CC BY
23
УДК:617:636.9.615
Ключевые слова: ветеринарная офтальмология, экспериментальная хирургия, травматический кератит, язвенный кератит, моделирование щелочного ожога роговицы, антиоксидант, антигипоксант, «Эмидонол»
Key words: veterinary ophthalmology, experimental surgery, traumatic keratitis, ulcerative keratitis, modeling of corneal burn by alkaline, antioxidant, antihypoxic drug, "Emidonol"
Сошкин Р.С., Сайтханов Э.О., Концевая С.Ю.
ОБОСНОВАНИЕ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «ЭМИДОНОЛ 5 %» ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКИХ И ЯЗВЕННЫХ ПОВРЕЖДЕНИЯХ РОГОВИЦЫ У ЛАБОРАТОРНЫХ КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
THE SUBSTANTIATION OF "EMIDONOL 5%" LOCAL DIRECTION IN CASES OF TRAUMATIC AND ULCER DAMAGE OF LABORATORY RODENT'S CORNEAL IN EXPERIMENT
ФГБОУ ВПО «Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева»
Адрес: Россия, г. Рязань, Костычева ул., д. 1 Ryazan State Agrotechnological University named after P. A. Kostychev, Federal State Budgetary Institution of Higher Professional Education Address: Russia, Ryazan, Kostychev st., 1
Сошкин Роман Сергеевич, ассистент каф. ВСЭ, хирургии, акушерства и ВБЖ. E-mail: r.soshkin@yandex.ru
Soshkin Roman S., Assistant of the Dept. of Veterinary-Sanitary Examination, Surgery, Obstetrics and Internal Animal Disease. E-mail: r.soshkin@yandex.ru Сайтханов Эльман Олегович, зав. кафедрой ВСЭ, хирургии, акушерства и ВБЖ. E-mail: elmanrzn@gmail.com Saitchanov Elman O., Head of the Dept. of Veterinary-Sanitary Examination, Surgery, Obstetrics and Internal Animal Disease. E-mail: elmanrzn@gmail.com Концевая Светлана Юрьевна, д. в. н., профессор каф. ВСЭ, хирургии, акушерства и ВБЖ Kontsevaya Svetlana Yu., Doctor of Veterinary Sciences, Professor of the Dept. of Veterinary-Sanitary Examination, Surgery, Obstetrics and Internal Animal Disease
Аннотация. В статье описаны результаты и ход доклинических испытаний препарата местного применения «Эмидонол 5 %» при смоделированных травматических и язвенных (химический ожог) поражениях роговицы у лабораторных крыс. В процессе исследования были получены хорошие результаты и доказана эффективность препарата как в виде монотерапии, так и в составе комплексной терапии. Проведенные исследования показали, что включение препарата «Эмидонол 5 %» в стандартную схему лечения приводит к значительному сокращению сроков эпители-зации и регенерации роговицы.
В ходе проведения эксперимента было разработано и применено на практике устройство для нанесения дозированного поражения роговицы заданной геометрии (химический ожог), что значительно облегчило и ускорило моделирование данной патологии у подопытных животных.
Summary. "Emidonol 5 %" pre-clinical experience's results and course in cases of modelling traumatic and ulcer damage of laboratory rodent's cornea were described in this article. Good results were achieved and effectiveness in treatment by only this drug and in complex therapy was convinced. Conducted researches showed significant reduction of epitelisation duration and corneal regeneration under inclusion of "Emidinol 5 %" drug in standart treatment regimen. An application device for task geometry corneal burn damage was developed and used in practice, and it make easier and faster modelling of this patology in laboratory animals.
Введение
Стремительно развивающаяся ветеринарная офтальмология диктует ветеринарным врачам всё новые стандарты и методы лечения, призванные облегчить и ускорить выздоровление животных с болезнями органов зрения. Среди препаратов с керато-протективным действием особняком стоят антиоксиданты и антигипоксанты, предста-
вителем которых является «Эмидонол 5 %» (3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат-2-этил-6-метил-З-гидроксипиридина дисук-цинат), однако на рынке представлены лишь инъекционная и пероральная лекарственные формы.
Среди всех болезней зрительного анализатора значительная часть приходится на травматические и язвенные поражения рого-
вицы. Несмотря на то, что эффективность применения антигипоксантов при лечении заболеваний роговицы отчасти апробирована и подтверждена, препарат «Эмидонол» является представителем следующего поколения препаратов своей группы, что дает нам повод небезосновательно рассчитывать на его эффективность в офтальмологической практике.
