CC BY
8
Выводы
1. При трансплантации асцитного рака Эрлиха мышам, получавшим с кормом уже ранее применявшиеся консерванты — бисульфит натрия и бензойную кислоту, число развившихся опухолей было наименьшим. Длительность жизни этих мышей была наименьшей, а объем асцитиче-ской жидкости — наибольшим. Это свидетельствует о большей злокачественности развившихся у них опухолей по сравнению с контрольными мышами.
2. Процент развившихся опухолей у мышей, получавших сорбино-вую кислоту и низин, а также степень ее злокачественности были такими же, как и у контрольных мышей.
ЛИТЕРАТУРА
Игнатьев А. Д. Вопр. пит., 1965, № 3, с. 61. — D е u е 1 Н. J., А 1 f i n - S 1 a -t a r R„ W e i e C. S. et al„ Food. Res., 1954, v. 19, p. 1. — F i t z h и g h O. G„ Knudsen L. F., Nelson A. A., J. Pharmacol, exp. Ther., 1946, v. 86, p. 37. — H о s i n о. Цит. J. Hartwell. Survey of Compounds Which Have bun Tested for Carcinogenic activity. Washington, 1951, p. 54. — Kieckebusch W., Lang K., Arzneimittel.-Forsch., 1960, Bd 10, S. 1001, —Lang K., Ibid., S. 997, —Locket t M. F„ N a toff I. L., J. Pharm. Pharmacol., 1960, v. 12, p. 488. — Morgan A. F„ Am. J. publ. Hlth., 1935, v. 25, p. 328. — W a x t e r S, Tabar P., M e 1 с h e r L., Cancer Res., 1953, v. 13, p. 276. — Waxier S., J. nat. Cancer. Inst., 1954, v. 14, p. 1253. — Idem, Stanford med. Bull., 1957, v. 15, p. 26. — Idem, Am. J. clin. Nutr., 1960, v. 8, p. 760.
Поступила 8/VII 1964 r.
EFFECT OF CERTAIN FOOD CONSERVANTS ON THE DEVELOPMENT OF MALIGNANT PROCESSES IN MICE
A. A. Diner man, A. D. Ignatiev
In tests performed over 365 mongrel mice of both sex was studied the effect of certain food conservants (sodium bisulfite, benzoic acid, sorbis acid, nizine) on the development of ascetic Erlich cancer. Those mice, that received sodium bisulfite and benzoic acid, presented a higher percentage of developed tumours, a shorter life length and, a larger amount of ascetic fluid than the mice, receiving sorbic acid and nizine as well as the control animals. The fattening caused by the conservants had no effect on the development of the malignant processes.
УДК 61S.778.4-099-092.259
О ТОКСИЧЕСКОМ ДЕЙСТВИИ СЕВИНА НА ЖИВОТНЫЙ ОРГАНИЗМ
М. Н. Рыбакова Институт питания АМН СССР, Москва
В ближайшее время предполагается широко использовать в борьбе с вредителями продовольственных культур инсектициды—производные карбаминовой кислоты. Наиболее перспективным препаратом из этой группы является севин (1-нафтил-Ы-метилкарбамат)—кристаллический порошок кремового цвета, стабильный при хранении, с температурой плавления 142°, слабо растворимый в воде (0,03%) и умеренно в органических растворителях (до 40%).
Для использования в сельскохозяйственном производстве севин выпускают в виде смачивающихся порошков (30—80%), дустов (5—50%), концентрированных суспензий и гранул с различным содержанием ак-тивнодействующего вещества. Севин представляет собой инсекто-акари-
цид контактного и кишечного действия. Широкий спектр действия и относительно малая токсичность его для млекопитающих — основные факторы, объясняющие быстрое распространение севина. Токсичность этого препарата рассматривалась в литературе в основном при непродолжительном действии на животный организм больших доз его. Установлено, что он вызывает у подопытных белых крыс и мышей изменение активности холинэстеразы сыворотки крови, внутренних органов, нарушение функции печени и почек (Carpenter и соавторы; Н. В. Хомич; Ю. А. Морейнис и И. М. Эстрин; Н. И. Жаворонков, и др.). Севин в больших дозах, по данным В. И. Вашакидзе, обусловливает функциональные изменения в половых железах крыс-самок и самцов. Под действием севина изменяется иммунологическая реактивность организма свиней и крупного рогатого скота (О. А. Малинин).
