Окислительный стресс и эндогенная интоксикация при диарее новорожденных телят-гипотрофиков Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

производства мяса бройлеров / В.М. Колесников // Достижения науки и техники АПК. - 2002. - № 4. - С. 37-38. 4. Методические рекомендации по выращиванию птицы и производству экологически безопасного мяса, предназначенного для детского питания / Всерос науч.-иссл. и технол. ин-т птицеводства; Разраб.: B.C. Лукашенко, М.А. Лысенко, Т.А. Столляр. и др.

- Сергиев Посад, 2000. - С. 20. 5. Павлова, О.Н. Эффективность использования кормовой добавки «СпироГумат» при выращивании цыплят-бройлеров / О.Н. Павлова, В.В. Зайцев, И.П. Токарев // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. - 2011. - №1

- С. 119-122. 6. Тишенков, А.Н. Динамика содержания витаминов А, Е и железа в печени цыплят-бройлеров / А.Л. Тишенков, Ю.Л. Микулец // Ветеринария. - 2002. - №11. - С. 30-31.

СОДЕРЖАНИЕ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ В МЫШЦАХ И ВИТАМИНОВ В ПЕЧЕНИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ НАГРУЗКЕ ГУМАТОМ КАЛИЯ

Грибанова Е.А., Каримова Р.Г., Гарипов Т.В., Павлова О.Н.

Резюме

Изучено содержание микроэлементов в мышечной ткани и витаминов в печени цыплят-бройлеров на фоне нагрузки гуматом калия. Установлено, что гумат калия способствует повышению в мышцах микроэлементов и снижению концентрации тяжелых металлов.

CONTENTS OF MICROELEMENTS IN THE MUSCLE AND VITAMINS IN THE LIVER OF BROILER CHICKENS AT A LOAD OF POTASSIUM HUMATE

Gribanova E.A., Karimova R.G., Garipov T.V., Pavlova O.N.

Summary

The content of trace elements in the muscle and liver vitamins in broiler chickens against load potassium humate. Found that potassium humate promotes muscle decrease in the concentration of trace elements and heavy metals.

УДК 619:616.092.172.2.636.22/28

ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС И ЭНДОГЕННАЯ ИНТОКСИКАЦИЯ ПРИ ДИАРЕЕ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ-ГИПОТРОФИКОВ

Гундоров М.А. - аспирант; Пахмутов И.А. - д.в.н., профессор;

Главинский А.В. - соискатель Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия

Ключевые слова: телята-гипотрофики, диарея, показатели ПОЛ и эндогенной интоксикации, комплексная терапия.

Keywords: calves, hypothrophiae, diarrhea, peroxudation of lipids, endogenous intoxication.

Известно, что на ранних этапах постнатального онтогенеза организм новорожденных телят адаптируется к новым условиям существования, включая переход к иному типу дыхания и пищеварения. В свою очередь это приводит к интенсификации процессов свободнорадикального окисления (СРО), сопровождающейся дисбалансом и своеобразным истощением ферментативного и неферментативного звена антиоксидантной защиты (АОЗ), т. е. возникновением состояния окислительного стресса (ОС) и, как следствие, избыточной активизацией процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), окислительной модификации белков (ОМБ) и эндогенной интоксикации (ЭИ).

В первую очередь такие метаболические сдвиги обнаруживаются у телят-гипотрофиков, организм которых отличается так называемой «физиологической незрелостью», создающей предпосылки для возникновения и развития заболеваний различной этиологии, из которых, по общепризнанному мнению, основное место отводится острым расстройствам пищеварения с диарейным синдромом (диспепсии различной степени тяжести) [1, 2, 4-9].

Цель работы - изучить ряд показателей, характерных для окислительного стресса и эндогенной интоксикации (ОС, ЭИ) у телят-гипотрофиков при комплексном лечении функциональной диареи (простой диспепсии) в первые 10-12 дней жизни.

Материалы и методы. Объектом исследований служили новорожденные телята-гипотрофики черно-пестрой породы, начиная с 1-2-х суток после рождения. «Физиологическая незрелость» или «синдром слабых телят» определялся по низкой массе тела (22-25 кг), по заторможенному сосательному рефлексу и недостаточной двигательной активности, по пониженной температуре тела, равной 38,1-38,2°С [6].

