CC BY
209
Методика исследования УДК 340.67:615.9.099.074
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДЕЛЬТАМЕТРИНА ПРИ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
© Белоусова О.В., Шорманов В.К., Чигарёва Е.Н., Владимиренко Е.Н.
Кафедра фармацевтической, токсикологической и аналитической химии Курского государственного медицинского университета, Курск
E-mail: R-WLADIMIR@vandex.ru
Определены оптимальные условия изолирования дельтаметрина из биологического материала диоксаном. Показана возможность очистки анализируемого соединения от соэкстрактивных веществ биоматериала адсорбционной хроматографией на колонке, заполненной силикагелем. Для идентификации и количественного определения дельтаметрина в извлечениях из ткани трупной печени предложены методы ТСХ, электронной и ИК-спектрофотометрии, а также метод ВЭЖХ. На основе предварительных исследований разработана методика химико-токсикологического исследования дельтаметрина.
Ключевые слова: дельтаметрин, изолирование, идентификация и определение.
DELTAMETRIN DETERMINATION UPON COURT-CHEMICAL INVESTIGATION OF BIOLOGIC MATERIAL
Belousova O. V., Shormanov V.K., Chigareva E.N., Vladimirenko E.N.
Pharmaceutical, Toxicological & Analytical Chemistry Department of the Kursk State Medical University, Kursk
Optimum of deltametrin isolation from biologic material by dioxin was determined. Purification possibility of analyzed compound of co-extractive substances of biomaterial by adsorption chromatography on column, packed with Silica gel, was shown. Methods of TLC, electron and IR- spectrophotometry, and HPLC were proposed for identification and assay of deltametrin in extracts from corpse liver. Procedure of deltametrin chemical - toxicological investigation was developed on the base of previous investigations.
Keywords: deltametrin, isolation, identification and determination.
Дельтаметрин (8-альфа-циано-3фенокси-бензил-( 1 Я,цис)-3 -(2,2-дибромви-нил)-2,2-ди-метилциклопропанкарбоксилат) (синонимы: бу-токс, бутофлин, дукаметрин, децис, К-Обиоль) -биологически активное вещество, обладающее свойствами инсектицида, акарицида и ларвицида и широко применяющееся в сельском хозяйстве, медицинской и ветеринарной практике [1, 3, 6].
По физическим свойствам- это белые кристаллы с температурой плавления 98-101оС без выраженного вкуса и запаха, хорошо растворимые в большинстве органических растворителей (ацетон, гексан, бензол, хлороформ, ацетонитрил) и плохо растворимые в воде [3, 4].
Дельтаметрин обладает значительной токсичностью по отношению к теплокровным животным и человеку. ЛД50 для крыс чистого вещества составляет 100-200 мг/кг, по другим данным 24-52 мг/кг, концентрата эмульсии-537,3 мг/кг. Описаны многочисленные случаи отравления данным веществом, в том числе с летальным исходом [2, 3, 5]. Отравления обычно происходят при непосредственном контакте с веществом в процессе его производства, хранения и применения, вследствие аварий, в условиях загрязнения объектов окружающей среды отходами химических производств, выбросами в атмосферу и сточными водами предприятий, а также при суицидальных попытках [1, 3].
Широкое применение дельтаметрина, его высокая токсичность, наличие случаев летального отравления обусловливают необходимость изучения этого соединения в химико-токсикологическом отношении.
До настоящего времени вопросы химико-токсикологического анализа остаются недостаточно разработанными.
Целью настоящего исследования явилась разработка методики химико-токсикологического исследования дельтаметрина.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом исследования явился дельтаметрин (стандарт ФГУП «ВНИИХСЗР», содержание вещества >99%).
Изучены особенности изолирования дельта-метрина из биологического материала растворителями различной химической природы.