Однако такая важная система организма, как нейро-эндокринная, осталась вне поля зрения многих исследователей. Крайне слабо освещено в литературе и влияние малых доз этого пестицида на животный организм.
Стремясь восполнить этот пробел, мы изучали влияние малых доз севина на нейро-эндокринную систему с применением тестов, характеризующих функциональное состояние эндокринных желез — подвижность сперматозоидов у крыс-самцов, эстральный цикл крыс-самок методом вагинальных мазков (Я. М. Кабек). Состояние гонадотропной функции гипофиза определяли по методу Ашгейм-Цондека. Тест-объектом служили инфантильные мыши-самки весом б—7 г. В надпочечниках исследовали содержание аскорбиновой кислоты (методом Mindlin и Butler). Опыты были поставлены на 272 беспородных белых крысах и 80 мышах обоего пола. Для этого использовали чистый препарат севина (100% по действующему началу), который вводили подопытным животным пер-орально в виде масляных растворов. Контрольные животные получали чистое подсолнечное масло.
Верхние параметры токсичности севина определяли в острых опытах на 80 самках белых мышей и 48 самках белых крыс. Препарат вводили однократно в масляном растворе перорально с помощью зонда в дозах от 200 до 800 мг/кг. Наблюдение над животными вели 14 дней. Результаты опытов были обработаны статистическим методом пробит-анализа по Литчфильду и Уилкоксону. Найденные при этом среднесмертельные дозы (LD50) севина составили 437,5±70,6 мг/кг для белых мышей и 515±79,2 мг/кг для крыс.
В условиях подострого опыта (продолжительностью 50 дней) севин вводили ежедневно в дозе 50 мг/кг (0,1 LD50) 32 белым крысам (самки весом 120—150 г и самцы весом 180—200 г). Такое же число животных было использовано в контрольных группах.
В хроническом опыте вводимыми дозами севина были: первая доза 7 мг/кг веса тела (1-я группа); вторая доза, соответствующая 10 мг/кг, определялась в количестве 14 мг/кг (2-я группа); третья доза севина составляла 70 мг/кг, т. е. была в 10 раз выше минимальной (3-я группа). В каждой группе, включая и контрольную, 4-ю, было по 24 самки (с начальным весом 90—100 г) и 24 самца (с начальным весом 120— 130 г). Всего в опыте использованы 192 белые крысы обоего пола. Продолжительность хронических опытов составляла 12 месяцев.
Все исследования мы проводили одновременно на животных опытных и контрольной групп в хроническом опыте через 3, 6, 9 и 12 месяцев.
Судя по результатам подострого эксперимента, севин в применяемой дозе (50 мг/кг) оказывал выраженное токсическое действие на организм животных. В частности, обнаружилось некоторое отставание веса тела подопытных животных (на 8—10%) и прогрессирующее угнетение активности холинэстеразы (составившее в конце опыта в среднем 41% для •ацетилхолинэстеразы и 27% для бутирилхолинэстеразы). Под влиянием
севина достоверно снижался уровень аскорбиновой кислоты в надпочечниках животных (Р<0,001), а также нарушалась функция половых желез. Так, у самцов отмечалось ограничение времени подвижности сперматозоидов (в среднем на 40,4% по сравнению с контролем). Угнетение астрального цикла самок крыс выразилось в удлинении его продолжительности (в среднем на 11,3%), увеличении фазы диэструса (в среднем на 50%) и некотором уменьшении продолжительности периода течки (1,05 дня против 1,34 в контроле).
Установлено также, что изучаемый препарат вызывает увеличение выделения гонадотропных гормонов гипофиза у инфантильных мышей (увеличение у них веса яичников на 20%, а матки на 41% по сравнению с контролем).
