CC BY
33
УДК 612.8+615.2
ОКСИДАНТНЫЙ СТАТУС ГОЛОВНОГО МОЗГА МЫШЕЙ ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИОННОМ СТРЕССОВОМ ВОЗДЕЙСТВИИ И ВОЗМОЖНОСТЬ ЕГО КОРРЕКЦИИ КОМЕНАТОМ ЛИТИЯ
© 2013 г. Л.В. Шурыгина, Э.И. Злищева, А.А. Кравцов, Т.В. Андросова, Л.И. Злищева, Л.А. Полещук,
Н. О. Абрамова
Шурыгина Людмила Васильевна - кандидат сельскохозяйственных наук, заведующая отделом биологически активных веществ, старший научный сотрудник, Кубанский государственный университет, ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected].
Злищева Энна Ивановна - кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, старший научный сотрудник, отдел биологически активных веществ, Кубанский государственный университет, ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected].
Кравцов Александр Анатольевич - кандидат биологических наук, научный сотрудник, отдел биологически активных веществ, Кубанский государственный университет, ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected]. Андросова Татьяна Васильевна - старший научный сотрудник, отдел биологически активных веществ, Кубанский государственный университет, ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected].
Злищева Лариса Ивановна - кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, отдел биологически активных веществ, Кубанский государственный университет, ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910.
Полещук Лариса Афанасьевна - научный сотрудник, ООО «Бализ Фарм», ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected].
Абрамова Наталья Олеговна - научный сотрудник, ООО «Бализ Фарм», ул. Мира, 4/1, г. Краснодар, 350910, e-mail: [email protected].
Shurygina Ludmila Vasil'evna - Candidate of Agricultural Science, Head of Department of Biologically Active Substances, Senior Researcher, Kuban State University, Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected].
Zlischeva Enna Ivanovna - Candidate of Biological Science, Leading Researcher, Senior Researcher, Department of Biologically Active Substances, Kuban State University, Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected].
Kravtsov Aleksandr Anatol'evich - Candidate of Biological Science, Researcher, Department of Biologically Active Substances, Kuban State University, Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected].
Androsova Tatyana Vasil'evna - Senior Researcher, Department of Biologically Active Substances, Kuban State University, Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected].
Zlischeva Larissa Ivanovna - Candidate of Biological Science, Leading Researcher, Department of Biologically Active Substances, Kuban State University, Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected]
Poleschuk Larissa Afanas'evna - Researcher, «Baliz Farm», Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected].
Abramova Nataliya Olegovna - Researcher, «Baliz Farm», Mir St., 4/1, Krasnodar, Russia, 350910, e-mail: [email protected]
Исследовано влияние комената лития на окислительные процессы в головном мозге мышей на модели иммобилизационного стресса. Установлено, что при дострессовом введении мышам комената лития (1 и 2 мг/кг) отмечается его выраженное дозозависимое антиок-сидантное стресспротекторное действие. Коменат лития способствует угнетению гиперпродукции свободных радикалов, снижению содержания вторичного продукта перекисного окисления липидов — малонового диальдегида в мозге стрессированных животных, стабилизирует глутатионовую антиокислительную систему на исходном уровне.
Ключевые слова: стресс, коменат лития, свободнорадикальное окисление, малоновый диальдегид, антиоксидантное действие, глутатионовая антиокислительная система.
Influence of lithium comenate on oxidizing processes in a brain of mice on immobilized stress model is investigated. It is established that at pre-stress treatment mice with lithium comenate (1 mg/kg and 2 mg/kg) becomes perceptible its expressed dose-dependent antioxidative stressprotective action. Lithium comenate promotes oppression of a hyperproduction of free radicals, depression of the maintenance of a product of lipid peroxidation - malonic dialdehyde in a brain of stressed animals, stabilizes glutathion system at initial level.
Keywords: stress, lithium comenate, free radical oxidation, malonic dialdehyde, antioxidative action, antioxidative glutathion system.
