CC BY
36
№ 6 - 2013 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 575.113.2 + 575.22:618.3-06
О РАСПРЕДЕЛЕНИИ АЛЛЕЛЕЙ И ГЕНОТИПОВ ЛОКУСА -1306С/Т ММР-2 У ЖЕНЩИН С ПРЕЭКЛАМПСИЕЙ
В. С. Овчарова
ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский
университет» (г. Белгород)
Статья посвящена новым данным, касающимся распределения аллелей и генотипов локуса —1306С/Т ММР-2 среди женщин с преэклампсией (ПЭ) и в контрольной группе, а также вовлеченности данного полиморфизма в развитие ПЭ. При сравнительном анализе частот аллелей и генотипов полиморфного маркера гена матриксной метеллопротеиназы-2 (—1306С/Т ММР-2) среди женщин с ПЭ разной степени тяжести, а также в контрольной группе установлены статистически достоверные различия. При сравнительном анализе частот аллелей и генотипов беременных с ПЭ и беременных без ПЭ статистически достоверных отличий выявлено не было.
Ключевые слова: преэклампсия, полиморфизм, матриксная металлопротеиназа.
Овчарова Вероника Сергеевна — аспирант кафедры медико-биологических дисциплин факультета лечебного дела и педиатрии ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», г. Белгород, рабочий телефон: (4722) 30-13-83, e-mail [email protected]
Введение. При современном уровне развития медицины преэклампсия (ПЭ) остается одной из важнейших проблем акушерства [1]. Частота этого осложнения практически не снижается на протяжении последних двадцати лет и составляет, по данным разных авторов, 7-20 % [6, 7]. В России ПЭ занимает 3-е место в структуре материнской смертности. Известно, что доля преждевременных родов при ПЭ достигает 20-30 %, перинатальная заболеваемость и смертность в 3-4 раза превышает среднепопуляционную [1].
В настоящее время остается актуальным поиск ранних предикторов развития данной патологии и разработка на основании этих данных четких профилактических мероприятий [6]. Результаты изучения молекулярно-генетических маркеров, участвующих в развитии преэклампсии [2, 4], в настоящее время не позволяют делать однозначных выводов, что диктует необходимость дальнейших исследований в этой
области.
Формирование плаценты является инвазивным процессом и неотъемлемо связано с разрушением базальной мембраны и экстрацеллюлярного матрикса, в котором принимают участие целый ряд ферментов, в том числе матриксные металлопротеиназы (ММП) [3]. В результате формирования плаценты происходит пролиферация клеток и перестройка в локальной сосудистой системе, сопровождающаяся активной деятельностью этих ферментов [5]. Поэтому оценка уровня ММП является не только важным прогностическим фактором, но и мониторинговым показателем, отражающим успешное формирование плаценты. Влияние специфических активаторов или тканевых ингибиторов ММП на их активность приводит к изменению течения всего процесса формирования плаценты. В плаценте представлено множество изоформ ММП, в том числе и металлопротеиназа-2 (—1306С/Т MMP-2) [8].
До конца не изученным остается вопрос вовлеченности ММП в развитии ПЭ. Особенно актуальным при этом является анализ роли генетических факторов металлопротеиназ при ПЭ.
Целью исследования является изучение роли генетического полиморфизма —1306С/Т MMP-2 в формировании ПЭ.
Материалы и методы исследования. Материалом для исследования послужили образцы ДНК 438-ми пациенток с ПЭ и 623-х беременных без ПЭ, выделенные из венозной крови, взятой из локтевой вены пробанда в объеме 5 мл с последующей обработкой методом фенол-хлороформной экстракции. Исследование полиморфизма проводили с помощью методов полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров с последующим анализом полиморфизма гена —1306С/Т MMP-2 методом TaqMan зондов с помощью real-time ПЦР. Средний возраст женщин основной группы составил 27,11 ± 6,42 года (варьировал от 18 до 44 лет), в контрольной — 26,5 ± 6,36 года (варьировал от 18 до 42 лет) (р > 0,05).
Расчет фенотипических и генных частот проводили стандартными методами. Для сравнения частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий х2 с поправкой Йетса на непрерывность. Вычисления производили в таблицах сопряженности 2 х 2.
Результаты и обсуждение. При анализе распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера —1306С/Т MMP-2 среди беременных с ПЭ и в контрольной группе выявлено, что для них выполняется равновесие Харди-Вайнберга (р > 0,05). Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера —1306С/Т MMP-2 выявил преобладание аллеля —1306 С MMP-2 — 76,37 % (78,01 % контроль) и генотипа —1306 СС — 59,82 % (61,80 % контроль). Достоверных различий в концентрациях генетических вариантов по локусу —1306С/Т ММР-2 между беременными с ПЭ и контрольной группой не выявлено (табл. 1).
