CC BY
62
Современные проблемы науки и образования. - 2015. -№2; иКЬ:Нир//ккк.$с1епсе-ейисаИап.ти/122-17481
5. Леванова, О. А. Особенности размеров женского таза в зависимости от типа телосложения и роста / О. А. Леванова, Л. М. Железнов // Морфология. - 2016. - Т. 149, № 3. - С. 123.
6. Медведев, М. В. Ультразвуковая фетометрия: справочные таблицы и номограммы / Под ред. М. В. Медведева. - М.: Реальное Время, 2009. - С. 19-24.
7. Николенко, В. Н. Антропометрический метод: некоторые анатомо-клинические параллели / В. Н. Николенко, Д. Б. Никитюк, Т. Ш. Миннибаев,
С. В. Чава // Журнал практической и теоретической биологии и медицины. - 2013. - Т. 12, № 1. - С. 233-237.
8. Томаева, К. Г. Течение беременности и ее исход у женщин с различными типами телосложения : автореф. дис. ... канд. мед. Наук / К. Г. Томаева. -СПб., 2011. - С. 14-17.
9. Шатрова, О. В. Особенности течения родов у женщин различных соматотипов / О. В. Шатрова, Т. А. Макаренко, В. Б. Цхай, В. Г. Николаев // Материалы IV Международного конгресса по инте-гративной антропологии. - СПб. : Изд-во СПБГМУ, 2002. - С. 408-410.
УДК 611-018.7:612.018:616-022.1:616.45-001.1/3
А. Н. КОЗЛОВА, А. А. СТАДНИКОВ
О ВЛИЯНИИ ОКСИТОЦИНА НА СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ РЕОРГАНИЗАЦИЮ НЕЙРОСЕКРЕТОРНЫХ КЛЕТОК ГИПОТАЛАМУСА В УСЛОВИЯХ КОМБИНИРОВАННОГО СТРЕССА
ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России A. N. KOZLOVA, A. A. STADNIKOV
ON THE EFFECT OF OXYTOCIN ON THE STRUCTURAL AND FUNCTIONAL REORGANIZATION OF NEUROSECRETORY CELLS OF THE HYPOTHALAMUS UNDER CONDITIONS OF COMBINED STRESS
Orenburg State Medica l University
РЕЗЮМЕ
Целью исследования было выявление влияния окси-тоцина на структурно-функциональные изменения в нейросекреторных клетках супраоптических ядер гипоталамуса 30 крыс, подвергавшихся эмоционально-болевому стрессу с последующим интратрахеальным введением взвеси кишечной палочки и крыс, получавших внутримышечно окситоцин после каждого сеанса стрессирования и заражения бактериями. Супраоп-тические ядра гипоталамуса были изучены методами световой, электронной микроскопии, иммуногисто-химии. Исследования показали, что при сочетанном воздействии стрессорных факторов происходит снижение синтетических процессов и активизация процессов, ведущих к функциональному истощению и дегенерации нейросекреторных клеток супраоптических ядер гипоталамуса и гибели их апоптозом. У животных, получавших окситоцин на ультраструктурном уровне в НСК наблюдалась активизация и преоблада-
Козлова Алина Николаевна - к. м. н., доцент кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России; тел. (3532) 77-22-75; e-mail: [email protected]
Стадников Александр Абрамович - д. б. н., Заслуженный деятель науки РФ, заведующий кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России; тел. (3532) 77-22-75
ние репаративных процессов над деструктивными. В супраоптических ядрах наблюдалось увеличение количества клеток в фазах начала синтеза, накопления и выведения нейросекрета и снижение количества дегенерирующих форм при высоких показателях функциональной активности клеток и уменьшения количества клеток с положительной реакцией на белок р53 и Tunel-реакцией. Полученные результаты позволяют сделать вывод о положительном действии окситоци-на на течение защитно-приспособительных реакций в нейросекреторных клетках супраоптических ядер гипоталамуса и адекватного функционирования при истощающем действии комбинированного стресса.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: НЕЙРОСЕКРЕТОРНЫЕ КЛЕТКИ, СУПРАОПТИЧЕСКИЕ ЯДРА ГИПОТАЛАМУСА, СТРЕСС, ОКСИТОЦИН.
