CC BY
39
УДК 618.21.36:616.523:577.114 Л.М.Колесникова
ОБМЕН ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ГЕРПЕС-ВИРУСНУЮ ИНФЕКЦИЮ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
В работе представлены результаты исследования обмена гликозаминогликанов в периферической крови и гомогенате плацент от женщин, перенесших во время беременности обострение герпесной инфекции. Выявлено повышение содержания кислых гликозаминогликанов (гиалуроно-вой кислоты) и сульфатированных производных (гепарансульфата и хондроитинсульфатов) как в крови, так и в плаценте. Степень выраженности проявлений находилась в прямой зависимости от тяжести заболевания во время беременности.
Ключевые слова: герпес-вирусная инфекция, беременность, гликозаминогликаны.
SUMMARY
L.M.Kolesnikova
THE EXCHANGE OF GLYCOSAMINOGLYCANS IN PREGNANT WOMEN WHO HAD HERPES-VIRUS INFECTION
The results of investigation about the exchange of glycosaminoglycans in the periphery blood and homogenate of placentas of women who had an exacerbation of herpes-virus infection during pregnancy are presented. The rise of acidic glycosaminoglycans (hyaluronic acid) and sulfates derivates (geparansulfate and hondroiti-nesulfates) both in blood and in placenta was found out. The degree of manifestations was in direct dependence on gravity of the disease during pregnancy.
Key words: herpes-virus infection, pregnancy, glycosaminoglycans.
В настоящее время особое внимание привлекает проблема персистирующей герпес-вирусной инфекции, так как частота инфицирования населения земного шара, по данным ВОЗ, составляет, примерно, 100% [1, 3, 5]. Особенно опасными в этом отношении являются рецидивы заболевания в период беременности, так как вирусы герпеса поражают фетоплацентарный барьер, изменяя структурно-функциональные свойства мембранных компонентов, в частности, гликозаминогликанов. Нарушение их синтеза напрямую связано со степенью агрессивности герпесной инфекции. Можно предположить, что изучение обмена гликозаминогликанов позволит лучше представить архитектонику мембран структурных компонентов плаценты, что позволит прогнозировать проявления его структурно-функциональных перестроек при герпесной патологии у беременных.
Целью нашей работы явилось изучение обмена гликозаминогликанов в периферической крови, а также в плаценте женщин, с учетом сроков гестации и выраженности герпесной инфекции.
Материалы и методы исследования
Проводилось исследование периферической крови женщин в I, II и III триместрах, перенесших во время беременности обострение герпесной инфекции. В группу с тяжелым течением заболевания (титр антител к ВПГ-1 1:12800) вошли 45 беременных женщин (по 15 в каждом триместре). С легким течением (титр антител к ВПГ-1 1:3200) - 45 беременных (по 15 в каждом триместре). Контрольную группу составили 45 практически здоровых женщин на тех же сроках гестации. Одновременно обрабатывались плаценты, полученные от женщин с агрессивной герпесной инфекцией (15 случаев) и от женщин с физиологической беременностью, составивших контрольную группу (15 случаев).
Для получения гомогената плодовая часть плаценты (ворсинчатый хорион) срезалась скальпелем небольшими пластинками площадью до 2-3 см и толщиной 1 мм. Кусочки ткани помещали в химические стаканы, содержащие 200 мл физиологического раствора, отмывали от клеток крови, перемешивая на магнитной мешалке в течение 15 мин. и подсушивали на фильтровальной бумаге. Затем ткань растирали пестиком в фарфоровой ступке и гомогенизировали до однородной кремообразной массы, которую в последующем обрабатывали для выделения гликозами-ногликанов по прописи Р.В.Меркурьевой [8]. Полученные экстракты сывороточных и плацентарных гликозаминогликанов разделяли методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле. Оптическую плотность гелевых столбиков определяли с помощью денситометрии исследуемых образцов, а затем рассчитывали их процентное содержание на единицу площади.
Результаты исследования и их обсуждение
Известно, что гликозаминогликаны выполняют особенно важные, сложные функции - «узнавание» клетками других клеток, вирусов, молекул, избирательное пропускание через мембраны, возникновение иммунитета и другое. Приводятся данные о повышении уровня гиалуроновой и хондроитинсерных кислот, с которыми связана регуляция проницаемости плаценты, у женщин с нормально протекающей беременностью. Параллельно отмечено увеличение активности гиалуронидазы, за счет которой и происходит расщепление молекул гиалуроновой кислоты, входящей в состав соединительной ткани, при этом уменьшается вязкость фетоплацентарного барьера, что создает благоприятные условия для обмена веществ между тканями матери и плода [9].