Многие патологии ЦНС, при которых наблюдаются деструктивные изменения нейронов головного мозга, связаны с активацией перекисного окисления липидов (ПОЛ). Основные механизмы нейронального повреждения включают истощение энергетических ресурсов в условиях ацидоза ткани мозга, нарушение ионного гомеостаза, деполяризацию клеточных мембран, накопление возбуждающих аминокислот в меж-
клеточном пространстве и гиперпродукцию активных форм кислорода (АФК) [1-3]. Окислительный стресс, ведущий к гиперпродукции свободных радикалов (СР) и деструкции мембран, связанной с активацией фосфолипазного гидролиза, играет особо значимую роль в патогенетических механизмах ишемии мозга. В зоне ишемии нарастает концентрация продуктов ПОЛ и интенсивность образования АФК. Это сочетается со
снижением активности антиоксидантных ферментов и нарушением функции физиологических систем защиты. При этом уменьшается количество практически всех водо- и жирорастворимых антиоксидантов [3-5]. Истощение уровня эндогенных антиоксидантов и нарушение ферментативных механизмов антирадикальной защиты приводит к неуправляемой и некомпенсированной интенсификации ПОЛ [6]. Антиоксидант-ная защита организма при оксидативном стрессе неспособна полностью нейтрализовать образующийся избыток АФК. В этих условиях очевидна целесообразность использования антиоксидантных препаратов, способных защитить ткань мозга от повреждения [7]. В соответствии с этим в последнее время уделяется большое внимание поиску новых высокоэффективных средств антиоксидантной защиты ЦНС и изучению молекулярных механизмов их действия [7, 8].
Целью данной работы являлось исследование ан-тиоксидантных свойств литиевой соли коменовой кислоты в мозге стрессированных животных.
Полученная нами литиевая соль коменовой кислоты - новое сравнительно простое по химическому строению вещество, имеющее в своем составе биологически активные катион лития и анион коменовой кислоты [9].
Известно, что литий подавляет симпатическую активность и ослабляет действие катехоламинов (КА), активирует моноаминооксидазу и усиливает внутри-нейрональный метаболизм КА, уменьшает чувствительность адренергических и дофаминовых рецепторов, обладает способностью предотвращать повышенную чувствительность дофаминовых рецепторов, возникающую при лечении нейролептиками. Значительное число работ посвящено антиоксидантным свойствам лития [10-13].
Коменовая кислота (5-гидрокси-у-пирон-2-карбо-новая), имеющая широкий диапазон действия, обладает антиоксидантным, антиабстинентным, анксиоли-тическим и антидепрессантным свойствами, мягким седативным действием, является высокоэффективным ненаркотическим анальгетическим средством, не имеющим негативных побочных эффектов, не вызывающим зависимости и привыкания, приводящим к долговременному снятию болевого синдрома. Она оказывает выраженное ростостимулирующее действие на культивируемые нейроны коры головного мозга пренатально стрессированных животных [14-18], является основным физиологически активным компонентом высокоэффективного лекарственного препарата «Бализ-2», обладающего противовоспалительным, антибактериальным и ранозаживляющим свойствами [15]. Для получения комената лития использовали коменовую кислоту, выделенную нами из коммерческого лекарственного препарата «Бализ-2» [9].
Известно, что при стрессе происходят нарушения в нервных клетках как метаболические, так и морфологические, вплоть до их гибели. При этом повреждение нейронов в основном связано с гипоксией, окси-дативным стрессом [1-3].
Для оценки состояния оксидативных механизмов наиболее часто используют определение продуктов ПОЛ, одним из которых является малоновый диальде-гид (МДА), а также исследование хемилюминесцен-
ции (ХЛ) биологических сред, интегрально отражающей баланс про- и антиоксидантных процессов в организме. Важным звеном защиты клеток от токсического действия первичных продуктов ПОЛ является антиоксидантная глутатионовая система [19]. В этой связи влияние комената лития на окислительные процессы в мозге стрессированных животных нами оценивалось по содержанию вторичного продукта ПОЛ -МДА, состоянию свободнорадикального окисления (СРО), а также его влиянию на антиокислительную глутатионовую систему по активности ферментов глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР) и содержанию восстановленного глутатиона (GSH) в мозге стрессированных животных.
Материалы и методы
В работе использована литиевая соль коменовой кислоты, синтезированная в отделе биологически активных веществ ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный университет» [9]. Коменат лития представляет собой кристаллический порошок желтоватого цвета со слабым специфическим запахом, легко растворим в воде, слаборастворим в спирте, молекулярная масса - 162,02.
Эксперименты выполнены на белых беспородных мышах-самцах массой 23-25 г.
Животных содержали в виварии при свободном доступе к пище и воде. Опыты проводили с соблюдением принципов гуманности в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных (приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. № 755).
Иммобилизационный стресс у мышей вызывали путем подвешивания их за шейную складку в течение 5 ч. Затем мышей декапитировали, головной мозг помещали в жидкий азот, определяли уровень СРО, МДА, содержание GSH, активность ферментов: ГП и ГР. Коменат лития вводили мышам до стрессирова-ния один раз в день per os натощак в течение 3 сут в дозах 1, 2 и 3 мг/кг массы тела.