SUMMARY
The purpose of research was to determine the effect of oxytocin on structural and functional changes in neurose-cretory cells of the hypothalamus supraoptic nucleus of 30 rats subjected to emotional-painful stress, with the subse-quentintratrachealintroduction of E. coli suspension and rats received intramuscularly oxytocin after each session of stress and infections with bacteria. Supraoptic nuclei of the hypothalamus were studied by light, electron microscopy, immunohistochemistry. Studies have shown that the combined effects of stressor factors, there is a decrease in
synthetic processes and intensification processes, leading to functional exhaustion and degeneration of the neurosecretory cells of supraoptic nuclei of the hypothalamus and their death by apoptosis. In animals treated with oxytocin at the ultrastructural level in the neurosecretory cellswas observed an increase and predominance of reparative processes over the destructive. In supraopticus nuclei, an increase in the number of cells in phases of the beginning of the synthesis, accumulation and excretion of the neurosecretion and decreasing the number of degenerating forms, with high level of functional activity of cells and reduce the number of cells positive for p53 protein and Tunel-reaction. The obtained results allow to conclude about the positive effect of oxytocin on the course of protectively-adaptive reactions in cells supraop-ticusneurosecretory nuclei of the hypothalamus and proper functioning at the exhausting action of the combined stress.
KEY WORDS: NEUROSECRETORY CELLS, SUPRAOPTIC NUCLEI OF THE HYPOTHALAMUS, STRESS, OXYTOCIN.
Среди важнейших регулирующих систем организма роль нейроэндокринной системы в поддержании гомеостаза, обеспечении процессов адаптации и компенсации нарушенных функций через нейротрансмит-терные и гуморальные механизмы считается бесспорной [2, 3]. Гипоталамусу в концепции стресса отводится роль «стартера», запускающего работу стресс-системы, прежде всего посредством эндокринных механизмов [5]. Однако наряду со структурами, обеспечивающими регуляцию формирования ответной реакции на стрессорное воздействие, в гипоталамусе включаются ограничительные стресс-лимитирующие гуморальные механизмы. Такая роль отводится одному из нонапеп-тидных гормонов - окситоцину (ОТ). На сегодняшний день практически отсутствуют исследования, посвященные изучению влияния ОТ на защитные механизмы в нейросекреторных клетках супраоптических ядер гипоталамуса в условиях стресса.
ЦЕЛЬЮ НАСТОЯЩЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ явилось определение закономерностей структурно-функциональных изменений в супраоптических ядрах гипоталамуса крыс при интратрахеальном введении кишечной палочки на фоне длительного эмоционально-болевого стресса (ЭБС) и влияния окситоцина на выявленные изменения.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа была выполнена на 30 белых беспородных крысах самцах массой 250-270 г. Эксперименты с животными проводились в соответствии с «Правилами по обращению, содержанию, обезболиванию и умерщвлению экспериментальных животных» (МЗ СССР, 1877 г.; МЗ РСФСР, 1977 г.) Животные были поделены на 3 группы. Контролем служили крысы (n=10), которым интратрахеально ввели взвесь суточной агаровой
культуры штамма кишечной палочки (E. coli А37) в дозе 200 млн микробных тел в 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия. В первую опытную группу вошли крысы (n=10), у которых вызывали эмоционально-болевой стресс (ЭБС) по О. Desiderato et al. [6] ежедневно по 3 часа в течение 7 суток и на 8-е сутки ввели взвесь суточной агаровой культуры кишечной палочки (E. coli А37) в дозе 200 млн микробных тел в 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия. У животных второй опытной группы (n=10) однотипно со второй вызывали стресс и после каждого сеанса стрессирования вводили внутримышечно по 0,02 ЕД ОТ (фирма «Gedeon Richter»). После введения на 8-е сут. взвеси штамма культуры E. coli А37 продолжали ежедневно вводить в/м ОТ до окончания эксперимента. Животных выводили из опыта путем декапитации, после дачи эфирного наркоза через 1 и 4 сут. после контаминации бактериями.
Объектом исследования служили супраоптические ядра гипоталамуса. Для гистологического исследования ядер гипоталамуса использовали окрашивание препаратов мозга гематоксилином и эозином по Бар-гману. С типичных полей зрения в каждой окраске для иллюстрации находок и морфометрического исследования производили микрофотосъемку каждого ядра гипоталамуса с использованием объектива х40, х100 и окуляра х15.
Для оценки состояния крупноклеточных ядер гипоталамуса определяли процентное соотношение типов секреторных нейронов в парных супраоптических ядрах путем дифференцированного подсчета всех нейросекреторных клеток согласно имеющимся сведениям и классификациям [4].