Кроме того, у подопытных животных под воздействием севина увеличивался вес надпочечников (20%) и печени (28%).
Из данных подострого (50-дневного) опыта следует, что пестицид, вводимый в дозе 50 мг/кг, оказывал токсическое действие на организм теплокровных животных, приводя к нарушению функции некоторых эндокринных желез.
В результате хронических (12 месяцев) исследований установлено, что севин в различных дозах (7, 14 и 70 мг/кг) вызывал выраженные симптомы интоксикации. Эти изменения были особенно заметны, когда применялись большие дозы севина (70 мг/кг). Помимо того, наиболее выраженные изменения в общем состоянии подопытных животных, в весе их тела и показателях, характеризующих функциональное состояние различных органов и систем, выявлялись при действии препарата в конце опыта (во всех опытных группах).
Следует отметить, что севин, применяемый в малых дозах (7 и 14 мг/кг), не вызывал заметных сдвигов в общем состоянии подопытных животных. Они лишь незначительно (в среднем на б—8%) отставали в весе от контрольных животных, тогда как при больших дозах (70 мг/кг) наблюдалось статистически достоверное снижение веса ^¿0,001) на всем протяжении опыта.
В хроническом опыте подтвердились данные литературы и результаты нашего подострого опыта, свидетельствующие о том, что выраженное ацетилхолинэстеразное действие севина проявляется только под влиянием его больших доз. Так, если при дозе севина 70 мг/кг угнетение активности холинэстеразы в конце опыта составляло в среднем 94%, то при действии меньших доз (14 мг/кг) оно составляло в среднем 32,5%; при дозе же 7 мг/кг к концу опыта активность холинэстеразы оставалась на уровне, близком к контролю (снижалась на 3,3%). Следовательно, при длительном введении пестицида в малых дозах (7 мг/кг) активность холинэстеразы, по-видимому, не может служить показателем токсического действия севина.
При изучении влияния севина на эндокринную систему в надпочечниках обнаружено увеличение веса: при воздействии малых доз (7 и 14 мг/кг) на 15—30% и больших доз (70 мг/кг) на 43% (по сравнению с контролем). Морфологическое изучение структуры и функции надпочечников показало, что препарат можно рассматривать как некоторый стимулятор функции их коры, преимущественно пучковой зоны. При воздействии севина в малых дозах (7 мг/кг) изменения в надпочечниках выразились в некотором расширении клубочковой зоны с наличием в ней фигур митотического деления. Отмечалось укрупнение клеток пучковой зоны с наличием крупных ядер и двухъядерных клеток (рис. 1). Гистологическая картина надпочечника контрольной крысы представлена на рис. 2. При окраске на липиды определялось некоторое увеличение их по сравнению с контролем. При больших дозах севина эти изменения были выражены резче. Содержание аскорбиновой кислоты на надпочечниках крыс оказалось несколько сниженным при малых дозах севина
Рис. 1. Надпочечник крысы при введении ей севина в дозе 7 мг/кг. Клубочко-вая зона расширена за счет пролиферации клеточных элементов. В пучковой зоне ясно отмечается полиморфизм ядер наряду с увеличением самих клеток.
Окраска гематоксилин-эозином.
Ув.: ок. 5Хоб. 50.
Рис. 2. Надпочечник контрольной крысы. Видна капсула, клубочковая и пучковая зоны нормального строения.
Окраска гематоксилин-эозином. Ув.: ок. 5Хоб. 50.
(7 и 14 мг/кг), однако это снижение было статистически недостоверным (Р>0,5 и >0,25).
Данные хронического опыта по выявлению подвижности сперматозоидов у животных, получавших севин, приведены в таблице.
У животных, получавших севин, снижалось время подвижности сперматозоидов по сравнению с контролем, даже при воздействии малых доз препарата (7 мг/кг).