Больные диареей телята составили опытную (I, n=32) и контрольную группы (II, n=30). Начиная со 2-х суток, телята I группы лечились комплексно по разработанной схеме-модели: в начале лечения на 2-й день после рождения назначалась кратковременная голодная диета (пропуск одного кормления молозивом), а перед следующим кормлением за 30-40 мин. им выпаивался отвар из лекарственного сырья (тысячелистник, конский щавель, полынь, зверобой, кора дуба) 0,5-0,7 л с добавлением по 0,5 г фталазола и сульгина, 5,0 натрия сульфата, 20,0 - глюкозы, 2,0-3,0 -хлорида натрия, на 3 сутки выполнялась двухсторонняя новокаиновая блокада по В.В.Мосину, в/м назначался «Седимин» (А-БИО, Россия), а в/б - 5 мл тетравита, в последующие дни применялся в/м витамин В12 (500 мкг 1 раз в сутки), во II-ой группе больным телятам вводился в/м тетравит в рекомендуемых дозах с интервалом 5 дней. По мере необходимости

назначались симптоматические лекарственные средства (сердечные, мочегонные, улучшающие пищеварение и т.п.). В качестве отрицательного контроля использовались клинически здоровые телята-аналоги по возрасту (нормотрофики) (п=10).

У подопытных животных брались пробы венозной крови через 2, 5, 10-12 суток после рождения, в которых общепринятыми методами лабораторных исследований определялись следующие показатели: -малоновый диальдегид (МДА) и ацилгидроперекиси (АГП2зз), отражающие состояние процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ)

- окислительная модификация белков под влиянием избытка продуктов свободнорадикального окисления (ОМБ);

- молекулы средней массы (МСМ254 и МСМ280) как индикаторы эндогенной интоксикации;

- ферментные и неферментные продукты антиокислительной защиты (АОЗ): глютатион (общий, восстановленный и окисленный), токоферол (витамин Е), общая антиокислительная активность (АОА), активность ферментов супероксиддисмутазы, каталазы (СОД, Кат.) [2, 3, 4].

Цифровой материал обрабатывался статистически с использованием лицензионной компьютерной прикладной программы «^аЙБЙса 5.0». Достоверность различий оценивали методом парных сравнений с помощью ^критерия Стьюдента при уровне значимости р<0,05.

Результаты и выводы исследования. Как демонстрируют материалы табл. 1, у больных телят-гипотрофиков все изучаемые показатели свидетельствовали о наличии состояния ОС и ЭИ. Так, уровень МДА (ТБК - продуктов) и АГП превышали нормальные величины почти в 2, а ОМБ - в 1,5 раза. Содержание молекул средней массы возрастало на 32-35% по отношению к относительной норме, указывая тем самым на накопление биологически активных продуктов катаболизма белков, вероятно, и за счет их повышенной окислительной модификации с последующим накоплением в водорастворимой фракции сыворотки крови. Последнее, как известно, содержит гидрофобные токсические соединения, в частности продукты СРО, протеолиза, билирубин и т.п. При этом одновременное возрастание уровня среднемолекулярных пептидов (ММ 500-5000Да) в этой фракции и снижение в первую очередь количества и связывающей способности альбумина в сыворотке крови указывали на наличие у больных телят окислительного стресса, как важного звена в патогенезе острых расстройств пищеварения в форме функциональной диареи у новорожденных животных [1, 6-9].

Судя по данным табл. 1, через 5 суток после начала опытов в I и II группах наступало снижение уровня МДА, АГП. Однако он еще оставался существенно выше, чем у клинически здоровых телят-аналогов (р<0,05-0,01). Через 10 суток эти два показателя ПОЛ в I группе достигали нормативных значений, а во П-ой - они заметно отличались тем, что

количество ТБК - продуктов было достоверно выше, чем в 1-ой и в отрицательном контроле (р<0,05), но по количеству АГП межгрупповые различия были менее выраженными (р>0,05).

1. Показатели ПОЛ, ОМБ и ЭИ у подопытных телят (M±m, n=7)

Показа тели Сроки исследований, сут. Клин. здоров. (нормотроф)

2 (начало) 5 10-12

I II I II

МДА, мкМ/л 3,37±0,15хх 1,83±0,12х 2,05±0,14х 1,52±0,05ха 1,71±0,06хх 1,34±0,07

АГП233 ед.оп./мл 2,62±0,13хх 2,38±0,16хх 2,53±0,18хх 1,66±0,15 1,80±0,13х 1,37±0,14

МСМ280 ед.оп. 0,37±0,02хх 0,29±0,01 0,33±0,02х 0,26±0,02 0,30±0,02 0,28±0,01

МСМ254 ед.оп. 0,41±0,01хх 0,32±0,02 0,36±0,02 0,29±0,04 0,32±0,03 0,31±0,02

ОМБ, нМ КГ/мг белка 1,79±0,06хх 1,42±0,03ха 1,63±0,05хх 1,29±0,02ха 1,38±0,03х 1,24±0,05

Условные обозначения: ПОЛ - перекисное окисление липидов; МДА - малоновый диальдегид; АГП233 - ацилгидроперекиси липидов; ОМБ - окислительная модификация белков; КГ - карбонильные группировки; МСМ - молекулы средней массы; ЭИ - эндогенная интоксикация; х - р<0,05; хх - р<0,01 уровень достоверности различий по сравнению с клинически здоровыми телятами- нормотрофиками; ха -межгрупповые различия.