Определяли типы нейросекреторных клеток:
1-й тип - клетки активно секретирующие, соответствующие фазам накопления и выведения секреторного цикла: НСК со светлым окрашиванием цитоплазмы и увеличением всех основных структур в размерах, расположением ядрышек около ядерной оболочки. Выведение нейросекрета преобладает над синтезом, или синтез и выведение нейросекрета уравновешены.
2-й тип - клетки в состоянии высокой активности или в фазе опустошения (истощения): НСК крупные не содержат секрет.
3-й тип - клетки в состоянии «депонирования» или покоя, что соответствует фазе накопления, при продолжающемся синтезе происходит торможение выведения нейросекрета, НСК с темным окрашиванием цитоплазмы.
4-й тип - клетки в состоянии «физиологической дегенерации»: НСК с темным окрашиванием, угловатой формой тел, пикноморфными ядрами.
Критериями оценки функционального состояния СОЯ являлись: изменение объемов ядер и пе-
рикариона НСК; изменение объемов ядрышек НСК; соотношение ядерно-цитоплазматическое; соотношение ядрышко-ядерное; качественная оценка состояния синтеза нейросекрета в НСК крупноклеточных ядер гипоталамуса белых крыс.
Метод оценки нейросекреторного материала в НСК, как способ выявления функциональных сдвигов ГГНС, рассматривался с позиции качественной характеристики процесса нейросекреции в сочетании с количественным морфометрическим методом.
Для электронно-микроскопического исследования кусочки взятого материала размером 1 мм3 фиксировали в охлажденном 2,5% растворе глюта-рового альдегида на S-коллединовом буфере. Постфиксацию проводили в четырехокиси осмия.
После промывки в нескольких порциях буфера материал подвергали дегидратации в растворах ацетона возрастающей концентрации и заливали в смесь эпона-812 и аралдита. С каждого блока готовили полутонкие срезы (1 мкм) на ультрамикротоме LKB-5 (Швеция) и окрашивали метиленовым синим и основным фуксином по методике Sato T., Shamoto M.
Полутонкие срезы использовали как для ориентации в заточке блоков с целью изготовления ультратонких срезов, так и для качественного и морфометриче-ского анализов тканевой и клеточной организации на световом уровне. Ультратонкие срезы монтировали на медные сетки и подвергали двойному контрастированию растворами уранилацетата и цитрата свинца.
Исследование ультратонких срезов производили на электронном микроскопе ЭМВ 100АК (Украина) при увеличении от х4000 до х40 000. Фотодокументирование производили с использованием фотопластинок «для ядерных исследований». Электронные микрофотограммы изготавливали на фотографической черно-белой бумаге «Унибром 160 БП».
Для иммуноцитохимических исследований использовали парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм, помещенные на стекла Superfrost plus.
Этапы иммуногистохимического определения экспрессии генов р-53, Tunel-реакции проводились соответственно протоколу фирмы-изготовителя с использованием в пункте специфических антител. Срезы инкубировали с антителами к антигену р-53 (фирма «Dako» Дания, моноклональные мышиные антитела, клон DO-7, разведение 1:50), методика TUNEL с использованием набора Apo-BrdU-IHCTM In Situ DNA Fragmentatio Assay Kit (BioVision, USA) использовалась для определения апоптозных клеток. При наличии положительной иммуногистохимической реакции ядра или ядрышки клеток окрашивались в коричневый цвет.
Морфометрическое исследование было проведено в соответствии с принципами системного количественного анализа [1].
Для тканевого морфометрического исследования использовали световой микроскоп Биомед-6 ПР 3 (Биомед, Москва) с цифровой камерой ToupCamera, 5.0 mpx и прилагающегося программного обеспечения к ней. В программе ToupCamera проводилась предварительная калибровка измерительной линейки отдельно для каждого объектива при помощи объект-микрометра. Далее все измерения осуществляли в микрометрах, что не требовало введения дополнительных поправочных коэффициентов.
Полученные материалы были подвергнуты статистической обработке с помощью персонального компьютера IBM PC Pentiumcore 2 duo в программе «Microsoft Excel-2010». Производили подсчет среднеарифметических значений абсолютных и относительных величин (М), ошибок средних величин (м) и стандартных отклонений (s). Для сравнения двух групп данных рассчитывался t-критерий Стьюдента. Различия средних величин признавались статистически значимыми (достоверными) при уровне значимости р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
На светооптическом уровне через 1 сутки после ин-тратрахеального введения бактерий E. coli АЛФА «+» на фоне ЭБС среди НСК СОЯ выявлялись мелкие полигональной формы клетки с базофильной вакуолизи-рованной цитоплазмой перикариона (рис. 1). Гиперх-ромные ядра клеток занимали центральное положение или располагались эксцентрично. Большинство ядер не имели ядрышек. При окраске по методу Баргмана выявлялись НСК с небольшим количеством нейросекре-та или полным отсутствием его в цитоплазме. В НСК, не содержащих нейросекрет, отмечалось появление вакуолей в цитоплазме. Вокруг клеток наблюдалось появление расширенных зон отека и нейронофагии.