Предварительно в химических стаканах вместимостью 50 мл каждый готовили модельные смеси дельтаметрина с мелкоизмельчённой (размер частиц не более 0,5 см) тканью трупной печени человека из расчёта 25 мг исследуемого вещества в 25 г биологической ткани. Отдельно в такие же стаканы помещали контрольные образцы мелкоизмельчённой ткани печени, заведомо
не содержащие рассматриваемое вещество. Стаканы плотно закрывали полиэтиленовой плёнкой и сохраняли приготовленные искусственные смеси, а также контрольные образцы мелкоизмель-чённой ткани печени в течение 2 часов при температуре 18-22оС. По истечении указанного времени осуществляли двукратное изолирование дельтаметрина из модельных смесей при соотношении изолирующего агента и биологического материала 2:1 (по массе). Продолжительность каждого настаивания составляла 60 минут. Оба извлечения, полученные из каждой модельной смеси, объединяли и часть объединенного извлечения наносили на пластины типа «Сорбфил» с люминесцентным индикатором. Одновременно на линию старта наносили 5-10 мкл 0,04% этаноль-ного раствора вещества-свидетеля. Хроматогра-фировали, используя в качестве подвижной фазы систему растворителей гексан-толуол (5:5). На полученных хроматограммах в УФ-свете наблюдали пятно дельтаметрина темно-фиолетового цвета (К£=0,47±0,03). Дельтаметрин элюировали из сорбента ацетонитрилом при экспозиции в течение 15 минут.
Оптическую плотность полученного элюата измеряли на спектрофотометре СФ-46 при длине волны 276 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм на фоне элюата, полученного при исследовании контрольного образца печени. Количество анализируемого вещества, перешедшее в извлечение, рассчитывали, используя уравнение гра-дуировочного графика, которое имело вид: А = 0,01598-С+0,00041, где А - оптическая плотность, С - содержание анализируемого вещества в фо-тометрируемом растворе, мкг/мл.
Проведено исследование зависимости степени извлечения рассматриваемого соединения из биологического материала диоксаном от кратности настаивания и количественного соотношения изолирующего агента и биологической ткани. При этом брали на анализ по 5 г каждой искусственной смеси или контрольного образца печёночной ткани. Каждую искусственную смесь параллельно с контрольным образцом настаивали с определённой массой изолирующего агента (5, 10, 12,5, 15 или 20 г) четырёхкратно. Продолжительность отдельного настаивания составляла 1 час. Извлечения при необходимости упаривали в 4 раза. Определенное количество каждого из полученных извлечений подвергали хроматографи-рованию на пластинах типа «Сорбфил» и проводили определение дельтаметрина после его обнаружения на хроматограммах методом УФ-спектрофотометрии в соответствии с вышеописанной методикой.
Проведено изучение зависимости степени извлечения от продолжительности контакта изолирующей жидкости и биоматериала
При этом приготовление и сохранение искусственных смесей дельтаметрина с биоматериалом и контрольных образцов биологической ткани осуществляли по схеме, описанной выше. Порции искусственных смесей или контрольных образцов ткани печени (по 25 г каждая) двукратно настаивали с порциями диоксана по 50 г каждая в течение определенного времени (15, 30, 45, 60 или 75 минут). Отдельные извлечения, полученные при одинаковой продолжительности настаивания, объединяли и упаривали при необходимости в 4 раза. В каждом случае часть объединённого извлечения наносили на линию старта пластины типа «Сорбфил», хроматографировали, обнаруживали дельтаметрин и определяли его по приведённой выше схеме.
Изучена зависимость степени извлечения дельтаметрина диоксаном от концентрации анализируемого соединения в биологическом объекте. В каждом случае 25,00 г мелкоизмельченной трупной печени человека, содержащей определенное количество дельтаметрина (от 0,50 до 10,00 мг), дважды (по 1 часу) настаивали с порциями диоксана по 50 г каждая. Отдельные извлечения объединяли и упаривали в токе воздуха до объёма 4-6 мл, количественно переносили в мерную колбу на 10 мл и доводили диоксаном до метки. Определённое количество полученного извлечения наносили на пластины «Сорбфил» и далее поступали так, как указано выше.
Для очистки дельтаметрина, выделенного из биологического материала, изучали возможность применения адсорбционной хроматографии низкого давления в колонке размерами 490^11 мм, заполненной 10 г силикагеля Ь 40/100 ц.
Обнаружение и предварительную идентификацию дельтаметрина, изолированного из биоматериала, осуществляли методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках «Сорбфил» с люминесцентным индикатором с применением мало- и среднеполярных подвижных фаз.
Исследовали возможность применения метода электронной и ИК-спектрофотометрии для подтверждающей идентификации дельтаметрина и его количественного определения.
Определение методом электронной спектро-фотометрии проводили на спектрофотометре СФ-46 в кюветах с толщиной рабочего слоя 10 мм.
