CC BY
29
ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ БИОПРЕПАРАТА «ЯГЕЛЬ
ДЕТОКС»
Степанова Альбина Васильевна
гл. специалист СВФУ, РФ, г. Якутск Аньшакова Вера Владимировна
канд. пед. наук, доцент СВФУ, РФ, г. Якутск E-mail: ansha-kova v@mail.ru
DETERMINATION SECURITY OF BIOPREPARATION "YAGEL DETOX"
Albina Stepanova
chief specialist of North-Eastern Federal University, Russia, Yakutsk
Vera Anshakova
candidate of pedagogical sciences, associate professor of North-Eastern Federal
University, Russia, Yakutsk
АННОТАЦИЯ
В статье представлены данные токсикологических испытаний — определение безопасности и потенциальных токсических эффектов биопрепарата «Ягель Детокс».
ABSTRACT
Given paper describes toxicological tests data — determination of product safety and the potential toxic effects of biological product "Yagel Detox".
Ключевые слова: токсикология; лишайники; механохимическая биотехнология.
Keywords: toxicology; lichens; mechanochemical biotechnology.
Введение
Разработанная в Северо-Восточном федеральном университете биологически активная добавка к пище «Ягель Детокс» из таллома лишайников используется как дополнительный источник полисахаридов, витамина В12, содержит лишайниковые кислоты антибиотического действия [6, с. 16—20; 4]. Производство БАД осуществляется инновационной экологически чистой, безотходной механохимической биотехнологией [1].
Уникальная технология обработки сырья позволяет получить межмолекулярные комплексы на основе полимерной матрицы природных олигосахаридов. Полученные комплексы состоят из «активного наполнителя» — лишайниковых в — олигосахаридов, образующихся в процессе механохимической переработки лишайниковых в - полисахаридов и действующего вещества любой природы, в том числе вносимых извне фармацевтических препаратов антибиотического, адаптогенного, иммуномодуляторного, цитостатического действия и витаминно-микроэлементных комплексов [2, с. 33—42; 4].
Целью исследования является определение безопасности и потенциальных токсических эффектов биологически активной добавки к пище «Ягель Детокс».
Методы
Экспертиза образцов БАД к пище «Ягель Детокс» по показателям безопасности проводилась в аккредитованном испытательном лабораторном центре на основании аттестованных нормативных и методических документов.
Токсичность БАД изучали согласно требованиями к доклиническому изучению общетоксического действия фармакологических веществ [5, с. 13]. Животные Mussp. CD-1 (n=60 самок и n=60 самцов) предоставлены Питомником лабораторных животных ФИБХ РАН, г. Пущино в возрасте 7 недель и массой тела 33,0 ± 0,6 г (самцы) и 25,4 ± 0,5 г (самки). Тестируемый препарат «Ягель-Детокс» и контрольное вещество (физ. раствор) вводились животным внутрижелудочно объемом 10 мл/кг в двух различных дозах 1000 и 2000 мг/кг.
В ходе прижизненной фазы исследования у животных регистрировались клинические признаки возможной интоксикации, вес тела, потребление корма. Половина животных была подвергнута эвтаназии через две недели после начала введения тестируемых препаратов. Вторая половина была подвергнута эвтаназии через 8 недель после начала введения тестируемых препаратов. У животных были выполнены измерения гематологических показателей периферической крови, биохимический анализ сыворотки крови, массы
органов. В рамках данного исследования гистологический анализ не потребовался.
Для всех количественных данных была применена описательная статистика: подсчитаны средние значения и стандартная ошибка среднего. Нормальность распределения вариант в группе определяли тестом Shapiro-Wilk при 5 % уровне значимости. Данные веса тела и потребления корма были проанализированы двухфакторным дисперсионным анализом ANOVA с последующим тестом Newman-Keuls или Duncan. Данные гематологии, биохимии и веса органов были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с последующим тестом Newman-Keuls или непараметрического критерия Kruskal-Wallis с последующим тестом Dunn в зависимости от типа распределения количественных данных.
Статистический анализ проводили программой Statisticaver. 7.1. Различия определяли при P<0,05.
