ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЯВЛЕНИЯ В РАСТЕНИЯХ ОГУРЦА И РЕДИСА ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНОВ НИКЕЛЯ*
И. Д. Михайлова, И. В. Егорова, А. С. Лукаткин
В статье рассматривается изменение скорости супероксидного анион-радикала и интенсивности перекисного окисления липидов у растений огурца и редиса при воздействии различных концентраций ионов никеля. Показано, что ионы 1чН2+ не оказали значительного отрицательного влияния на растения.
I
В последнее время условия жизни растений ухудшаются в связи с глобальными процессами на Земле как естественного, так и антропогенного происхождения. В связи с этим возрастает потребность в точной оценке адаптивного потенциала растений. Из антропогенных стрессоров существенное неблагоприятное воздействие на растения оказывают тяжелые металлы (ТМ) [1]. Наиболее опасными из них считаются Сс1, Си, РЬ, Сг, и их действие на растения достаточно хорошо изучено. Менее токсичный, но потенциально опасный № изучен слабее, хотя его действие на рост и физиологические процессы тоже бывает весьма ощутимым [3]. Данный металл является важным элементом питания растений, но в высоких дозах оказывает токсическое действие. Показано, что избыток никеля снижал митотическую активность в апексе корня кукурузы и нарушал целостность корневых меристем, а также ингибиро-вал рост корней и побегов у ряда растений
т.
Абиотические и биотические стрессы вызывают каскад ответных реакций растительной клетки, частью которого является окислительный взрыв. В результате усиления генерации активированных форм кислорода (АФК) в клетках растений возникает состояние окислительного стресса — изменение баланса между образованием АФК и активностью антиоксидантной защиты в пользу первого [4]. Последующие определяемые АФК процессы зависят от локализации, времени и уровня генерации АФК в ответ на стресс, а также от деятельности клеточных систем их инактивации [2].
В настоящее время развивается гипотеза, что избыточные дозы ТМ также вызывают окислительный стресс в клетках растений [1]. Так, в клетках растений пшеницы при
действии ТМ повышалось образование АФК [5]. Однако механизмы возникновения окислительного стресса в растениях при действии ТМ, как и последующие окислительные проявления, детально не выяснены. В связи с этим изучали влияние ионов Ni2+ на скорость генерации начальной АФК — супероксидного анион-радикала (02~) и интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в молодых растениях огурца и редиса.
Растения огурца (Cucumis sativus L., сорт Единство) и редиса (Raphanus sativus L., сорт Красный великан) выращивали на воде в факторостатных условиях (освещенность 2 ООО лк, температура 28 °С, фотопериод 12 ч) на различных концентрациях NiS04 х х7Н20 (10 мкМ, 0,1 мМ, 1 мМ) до возраста 7 дней. После этого измеряли скорость генерации 02~ и интенсивность ПОЛ по методикам, приведенным в [2].
Определение скорости генерации 02~ в растениях при действии ионов Ni2+ показало, что у огурца она была на уровне контроля в большинстве вариантов, и лишь в самой малой концентрации ионов никеля (10 мкМ) была достоверно ниже контроля (рис. 1, а). В опыте с растениями редиса наблюдали повышение скорости генерации 02~ при всех использованных концентрациях по сравнению с контролем. Максимальное значение 02~ зафиксировано при концентрации 0,1 мМ, минимальное — при 1 мМ Ni2+в среде (рис. 1,6).
Интенсивность перекисного окисления липидов в семидневных проростках огурца при действии различных концентраций ионов никеля несколько возрастала при концентрациях 1 мМ и 0,1 мМ, но не при концентрации 10 мкМ (рис. 2, а); это свидетельствует об отсутствии негативного влияния низкой дозы Ni2+ в среде на растения огурца.
© И. Д. Михайлова, И. В. Егорова, А. С. Лукаткин, 2011
* Исследование выполнено при поддержке Министерства образования и науки РФ (АВЦП «Развитие научного потенциала высшей школы», проект 2.1.1/624).
10
ВЕСТНИК Мордовского университета | 2011 | -N? 4
В растениях редиса интенсивность ПОЛ при всех дозах ионов никеля в среде изменялась относительно контроля незначительно, достоверное уменьшение выявлено лишь при дозе 0,1 мМ №2+ в среде (рис. 2, б).
Очевидно, что ионы никеля (в изученных концентрациях) при длительном воздействии не оказали значительного отрицательного влияния на молодые растения редиса.
х о
К £ Я к £ £
о и
5х
Ч л
я ^
О о
О й
ф А
с -и
Л
н
§.я
£г а. о
¡а
и
200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0
1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ
Вода
Концентрация металла
а
I £ О
* X
аз а
О .
8 65
О О
* £ о 2
Си у
и А
ы О
60
50
40
20
Ш. '••«
гШШ
ьюШуяш
V ОJ — Л*А« г
шшВ
шш
ШШВЯ
Вода 10 мкМ 0,1 мМ 1 мМ
Концентрация
6
Рис.1
Влияние различных концентраций ионов №2+ на скорость генерации суперрксидного анион-радикала в семядольных листьях семидневных проростков: а — огурца, б — редиса
и
о\ к Л § 5
п о
X 2
у 2*5
£ £. а .