В ходе выполненных исследований установлено перераспределение основных фракций гликозами-ногликанов, как в периферической крови, так и тканях плаценты от женщин с физиологической бере-
менностью и беременностью, осложненной герпесной инфекцией (табл.). Так, при физиологической беременности с увеличением сроков гестации снижался уровень гиалуроновой кислоты: 9,09±0,149% -
I триместр; 7,363±0,191% - II триместр;
5,636±0,541% - III триместр и гепарансульфата в крови: 19,288±0,463% - I триместр; 16,326±0,133% -
II триместр; 13,365±0,903% - III триместр. Содержание гепарина (29,022±1,051% - I триместр;
28,687±0,275% - II триместр; 28,355±1,895% - III триместр) и хондроитин-6-сульфата (18,938±0,798%
- I триместр; 18,783±0,198% - II триместр; 18,627±1,054% - III триместр), наоборот, достоверно не изменялось на протяжении всей беременности. В то же время уровень хондроитин-4-сульфата (от 22,51±1,195% - I триместр; 24,808±0,322% - II триместр; до 27,11±1,048% - III триместр) и кератан-сульфата (5,34±0,777% - I триместр; 5,586±0,25% - II триместр; 5,835±0,657% - III триместр) увеличивался.
У беременных, страдающих герпес-вирусной инфекцией, при титре антител к ВПГ-1 1:12800, показатели гиалуроновой кислоты снижались на протяжении всего срока беременности (7,692±0,12% - I триместр; 6,600±0,289% - II триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. В III триместре наблюдалось статистически достоверное увеличение гиалуроновой кислоты до 7,968±0,653%. Показатели гепарансульфата снижались (12,008±0,061% - I триместр; 12,953±1,227% - II триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. В III триместре наблюдалось увеличение фракции гепарансульфата, по сравнению с показателями контрольной группы (19,733±1,592%). Нами было отмечено повышенное содержание гепарина (33,817±0,528% - I триместр; 32,088±5,655% - II триместр), при этом в III триместре гепарин снижался (22,964±1,771%). Хондроитин-4-сульфат увеличивался (30,154±0,605% - I триместр; 25,143±4,392% - II триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. В III триместре наблюдалось снижение этой фракции (22,509±1,549%), по сравнению с показателями контрольной группы. Хондроитин-6-сульфат во всех трех триместрах достоверно снижался, по сравнению с показателями контрольных групп (16,356±0,854% - I триместр; 16,268±3,246% - II триместр; 15,455±1,018% - III триместр). В то же самое время нами было замечено значительное снижение кератансульфата в I триместре (3,351±0,213%). Во II и III триместрах, наоборот, кератансульфат увеличивался (5,888±0,498% и 8,038±0,456%, соответственно).
Обнаруженное нами изменение содержания гли-козаминогликанов, вероятно, явились следствием значительных повреждений тканевых структур в результате формирующегося окислительного стресса, который снижал защитные свойства ткани и приводил к дальнейшему поражению ее вирусом.
У беременных с герпес-вирусной инфекцией, при титре антител к ВПГ-1 1:3200, обнаруживалось увеличение содержания гиалуроновой кислоты
(10,118±0,09% - I триместр; 7,819±0,098% - II триместр; 13,499±0,513% - III триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. Гепарансульфат повышался (27,59±0,363% - I триместр;
18,737±0,763% - III триместр). Напротив, во II триместре содержание гепарансульфата снижалось до 13,145±0,505%, по сравнению с показателями контрольной группы. Гепарин достоверно понижался на протяжении всего срока гестации (22,469±0,517% - I триместр; 25,98±3,4% - II триместр; 21,342±1,65% -
III триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. Хондроитин-4-сульфат увеличивался (25,583±0,473% - I триместр), по сравнению с показателями контрольной группы. В то же время происходило снижение данной фракции (20,973±3,994%
- II триместр; 20,704±1,553% - III триместр). Хонд-роитин-6-сульфат снижался (9,955±0,399% - I триместр; 18,518±0,76% - III триместр), по сравнению с показателями контрольных групп. В то же самое время показатели этой фракции значительно увеличивались во II триместре (25,42±2,39%). В I триместре отмечено существенное снижение кератансульфа-та (3,258±0,16%), по сравнению с показателями контрольной группы. В то время как с увеличением срока гестации происходило увеличение данной фракции (10,39±1,12% - II триместр; 7,573±0,373% - III триместр).