Для оценки влияния комената лития на окислительные процессы и антиоксидантную глутатионовую систему в мозге были сформированы 5 групп животных: 1-я - интактные; 2-я - стресс; 3-я - стресс + коменат лития 1 мг/кг; 4-я - стресс + коменат лития 2 мг/кг; 5-я - стресс + коменат лития 3 мг/кг.
Уровень СРО изучали ХЛ методом [20] на приборе SmartLum 5773. Определяли светосумму ХЛ в условных единицах (у.е.). По интенсивности ХЛ судили о содержании СР.
Содержание МДА определяли по методике из [21].
Определение GSH (свободных сульфгидрильных групп) в кислоторастворимом надосадке проводили по методике из [22]. GSH определяли в супернатанте после осаждения белков сульфосалициловой кислотой с добавлением реактива Эллмана (ДТНБ). После этого пробы окрашиваются в желтый цвет, образуется нит-ротиобензоат (НТБ) в эквимолярном с восстановленным глутатионом количестве. Оптическую плотность регистрировали спектрофотометрически при 412 нм. Концентрацию GSH определяли по калибровочному графику, построенному по нескольким стандартным
растворам с известной концентрацией GSH в 2%-й сульфосалициловой кислоте, активность ГП - по скорости окисления GSH в присутствии гидроперекиси третичного бутила [23]. По количеству оставшегося неокисленным GSH судили об активности ГП. Концентрацию GSH определяли спектрофотометрически при 412 нм. В основе цветной реакции - взаимодействие SH-группы с ДТНБ с образованием окрашенного продукта - тионитрофенильного аниона (ТНФА). Количество ТНФА пропорционально количеству SH-групп, прореагировавших с ДТНБ.
Активность ГР определяли по скорости окисления НАДФН в реакции, катализируемой ГР из суперна-
танта, во время инкубации с окисленным глутатионом при 37 оС [24].
Результаты и обсуждение
Иммобилизационое стрессовое воздействие способствует резкому повышению уровня СРО и МДА (р < 0,01), приводит к мобилизации глутатионовой антиокислительной системы (ГАОС) (табл. 1, 2). При этом значительно увеличивается активность ГП (р < 0,001), повышается активность ГР (р < 0,05), отмечается снижение концентрации GSH (р < 0,05).
Таблица 1
Влияние монозамещенного комената лития на СРО и содержание МДА в мозге стрессированных мышей (М±т)
Группа животных СРО, светосумма, у.е. МДА, нМ/мг белка
Интактные 259,86±6,04 3,59±0,15
Стресс 293,87±4,34** 4,7±0,16***
Стресс+коменат лития 1 мг/кг 250,62±9,07-- 3,9 ±0,28-
Стресс+ коменат лития 2 мг/кг 237,43±16,92- 3,64±0,10—
Стресс+ коменат лития 3 мг/кг 285,19±5,94 4,83±0,18
Примечание. * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001 - по сравнению с интактным контролем; ■ - p < 0,05; ■■ - p < 0,01; ■■■ - p < 0,001 - по сравнению со стрессом.
После применения комената лития в дозах 1 и 2 мг/кг в мозге стрессированных животных отмечается статистически значимое снижение интенсивности СРО и содержания МДА (табл. 1). При этом наиболее выраженное снижение отмечается в группе животных, принимавших коменат лития в дозе 2 мг/кг (р < 0,001). Коме-нат лития в концентрации 3 мг/кг влияния на окислительные процессы в мозге при стрессе не оказал. Так, в группе стрессированных животных, принимавших коменат лития в дозе 3 мг/кг, интенсивность СРО и уровень МДА в головном мозге практически остаются на уровне стрессированных животных. В связи с от-
сутствием антиоксидантого эффекта литиевой соли коменовой кислоты в концентрации 3 мг/кг и проявлением ею наиболее выраженного антиокислительного эффекта в концентрации 2 мг/кг в дальнейших исследованиях коменат лития использовался только в концентрации 2 мг/кг.
Введение мышам комената лития в дозе 2 мг/кг per os в течение 3 дней до стрессирования препятствует изменению в мозге активности глутатионовой АОС. Содержание GSH (р < 0,05), активность ферментов ГП (р < 0,001) и ГР (р < 0,05) практически не отличаются от таковых в мозге интактных животных (табл. 2).