Результаты и их обсуждение
По результатам определения микробиологических исследований БАД к пище было установлено отсутствие патогенной микрофлоры во всех пробах, что свидетельствует о высокой степени микробиологической чистоты биопродукции. Также по обследованным показателям токсичных элементов и пестицидов биопрепарат соответствует нормативам, установленным для БАД (СанПиН 2.3.2.1290-03).
В ходе токсикологического исследования признаков интоксикации организма животных не отмечено, случаи летальных исходов отсутствовали. Статистически значимых различий между животными, получавшими тестируемые препараты и контрольными животными, получавшими физиологический раствор, по массе тела и ее приросту ни у самцов, ни у самок выявлено не было.
После введения тестируемых препаратов у мышей не наблюдалось выраженных изменений биохимических показателей сыворотки крови, которые
могли бы свидетельствовать о токсических изменениях во внутренних органах (табл.1).
Таблица 1.
Биохимические показатели крови животных (самки, п=60)
Значение биохимического
Биохимически й параметр Срок параметра/препа] рат
эвтаназии, день Контроль (Физ. Раствор) Ягель-Детокс, доза 1 (1000 мг/кг) Ягель-Детокс, доза 2 (2000 мг/кг)
Мочевина, 15-й 10,1 ± 3,6 8,6 ± 1,5 8,3 ± 1,3
ммоль/л 60-й 8,4 ± 2,9 10,2 ± 3,7 9,1 ± 2,4
Холестерин, 15-й 2,4 ± 0,5 2,5 ± 0,3 2,6 ± 0,7
ммоль/л 60-й 3,2 ± 1,4 2,9 ± 0,9 3,1 ± 0,9
Триглицериды, 15-й 0,7 ± 0,3 0,8 ± 0,3 0,6 ± 0,2
ммоль/л 60-й 0,8 ± 0,2 0,7 ± 0,4 0,8 ± 0,3
АЛТ, Ед/л 15-й 35,1 ± 14,3 26,0 ± 3,8 32,0 ± 3,4
60-й 27,9 ± 12,7 31,5 ± 4,6 30,8 ± 2,3
АСТ, Ед/л 15-й 86,8 ± 34,1 59,4 ± 9,4 73,8 ± 31,0
60-й 67,5 ± 24,8 63,2 ± 19,0 72,9 ± 32,1
Билирубин, 15-й 3,8 ± 1,9 4,7 ± 1,1 4,8 ± 1,5
мкмоль/л 60-й 4,1 ± 2,0 3,9 ± 2,5 4,6 ± 1,7
Креатинин, 15-й 63,3 ± 14,0 53,0 ± 16,4 56,6 ± 8,5
мкмоль/л 60-й 57,8 ± 9,1 61,2 ± 19,3 55,4 ± 7,2
ЩФ, Ед/л 15-й 119,0 ± 22,3 100,4 ± 22,9 114,9 ± 35,5
60-й 115,3 ± 12,6 107,9 ± 21,4 116,5 ± 27,7
Альбумин, г/л 15-й 32,9 ± 2,1 31,8 ± 1,7 31,9 ± 2,1
60-й 33,5 ± 3,0 34,2 ± 2,8 32,5 ± 3,1
Кальций, 15-й 2,5 ± 0,2 2,4 ± 0,05 2,4 ± 0,1
ммоль/л 60-й 2,4 ± 0,1 2,7 ± 0,8 2,6 ± 0,3
Фосфор, 15-й 3,8 ± 1,0 3,4 ± 0,5 3,3 ± 0,2
ммоль/л 60-й 3,5 ± 2,0 3,3 ± 0,7 3,4 ± 0,1
Общий белок, 15-й 45,3 ± 2,9 43,7 ± 2,6 44,0 ± 3,6
г/л 60-й 41,9 ± 3,0 44,6 ± 1,9 45,6 ± 2,1
Хлориды, 15-й 129,6 ± 7,3 127,6 ± 1,5 125,6 ± 2,4
ммолль/л 60-й 127,4 ± 6,1 129,3 ± 3,7 128,2 ± 1,5
Глобулины, г/л 15-й 12,4 ± 1,2 11,9 ± 1,2 12,1 ± 1,7
60-й 12,8 ± 1,3 10,9 ± 2,0 12,8 ± 2,6
Альбумин/глоб 15-й 2,7 ± 0,2 2,7 ± 0,2 2,7 ± 0,2
улины 60-й 2,3 ± 0,1 2,5 ± 0,3 2,2 ± 0,2
Результаты гематологического анализа показали, что внутрижелудочное введение тестируемого препарата «Ягель-Детокс» мышам CD-1 не выявило токсических эффектов на систему крови.