При иммуноцитохимическом исследовании на белок р53 отмечалось появление р53-позитивных гли-альных клеток (рис. 2). Методом Tun el выявлялись иммунопозитивные НСК и глиальные клетки (рис. 3).
Через 4 сут. после контаминации бактериями СОЯ были представлены НСК полигональной формы или овально-вытянутой формы, незначительной величины. Отмечалась вакуолизация цитоплазмы, преимущественно в субнуклеарной области. Ядра средней величины занимали положение от центрального до резко эктопированного. Ядрышко, как правило, было эктопировано. При окраске по Баргману нейросекрет выявлялся не во всех клетках, и окраска отличалась различной степенью интенсивности. Часть клеток утрачивали четкие контуры и приобретали черты строения, характерные для деструктивно измененных клеток. Иммуноцитохимический метод Tunel показал увеличение количества иммунопозитивных глиаль-ных и нейросекреторных клеток.
Ультраструктурные изменения протекали на фоне уменьшения объема цитоплазмы клеток (рис. 4). В кариолемме увеличивалось число ядерных пор. Ядра содержали эухроматин, в некоторых наблюдалась концентрация глыбок гетерохроматина вдоль внутренней мембраны. В цитоплазме происходило очаговое набухание и распад цистерн гранулярной эндоплазматической сети, нарушалось упорядоченное расположение полисом, отмечалась гипертрофия элементов пластинчатого комплекса. В немногочисленных митохондриях наблюдались изменения ультраструктуры в виде набухания, фрагментации, распада крист и превращения в вакуоли. Увеличивалось количество лизосом. В клетках происходила очаговая деструкция цитоплазмы, появлялись признаки гомогенизации цитоплазмы, отдельные ее структуры переставали быть различимыми.
Заметно увеличивалось число пикноморфных форм НСК. Ядра утрачивали правильную округлую форму, становились вытянутыми, их объем уменьшался (рис. 5). Ядерная оболочка имела выпячивания и бухты, на внутренней ядерной мембране отмечалось накопление глыбок гетерохроматина. Параллельно с изменениями ультраструктурной организации ядер протекали изменения в цитоплазме, сопровождающиеся увеличением числа лизосом, часть из которых находилась в непосредственном контакте с кариолеммой. Сжатые осмиофильные участки цитоплазмы разделяли расширенные канальцы и лакуны гранулярной эндоплазматической сети. Цитоплазма была вакуолизирована, на местах, где располагались митохондрии, появлялись вакуоли.
Средние показатели процентного содержания различных типов НСК СОЯ гипоталамуса у экспериментальных животных отличались от контрольных показателей во все сроки эксперимента. Содержание НСК СОЯ 1-го типа было меньше показателей контроля в 1-е сут. в 1,3 раза, на 4-е сут. - в 1,7 раза (рис. 6 А). Количество НСК 2-го типа превосходило контрольные показатели в наблюдаемые сроки в 1,4-1,5 раза (рис. 6 Б). Уровень содержания НСК 3-го типа был ниже контрольных значений в 1,3-1,4 раза (рис. 6 В), и наблюдалось превышение количества клеток 4-го типа по сравнению с контролем в 1,6-2 раза (рис. 6 Г).
У животных первой опытной группы через 1 сут. после контаминации средние показатели площадей НСК СОЯ гипоталамуса не отличались от контрольных значений, на 4-е сут. их площадь уменьшалась относительно контрольных показателей в 1,6 раза (рис. 7 А). Показатели площадей ядер НСК СОЯ не отличались от контрольных показателей во все сроки наблюдения (рис. 7 Б). Значения коэффициента ЯЦО превосходили контрольные показатели во все сроки наблюдения в 1,3-1,6 раза (рис. 7 Г).
_ * -А
2
2
*
1
?