Многократное увеличение гиалуроновой кислоты, с одной стороны, позволяет говорить о попытке организма беременной сопротивляться проникновению и распространению в нем инфекции, а с другой стороны, о повреждении структуры соединительной ткани, что препятствует проникновению к очагам поражения вирусом герпеса антител, что, в свою очередь, изменяет иммунную защиту.
Одновременно исследовалась плацентарная ткань тех же беременных. В группе женщин с физиологической беременностью были установлены следующие показатели: гиалуроновая кислота -
13,569±1,165%; гепарансульфат - 18,757±1,545%; гепарин - 19,705±0,718%; хондроитин-4-сульфат -
29,114±1,386%; хондроитин-6-сульфат -
18,68±1,252%.
При титре антител к ВПГ-1 1:12800, наблюдалось снижение гиалуроновой кислоты (12,599±0,92%), гепарансульфата (18,727±0,692%), хондроитин-4-сульфата (22,572±1,063%), а так же было отмечено повышение гепарина (23,867±0,624%), хондроитин-6-сульфата
(24,032±1,187%), по сравнению с показателями контрольной группы.
При титре антител к ВПГ-1 1:3200, наблюдалось значительное увеличение гиалуроновой кислоты (16,537±0,431%), гепарина (25,825±0,803%), хондроитин-6-сульфата (22,611±0,583%), незначительно, гепарансульфата (19,452±0,352%), с одновременным снижением хондроитин-4-сульфата
Таблица
Процентное содержание гликозаминогликанов в периферической крови и плаценте у беременных с герпес-вирусной инфекцией (в %)
Группы беременных Титр антител КВПГ Гиалуроновая кислота Г епарансульфат Г епарин Хондроитин-4- сульфат Хондроитин-6- сульфат Кератансульфат
Периферическая кровь
Контроль 9,09*0,149 19,288±0,463 29,022± 1,051 22,51± 1,195 18,938±0,798 5,34±0,777
ХГВИ, I триместр (8-12 недель) 1:3200 10,118±0,09 р<0,01 27,59±0,363 р<0,001 22,469*0,517 р<0,001 25,583*0,473 р<0,05 9,955±0,399 р<0,001 3,258±0,16 р<0,05
1:12800 7,692±0,12 р<0,001 12,008*0,061 р<0,001 33,817*0,528 р<0,001 30,154*0,605 р<0,001 16,356±0,854 р<0,05 3,351*0,213 р<0,05
Контроль 7,363±0,191 16,326 •: 0.133 28,687±0,275 24,808*0,322 18,783±0,198 5,586±0,25
ХГВИ, II триместр (13-24 недели) 1:3200 7,819*0,098 р<0,05 13,145±0,505 р<0,001 25,98*3,4 20,973*3,994 25,42±2,39 р<0,05 10,39±1,12 р<0,01
1:12800 6,600*0,289 р<0,05 12,953±1,227 р<0,05 32,088*5,655 25,143±4,392 16,268±3,246 5,888*0,498
Контроль 5,636+0,541 13,365±0,903 28,355±1,895 27,11± 1,048 18,627±1,054 5,835*0,657
ХГВИ, III триместр (25 -34 недели) 1:3200 13,499*0,513 р<0,001 18,737±0,763 р<0,001 21,342±1,65 р<0,05 20,704*1,553 р<0,001 18,518±0,76 7,573*0,373 р<0,05
1:12800 7,968±0,653 р<0,05 19,733±1,592 р<0,01 22,964*1,771 р<0,05 22,509*1,549 р<0,05 15,455±1,018 р<0,05 8,038*0,456 р<0,05
Плацента
Контроль 13,569 і 1,165 18.757..-: 1,545 19,705*0,718 29,114+1,386 18,68±1,252 -
ХГВИ, III триместр (25 -34 недели) 1:3200 16,537±0,431 р<0,05 19,452*0,352 25,825*0,803 р<0,001 22,714*1,126 р<0,01 22,611±0,583 р<0,05 -
1:12800 12,599*0,92 18,727±0,692 23,867*0,624 р<0,001 22,572* 1,063 р<0,01 24,032±1,187 р<0,01 -
БЮЛЛЕТЕНЬ___________________________________________________________________________________________________Выпуск 30, 2008
(22,714±1,126%), по сравнению с показателями контрольной группы.