Материалы и методы
Исследования были проведены в 2 этапа в период с 01.07.2017 по 31.08.2017 на базе научно-исследовательской лаборатории на-нотехнологий, кафедры ветеринарно-сани-тарной экспертизы, хирургии, акушерства и внутренних болезней животных и вивария учебно-лабораторных животных ФГБОУ ВО РГАТУ
В качестве объектов исследования были использованы лабораторные крысы породы «Вистар» массой (260-280) г в количестве 32-е головы (самцы и самки). На первом этапе эксперимента опытным животным (16 голов) было нанесено поверхностное механическое, а на втором этапе - химическое повреждение роговицы (еще 16 голов) под общей нейролеп-таналгезией («Золетил 50»), дополнительно применяли инстилляцию в конъюнктиваль-ный мешок «Лидокаином 2 %» .
Для нанесения механической травмы пользовались роговичным трепаном и микрохирургическим сапфировым ножом-расслаивателем. Для нанесения дозированного химического повреждения пользовались спроектированным и сконструированным нами устройством-аппликатором с 0,1 Н №ОН (экспозиция 15 секунд). Визуальный контроль во время операций осуществлялся посредством операционного микроскопа «ЛОМО МХ-ОФ-1». Контроль геометрических характеристик дефекта производили с помощью флюоресцеиновой пробы и штангенциркуля (для высокой точности проводимых измерений). В случаях измерения дефектов диаметром менее 1,0 мм пользовались микрометрической окулярной сеткой, установленной на окуляры стереоскопического микроскопа МБС-1.
Всех животных разделили на 4 группы. Животным первой группы проводили лече-
ние по одной из общепринятых схем - «антисептик - антибиотик - кератопротектор». Из препаратов данных групп наш выбор пал на таких представителей, как «Офтальмо-сан», «Ципровет», «Корнерегель». Данная схема была названа нами «классической». Животным второй группы была назначена та же стандартная схема лечения, но в неё мы включили испытуемый препарат. Третьей группе был назначен препарат «Эмидонол 5 %» в монорежиме. Четвертая группа была плацебо-контролируемой: животным инстиллировали изотонический натрия хлорид (№С1 0,9 %). Выполнение назначений (введение лекарственных препаратов) производилось сотрудниками вивария из обезличенных нумерованных флаконов капельниц. Контроль геометрических характеристик дефекта производили 2 раза в сутки (утро и вечер). Данные заносили в специальный журнал учета. Животных выводили из эксперимента после отрицательной флюоресцеи-новой пробы, то есть после полной эпители-зации дефекта роговицы.
Результаты исследования
В ходе проведения исследования нами было разработано и сконструировано устройство для нанесения дозированного ожогового повреждения роговицы заданной геометрии.
Устройство содержит в себе трубчатый корпус, имеющий волокнистый фетровый наконечник, соединенный при помощи впитывающего жидкость тампона с внутренней камерой, содержащей едкий натр. Изготавливается самим экспериментатором непосредственно перед опытом из фломастера. Для этого фломастер (обязательно с красителем на водной основе) тщательно промывается дистиллированной водой под давлением (при помощи шприца). Фетровый наконечник аккуратно срезается скальпелем под прямым углом (с 1—2 мм отступом от пластмассового корпуса фломастера) Далее при помощи того же шприца устройство промывается 0,1 Н №ОН (вещество и его концентрация зависят напрямую от целей экспериментатора), после чего излишки щёлочи стряхиваются энергичным движением руки
«от себя». После проведённых манипуляций устройство готово к эксплуатации.
Для нанесения ожога на роговицу, лимб или конъюнктиву нужно одной рукой приоткрыть и зафиксировать веки, а другой прислонить устройство к нужным в эксперименте тканям глаза. Время экспозиции регулируется самим экспериментатором. После нанесения химического ожога следует промыть конъюнктивальный мешок изотоническим раствором №С1 и одеть на устройство защитный колпачок.
Следует отметить, что, благодаря капиллярным свойствам стержня, едкий натр не растекается по тканям глаза и не вызывает излишней травмы. В дополнение к этому экспериментатор может сам регулировать как состав и концентрацию раствора, так и время экспозиции. В ходе эксперимента мы использовали 0,1 Н №ОИ и время экспозиции 15 секунд.
В ходе проведения эксперимента с травматическим повреждением роговицы нами были отмечены некоторые закономерности. Через 24 часа мы не выявили достоверной разницы между группой, получавшей лечение по схеме, принятой нами за «классическую», и группой с включенным в эту же схему препаратом «Эмидонол 5 %» (р>0,05). Однако, в это же время, достоверная разница присутствовала между группами крыс, получавших «Эмидонол 5 %» в монорежиме и плацебо (0,9 % №С1), что говорит о наличии определенного терапевтического эффекта у испытуемого препарата. Так, размер дефекта на правом глазу был меньше на 23 %, а на левом - на 24 % при р<0,05 (табл. 1).