Определение методом ИК-спектрофотомет-рии осуществляли, используя ИК-спектрофото-метр МРЛКТ 400<! фирмы «№со1еЪ> (США) с детектором БТ08 КБг. Анализируемое вещество запрессовывали в таблетки с бромидом калия и
исследовали его светопоглощение в интервале частот 4000 - 400 см"1.
Для подтверждающей идентификации дельтаметрина изучена также возможность применения метода обращённофазовой ВЭЖХ.
Дельтаметрин, выделенный из биологического материала, для хромато-масс-спектрометрического исследования предварительно очищали на колонке с силикагелем L 40/100 ц по предлагаемой схеме.
Хроматографировали на приборе «Alliance» фирмы «Waters» (США) модели 2695 с диодно-матричным детектором (модель 2996). В качестве неподвижных фаз для определения методом ВЭЖХ рассмотрены Zorbax SB C-8, Nova Pack C-18 и Symmetry C-18, в качестве элюентов - сильнополярные системы растворителей, включающие водный раствор с определённым значением рН и динамический модификатор органической природы (ацетонитрил, ацетон, метанол или ди-оксан). Осуществляли расчёт времени удерживания (tR), объёма удерживания (VR), относительного (по отношению к удерживанию лямбда-цигалотрина) удерживания, коэффициента ёмкости (k'), числа теоретических тарелок (N).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты сравнительного изучения изолирования дельтаметрина изолирующими агентами различной химической природы (n-5; P=0,95) представлены в табл. 1.
Как свидетельствуют полученные данные, наименьшие значения степени извлечения дель-таметрина наблюдаются при изолировании данных веществ водой и водными растворами основания и кислоты. В большей степени рассматриваемое вещество изолируется гидрофобными органическими растворителями (гексан, толуол, хлороформ, этилацетат).
Лучшими изолирующими агентами для извлечения дельтаметрина из биологического мате-
риала следует считать такие гидролипофильные органические растворители, как ацетонитрил, ацетон, метанол, диоксан. Наибольшие значения степени извлечения дельтаметрина удаётся достичь при использовании в качестве изолирующего агента диоксана.
Результаты изучения зависимости полноты извлечения рассматриваемого вещества от массового соотношения изолирующего агента и биоматериала и кратности изолирования (n=5; Р=0,95) показывают, что для достаточно полного извлечения рассматриваемого вещества из трупной печени необходимо по крайней мере двукратное настаивание биологического материала с изолирующим агентом при условии, что количество изолирующей жидкости в каждом случае должно превышать количество биологического материала как минимум в два раза по массе.
Результаты изучения зависимости степени извлечения дельтаметрина из биоматериала от продолжительности контакта изолирующего агента с биологическим объектом представлены на рис. 1.
Как свидетельствуют полученные данные, оптимальное время контакта биоматериала с диок-саном составляет 45 минут.
Результаты изучения зависимости степени извлечения дельтаметрина из биоматериала (ткани трупной печени) от содержания отравляющего вещества в биоматериале представлены в табл. 2.
Как свидетельствуют данные эксперимента, представленные в табл. 2, увеличение содержания дельтаметрина в модельных смесях в интервале концентраций 0,05 - 10,00 мг при постоянной массе навески ткани печени (25,00 г) сопровождается лишь незначительным изменением значений степени извлечения, не превышающим 5%. Это позволяет предположить, что взаимодействие молекул дельтаметрина со структурными элементами печени не приводит к образованию достаточно прочных связей.
Таблица 1
Зависимость степени извлечения дельтаметрина из ткани печени от природы изолирующего агента (двукратное изолирование, соотношение изолирующего агента и биологического материала 2:1 (по массе) (n =5; Р=0,95)
Изолирующий агент Степень извлечения, % Изолирующий агент Степень извлечения^
Диоксан 72,24± 2,21 гексан 53,56± 2,44
Ацетонитрил 57,36 ± 2,42 этилацетат 33,67± 1,75
Ацетон 65,13± 2,31 толуол 24,73 ± 1,53
Метанол 65,92 ± 5,54 вода 0,20 ± 0,01
Этанол 43,79 ± 2,81 0,1 н. р-р гидроксида натрия 0,65± 0,03
Хлороформ 55,04 ± 2,61 уксусная кислота 8 % 0,45± 0,03
ДМФА 4,88 ± 0,27
R, % 75,0 4
50,0 -■
25,0 -■
0,0
25
50
75
t, мин
Рис. 1. Результаты изучения зависимости степени извлечения дельтаметрина из ткани трупной печени (Я, %) от продолжительности настаивания (1, мин).