Таблица 1
Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфного маркера гена ММР-2 у беременных с ПЭ и в контрольной группе
Полиморфизм Аллели, генотипы Контрольная группа (п = 623) Беременные с ПЭ (п = 438) OR (95 % CI) X2, p
П( % П( %
—1306 С/Т ММР-2 (^243865) —1306 С 972 78,01 669 76,37 0,91 (0,74-1,13) X2 = 0,70, р = 0,40
—1306 Т 274 21,99 207 23,63 1,10 (0,89-1,36)
—1306 СС 385 61,80 262 59,82 0,92 (0,71-1,19) X2 = 0,35, р = 0,56
—1306 СТ 202 32,42 145 33,11 0,77 (0,59-1,00) р 2 = = о , 08 ел ,
—1306 ТТ 36 5,78 31 7,07 1,24 (0,74-2,10) X2 = 0,53, р = 0,47
Среди беременных с ПЭ легкой степени тяжести и контрольной группой выявлена достоверная разница в концентрации генотипа —1306СТ ММР-2 (X2 = 4,31; р = 0,04). У беременных с ПЭ I стадии данный генетический вариант (44,58 %) встречается чаще, чем у беременных контрольной группы (32,42 %). Среди беременных с ПЭ средней и тяжелой степени и беременных без ПЭ статистически достоверных отличий выявлено не было (р > 0,05) (табл. 2).
Таблица 2
Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфного маркера гена ММР-2 у беременных с ПЭ и в контрольной группе
Полиморфизм, степень тяжести ПЭ Аллели, генотипы Контрольная группа (п = 623) Беременные с ПЭ (п = 438) ОR (95 % С1) X2, Р
П( % П( %
—1306 С/Т ММР-2 (ге243865) I степень —1306 С 972 78,01 121 72,89 0,76 (0,52-1,11) X2 = 1,91, р = 0,17
—1306 Т 274 21,99 45 27,11 1,32 (0,90-1,93)
—1306 СС 385 61,80 42 50,60 0,63 (0,39-1,03) X2 = 3,39, р = 0,07
—1306 СТ 202 32,42 37 44,58 1,68 (1,03-2,79) X2 = 4,31, р = 0,04
—1306 ТТ 36 5,78 4 4,82 0,83 (0,24-2,51) X2 = 0,01, р = 0,92
—1306 С/Т ММР-2 (ге243865) II степень —1306 С 972 78,01 141 75,81 0,88 (0,61-1,29) X2 = 0,34, р = 0,56
—1306 Т 274 21,99 45 24,19 1,13 (0,78-1,65)
—1306 СС 385 61,80 56 60,22 0,94 (0,59-1,50) X2 = 0,03, р = 0,86
—1306 СТ 202 32,42 29 31,18 0,94 (0,57-1,55) X2 = 0,01, р = 0,91
—1306 ТТ 36 5,78 8 8,60 1,54 (0,64-3,59) X2 = 0,68, р = 0,41
—1306 С/Т MMP-2 (rs243865) III степень —1306 С 972 78,01 91 74,59 0,83 (0,53-1,30) X2 = 0,57, p = 0,45
—1306 Т 274 21,99 31 25,41 1,21 (0,77-1,89)
—1306 СС 385 61,80 35 57,38 0,83 (0,47-1,47) X2 = 0,29, p = 0,59
—1306 СТ 202 32,42 21 34,42 1,09 (0,61-1,97) X2 = 0,03, p = 0,86
—1306 ТТ 36 5,78 5 8,20 1,46 (0,48-4,09) X2 = 0,23, p = 0,63
Таким образом, при сравнительном анализе частот аллелей и генотипов беременных с ПЭ и беременных без ПЭ статистически достоверных отличий выявлено не было (p > 0,05). Установлена ассоциация молекулярно-генетического маркера —1306С/Т ММР-3 с развитием ПЭ I степени тяжести.
Статья подготовлена при поддержке внутривузовского конкурса грантов «Инициатива».
Список литературы
1. Айламазян Э. К. Гестоз : теория и практика / Э. К. Айламазян, Е. В. Мозговая. — М. : «МЕДпресс-информ», 2008. — С. 272.
2. Елыкова А. В. Анализ ассоциаций аллельных вариантов гена предсердного натрийуретического пептида (+1837 G/AANP) с формированием преэклампсии / А. В. Елыкова, С. П. Пахомов // Вестн. Рос. гос. мед. ун-та. — 2013. — Спец. вып. № 1. — С. 18.