Таблица 2
Влияние монозамещенного комената лития на антиоксидантную глутатионовую систему
Группа животных GSH, мкМ на 1 г вл. тк. ГП, мкМ GSH/мин на 1 г белка ГР, мкМ НАДФН/с на 1 г белка
Интактные 1,99±0,04 645,85±19,81 1,22±0,06
Стресс 1,79 ±0,05* 761,13±19,35*** 1,46±0,07*
Стресс+коменат лития 2 мг/кг 2,03±0,07- 641,2±14,20 ■■■ 1,29±0,10
Примечание. * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001 - по сравнению с интактными животными; ■ - р < 0,05;" - р < 0,01; ■■■ - р < 0,001 - по сравнению со стрессом.
То есть при дострессовом введении комената лития происходит стабилизация равновесия ПОЛ -ГАОС на уровне, близком к исходному (табл. 1).
Таким образом, под влиянием стресса в мозге мышей повышается уровень СР, увеличивается содержание МДА, снижается концентрация GSH, отмечается статистически значимое повышение активности ферментов ГП и ГР. Дострессовое введение комената лития способствует стабилизации окислительных процессов в головном мозге мышей на ис-
ходном уровне при существенном снижении интенсивности ПОЛ. При этом отмечается статистически значимое снижение уровня СР и содержания МДА, восстановление глутатионового обмена до контрольного уровня. Максимальный антиокислительный эффект наблюдается при применении комената лития в концентрации 2 мг/кг.
Как указывалось выше, основу окислительного стресса составляет СРО жирных кислот, или ПОЛ. Активация ПОЛ - общее метаболическое звено реакции
напряжения (стресса). Она развивается непосредственно в ответ на внешние воздействия и в свою очередь может инициировать мобилизацию ответных реакций организма, реализующих стресс систем - компенсаторную мобилизацию антиокислительных (АО) резервов, в частности, за счет поступления в кровь обладающих АО-активностью КА и глюкокортикоидов [2, 19, 25].
Важным звеном защиты клеток от токсического действия первичных продуктов ПОЛ является анти-оксидантная глутатионовая система [19].
При этом качественная и количественная идентичность реакций ферментов метаболизма глутатиона на стресс, с одной стороны, и на эндогенные КА - с другой, также указывает на то, что многие эффекты стресса реализуются эндогенными КА, накапливающимися при стрессе. Имеются данные о влиянии стресса на ГП: описаны как повышение её активности, так и снижение. Активация ГП при стрессе имеет, вероятнее всего, функциональный характер, поскольку при повреждении ткани вследствие, например, ишемии происходит снижение активности ГП [26]. Сообщалось также как о стимуляции при стрессе ГР [27], так и об отсутствии изменений её активности [27, 28]. Функциональная роль высокоспецифичной ГР заключается в генерации восстановленного глута-тиона из его дисульфидной формы. Активация ГР обусловлена повышением сродства фермента к субстрату. Увеличение скорости восстановления глута-тиона в условиях его недостатка обеспечивает более высокую скорость оборота молекулы глутатиона в процессе окислительно-восстановительных взаимопревращений, в частности, в процессе восстановления глутатиона в сопряженной паре ГП-ГР [26].
Во многих работах, опубликованных ранее, указывается, что под действием различных патогенных факторов, в том числе под влиянием стресса, изменяется соотношение восстановленных и окисленных низкомолекулярных тиолов, в том числе глутатиона. При этом в начальный период действия разных по своей природе агентов содержание глутатиона (GSH) в крови и других тканях снижается [2, 29-31].