Таблица 2
Результаты изолирования различных концентраций дельтаметрина из ткани печени трупа человека
0
Внесено дельтаметрина, мг на 25 г ткани печени Найдено, % (n=5, р=0,95)
X S S X Dx
1,00 68,26 3,15 1,41 3,92
2,00 69,13 2,46 1,10 3,06
5,00 70,89 2,08 0,93 2,59
10,00 72,04 1,72 0,77 2,14
25,00 72,41 1,53 0,68 1,89
50,00 72,85 1,48 0,66 1,83
Результаты хроматографирования анализируемого вещества в колонке силикагеля Ь 40/100 ц с использованием подвижной фазы гексан-диоксан- пропанол-2 (150:5:1) показали, что дельтаметрин присутствует во фракциях с 14 по 25 включительно (27-50 мл).
На электронных спектрах дельтаметрина в различных растворяющих средах присутствуют три выраженные полосы поглощения: первая (коротковолновая) - с максимумами в области длин волн 210-226 нм, вторая - с максимумами в области 232-257 нм и третья (длинноволновая) - с максимумами в области длин волн 276-278 нм. Значения удельного коэффициента поглощения, рассчитанные для максимумов первой полосы, составляют 22350-41295, второй - 7280-25710, третьей - 3335-7085.
В дальнейшем в качестве среды для идентификации дельтаметрина методом электронной спектрофотометрии использован ацетонитрил.
Количественное содержание дельтаметрина определяли по уравнению градуировочного графика. График линеен в интервале концентраций 0,4-80,0 мкг/мл.
Особенности ИК-спектра дельтаметрина представлены в табл. 3
Как свидетельствуют полученные данные, среди характеристических полос можно выделить полосы, соответствующие колебаниям С=С и С-Н ароматических колец, метильных групп алифатической части молекулы, карбонильной группы и связи С — О в сложном эфире. Специфический набор характеристических полос в ИК-спектре дельтаметрина определяет принципиальную возможность использования колебательной спектро-фотометрии для идентификации рассматриваемого соединения.
Установлено, что оптимальные условия определения дельтаметрина методом ВЭЖХ достигаются при использовании колонки 3,9*150+3,9*20 мм Symmetry C-18 (размер частиц 5 ц) и элюента ацетонитрил - 0,025 М раствор дигидрофосфата калия (4:1 по объёму). Температура колонки составляла 200С, скорость подачи элюента -1 мл/мин. Значения оптической плотности регистрировали при 276 нм.
Как свидетельствуют полученные данные, в предлагаемых условиях время удерживания дель-таметрина составляло 6,115 мин, объём удерживания 6115 мкл, относительное удерживание 1,066, коэффициент ёмкости 3,07, число теоретических тарелок 7445. Открываемый минимум -
Таблица 3
Характеристика ИК-спектров дельтаметрина, извлечённого из биологического материала,
и стандарта рассматриваемого вещества
Виды колебаний Максимумы характеристических полос, см-1
дельтаметрина, извлечённого из биологического материала стандарта дельтаметрина
Асимметрические —СН3 2967 2967
Валентные С-Н 3049,2925, 2873 3049, 2925, 2872
Колебания карбонильной группы в алифатических (предельных) эфирах 1735 1735
Валентные ароматические С = С 1592, 1584, 1488, 1460, 1450 1592, 1584, 1488, 1460, 1450
Симметрические деформационные — СН3 ? 1376 1376
Колебания с участием связи С — О в эфирной группе 1252 1252
Плоскостные деформационные С-Н в ароматическом эфире (монозамещенном) алифатических кислот 1124 1124
Плоскостные деформационные С-Н в ароматическом ядре (1,3-замещенных) 1072, 1016 1072, 1015
Внеплоскостные деформационные С-Н в ароматическом ядре (1,3-замещенных) 885,801 885,801
Внеплоскостные деформационные С-Н - в ароматическом ядре (монозамещенных) 769, 754 769, 753
Внеплоскостные деформационные С-Н -в ароматическом ядре (1,3-замещенных) 700,690 700, 690
0,005 мкг дельтаметрина в хроматографируемой пробе.