Ч? »
Рис. 1 - Фрагмент СОЯ гипоталамуса крысы 1-й опытной группы. 1 сут. 1 - нейронофа-гия; 2 - НСК с признаками дегенеративных изменений. Микрофото. Окраска гематоксилин-эозин. Ок.15, об. 100
Рис. 2 - Фрагмент СОЯ гипоталамуса крысы 1-й опытной группы. 1 сут. Иммуногисто-химическая реакция выявления белка р53. Иммунопозитивные клетки окрашиваются в коричневый цвет. Ок. 15, об. 100
Рис. 3 - Фрагмент СОЯ гипоталамуса крысы 5-й опытной группы. 1 сут. Иммуногистохи-мическая Типе1-реакция. Ок. 15, об. 100
Рис. 4 - Фрагмент НСК СОЯ гипоталамуса крысы 1-й опытной группы. 1 сут. Я - ядро; ПК - пластинчатый комплекс; ЭПС - цистерны эндоплазматической сети; М - митохондрия; В -вакуоль; Х - участки цитоплазмы с признаками хроматолиза. Увеличение 25 000
прилежащими к ним лизосомами. В митохондриях наблюдались незначительные изменения. Встречались клетки с большим количеством круглых небольших митохондрий с плотно упакованными кристами и клетки с небольшим количеством митохондрий. Ядерная оболочка приобретала волнистую форму или формировала одно- и многолопастные выросты (рис. 10).
Рис. 5 - Фрагмент НСК СОЯ гипоталамуса крысы 1-й опытной группы. 1 сут. Я - ядро; ЭПС - расширенные канальцы эндоплазматической сети. М - митохондрия; Л - лизосома. Увеличение 25 000
У животных 2-й опытной группы на микроскопическом уровне во все сроки наблюдения НСК СОЯ гипоталамуса отличались полиморфизмом. Преобладали клетки крупных размеров округлой или овальной формы, гиперхромной базофильной цитоплазмой и светлыми крупными эксцентрично расположенными ядрами с гипертрофированными ядрышками (рис. 8). Клетки одинаковые по форме располагались плотно друг к другу, формируя группы. При окраске по Баргману выявлялись группы менее крупных клеток полигональной формы с ровными четкими контурами и положительной реакцией на нейросекрет по всему объему цитоплазмы.
В СОЯ выявлялись единичные глиальные клетки с положительной Tunel-реакцией. На ультраструктурном уровне преобладали НСК с равномерным распределением эухроматина в ядрах и почти полным отсутствием гетерохроматина, за исключением небольших глыбок гетерохроматина на внутренней мембране ядра. В ядрах многих клеток определялось ядрышко, как правило, крупное с дифференцированным аморфным, фибриллярным и гранулярным компонентами (рис. 9). В кариолем-ме увеличивалось количество ядерных пор с накоплением гранулярного вещества. Встречались клетки без видимых признаков деструкции органелл, практически не обнаруживались явления хроматолиза. В цитоплазме сосредоточено большое число компартментов эндоплазматического ретикулума, на поверхностях которого выявлялись в большом количестве рибосомы. Расширенные цистерны гранулярной эндоплазматической сети и полисомы распределены равномерно по всей цитоплазме и сосредоточены в большом количестве в инвагинациях цитоплазмы вокруг ядра. Отмечались признаки активизации пластинчатого комплекса в виде увеличения размеров гладкостенных крупных пузырьков, количества первичных гранул, расширения диктиосом пластинчатого комплекса. В цитоплазме отмечалось образование миелиноподобных телец с
Контроль
ЭБС+Е.
coli ЭБС+Е.
Рис. 6 - Процентное содержание различных типов НСК СОЯ гипоталамуса крыс при интратрахеальном введении бактерий E. coli АЛФА «+» на фоне ЭБС и ОТ. А - 1-го типа; Б - 2-го типа; В - 3-го типа; Г - 4-го типа. * - различия с показателями контроля достоверны прир<0,05
IM Î*à
1 сут
4 сут
1 сут
4 сут
Контроль — ЭБС+Е. — coli ЭБС+Е. — coli+OT
Рис. 7 - Морфометрические показатели НСК СОЯ гипоталамуса крыс при интратрахеальном введении бактерий E. coli АЛФА «+» на фоне ЭБС и ОТ. А - площадь цитоплазмы; Б - площадь ядра; В - яЯО; Г - ЯЦО. * - различия с показателями контроля достоверны при р<0,05
Рис. 8 - Фрагмент СОЯ гипоталамуса крысы 2-й опытной группы. 1 сут. НСК с положительной гистохимической реакцией. Микрофото. Окраска по Баргману. Ок. 15, об. 100
Рис. 9 - Фрагмент НСК СОЯ гипоталамуса крысы 6-й опытной группы. 1 сут. Я - ядро; ЯШ - ядрышко; СГ - секреторные гранулы; К - кариолемма с порами и скоплением гранулярного вещества; М - митохондрия; Л - лизосома; МПТ - миелиноподобное тельце; ПК - пластинчатый комплекс. Увеличение 20 000
Рис. 10 - Фрагмент НСК СОЯ гипоталамуса крысы 6-й опытной группы. 1 сут. Я - ядро; К - кариолемма образует инвагинации; П - полисомы; ПК - пластинчатый комплекс; М - митохондрия. Увеличение 20 000
Показатели процентного содержания НСК СОЯ 1, 2 и 3-го типов во все сроки наблюдения не отличались от контрольных значений (рис. 6 А, 6 Б, 6 В). Количество НСК 4-го типа в СОЯ было меньше в 1-е сут. по сравнению с контролем в 1,5 раза, к 4-м сут. наблюдалось незначительное увеличение их количества, которое соответствовало контрольным значениям (рис. 6 Г).
