа выявлены положительные взаимосвязи МСР-1 с лабораторными маркерами активности воспалительного процесса (1§М, ЦИК), а также с повышением пролиферативной активности клеток (ДНК-цитометрия периферической крови).

Кроме того, у больных со стероидрезистент-ным НС выявлено длительное сохранение стабильно высокого уровня МСР-1 в моче, несмотря на проводимую противовоспалительную и иммуно-супрессивную терапию. Отсутствие положительной динамики на фоне базисной терапии, по-нашему мнению, указывает на высокий риск быстрого прогрессирования заболевания с развитием терминальной почечной недостаточности, что согласуется с результатами других исследователей [1, 10].

Поскольку изменение тубулоинтерстициальной ткани является одним из существенных факторов прогрессирования хронического гломерулонефрита, патогенетически обоснованным является проведение противовоспалительной и иммуносупрессивной терапии у больных с высоким уровнем МСР-1. На сегодняшний день доказано антихемокиновое действие многих препаратов, традиционно применяемых в нефрологии, таких как кортикостероидные гормоны, циклоспорин, ингибиторы АПФ, блокато-ры рецепторов к ангиотензину, статины, антиокси-данты [2]. В результате наших исследований подтверждена эффективность проводимой гормональной терапии в виде установления отрицательной корреляционной взаимосвязи гормоны - МСР-1.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, анализ проведенного исследования позволяет сделать заключение о перспективности определения уровня мочевой экскреции МСР-1 как для мониторирования активности процесса, так и для определения тактики лечения и оценки эффективности проводимой терапии при гломерулонефритах. Важными прогностическими критериями прогрессирования ХГН и риска развития неблагоприятных исходов являются степень и длительность повышения МСР-1. Преимуществами метода определения МСР-1 в моче являются неинвазивность, доступность материала (мочи), что позволяет рекомендовать его для широкого применения в клинической практике.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Чеботарева НВ, БобковаИН, Козловская ЛВ. Молекулярные механизмы интерстициального фиброза при прогрессирующих заболеваниях почек. Нефрология и диализ 2006; (1): 26-35

2. Картамышева НН, Чумакова ОВ, Кучеренко АГ. Некоторые механизмы формирования тубулоинтерстициально-го компонента при хронических заболеваниях почек. Мед науч и учебно-методжурн 2002; (6): 176-187

3. AmikoGD. Tubulointerstitium as predictor of progression of glomerular diseases. Nephron 1999; 83 (4): 289-295

4. Border WA, Noble NA. Transforming growth factor-в in tissue fibrosis. N Eng J Med 1994; 331: 1286-1292

5. Viedt C, Orth S. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the kidney: does it more than simply attract monocytes? Nephrol Dial Transplant 2002; 17: 2043-2047

6. Wada T, Yokoyama H, Su S, Mukaida N, Iwano M et al. Monitoring urinary levels of Monocyte chemotactic and activating factor reflects disease activity of lupus nephritis. Kidney Int 1996; 49: 761-767

7. Картамышева НН, Сергеева ТВ, Кучеренко АГ. Моно-цитарный хемоаттрактивный протеин-1 (МСР-1) в патогенезе изменений тубулоинтерстициальной ткани у детей с хроническим гломерулонефритом. Нефрология и диализ 2005;(4):443-447

8. Wada T, Furuichi K, Segawa C, Shimizu M et al. MIP-16 and MCP-1 contribute crescents and interstitial lesions in human crescentic glomerulonephritis. Kidney Int 1999; 56: 9951003

9. Yokoyama H, Wada T, Furuichi K, Segawa C et al. Urinary levels chemokines (MCAFD MCP-1, IL-8) reflect distinct disease activities and phases of human IgA nephropathy. J Leukocyte Biol 1998; 63: 493-499

10. Tam FWK, Sanders J-S, George A, Hammad T at al. Urinary monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) is a marker of active renal vasculitis. Nephrol Dial Transplant 2004; 19:2761-2768

Поступила в редакцию 27.01.2011 г.

Принята в печать 09.02.2011 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.