Изучение морфологической структуры семенников крыс, которым вводили севин, позволило установить изменения в структуре семенных
Изменение подвижности сперматозоидов у животных, получавших севин (в минутах)
Группа животных
и к
5 3 т я
Срок наблюдения (в месяцах)
6 9 12
М±т Р М±т Р М±т Р
35,8±0,98 32,8±0,71 22,6 ± 0,66 37,6± 1,23 <0,25 <0,01 <0,001 33.5 ± 0,87 30,3 ± 0,84 16,0±0,96 36,0± 1,06 <0,1 <0,002 <0,001 31,5±0,66 25,8±0.75 10,6±0,66 40,6±0,71 <0,001 <0,001 <0,001
1-Я
2-я
3-я
Контроль ная
канальцев, вызвавшие нарушение цикла сперматогенеза, особенно значительное при больших дозах пестицида (70 мг/кг). В семенниках крыс при действии малых доз его (7 мг/кг) встречался отек интерстициальной ткани, наблюдалась десквамация сперматогенного эпителия с деструкцией паренхимы, в некоторых канальцах было уменьшено количество сперматогоний и сперматоцитов первого и второго порядка и т. д. Но эти изменения носили сугубо очаговый характер, так как наряду с ними имелись семенные трубочки совершенно нормального строения.
Влияние пестицида на половые железы крыс-самок сказывалось в угнетении астрального цикла, особенно резко выраженное при действии большой дозы (70 мг/кг). При этой дозе продолжительность цикла по сравнению с контролем увеличивалась в среднем на 70%. Меньшие дозы севина (7 и 14 мг/кг) вызывали увеличение средней продолжительности полового цикла соответственно на 10 и 20%. Сопоставляя продолжительность отдельных стадий цикла у животных, получавших севин, можно было отметить, что чем дольше вводился препарат, тем больше удлинялся период межтечки. Подобное увеличение достигало максимума в конце опытного периода (12 месяцев), составляя в 1-й группе 37,4% и во 2-й 58,5%; в 3-й группе фаза диэструса увеличивалась более чем в 2 раза по сравнению с контролем. Наоборот, фаза эструса полового цикла несколько уменьшилась. В связи с этим у подопытных крыс-самок уменьшалось общее число циклов, приходившихся на каждую из них в течение месяца в период исследования.
Морфологическое изучение яичников крыс, получавших севин, показало, что количество желтых тел в них увеличилось по сравнению с контролем, причем при малой дозе препарата (7 мг/кг) их было несколько меньше, чем в яичниках крыс, которым вводили севин в больших дозах. Количество атретических фолликулов также возросло.
Ввиду того что изменения в половых железах функционально зависят от деятельности аденогипофиза, мы изучали функциональное состояние его гонадотропной активности путем введения эмульсии исследуемых гипофизов подопытных крыс инфантильным мышам-реципиентам. Затем у них определяли степень возрастания относительного веса полового аппарата (яичники, матка). С 6-го месяца воздействия севином нарушилось выделение гонадотропных гормонов из аденогипофиза, сопровождающееся ускорением полового созревания инфантильных мышей-самок, что выражалось значительным увеличением веса яичников и матки по сравнению с состоянием половой функции мышей, получавших эмульсию гипофиза контрольных животных. Так, при малых дозах севина (7 и 14 мг/кг) вес яичников увеличился в среднем на 20—33% и вес матки на 48—50% (по сравнению с контролем). При действии больших доз пестицида (70 мг/кг) увеличение веса полового аппарата было еще значительнее (вес яичников возрос на 51,5%, вес матки —на 123,3%).
Таким образом, изучение влияния севина на гонадотропную функцию гипофиза крыс показало, что это вещество даже в малых дозах повышает выделение гонадотропных гормонов гипофиза, от чего, по-видимому, зависят и описанные выше нарушения функции половых желез.
После окончания затравки подопытные животные были забиты, их внутренние органы подвергнуты макро- и микроскопическому изучению. Исследование некоторых паренхиматозных органов (печень, почки) позволило установить, что не только в больших, но и в малых дозах севин вызывает изменения их структуры, характеризующиеся частичным жировым перерождением печеночных клеток, небольшими диапедезнымн кровоизлияниями, полиморфизмом ядер, а в почках—мутным набуханием эпителия канальцев.