Средние показатели площадей НСК СОЯ оставались в пределах показателей контрольных животных во все сроки наблюдения (рис. 7 А).
Средние показатели площадей ядер НСК СОЯ превосходили значения показателей контрольных животных в 1 сут. после контаминации в 1,3 раза и на 4-е сут. не отличались от контрольных значений (рис. 7 Б).
Показатели коэффициента яЯО НСК СОЯ превосходили показатели контрольных животных во все сроки наблюдения в 1,4-1,5 раза (рис. 235 7 В).
Показатели коэффициента ЯЦО были больше в 1 сут. от момента введения бактерий в 1,3 раза по сравнению с контролем и на 4-е сут. не отличались от контрольных значений (рис. 7 Г).
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Анализ ультраструктурной организации НСК у животных 1-й опытной группы показал наличие деструктивных и репаративных процессов на действие патогена при стрессе. В наблюдаемые сроки преобладали клетки с признаками деструкции, выражающиеся в различных стадиях хроматолиза, частичной вакуолизации ядер и цитоплазмы, повреждении внутриклеточных органелл, увеличении количества пик-номорфных форм НСК с необратимыми изменениями ядра и гомогенизации цитоплазмы, появления НСК с положительной реакцией на апоптоз. Структурно-функциональные изменения в НСК в значительной мере обусловлены возникающими нарушениями ней-роглиальных взаимоотношений. Нарушения выражались в повышении проницаемости стенок сосудов, возникновении периваскулярных и перицеллюлярных отеков, усилении нейронофагии. Этим процессам сопутствуют существенные изменения глии, проявляющиеся в форме отека, набухания и апоптоза.
Увеличение числа нейронов, имеющих признаки дегенеративных изменений, отражает нарастание дистрофических процессов и возникновение препятствий на пути выведения нейросекрета. Вследствие выявленных нарушений нейросекреторного цикла возможно поступление в кровь измененного, незрелого нейросекрета.
Развитие дегенеративных изменений в НСК на ультраструктурном уровне при стрессе сопровождалось резким снижением количества активно секретирую-щих клеток, клеток в состоянии покоя или депонирования, на фоне увеличения количества НСК в состоянии опустошения и физиологической дегенерации.
Морфометрические показатели средних значений площадей ядер НСК СОЯ и показателей яЯО не отличались от контрольных значений во все сроки наблюдения, при этом показатели ЯЦО превосходили контрольные цифры на фоне уменьшения средних показателей площадей клеток. Следовательно, клетки
имели небольшой объем цитоплазмы при нормальных размерах ядер, что позволяет сделать предположение об истощении внутриклеточных органелл. Средние показатели яЯО НСК оставались на уровне контрольных показателей, следовательно, сбоя в генетическом аппарате в заданных условиях не происходило, и в перспективе возможно наступление активизации компенсаторных процессов в более отдаленные сроки.
Таким образом, на основании сравнительного анализа содержания различных типов НСК СОЯ гипоталамуса, средних морфометрических показателей НСК и ультраструктурных изменений можно сделать заключение, что при контаминации на фоне стресса происходит выраженное снижение синтетических процессов и значительная активизация процессов, ведущих к функциональному истощению и дегенерации НСК СОЯ.