Результаты наших исследований показали, что под влиянием стресса отмечалось повышение уровня СР, увеличение содержания МДА, уменьшение концентрации GSH, наблюдалось статистически значимое повышение активности ферментов ГП и ГР. Дострес-совое введение комената лития способствовало стабилизации равновесия ПОЛ-ГАОС в головном мозге мышей. При этом отмечалось статистически значимое снижение уровня СР и содержания МДА, восстановление глутатионового обмена до контрольного уровня. Полагаем, что высокий антиоксидантный, стресс-протекторный эффекты комената лития, возможно, являются результатом взаимного потенцирования биологических свойств катиона лития и аниона коме-новой кислоты. Так, литий подавляет симпатическую активность и ослабляет действие КА, усиливает их внутринейрональный метаболизм [10]. Указывалось также, что хлорид лития оказывает антиоксидантный эффект, хотя и неспособен предотвратить окислительное повреждение мозга, вызванное хроническим стрессом [13]. Вместе с тем приводятся данные, свидетельствующие о том, что хлорид лития не предот-
вращает гибель культивируемых нейронов, вызванную перекисью водорода [11]. Не обнаружено заметного антиоксвдантного эффекта хлорида лития и при исследовании нами его антиокислительных свойств in vitro в модельной системе ЦФЛ (цитратно-фосфатный буфер с добавлением люминола). Исходя из этого, можно заключить, что, вероятнее всего, прямого ан-тиоксидантного действия хлорид лития не оказывает. В то время как коменовая кислота и коменат лития in vitro проявили выраженные антиокислительнные свойства [32, 33]. В этой связи можно предположить, что высокий антиоксидантный стресспротекторный эффект комената лития обусловлен не только его прямым антиоксидантным действием, но и влиянием на обмен КА в ткани мозга. Представленные результаты исследования антиоксидантных свойств литиевой соли коменовой кислоты in vivo в мозге стресси-рованных животных, а также опубликованные ранее данные высокой нейропротекторной эффективности этого препарата в условиях глутаматной эксайтоток-сичности in vitro [32] указывают на необходимость проведения дальнейших исследований комената лития с целью изучения возможности применения его для лечения различных нейродегенеративных заболеваний, вызываемых окислительным стрессом.
Литература
1. Попова М.С., Степаничев М.Ю. Индукция клеточного
цикла, амилоид-бетта и свободные радикалы в механизме развития нейродегенеративных процессов в мозге // Нейрохимия. 2008. Т. 25, № 3. С. 170-178.
2. Зозуля Ю.А., Барабой В.А., Сутковой Д.А. Свободнора-
дикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга. М., 2000. С. 221-226.
3. Halliwel B., Chiricol S. Lipid peroxidation: its mechanism,
measurement, and significance // Am. J. Clin. Nutr. 1993. Vol. 57. P. 715-725.
4. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга.
М., 2001. 328 с.
5. Федорова Т.Н. Окислительный стресс и защита головно-
го мозга от ишемического повреждения: дис. ... д-ра биол. наук. М., 2004. 298 c.
6. Gilgun-Sherki Y., Rosenbaum Z., Melamed E., Offen D.
Antioxidant therapy in acute central nervous system injury: current state // Pharmacological Reviews. 2002. Vol. 54, № 2. Р. 271-284.
7. Поварова О.В., Каленикова Е.И., Городецкая Е.И., Мед-
ведев О.С. Антиоксиданты как нейропротекторы при ишемическом инсульте // Эксперим. и клин. фармакология. 2003. Т. 66, № 3. С. 69-73.
8. Chen K., Suh J., Carr A.C., Morrow J.D., Zeind J., Frei B.
Vitamin C suppresses oxidative lipid damage in vivo, even in the presence of Iron- overload // J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2000. Vol. 279. P. 1406-1412.
9. Шурыгин А.Я., Злищева Э.И., Кравцов А.А., Андросова
Т.В., Скороход Н.С., Абрамова Н.О., Немчинова Е.А., Полещук Л.А. Способ получения литиевой соли коме-новой кислоты и применение её как антиоксидантного, стресс- и нейропротекторного средства / Патент № 2477722 РФ МПК51 C07D 309/40, А 61К31/351, А 61 Р 25/00: заявитель и патентообладатель ГОУ ВПО «Кубанский государственный университет», Краснодар (RU), № 2011131609/04; заявл. 27.07.11 г.
10. Крыжановский Г.Н. Новые данные по фармакологии и
клиническому применению солей лития: сб. тр. НИИ
фармакологии АМН СССР / под ред. Б. Любимова. М., 1984. C. 49-57.
11. Nonaka Sh., Hough Chr.J., Chuang D.-M. Chronic lithium
treatment robustly protect neurons in the central nervous system against excitotoxicity by inhibiting N-methyl-d-aspartate receptor-mediated calcium influx // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. Vol. 95. P. 2642-2647.
12. Shao L., Cui J., Young L.T., Wang J.F. The effect of Mood
stabilizer lithium on expression and activity of glutathione-S-transferase isoenzymes // Neuroscience. 2008. Vol. 151(2). P. 518-524.
13. De Vasconcellos A.P., Nieto F.B., Crema L.M., Diehl L.A.,
de Almeida L.M., Prediger M.E., da Rocha E.R., Dalmaz C. Chronic lithium treatment has antioxidant properties but does not prevent oxidative damage induced by chronic variate stress // Neurochem. Res. 2009. Vol. 196, № 1. P. 84-92.