Количественное определение дельтаметрина методом ВЭЖХ проводили, используя уравнение градуировочного графика, которое в данном случае имело вид: S=5,01025-106-C - 0,00727, где S -площадь хроматографического пика, С - концентрация определяемого вещества в хроматографи-руемой пробе, мкг. График линеен в интервале концентраций 0,005-0,2 мкг.
По результатам предварительных исследований разработана схема химико-токсикологического исследования, состоящая в следующем:
И з о л и р о в а н и е. 25 г искусственной смеси или такое же количество контрольного образца биоматериала настаивали дважды (по 45 минут) с порциями диоксана по 50 г каждая. Отдельные извлечения объединяли, пропускали через слой безводного сульфата натрия (через стеклянный фильтр диаметром 4 см со слоем безводного сульфата натрия толщиной 1,5-2,0 см), слой сульфата натрия промывали 20 г диоксана. Оба
фильтрата и промывную жидкость объединяли в выпарительной чашке и испаряли растворитель в токе воздуха при комнатной температуре.
О ч и с т к а м е т о д о м к о л о н о ч н о й х р о м а т о г р а ф и и. Остаток, полученный после испарения растворителя из объединённого диоксанового извлечения, предварительно очищенного путём фильтрования по вышеописанным схемам, растворяли в 3-4 мл системы растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в объёмных отношениях 150:5:1. Полученный раствор вносили в колонку размером 490*11 мм, заполненную 10 г силикагеля Ь 40/100 ц. После полного вхождения раствора в слой сорбента в колонку прибавляли подвижную фазу гексан-диоксан-пропанол-2 (150:5:1). Элюат собирали отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции с 14 по 25 включительно объединяли в выпарительной чашке, элюент испаряли в токе воздуха при комнатной температуре, остаток растворяли в 6-8 мл ацетонитрила, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводили до
Таблица 4
Результаты определения дельтаметрина в биологическом материале после изолирования диоксаном и очистки методом колоночной адсорбционной _хроматографии (n=5; P=0,95)_
Внесено дельтамет- Найдено с применением
рина, метода ВЭЖХ, %
Анализируемый объект мг в 25 г биологического
объекта X S S x Ax
50,0 72,68 1,68 0,75 2,09
25,0 72,46 1,74 0,78 2,16
Ткань трупной печени 10,0 72,33 1,91 0,85 2,37
5,0 72,08 2,19 0,98 2,72
2,5 71,61 2,47 1,10 3,07
50,0 72,44 1,76 0,79 2,19
Ткань трупной печени, 25,0 72,27 1,95 0,87 2,42
подвергшейся гнилостным из- 10,0 72,08 2,07 0,93 2,57
менениям 5,0 71,79 2,28 1,02 2,84
2,5 71,31 2,58 1,15 3,21
метки водой (и с х о д н ы й а ц е т о н и т р и л ь-н ы й р а с т в о р ).
В две выпарительные чашки (№ 1) вносили по 0,2 мл исходного ацетонитрильного раствора (при необходимости этот объём мог быть увеличен до 1,5 мл). В чашку № 2 вносили 4 мл исходного ацетонитрильного раствора. Порции раствора во всех чашках испаряли в токе воздуха при комнатной температуре до получения сухих остатков.
О п р е д е л е н и е м е т о д о м Т С Х. Остатки в чашках № 1 и № 2 растворяли в незначительном количестве ацетона и количественно переносили каждый раствор в виде полосы на линию старта хроматографической пластины «Сорбфил». Хроматографировали, используя подвижную фазу гексан-толуол (5:5). Исследуемое вещество идентифицировали по совпадению его значения Rf с таковым вещества-свидетеля.
О п р е д е л е н и е м е т о д о м э л е к тр о н н о й с п е к т р о ф о т о м е т р и и. После предварительного хроматографирования методом ТСХ остатка из чашки № 1 участок хроматограм-мы с пятном исследуемого вещества вырезали, и элюировали вещество из сорбента 5 (10) мл аце-тонитрила в течение 15 минут. Светопоглощение элюата исследовали в интервале длин волн 200360 нм. В случае присутствия больших концентраций анализируемого вещества элюат разбавляли ацетонитрилом. Дельтаметрин идентифицировали по положению точек максимумов, совпадающих с положением максимумов в спектре вещества-стандарта.