У животных второй опытной группы действие окситоцина оказало влияние на НСК СОЯ и микроокружение, нивелировало комбинированное действие хронического стресса и бактерий, о чем свидетельствовало улучшение цитоструктуры НСК и глии на микроскопическом и ультраструктурном уровнях. При введении ОТ наблюдалась активизация и преобладание репаративных процессов над деструктивными. На ультраструктурном уровне выявлялись непосредственные признаки активации репаративных процессов, начинающиеся с ядра и распространяющиеся по всему объему клетки, проявляющиеся увеличением доли эухроматина, гипертрофией ядрышек, увеличением протяженности ядерной оболочки посредством инвагинации цитоплазмы, накоплением гранулярного вещества в порах ядерной оболочки. В цитоплазме наблюдалось резкое увеличение числа полисом, значительная выраженность элементов гранулярной ЭПС, появления большого числа лизосом и округлых мелких митохондрий с плотно упакованными кристами. Под действием окситоцина в НСК развивались компенсаторно-приспособительные процессы с ранних сроков наблюдения. Вероятно, в реакции НСК на окситоцин проявился антиоксидантный эффект окситоцина, что согласуется с данными об ингибирующем действии окситоцина на процессы индуцированного перекисно-го окисления липидов при стрессе повышать уровень глютадиона, что позволяет сохранить целостность клеточных мембран и органелл [8, 10].
Ультраструктурные показатели цитопротектор-ного действия окситоцина сочетались со снижением количества дегенерирующих форм НСК, увеличением количества клеток в фазах начала синтеза, накопления и выведения нейросекрета при наличии высоких показателей функционального состояния НСК СОЯ, превышающих не только показатели животных, не получавших окситоцин, но и контрольные показатели.
Воздействие окситоцина сопровождалось увеличением размеров НСК, их ядер, повышением показателей ЯЦО и яЯО, по сравнению с животными, не получавшими окситоцин, что свидетельствует об активизации функциональной активности НСК. Анализ полученных морфометрических показателей позволяет сделать заключение о действии ОТ на генетический аппарат клетки, стимулирующее действие на ядрыш-ковый аппарат, который является показателем активизации синтетических процессов и компенсаторных реакций в ответ на стресс и введение патогена. Повышение секреторной активности НСК под действием окситоцина, вероятнее всего, связано с его влиянием на активизацию репликации и синтеза РНК [7].
Уменьшение количества НСК с положительной Tunel-реакцией и снижение количества глиальных клеток, экспрессирующих белок р-53, служит подтверждением цитопротекторного действия окситоцина [9, 11].
Таким образом, окситоцин оказывает положительное действие на течение защитно-приспособительных реакций в НСК СОЯ и адекватного функционирования при заражении после стресса, оказывающего истощающее действие на НСК СОЯ.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Автандилов, Г. Г. Основы количественной патологической анатомии / Г. Г. Автандилов. - М. : Медицина, 2002. - 240 с.
2. Акмаев, И. Г. Нейроиммуноэндокринология гипоталамуса / И. Г. Акмаев, В. В. Гриневич. - М. : Медицина, 2003. - 168 с.
3. Поленов, А. Л. Морфофункциональная организация нейросекреторных клеток гипоталамуса / А. Л. Поленов // Нейроэндокринология. - СПб.: Медицина, 1993. - С. 139-187.
4. Поленов, А Л. Морфофункциональная организация нейросекреторных клеток гипоталамуса /
A. Л. Поленов // Нейроэндокринология. - СПб.: РАН, 1993. - Ч. 1. - С. 31-70.
5. Стадников, А. А., Бухарин О. В. Гипоталами-ческая нейросекреция и структурно-функциональный гомеостаз про- и эукариот (морфологические основы реактивности, пластичности и регенерации) / А. А. Стадников, О. В. Бухарин. - Оренбург : ОрГМА, 2012. - 296 с.
6. Desiderato, O. Development of gastric ulcer in rats following stress termination / Desiderato O., Mac Kinnon J. R., Hisson H. // J. Comp. Physiol. Psychol. - 1974. - V. 87. - № 2. - Р. 208-214.
7. Detillion, C. E.. Social facilitation of wound healing / Detillion, C. E., Craft T. K. S., Glasper E. R., Prendergast
B. J., DeVries A. C. // Psychoneuroendocrinology. -2004. - V. 29. - № 8. - P. 1004-1011.
8. Iseri, S. O. Oxytocin protects against sepsis-induced multiple organ damage: role of neutrophils / Iseri S. O., Sener G., Saglam B., Gedik N., Ercan F., Yegen B. C. // J. Surg Res. - 2005. - V. 126. - № 1. - P. 73-81.