14. Кравцов А.А., Шурыгин А.Я. Сравнительное изучение ан-
тиоксидантных свойств коменовой кислоты и её солей // Научно-техническое творчество молодёжи - путь к обществу, основанному на знаниях. М., 2009. С. 268-269.
15. Шурыгин А.Я. Препарат бализ. Краснодар, 2002. 416 с.
16. Патент № 2209062 РФ, МПК7 A61K31/351, A61P25/20;
Вещество, обладающее седативным действием / Зубарева Р.П., Крылов Б.В., Щеглов Б.Ф.; заявитель и патентообладатель Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, СПб, № 2002107079/14; заявл. 19.03.02; опубл. 27.07.03.
17. Патент № 2322977 МПК51 РФ A61K31/351 . Синтетиче-
ское анальгетическое средство и способ лечения на основе этого средства / Крылов Б.В., Лопатина Е.В. A61P29/02; заявитель и патентообладатель ЗАО «Фи-зиофарм» (RU) СПб № 2006128504/15; заявл. 01.08.06; опубл. 27.04.08.
18. Панова Т.И. Механизмы влияния коменовой кислоты на
интегративную деятельность мозга // Теоретическая экспериментальная медицина. Медицина сегодня и завтра. 2005. № 1. С. 28-33.
19. Барабой В.А., Сутковой Д.А. Окислительно-антиокси-
дантный гомеостаз в норме и патологии. Киев, 1977. 420 с.
20. Фархутдинов У.Р., Фархутдинов Р.Р. Особенности хе-
милюминесценции плазмы крови и активность альвеолярных макрофагов при экспериментальной пневмонии // Бюл. экспер. биол. и мед. 2000. Т. 129, № 3. С. 260-264.
21. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Определе-
ние содержания продуктов перекисного окисления ли-
Поступила в редакцию_
пидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой // Вопросы мед. химии. 1987. № 1. С.19-21.
22. Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of total, protein-bound,
and nonprotein sulfhydryl groups in tissue with Ellman's reagent // An. Biochem. 1968. Vol. 25, № 1. P. 192-205.
23. Моин В.М. Простой и специфический метод определе-
ния активности глутатионпероксидазы в эритроцитах // Лаб. дело. 1986. № 12. С. 724-727.
24. Юсупова Л.Б. О повышении точности определения ак-
тивности глютатионпероксидазы эритроцитов // Лаб. дело. 1989. № 4. С. 100-101.
25. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисле-
ние липидов // Успехи современной биологии. 1991. Т. 111, вып. 6. С. 923-931.
26. Колесниченко Л.С., Манторова Н.С., Шапиро Л.А. Био-
физические и биотехнические аспекты гомеостаза: межведом.: сб. науч. тр. Красноярск, 1989. 178 с.
27. Мхитарян В.Г., Агаджанов М.И., Геворкян Д.М., Мекае-
лян З.М. Ферментативные механизмы антирадикальной защиты клетки при экстремальных состояниях // Вестн. АМН СССР. 1982. № 9. С. 15-19.
28. Колесниченко Л.С., Манторова Н.С., Шапиро Л.А., Оль-
ховский И.А., Барон А.В., Кулинский В.И. Влияние эмоционального стресса на активность ферментов метаболизма глутатиона // Вопросы мед. химии. 1987. № 3. С. 85-88.
29. Соколовский В.В. Тиоловые антиоксиданты в молеку-
лярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие // Вопросы мед. химии. 1988. Т. 34, № 6. С. 2-11.
30. Суханова Г.А., Серебров В.Ю. Биохимия клетки. Томск,
2000. С. 91-142.
31. Курашвили В.А., Майлэм Л. Новые возможности предот-
вращения оксидативного стресса // Журн. натур. медицины. 2001. № 1. С. 7-14.
32. Шурыгин А.Я., Кравцов А.А., Немчинова Е.А., Скороход
Н.С., Абрамова Н.О., Шурыгина Л.В., Злищева Э.И., Андросова Т.В. Изучение антиоксидантных и нейро-протекторных свойств литиевой соли коменовой кислоты // Изв. вузов. Сев.-Кавк. регион. Естеств. науки. 2012. № 3. С. 77-79.
33. Шурыгин А.Я., Абрамова Н.О., Кравцов А.А., Удодова
Е.И. Изучение антиоксидантных свойств монолитиевой соли коменовой кислоты // Физиология адаптации: материалы 1-й Всерос. науч.-практ. конф. Волгоград, 2008. 366 с.
29 апреля 2013 г.