ё1 "I
51
X ЗВ а> а;
Ь е; ЭЙ о
О
1 мМ ! 0,1 мМ 10 мкМ
Вода
Концентрация металла
а
2 ^ о ё
"I
X $ * £
а2,
2 « с о
иа " н £
О С О 5 X Ч
ос к
X
0>
о *
О
5 О
X »
X
3
8
1 0
Вода 10 мкМ 0,1 мМ 1 мМ
Концентрация б
Рис. 2
Влияние различных концентраций ионов №2+ на интенсивность перекисного окисления липидов в семядольных листьях семидневных проростков: а — огурца, б — редиса
Таким образом, проведенные опыты показали, что ионы никеля оказали более сильное воздействие на генерацию АФК в проростках редиса, чем на интенсивность ПОЛ — в проростках огурца. При этом можно видеть, что данный ион тяжелого
металла не вызвал существенного окислительного стресса в проростках огурца и редиса при длительном (7 суток) действии. Следовательно, ионы №2+ не оказали значительного отрицательного влияния на растения.
Серия 4Биологические Науки»
211
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Башмаков Д. И. Эколого-физиологические аспекты аккумуляции и распределения тяжелых металлов у высших растений / Д. И. Башмаков, А. С. Лукаткин. - Саранск : Изд-во Мордов. ун-та, 2009. - 236 с.
2. Лукаткин А. С. Холодовое повреждение теплолюбивых растений и окислительный стресс /
А. С. Лукаткин. - Саранск : Изд-во Мордёв. ун-та, 2002. - 208 с.
3. Лукаткин А. С. Цитокинин-подобные препараты ослабляют повреждения растений кукурузы ионами цинка и никеля / А. С. Лукаткин, Н. В. Грачева, Н. Н. Гришенкова // Физиология растений. - 2007. - Т. 54, № 3. - С. 432-439.
4. Пескин А. В. Окислительный стресс как критерий оценки окружающей среды / А. В. Пе-скин, С. Д. Столяров // Изв. РАН. Сер. Биологическая. - 1994. - Лг9 4. — С. 588-595.
5. Степанов М. Е. Окислительный стресс в растениях при действии тяжелых металлов свинца и цинка / М. Е. Степанов, А. С. Лукаткин // Вестн. Рос. воен.-мед. акад. - 2008. — № 3 (23), прил. 2, ч. 1. — С. 149.
Поступила 21.01.11.
ВЛИЯНИЕ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И ТИДИАЗУРОНА НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ
К. А. Сазанова, Д. И. Башмаков, А. С, Лукаткин
Изучено влияние синтетического регулятора роста тидиазурона и тяжелых металлов (ТМ) на перекисное окисление липидов (ПОЛ) в листьях ТпНсит аеьНьит Ь., интенсивность которого оценивали по накоплению продукта окисления — малонового диальдегида (МДА). Показано, что ТМ повышали содержание МДА в растениях пшеницы по сравнению с контролем. Обработка семян регулятором роста ти-диазуроном способствовала стабилизации состояния мембран, о чем свидетельствует снижение интенсивности ПОЛ в листьях пшеницы.
Тяжелые металлы (ТМ), среди которых особо значимы Си, N1, Ъп, РЬ, играют в жизни растений как положительную, так и отрицательную роль [1; 5]- В работах [2; 5] указывается на способность ТМ изменять состояние клеточных мембран. Известно также свойство тяжелых металлов индуцировать окислительный стресс и повреждение клеточных мембран, о степени которого можно судить по накоплению малонового диальдегида (МДА) [1; 6 — 7]. Загрязнение окружающей среды ТМ выступает важным внешним фактором, к которому растения эволюционно не приспособлены. Проникая в избытке в растительный организм, тяжелые металлы затрудняют ход метаболлических процессов, подавляют развитие, снижают продуктивность. Также они накапливаются в припо-
верхностном слое почвы, что приводит к нарушению ее плодородия и ухудшению качества растениеводческой продукции [1].
В настоящее время разрабатываются различные способы нейтрализации вредного для растений воздействия тяжелых металлов [5]. Все больший интерес представляют биологически активные вещества — регуляторы роста, которые применяются в качестве защиты и повышения устойчивости растений к биотическим и абиотическим факторам [5 — 6].
В работе мы исследовали действие ионов ТМ и синтетического регулятора роста тидиазурона на интенсивность перекисного окисления металлов (ПОЛ) в листьях пшеницы. Семена пшеницы (ТгШсит аеьНьит Ь.) помещали в слабый раствор КМп04 для обеззараживания, затем промывали дистиллиро-
К. А. Сазанова, Д. И. Башмаков, А. С. Лукаткин, 2011
ВЕСТНИК Мордовского университета | 2011 | Мр 4