3. Поздняков И. М. Инвазия трофобласта и её роль в патогенезе гестоза / И. М. Поздняков // Акушерство и гинекология. — 2008. — № 6. — С. 3-6.
4. Изучение роли индекса массы тела в характере ассоциаций генетических полиморфизмов вазоактивных гормонов с показателями артериального давления
у женщин в конце беременности / Е. А. Решетников, Л. Ю. Акулова, И. С. Добродомова [и др.] // Научные ведомости БелГУ. Сер. «Медицина. Фармация». — 2011. — № 4 (99), вып. 13. — С. 153-159.
5. Соболева Г. М. Семейство матриксных металлопротеиназ : общая характеристика и физиологическая роль / Г. М. Соболева, Г. Т. Сухих // Акушерство и гинекология.
— 2007. — № 1. — С. 5-8.
6. Шалина Р. И. Состояние здоровья женщин после перенесенного гестоза / Р. И. Шалина // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. — 2004. — № 5. — С. 59-63.
7. Шеманаева T. В. Прогностическая значимость молекул адгезии клеток сосудов
в оценке степени тяжести гестоза / Т. В. Шеманаева // Акушерство и гинекология.
— 2008. — № 2. — С. 16-19.
8. Tidwell S. C. Low maternal serum levels of placenta growth factor as an antecedent
of clinical preeclampsia / S. C. Tidwell, H. N. Ho, W. H. Chiu // J. Obstet. Gynecol. — 2001.
— Vol. 184. — P. 1261-1272.
DISTRIBUTION OF ALLELES AND LOCUS GENOTYPES - 1306C/T MMP-2 AT WOMEN WITH PREECLAMPSIA
V. S. Ovcharova
FSAEIHPE «Belgorod State National Research University» (Belgorod c.)
Article is devoted to the new data concerning distribution of alleles and genotypes of 1306C/T MMP-2 locus among women with preeclampsia (PE) and in control group, and also to involvement of this polymorphism into PE development. Statistically reliable differences are established in the comparative analysis of frequencies of alleles and genotypes of polymorphic marker gene of matrix metalloproteinases-2 (— 1306C/T MMR-2) among women with PE of different severity, and also in control group. Statistically reliable differences were not revealed at comparative analysis of frequencies of alleles and genotypes of pregnant women from PE and pregnant women without PE.
Keywords: preeclampsia, polymorphism, matrix metalloproteinase.
About authors:
Ovcharova Veronika Sergeevna — post-graduate student of medicobiological disciplines chair of medical business and pediatrics faculty at FSAEI HPE «Belgorod State National Research University», Belgorod, office phone: (4722) 30-13-83, e-mail [email protected]
List of the Literature:
1. Aylamazyan E. K. Gestosis: theory and practice / E. K. Aylamazyan, E. V. Mozgovaya. — M.: «Medical press inform», 2008. — P. 272.
2. Elykova A. V. The analysis of associations of allelic options of gene of atrial natriuretic peptide (+1837 G/A ANP) with preeclampsia formation / A. V. Elykova, S. P. Pakhomov // Bull. of Russian state medical university. — 2013. — Special Issue. № 1. — P. 18.
3. Pozdnyakov I. M. Invasion of trophoblast and its role in pathogenesis gestosis / I. M. Pozdnyakov // Obstetrics and gynecology. — 2008. — № 6. — P. 3-6.
4. Studying of role of body weight index in character of associations on genetic polymorphisms of vasoactive hormones with indicators of arterial pressure at women at the end
of pregnancy / E. A. Reshetnikov, L. Y. Akulova, I. S. Dobrodomova [etc.] // Scientific bulletin of BelSU. Series. «Medicine. Pharmaceutics». — 2011. — № 4 (99), Iss. 13 . — P. 153-159.
5. Soboleva G. M. Family of matrix metalloproteinases: general characteristic and physiological role / G. M. Sobolev, G. T. Sukhikh // Obstetrics and gynecology. — 2007.
— № 1. — P. 5-8.
6. Shalina R. I. State of health of women after transferred gestosis / R. I. Shalina // Quest. of gynecologies, obstetrics and perinatology. — 2004. — № 5. — P. 59-63.
7. Shemanayeva T. V. Prognostic importance of adhesion molecules of cells in vessels
in severity assessment of gestosis / T. V. Shemanayeva // Obstetrics and gynecology. — 2008.
— № 2. — P. 16-19.
8. Tidwell S. C. Low maternal serum levels of placenta growth factor as an antecedent of clinical preeclampsia / S. C. Tidwell, H. N. Ho, W. H. Chiu // J. Obstet. Gynecol. - 2001. - Vol. 184. - P. 1261-1272.