При снижении проявлений герпес-вирусной инфекции (титр антител к ВПГ-1 1:3200) картина синтеза гликозаминогликанов выглядит вполне привлекательно, чего не скажешь о высоких титрах - снижение гиалуроновой кислоты, гепарансульфата и хонд-роитин-4-сульфата приводит к снижению защитных и регенеративных функций фетоплацентарного барьера. Что, вероятно, отражается на функциональном состоянии организма плода.
Таким образом, результаты выполненных исследований позволяют охарактеризовать особенности взаимоотношений на уровне действия герпесвирусной инфекции и синтеза гликозаминогликанов, что служит основным критерием выраженности заболевания и, наоборот. Обострение герпесной инфекции во время беременности сопровождается нарушением обмена гликозаминогликанов, как в периферической крови, так и в тканях плаценты (повышение уровней гиалуроновой кислоты и сульфатиро-ванных производных), что способствует изменению структурно-функциональных свойств фетоплацентарного барьера, осложняет течение беременности и развитие плода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Характер дыхательной активности крови у беременных с герпес-вирусной инфекцией
[Т екст]/И. А. Андриевская//Фундаментальные аспекты оценки фетоплацентарной недостаточности при вирусных заболеваниях во время беременности/под ред. акад. РАМН М.Т.Луценко.-Благовещенск, 2008.-С.54.
2. Значение внутриутробного инфицирования центральной нервной системы вирусами простого герпеса в развитии инцефалопатий у детей раннего возраста/Антонов П.В. [и др.]//Арх. патологии.-2003.-Т.65, №4.-С.43-46.
3. Герпес-вирусные инфекции - иммунодефицит-ные заболевания XXI века [Текст]/И.Ф.Баринский// Аллергология и иммунология.-2004.-Т.5, №1.-С.202-203.
4. Факторы и условия, влияющие на процесс инфицирования плода на разных сроках беременности [Текст]/Е.И.Боровкина, И.С.Сидорова, А.А.Во-робьев//Вестник РАМН. -2004.-№ 1. -С.48-50.
5. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика [Текст]/В.А.Исаков, В.В.Борисова, Д.В.Исаков.-СПб.: Лань, 1999.-190 с.
6. Фетоплацентарная система при герпесной инфекции [Текст]/Луценко М.Т. [и др].-Благовещенск: Амурский гос. ун-т, 2003.-200 с.
7. Механизмы изменений иммунной системы у
беременных с герпес-вирусной инфекцией [Текст]/М.Т.Луценко, А.С.Соловьева,
И.А.Андриевская. -Благовещенск: Амурский гос. унт, 2007.-173 с.
8. Электрофоретическое разделение сывороточных мукопротеидов на фракции [Текст]/Р.В.Мер-курьева//Лабораторное дело.-1966.-№12.-С.712.
9. Гликозаминогликаны [[Электронный ресурс]/ В.К.Г ородецкий.-иКЬ: http://www.qolkom.ru/kme/
Поступила 22.10.2008
УДК 612.235:616.053.31:616.523 И.А.Андриевская
ГАЗОТРАНСПОРТНАЯ ФУНКЦИЯ КРОВИ РОЖЕНИЦ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ВО ВРЕМЯ БЕРЕМЕННОСТИ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
В работе представлены данные исследования газотранспортной функции периферической крови рожениц при герпесной инфекции. Установлено нарушение процессов эритропоэза, обусловленных развивающимся оксидативным стрессом и недостаточностью функционирования механизмов компенсации кислородной недостаточности (снижение уровня эритропоэтина, нивелирование ответа 2,3-ДФГ, подавление активности глутати-
онредуктазной системы). Следствием выявленных закономерностей нарушения кислородного гомеостаза в организме матери явилось формирование признаков хронической внутриутробной гипоксии у плода, которые снижали адаптивные возможности новорожденных.
Ключевые слова: герпес-вирусная инфекция, беременность, газотранспортная функция крови.