9. Kazuhide, T. Protein synthesis—dependent cytoplasmic translocation of p53 protein after serum stimulation of growth-arrested MCF-7 cells / Kazuhide T., Hidetoshi S., Sumimoto K., Tetsuo O. // Molecular Carcinogenesis. - 1993 - V. 8. - № 1. - P. 58-66.
10. Tsutsui, H. Oxidative stress and heart failure / Tsutsui H., Kinugawa S., Matsushima S. // Am J. Physiol Heart Circ Physiol. - 2011. - V 301. - № 6. - P. 21812190.
11. Xinwei, L. Cytoplasmic expression of p53 protein and its morphological features in salivary gland lesions / Xinwei L., Tatsuo T., Shumin W., FarzanaS., Zhaoyuan W., Fumihiko S. // Journal of Oral Pathology&Medicine. -1995. - V 24. - № 5. - P. 201-205.
УДК 611.41:616.411-089.87
К. Н. СТРОКИН1, С. В. ЧЕМЕЗОВ2
ЭКТОПИЧЕСКАЯ ТКАНЬ СЕЛЕЗЕНКИ ПОСЛЕ ПЕРЕНЕСЕННОЙ СПЛЕНЭКТОМИИ (СЛУЧАЙ ИЗ ПРАКТИКИ)
1 - ООО «МРТ-диагностика», г. Оренбург
2 - ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России K. N. STROKIN1, S. V. CHEMEZOV2
ECTOPIC SPLEEN TISSUE AFTER UNDERGOING SPLENECTOMY (CASE STUDY)
1 - LLC «MRI diagnosis», Orenburg
2 - Orenburg State Мedical University
РЕЗЮМЕ
Представлены материалы об увеличении эктопической ткани селезенки на фоне перенесенной посттравматической спленэктомии, варианты анатомического строения селезенки и причины развития спленоза.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: СЕЛЕЗЕНКА, СПЛЕНЭКТОМИЯ.
SUMMARY
The materials on the increase in ectopic tissue of the spleen on the background of suffering post-traumatic splenectomy, variants of the anatomical structure of the spleen and the reasons for the development of splines.
KEY WORDS: SPLEEN, SPLENECTOMY.
В кабинет магнитно-резонансной томографии был направлен пациент С., 55 лет, для проведения дифференциальной диагностики объемного образования размерами 4,5х5,3 см в левой подреберной области, обнаруженного при проведении ультразвукового исследования органов брюшной полости. Врач ультразвуковой диагностики ставил предположительный диагноз «новообразование левого надпочечника».
В ходе проведения магнитно-резонансного исследования (Symphony Maestro Class, 1.5 Tesla, Германия) 10.10.2016 г. выявлено дополнительное объемное об-
Строкин Кирилл Николаевич - врач-рентгенолог; тел. 79501879907; е-шаИ: [email protected]
Чемезов Сергей Всеволодович - Заслуженный работник высшей школы РФ, д. м. н., проф., заведующий кафедрой оперативной хирургии и клинической анатомии; тел. 8 (3532) 77-93-86; е-шай: [email protected]
разование в ложе удаленной в 2006 г. селезенки с четкими ровными контурами, размерами: 4,0х4,8х5,2 см, не связанное с органами брюшной полости и забрю-шинного пространства. По характеру сигнальных характеристик оно гипоинтенсивно, относительно печени на нативных Т1 ВИ и изогиперинтенсивна на нативных Т2 ВИ - аналогичного ткани селезенки, обнаружено наличие питающего сосуда, отходящего от селезеночной артерии. Заключение: вероятнее всего, эктопированная ткань селезенки (спленоз). С учетом наличия питающего сосуда из бассейна селезеночной артерии возможна добавочная селезенка.
ОБСУЖДЕНИЕ.
Спленоз является аутотрансплантацией селезеночной ткани, как правило, в результате травматического разрыва селезенки или спленэктомии.
Средняя продолжительность промежутка времени между травмой и возникновением брюшного или тазового спленоза составляет около 10 лет (от 5 мес. до 32 лет). В среднем период возникновения грудного спленоза (расположения дополнительной ткани селезенки в грудной полости) составляет 21 год (от 3 до 45 лет). Грудной спленоз обычно появляется при разрыве селезенки, сопровождающемся одновременной травмой диафрагмы, и наблюдается значительно реже. Подкожный спленоз - редкое состояние, патогенез которого, возможно, объясняется механической имплантацией. Во всех случаях, когда он наблюдался, имели место хирургическое вмешательство или посттравматические рубцы. Важно отличать спленоз от добавочных долек селезенки, так как оба состояния являются проявлениями эктопической ткани
