УДК 616-002.3-089
С. Р. Туйсин, А. В. Богданова, А. Ф. Садыкова, Т. З. Закиев, И. В. Закиева, Е. С. Галимова
Определение антиоксидантных свойств лекарственных средств для местного лечения гнойных заболеваний
Башкирский государственный медицинский университет 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3; тел. (347) 237-37-19
Представлены результаты изучения антиоксидантных свойств разных лекарственных средств для местного лечения гнойных заболеваний. Проведена хемилюминесценция гомогенатов тканей гнойных ран и определение антиокислительной активности тканей.
Ключевые слова: антиоксидантная терапия, Полидерм, Воскопран, Левомеколь, Полисорб, хемилюминесценция, гнойные заболевания.
Воспалительные процессы в тканях сопровождаются изменением содержания свободных радикалов на фоне снижения антиокислительной активности. Фагоцитирующие клетки вырабатывают активные формы кислорода, которые обладают микробицидным действием. Накопление недоокисленных перекис-ных продуктов в перифокальных тканях ран приводит к изменению сосудистого тонуса, тромбозу капилляров, нарушению проницаемости мембранных барьеров, а так же к активации лизосомальных ферментов. Поиск новых средств, позволяющих поддерживать скорость свободно-радикального окисления (СРО) на оптимальном уровне и контроль за состоянием данного процесса может играть исключительную роль в лечении и профилактике осложнений гнойных ран.
Материалы и методы исследования
Исследовались показатели люминол-зави-симой хемилюминесценции цельной крови у доноров и у больных с гнойными ранами, показатели хемилюминесценции гомогенатов тканей гнойных ран до и после лечения. Для оценки состояния СРО in vitro использованы следующие методы: измерение спонтанной и индуцированной зимозаном хемилюми-несценции цельной крови, измерение железо-индуцированной хемилюминесценции гомогена-тов тканей гнойных ран. Дана сравнительная характеристика влияния лекарственных форм «Полидерм», «Воскопран», «Полисорб», «Левомеколь», используемых при местном лечении гнойных ран на СРО в модельных систе-
мах in vitro. Исследовалась антиоксидантная активность компонентов входящих в состав повязки «Полидерм». Исследуемые препараты в дозе от 0.01 до 1.0 мг/мл добавляли в тест-системы, в которых инициировали реакции СРО.
Также исследована спонтанная и стимулированная добавлением зимозана лю-минол-зависимая хемилюминесценция цельной крови 122 больных с гнойными ранами, которая характеризует генерацию активных форм кислорода в фагоцитах, обладающих микробицидным действием. В качестве контроля определялись показатели нормы у 30 здоровых доноров. Было изучено распределение показателей хемилюминесценции относительно нормального ожидаемого распределения с целью выявления однородности группы по данным признакам. Группа доноров оказалась однородна по составу, что позволило рассчитать их средние значения.
Результаты и их обсуждение
Среднее значение спонтанной хемилюми-несценции цельной крови доноров составило 1.38 ± 0.06 отн. ед. Среднее значение максимальной светимости (МС) клеток крови — 2.57 ± 0.25 отн.ед. Среднее значение вспышки светимости (СС) цельной крови составило — 18.97 ± 1.05 отн. ед. Среднее значение спонтанной светимости (СпС) индуцированной хе-милюминесценции клеток крови доноров составило — 1.40 ± 0.16 отн. ед. Среднее значение МС клеток крови — 6.48 ± 0.91 отн. ед. Среднее значение СС цельной крови составило — 42.46 ± 1.04 отн. ед. Разница между интенсивностью спонтанного и индуцированного свечения свидетельствует о резервных возможностях фагоцитов.
По изменению хемилюминесценции цельной крови у больных с гнойными ранами мягких тканей были выделены две группы, в которых отмечалось либо увеличение изучаемых показателей, либо их снижение.
Дата поступления 19.12.06
Усиление люминол-зависимой хемилюми-несценция крови свидетельствует об избыточной генерации свободных радикалов фагоцитами и характерно для острого воспалительного процесса. Уменьшение интенсивности хемилюми-несценции крови наблюдалось у больных, у которых отмечалось снижение функциональной активности фагоцитов, что вместе с клиническими особенностями указывало на наличие у них длительного вялотекущего воспалительного процесса.
При исследовании хемилюминесценции гомогенатов тканей у больных с гнойных ранами мягких тканей обращает на себя внимание тот факт, что интенсивность свечения в области пораженной ткани выше, чем в участке здоровой. Это свидетельствует об избыточном накоплении свободных радикалов и ускорении процессов СРО в зоне гнойной раны.
Средние значения СС гомогенатов здоровых тканей составляет 1.2 ± 0.48 отн. ед., МС составляет в среднем 0.49 ± 0.02 отн. ед. Средние значения СС гомогенатов гнойных ран составляет 18.53 ± 2.07 отн. ед., МС 5.21 ± 0.97 отн. ед.
Определение антиокислительной активности ткани оценивалось по ее способности подавлять генерацию радикалов в модельной системе. Добавление в модельную систему гомо-гената, полученного из участка здорового ткани, вызвало угнетение хемилюминесценции. Гомогенаты тканей, полученные из гнойных ран, наоборот, вызывали усиление свечение. Это свидетельствует о том, что в гнойной ране происходит снижение антиокислительной активности и увеличиваются прооксиданты, способные инициировать образование свободных радикалов.
Проведено сравнение антиокислительной активности препаратов, традиционно используемых при лечении гнойных ран: «Полидерм», «Воскопран», «Полисорб», «Левоме-коль». По изменению хемилюминесценции оп-
ределяли антиокислительную активность препаратов.
В модели, генерирующей активные формы кислорода в присутствии «Полидерма», наблюдалось снижение светосуммы свечения на 64.2%. Внесение в систему «Воскопрана» практически не влияло на интенсивность свечения, «Полисорб» и мазь «Левомеколь» повышали хемилюминесценции на 15 и 58 % соответственно.
В модельной системе, в которой инициировались процессы перекисного окисления ли-пидов «Полидерм» снижал светосумму свечения на 75.8%, «Воскопран» не влиял на показатели хемилюминесценции, «Полисорб» усиливал свечение на 29%, «Лекомеколь» на 65%.
Интерес представляет изучение действия препаратов на генерацию активных форм кислорода фагоцитирующими клетками. Известно, что данный процесс характеризует функциональные возможности фагоцитов, их мик-робицидные свойства. Добавление «Полидерма» в систему увеличивало светосумму хе-милюминесценции на 130%, «Воскопран», «Полисорб», «Левомиколь» практически не влияли на хемилюминесценцию.
Уникальность экстракта прополиса масляного и «Полидерма» заключается в одновременной стимуляции образования активных форм кислорода фагоцитирующими клетками крови, от которых зависит микробицидное действие.
Таким образом, показано, что в гнойной ране происходит ускорение процессов свободно-радикального окисления, вследствие чего повышается интенсивность хемилюминесцен-ции содержимого гнойных ран в 5 раз и снижается антиокислительная активность в 3 раза.
Наибольшей антиокислительной активностью в модельных системах, имитирующих реакции СРО среди изученных средств, применяемых для местного лечения гнойных ран, обладает повязка «Полидерм».