Концентрация МСМ, отражающая в определенной мере процессы протеолиза, как видно из табличных данных, лишь через 5 суток оставалась в обеих группах выше нормативных величин (р<0,05). В конце срока наблюдений уровень МСМ280 и МСМ254 приближался к норме без межгрупповых различий, хотя их абсолютные значения были ниже в I группе. Более четкие существенные различия в этом плане продемонстрировали результаты определения ОМБ: во П-ой группе даже через 10 суток уровень ОМБ оставался повышенным по сравнению с 1-ой и здоровыми телятами-нормотрофиками (р<0,05).

В связи с наличием ОС у подопытных телят, естественно, было важно проследить за состоянием АОЗ по ряду объективных тестов, отражающих в целом и эффективность используемых средств терапии. Как видно из данных табл.2, у больных телят-гипотрофиков была снижена АОА вследствие интенсификации процессов ПОЛ, протеолиза, окисления нуклеиновых кислот и т.п., свидетельствуя о достаточно высоком напряжении функционирования системы АОЗ. Этот факт нашел свое весомое подтверждение в форме ослабления ее ферментативного и неферментативного звеньев. В частности, обнаруживалось снижение активности ферментов каталазы и СОД. Первая, как известно, связана с

разложением Н2О2, скорость которого лимитируется количеством и способностью к диффузии субстрата к активному центру фермента. Вторая тесно связана с образованием из супероксидного атома кислорода (О2-) в супероксиддисмутазной реакции перекиси водорода (Н2О2). Последняя, по общепризнанному мнению, является ингибитором СОД по принципу обратной связи [2, 7, 8, 9]. Уровень неферментных антиоксидантов глютатиона и витамина Е у больных телят II группы также оставался ниже таковых у клинически здоровых животных-аналогов (р<0,01).

2. Показатели АОЗ у подопытных телят (М±т, п=10)

Показатели Сроки исследований, сут. Клин. здоров. (нормотроф)

2 (начало) 5 10-12

I II I II

АОА, % 17,9±1,3хх 22,5±1,1 19,6±1,4 25,1±1,2ха 21,0±1,5 24,8±1,3

Катал.,мкМ Н2О2/лмин 38,5±1,3хх 45,9±1,5 42,5±1,7х 46,3±1,6 44,7±1,5х 49,6±1,4

СОД, у.е./мгНЬ 6,3±0,58хх 8,4±0,27ха 6,9±0,36хх 9,5±0,41 8,6±0,73 10,3±0,52

Витамин Е, мг% 0,28±0,03 0,36±0,02 0,31±0,04 0,44±0,03ха 0,37±0,01хх 0,47±0,03

Глютатион, мг% - общий - восст. - окисл. 28,8±1,3х 35,6±1,2 32,2±1,4х 37,8±1,5ха 34,3±1,3 36,7±1,4

21,5±1,0хх 29,7±1,4ха 23,8±1,3хх 34,5±1,2ха 27,5±1,6х 32,8±1,7

7,3±0,8хх 5,9±0,5х 8,4±0,3хх 3,3±0,2хха 6,8±0,4хх 3,9±0,6

Условные обозначения: АОА - антиоксидантная активность, СОД -супероксиддисмутаза; х - р<0,05; хх - р<0,01; ха, хха - уровень достоверности межгрупповых различий.

В процессе лечения у телят I группы фактически нормализовалась АОА, по-видимому, за счет возрастания содержания всех исследуемых биоантиоксидантов, тогда как во II - она оказалась несколько ниже (р<0,05) по сравнению с I и с таковой у здоровых животных. Этот факт, очевидно, был связан как с более высоким уровнем ОС и меньшей антиоксидантной активностью определяемых ферментов, а также уровнем восстановленного глютатиона и витамина Е. На заключительном этапе исследований (10-12 сутки), как видно из материалов табл. 2, АОА в обеих группах достигала нормативных значений у здоровых телят. Тем не менее в I группе она оказалась достоверно выше, чем во П-ой (р<0,05). Подобная картина наблюдалась и в отношении общего глютатиона, но уровень восстановленного - во II группе оказался ниже, чем в Ьой и у здоровых телят (р<0,05). Концентрация окисленного глютатиона во П-ой группе оставалась повышенной на всем протяжении срока опытов, что было связано, по всей вероятности, с дефицитом каталазы и витамина Е.