Более достоверные данные были получены нами на третьи сутки (спустя 48 часов после начала эксперимента). Разница в размерах дефекта между животными, получавшими «классическую» схему и получавшими таковую с включением в неё препарата «Эмидо-нол 5 %», составила 20 % для правого глаза и 16 % - для левого (р<0,05) (табл. 1).
В результате проведения эксперимента с травматическим повреждением роговицы нами было установлено, что группа опытных животных, получавших лечение в виде комбинации «классической» схемы и испы-
Рис. 1. Результат использования устройства. Положительная флюоресцеиновая проба.
туемого препарата, показала наименьшее время эпителизации дефекта (в среднем 3-е суток). Также группа животных, получавшая испытуемый препарат в монорежиме, показала результаты, значительно превосходящие группу с плацебо - №С1 0,9 % (разница в сроках составила более 2-х суток) (табл. 1).
При моделировании ожогового повреждения роговицы мы столкнулись с тем, что уже на первые сутки средняя разница в морфоме-трических показателях дефекта была достоверна во всех группах (р<0,05).
Интересно было и то, что за первые 24 часа эксперимента размер дефекта у некоторых животных плацебо-контролируемой группы превысил начальные значения: у двух самок и одного самца размер дефекта превышал изначальные 4 мм в среднем на 0,15 мм. У одного самца из группы, получавшей плацебо, дефект составил 4 мм на обоих глазах, что говорит об отсутствии динамики как таковой. По нашему мнению, такое явление вызвано наличием на поверхности большого количества некротизированых тканей, что, в свою очередь, препятствует закреплению нового, здорового эпителия на поверхности стромы и вызывает его слущивание. Таким образом, мы можем говорить об изъязвлении дефекта.
В результате проведения эксперимента с ожоговым повреждением роговицы нами было установлено, что группа опытных животных, получавших лечение в виде комбинации классической схемы и испытуемого препарата, показала наименьшее время эпи-телизации дефекта (в среднем четверо су-
Таблица 1
Динамика эпителизации дефектов роговицы у опытных животных по группам при моделировании травматического повреждения (M±m)
Дата 05.08.2016 06.08.2016 07.08.2016 08.08.2016 09.08.2016 10.08.2016
№ группы OD OS OD OS OD OS OD OS OD OS OD OS
1 М 4,00 4,00 2,18 2,10 0,48 0,45 0,08 0,08
т 0,00 0,00 0,16 0,17 0,12 0,18 0,10 0,13
2 М 4,00 4,00 2,21 2,001 0,102 0,082 - -
т 0,00 0,00 0,19 0,18 0,11 0,13 - -
3 М 4,00 4,00 2,923 2,883 1,45 1,50 0,48 0,47 0,08 0,08 - -
т 0,00 0,00 0,12 0,12 0,16 0,13 0,17 0,15 0,12 0,12 - -
4 М 4,00 4,00 3,85 3,83 3,40 3,38 2,58 2,53 1,65 1,58 0,87 0,83
т 0,00 0,00 0,41 0,37 0,64 0,64 0,96 0,92 1,05 0,92 1,01 0,87
Примечание: 1 - р>0,05 (по сравнению с группой № 1), 2 - р<0,05 (по сравнению с группой № 1), 3 - р<0,05 (по сравнению с группой № 4).
ток). Также группа животных, получавшая испытуемый препарат в виде монотерапии показала результаты, значительно превосходящие группу с плацебо - №С1 0,9 % (разница в сроках составила более 4-х суток) (табл. 2).
В результате проведения серии экспериментов нами было установлено, что препарат «Эмидонол 5 %» эффективен при местном применении для лечения травматических и ожоговых повреждений роговицы. Было выяснено, что препарат «Эмидонол 5 %» в комбинации с классической схемой «антисептик -антибиотик - кератопротектор» дает результаты, превосходящие (в среднем на сутки в эксперименте) таковые без него. Также было выяснено, что испытуемый препарат
влияет на процессы регенерации и эпители-зации в виде монотерапии: разница в сроках эпителизации в сравнении с плацебо составила более 2-х суток при травматическом и более 4-х суток при ожоговом повреждении.
По нашему мнению, на скорость регенеративных процессов исследуемый препарат повлиял опосредованно за счет блокирования активации свободнорадикальных процессов и перекисного окисления липидов клеточных мембран, а также за счет ускорения процессов митотического деления стволовых клеток в лимбальной области.