О п р е д е л е н и е м е т о д о м И К -с п е к т р о ф о т о м е т р и и. Остаток в чашке № 2 помещали в ступку, истирали, перемешивая с безводным бромидом калия, запрессовывали в
таблетки и исследовали светопоглощение в интервале частот 4000 - 400 см-1, используя ИК-Фурье спектрофотометр «Nikolet Magna 750» (США). Дельтаметрин идентифицировали по совокупности максимумов характеристических полос, совпадающих с таковыми вещества-свидетеля, и их относительной интенсивности (табл. 3).
О п р е д е л е н и е м е т о д о м В Э Ж Х . К 2 мл исходного ацетонитрильного раствора прибавляли 2 мл ацетонитрила и 1 мл 0,025 М раствор дигидрофосфата калия (при необходимости объём каждого из растворителей мог быть пропорционально изменён). 2-20 мкл полученного раствора вводили в хроматограф «Alliance» фирмы «Waters» (США), снабженный диодно-матричным детектором. Хроматографический процесс осуществляли, используя колонку с сорбентом «Nova Pack C-18» и подвижную фазу аце-тонитрил-0,025 М раствор дигидрофосфата калия (4:1 по объёму) по методике, описанной выше. Дельтаметрин идентифицировали по значениям времени и объемов удерживания, совпадающим со значениями этих же параметров вещества-стандарта. По величине площади пика на хрома-тограмме определяли количественное содержание вещества, используя уравнение градуировочного графика, и пересчитывали на определённую навеску биоматериала.
Результаты количественного определения рассматриваемого соединения в ткани трупной печени и ткани трупной печени, подвергшейся гнилостным изменениям, представлены в табл. 4.
Как свидетельствуют полученные данные, разработанные методики характеризуются доста-
точно высокими для подобного рода исследований воспроизводимостью и правильностью.
При содержании анализируемого соединения в количестве 25 мг в 25 г биоматериала методики позволяют определить в ткани печени 72,46-72,51 %, в гнилостно изменённой печени -72,27-72,35 % дельтаметрина. Значения полуширины доверительного интервала (n=5; Р=0,95) при этом не превышают соответственно 2,50 % и 2,42%. Определяемый минимум дельтаметрина составляет 0,4 мг в 100 г трупного органа (печени) и 0,6 мг в 100 г ткани трупной печени, подвергшейся гнилостным изменениям.
Таким образом, оптимальные условия изолирования дельтаметрина из биологического материала могут быть достигнуты диоксаном уже при двукратном настаивании, если массовое соотношение изолирующего агента и биоматериала составляет как минимум 2:1, а продолжительность отдельного настаивания - не менее 45 минут.
Для эффективной очистки получаемых извлечений предложена адсорбционная хроматография в колонке силикагеля L 40/100 ц.
Показана возможность предварительной идентификации и количественного определения анализируемого соединения с применением хро-матографических (ТСХ, ВЭЖХ) и спектральных (УФ- и ИК-спектрофометрия) методов.
Исходя из предварительно полученных результатов, разработана методика химико-токсикологического исследовании дельтаметрина, позволяющая идентифицировать и количественно определить данное вещество в трупном материале.
ЛИТЕРАТУРА
1. Горбачева Н.А., Орлова А.М. Пособие к разработке судебно-химического исследования трупного материала при отравлении синтетическими пирет-роидами. - М., 2001. - 99 с.
2. Горбачева Н.А., Орлова А.М. Синтетические пи-ретроиды: токсикология, метаболизм // Судебно-химическая экспертиза. - 1999. - Т. 42, № 5. -С. 28-31.
3. Дельтаметрин. - Женева: ВОЗ, 1992. -110 с.
4. Мельников Н.Н. Пестициды: химия, технология, применение. - М.: Химия, 1987. - 712 с.
5. Мужановский Э.Б., Фартушный А.Ф., Сухин А.П. Идентификация некоторых новых пестицидных препаратов в биологическом материале // Судебно-медицинская экспертиза. - 1998. - Т. 41, № 3. -С. 20-22.
6. Справочник пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению в Российской Федерации. -М.: «Издательство АГРОРУС», 2000. - 220 с.