Выводы. 1. Физиологически незрелые телята-гипотрофики, страдающие функциональной диареей (простая диспепсия), подвержены ОС не только в результате постнатальной адаптации, но и вследствие метаболических нарушений на почве задержки нормального развития жизненно-важных органов (желудочно-кишечного тракта, печени, эндокринной и нервной систем) под влиянием так называемого «материнского эффекта» на последних этапах беременности и в первую декаду периода новорожденности [8, 9]. 2. Разработанная схема-модель комплексной терапии телят-гипотрофиков, страдающих функциональной диареей, оказала более выраженное коррегирующее влияние на механизмы ОС, фактически устраняя дисбаланс между про- и антиоксидантными системами уже через 5 суток после начала лечения. 3. Включение в схему-модель комплексного лечения новокаиновой блокады по В.В.Мосину, препарата «Седимин», тетравита/тривита в сочетании с витамином В12, как показали результаты наших исследований, способствовали повышению активности клеточных и гуморальных факторов неспецифической защиты (врожденного иммунитета), усилению АОЗ и, судя по уровню гемоглобина, устраняли, очевидно, последствия железодефицитной анемии, сопровождающейся окислительным стрессом [6].

ЛИТЕРАТУРА: 1. Дельцов, А.А. Оксидативный статус крови телят при профилактике железодефицитной анемии в зоне радиации /А.А.Дельцов [и др.] //Ветеринария, 2011. - № 12. - С. 14-16. 2. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека. Методы ее определения /Е.Е.Дубинина [и др.] //Вопр. мед. химии, 1995. -т. 41. - №1. - С. 24-26. 3. Карпищенко, А.И. Медицинские лабораторные технологии. Справочник /А.И.Карпищенко [и др.]. - СПб, Интермедика, 1999. - т. 2. - 654 с. 4. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник /Под ред. проф. И.П.Кондрахина. - М.: КолосС, 2004. - 520 с. 5. Кузнецов, А.И. Физиология молодняка сельскохозяйственных животных. Учебн. пособие /А.И.Кузнецов,

B.Ф.Лысов. - Троицк: УГАВМ, 2002. - 80 с. 6. Медведев, И.Н. Нарушения в системе гемостаза у новорожденных телят при анемии /И.Н.Медведев [и др.] //Ветеринария, 2008. - №8. - С. 44-47. 7. Меньщикова, Е.Б. Окислительный стресс. Патологические состояния и заболевания /Е.Б.Меньщикова [и др.]. - Новосибирск, 2008. - 283 с. 8. Рецкий, М.И. Перекисное окисление липидов и система антиоксидантной адаптации телят /М.И.Рецкий [и др.] //С.-х. биол., 2004. - №2. - С. 56-60. 9. Рецкий, М.И. Биохимические маркеры развития окислительного стресса у новорожденных телят /М.И.Рецкий [и др.] //Ветеринария, 2005. - № 3. -

C. 47-49.

ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС И ЭНДОГЕННАЯ ИНТОКСИКАЦИЯ ПРИ ДИАРЕЕ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ-ГИПОТРОФИКОВ

Гундоров М.А., Пахмутов И.А., Главинский А.В.

Резюме

Установлено, что диарея новорожденных телят-гипотрофиков приводит к увеличению содержания в крови продуктов перекисного окисления липидов, окислительной модификации белков, молекул средней массы, к снижению АОЗ.

OXIDATIVE STRESS AND THE ENDOGENOUS INTOXICATION OF NEWBORN

CALVES WITH HYPOTHROPHIA

Gundorov M.A., Pahmutov I.A., Glavinski A.V.

Summary

It is established that diarrhea of newborn calves with hypothrophia increased contents in blood products of oxidative stress and molecules of average weight.

УДК 631.46: 631.461.5

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ПОВЫШЕНИЮ УРОЖАЙНОСТИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР

Дегтярева И.А. - д.б.н., зав. лабораторией; Яппаров И.А. - д.с.-х.н., зав. отделом;

Хидиятуллина А.Я. - н.с.

ГНУ Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения Российской академии сельскохозяйственных наук, г.Казань тел.: (843) 277-82-74

Ключевые слова: ризосфера, азотфиксирующие и фосфатмобилизующие микроорганизмы, ассоциации, плодородие почвы.

Keywords: rhizosphere, nitrogen-fixing and phospatemobilizing microorganisms, associations, fertility of soil.

Проблема повышения эффективности земледелия не теряет своей актуальности. Предлагается широкий арсенал методов, технологий, направленных на решение этой задачи. К числу наиболее распространенных относится использование минеральных удобрений различного компонентного состава, которые в последние годы предлагается вносить и в наноразмерном виде. Интерес представляют способы повышения плодородия почв и урожайности сельскохозяйственных культур с использованием биотехнологий, в частности, внесение в почву бактерий, способных эффективно обогащать