Статистически значимых различий по массе органов между группами животных, получавших тестируемые препараты и контрольными животными, в ходе исследования также выявлено не было (табл. 2).
Таблица 2.
Масса органов животных (самки, n=60)
Орган Срок эвтаназии, день Масса органов, г/препарат
Контроль (Физ. Раствор) Ягель-Детокс, доза 1 (1000 мг/кг) Ягель - Детокс, доза 2 (2000 мг/кг)
Семенники/ яичники 15-й 0,0217±0,001 0,021±0,001 0,0232±0,001
60-й 0,0199±0,001 0,0223±0,001 0,0211±0,001
Селезенка 15-й 0,1028±0,008 0,1118±0,01 0,112±0,008
60-й 0,1048±0,01 0,1250±0,012 0,1095±0,01
Почки 15-й 0,3460±0,02 0,3292±0,01 0,3353±0,02
60-й 0,3542±0,04 0,3485±0,08 0,3352±0,06
Надпочечники 15-й 0,0091±0,001 0,0103±0,001 0,0123±0,001
60-й 0,0110±0,001 0,0099±0,001 0,0110±0,001
Печень 15-й 1,1994±0,03 1,1354±0,03 1,1868±0,03
60-й 1,1761±0,06 1,1494±0,05 1,1645±0,04
Тимус 15-й 0,0491±0,004 0,0512±0,008 0,0468±0,004
60-й 0,0468±0,005 0,0495±0,01 0,0501±0,03
Сердце 15-й 0,1297±0,005 0,123±0,003 0,1247±0,005
60-й 0,1315±0,009 0,1286±0,007 0,1252±0,006
Легкие 15-й 0,1653±0,01 0,1658±0,005 0,1578±0,01
60-й 0,1722±0,009 0,1684±0,007 0,1595±0,015
Данные в таблицах 1-2 приведены для самок, у самцов результаты аналогичны
При плановой некропсии животных в ходе визуального осмотра внешнего состояния тела, внутренних поверхностей и проходов, полости черепа, грудной, брюшной и тазовой полостей с находящимися в них органами и тканями, шеи с органами и тканями, каркаса и скелетно-мышечной системы, а также мест введения морфологических признаков отклонения от общепринятой нормы, связанных с действием исследуемых препаратов, выявлено не было.
Таким образом, на основании проведенного исследования можно сделать
заключение о том, что тестируемый препарат «Ягель-Детокс» прошел
токсиколого-гигиеническую экспертизу и может быть рекомендован для
проведения дальнейших доклинических испытаний.
Список литературы:
1. Аньшакова В.В., Степанова А.В. Биотехнологическая переработка возобновляемого сырья Якутии // Современные проблемы науки и образования. 2013. № 2. [Электронный ресурс] — Режим доступа. — URL: http://www.science-education.ru/108-8860 (дата обращения: 20.05.2014).
2. Аньшакова В.В. Механохимическая технология получения биокомплексов на основе лишайникового сырья // Биофармацевтический журнал. — 2011. — Т. 3, — № 5. — С. 33—42.
3. Аньшакова В.В., Кершенгольц Б.М. Способ получения высокоактивного твердофазного биопрепарата антибиотического действия ЯГЕЛЬ из слоевищ лишайников // Патент России № 2467 063 C1. 2011.
4. Аньшакова В.В., Кершенгольц Б.М. Биологически активная добавка актопротекторного, адаптогенного действия из растительного сырья и способ ее получения // Патент России № 2477143 С1. 2011.
5. Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище / МУК 2.3.2.721-98. [Электронный ресурс] — Режим доступа. — URL: http://www.opengost.ru (дата обращения: 20.05.2014).
6. Anshakova V.V., Kershengolts B.M. Biological preparations on the basis of Reindeer moss as detoxifier internal environment of the organism // Russian Journal of Biopharmaceuticals. — 2013. — № 4. — Р. 16—20.