В ходе эксперимента нами было разработано и сконструировано устройство для нанесения дозированного ожогового повреждения роговицы заданной геометрии, что значитель-
Таблица 2
Динамика эпителизации дефектов роговицы у опытных животных по группам при моделировании химического ожога (M±m)
Дата 12.08.2016 13.08.2016 14.08.2016 15.08.2016 16.08.2016 17.08.2016 18.08.2016
№ группы OD OS OD OS OD OS OD OS OD OS OD OS OD OS
1 М 4,00 4,00 3,30 3,28 2,07 2,07 0,48 0,55 0,03 0,00
т 0,00 0,00 0,19 0,19 0,55 0,51 0,43 0,36 0,07 0,00
2 М 4,00 4,00 2,381 2,402 0,58 0,47 0,07 0,10
т 0,00 0,00 0,32 0,34 0,32 0,27 0,09 0,15
3 М 4,00 4,00 3,82 3,83 3,33 3,37 2,20 2,22 1,17 1,13 0,27 0,20 0,03 0,02
т 0,00 0,00 0,23 0,21 0,22 0,29 0,28 0,36 0,21 0,15 0,25 0,20 0,07 0,04
4 М 4,00 4,00 3,95 3,97 3,67 3,63 3,28 3,28 2,67 2,63 1,75 1,70 1,13 1,10
т 0,00 0,00 0,16 0,14 0,15 0,14 0,20 0,20 0,11 0,12 0,10 0,06 0,09 0,10
Примечание: 1 - р<0,05 (по сравнению с группой № 1).
но ускорило как настоящие, так и будущие эксперименты в данном направлении.
Заключение
Учитывая результаты проведенного исследования, препарат «Эмидонол 5 %» можно рекомендовать для местного использования в виде глазных капель при травматических и воспалительных патологиях переднего отрезка глаза у домашних животных.
Список литературы
1. Кански Д.Д., Менон Д., Еричева В.П. Клиническая офтальмология: систематизированный подход. М. : Логосфера, 2006. С. 144-145.
2. Копаева В.Г. Глазные болезни ; под ред. В.Г. Ко-паевой. М. : Медицина, 2002. 560 с.: ил.
3. Копенкин Е.П. Болезни глаз собак и кошек. М. : ЗооМедВет, 2002. Ч. 1 и 2.
4. Лебедев А.В., Черванев В.А., Трояновская Л.П. Ветеринарная офтальмология. М. : КолосС, 2004. С. 106-108.
5. Макашов А.В. Глазные болезни домашних животных. М. : Сельхозгиз, 1946. С. 144-166.
6. Мельниченко В.И. Антиоксиданты в ветеринарии: новые возможности // Ветеринарная клиника. 2006. № 7.
7. Новиков В.Е., Лосенкова С.О. Фармакология производных 3-оксипиридина // Обзоры по клинич. фармакол. и лек. терапии. 2004.
ПРЕДСТАВЛЯЕМ КНИГУ:
«Ультразвуковое и рентгенологическое исследование брюшной полости мелких домашних животных»
Издательство: ЧОУДПО «Институт Ветеринарной
Биологии», Санкт-Петербург, 2016 Тираж: 500 экз.
Формат: 210 х 297 мм, твёрдый переплет, 760 с. с илл.
Данная монография обобщает многолетний опыт работы сотрудников Института Ветеринарной Биологии в области УЗИ и рентгенодиагностики, а также многолетний опыт проведения курсов повышения квалификации для ветеринарных специалистов по УЗИ и рентгенологии. Кроме текстовой информации, изложенной в доступной форме, книга содержит большое количество иллюстрационного материала: оригинальные схемы, облегчающие понимание сложных процессов, сканы ультразвуковых исследований, рентгеновские снимки, фотографии макро- и гистопрепа-ратов.
Одной из отличительных особенностей данного издания является то, что материал, представленный в книге, дан в сравнительном аспекте. Органы и системы, норма и патология описаны с точки зрения УЗИ, рентгеновского исследования и показаны в виде макропрепаратов.
Книга рассчитана на ветеринарных специалистов, работающих в области ультразвуковой и рентгенологической диагностики, на врачей общей практики, а также студентов, планирующих специализацию в области УЗИ и рентгенодиагностики.
Стоимость:
Розничная цена 1 экз. - 9600 руб.
Для оптовых покупателей - система скидок.
Где купить в Санкт-Петербурге:
Институт Ветеринарной Биологии по адресу: ул. Ораниенбаумская, д. 3-Б (ст. м. "Чкаловская") Т. 812 232-55-92 invetbio@mai1.ru.
По вопросам оптового приобретения книг и журналов издательства ЧОУДПО «Институт Ветеринарной Биологии» обращаться по е-таП: invetbio@mail.ru; т. (812) 232-55-92.