Таким образом, изучаемый пестицид при длительном воздействии оказывает выраженное токсическое влияние на подопытных животных, степень развития которого зависит от доз и длительности введения его.
Использованные в опытах показатели функционального состояния эндокринных желез могут быть рекомендованы как чувствительные, позволяющие вскрывать начальные фазы интоксикации организма, что> особенно важно при установлении предельно допустимых количеств изучаемых пестицидов из группы карбаматов.
Установленное в настоящее время предельно допустимое содержание остаточных количеств севина в пищевых продуктах нужно снизить.
ЛИТЕРАТУРА
Вашакидзе В. И. Сообщения АН Грузинск. ССР, 1965, № 2, с. 471. — Жаворонков Н. И. В кн.: Материалы 10-й научной конференции по фармакологии. М., 1966, ч. 2, с. 157. — Кабак Я. М. Практикум по эндокринологии. М., 1945, с. 34, 80.— Морейнис Ю. А., Эстрин И. М. Врач, дело, 1963, № 1, с. 100. — X о м и ч Н. В. В кн.: Гигиена и токсикология новых пестицидов и клиника отравлений. М., 1962, с. 358. — Carpenter С. R., W е i 1 С. S„ Р а 1 m P. Е. et al„ J. Agr. Food Chem., 1961, v. 9, p. 30. — M i n d 1 i n R. L., В u 11 e г A. M., J. biol. Chem., 1938, v. 122, p. 673.
Поступила 3/V 1966 г.
ON THE TOXIC EFFECT OF SEVINE ON ANIMALS M. N. Rybakova
The paper presents experimental data on the study of the effect produced by sevine on animal's body under conditions of acute, subacute and chronic poisoning tests. The finding was that the LD50 of sevine for albino mice amounted to 437.5±70.6 mg/kg and that for albino rats — 515.0±79.2 mg/kg. After long-term introduction (12 months) of sevine in small doses (7—14 mg/kg) its toxic effect on experimental animals was noted in changes developing in the endocrine system. The existing maximum permissible residual content of sevine in the food products should be decreased.
УДК 612.398.5-053.6
РЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМА ПОДРОСТКОВ
ПРИ РАЗЛИЧНОМ СОДЕРЖАНИИ БЕЛКА В РАЦИОНЕ
Т. Н. Хаустова Институт питания АМН СССР, Москва
Для изыскания способов повышения защитных сил организма ребенка существенное значение имеет изучение влияния питания на иммуно-реактивное состояние. В последнее время опубликован ряд работ, посвященных этой проблеме, однако их авторы касались большей частью прививочного иммунитета и ставили свои опыты в основном на животных. Состояние факторов естественного иммунитета исследовано недостаточно; работы, освещающие этот вопрос в отношении детей, единичны.
Мы ставили своей целью изучить иммунореактивные сдвиги у подростков в зависимости от характера питания и, в частности, влияние белков как важнейшей составной части рациона.
Под нашим наблюдением находились 2 группы практически здоровых учащихся школы-интерната в возрасте 14—15 лет: 1-я группа состояла из 14 девочек и 9 мальчиков, а 2-я из 13 девочек и 13 мальчиков. У детей изучали иммунореактивное состояние, динамику их физического развития и заболеваемость. Показателем общефизиологической реактивности была кожно-сосудистая реакция на действие слабого химического раздражителя (3% водный раствор карболовой кислоты) по методике Э. И. Аршавской. Показателем естественного иммунитета служила фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов крови. Фагоцитоз определяли по методике В. С. Гостева. Объектом фагоцитоза являлась взвесь стафилококков (штамм Р-209) в физиологическом растворе. Устанавливали фагоцитарный индекс, т. е. отношение числа поглощенных кокков к 100 нейтрофилам, а также процент фагоцитоза, т. е. количество фагоцитировавших нейтрофилов из 100 подсчитанных лейкоцитов.
