CC BY
34
result in erroneous therapeutic policy and aggravate prognosis.
Key words: right ventricular myocardial infarction, diagnostics.
УДК: 546.49:616.36
О ПРОФИЛАКТИКЕ МЕЛАКСЕНОМ ГЕПАТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ РТУТИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ.
В.Б. БРИН*, А.К. МИТЦИЕВ*, К.Г.МИТЦИЕВ**
Хроническая ртутная интоксикация формирует выраженные функциональные и морфологические изменения печени. Применение ме-лаксена в качестве профилактического средства в условиях хронического отравления способствует снижению гепатотоксического действия ксенобиотика, что достоверно подтверждается данными как морфологического, так и биохимического исследований. Ключевые слова: ртутная интоксикация, мелаксен, печень.
Тяжелые металлы являются одними из наиболее опасных токсических веществ загрязняющих окружающую человека среду. Среди них особое место занимает ртуть, отнесенная к токсическим веществам I класса опасности. Коварность вредного воздействия ртути заключается в том, что её токсические эффекты на клеточный аппарат проявляются даже при микромолярных концентрациях. В ряде экспериментальных работ установлено, что поступившая в организм ртуть приводит к нарушению митохондриальных функций, индуцируя при этом гибель клеток [1]. Одной из главных причин апоптоза клеток в тканях в условиях ртутной интоксикации, является активация процессов липоперок-сидации с последующим формированием мощного окислительного стресса [2,7]. Являясь сильным тиоловым ядом, ртуть при поступлении в организм связывается с сульфгидрильными группами ферментами тканей, инактивируя тиоловые ферменты и синтез белка, что приводит к формированию дистрофических и некротических процессов [5]. Поступая в организм через желудочно-кишечным тракт, ртуть адсорбируется в кишечнике, проникает в кровь и с током крови поступает в печень, где и метабо-лизируется. Однако основная часть ксенобиотика кумулируется во внутренних органах (печень, почки), где пролонгировано, оказывает своё токсическое действие [3,6].
Из вышеизложенного следует, что актуальной является проблема поиска эффективных способов профилактики ртутной интоксикации и её токсических эффектов на организм.
В качестве профилактического средства в условиях хронической ртутной интоксикации, нами был выбран синтетический аналог гормона эпифиза - «Мелаксен» фирмы Unipharm-USA. Мелаксен оказывает выраженное адаптогенное действие, регулирует нейроэндокринные функции, снижает стрессовые реакции, оказывает иммуностимулирующее действие. Наличие у мелаксе-на выраженного мембранопротекторного свойства, обусловлено его мощным антиоксидантным действием [4].
Цель исследования - изучение эффектов внутрижелудоч-ного введения мелаксена на функциональные и гистологические изменения печени крыс в условиях интрагастрального введения хлорида ртути.
Материал и методы исследования. Работа проведена на 45 крысах-самцах линии Вистар, массой 200-300 грамм. При проведении экспериментов руководствовались статьей 11 Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).
Эксперименты проводились в 3 группах животных:
1 группа - интактные животные; 2 группа - животные с ин-трагастральным введением хлорида ртути в дозировке 0,5 мг/кг (в пересчёте на металл); 3 группа - животные с интрагастральным введением хлорида ртути в дозировке 0,5 мг/кг и внутрижелу-дочным введением мелаксена в дозе 10 мг/кг.
Крысы в течение эксперимента находились на стандартном пищевом рационе, имели свободный доступ к воде и пище в течение суток. Световой режим - естественный. По истечении времени эксперимента (30 дней) исследовали функциональное со-
* ГБОУ ВПО «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, Пушкинская ул., д. 40, Владикавказ, 362019
Институт Медико-биологических исследований ВНЦ РАН и РСО-Алания
стояние печени, что включало определение активности в плазме крови аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотранс-феразы (АСТ), определение содержания холестерина, концентрации общего и прямого билирубина, анализ активности щелочной фосфатазы. Определение активности трансаминаз проводилось с помощью биохимического диагностического набора фирмы «ЬаСквта» по методу Райтмана-Френкеля, по специальной формуле (соотношение активности аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы) рассчитывали коэффициент де Ритиса. Определение содержания холестерина в плазме крови проводилось с помощью диагностического биохимического набора фирмы «Витал Диагностикс СПб» энзиматическим колориметрическим методом. Определение концентрации общего и прямого билирубина проводилось с помощью диагностического биохимического набора фирмы «Витал Диагностикс СПб» по методу Маллой-Эвелина. Для исследования активности щелочной фосфатазы использовали биохимический набор фирмы «Ьаоквта». Все биохимические анализы проводились с использованием автоматического биохимического анализатора СквтШвИ (США). По истечению срока эксперимента животных забивали с использованием тиопенталового наркоза. Для гистологических исследований образцы тканей (печень) фиксировали в 10% нейтральном формалине, после чего подвергали заливке в парафин с последующим приготовлением срезов толщиной 7-8 микрон. Срезы окрашивались гематоксилином и эозином. Изучение срезов проводилось в проходящем свете при помощи микроскопа Микмед-1 под увеличением 80x200x400. Результаты всех серий опытов обработаны статистически с применением критерия «1» Стьюден-та на ПЭВМ РеШыт-А с использованием программы Рпгта 4.0.
Результаты и их обсуждение. Результаты экспериментальных исследований позволили установить, что у крыс в условиях хронической ртутной интоксикации происходило повышение концентрации общего билирубина в 2 раза, относительно значений интактного контроля, что было обусловлено увеличением более чем в 2 раза концентрации прямого билирубина, являющегося чувствительным маркером патологии печени. Внутрижелудочное введение хлорида ртути приводило к достоверному снижению активности щелочной фосфатазы (ЩФ), тогда как активность аланина-минотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) в разы превышала фоновые значения. Снижение коэффициента де Ритиса в условиях ртутной интоксикации биохимически подтверждало наличие повреждения печени.
Применение мелаксена в качестве профилактического средства в условиях хронической ртутной интоксикации способствовало снижению концентрации прямого билирубина и как следствие уменьшению значений общего билирубина в плазме крови, относительно значений 2 группы животных. Введение мелаксена экспериментальным животным в условиях ртутной интоксикации снижало активность ферментов АЛТ и АСТ в плазме крови, что явилось следствием повышения коэффициента де Ритиса относительно значений группы животных с изолированным введением хлорида ртути, свидетельствующего о снижении повреждающего действия хлорида ртути на ткань печени (табл.1).
Таблица 1
Влияние мелаксена на показатели печеночных проб
на фоне интрагастрального введения хлорида ртути (М±м)
Примечание: ( * ) - достоверное (р<0,001) изменение по сравнению с фоном; ( ** ) - достоверное (р<0,05) изменение по сравнению с фоном;
( # ) - достоверное (р<0,001) изменение по сравнению с группой №2;
( ## ) - достоверное (р<0,05) изменение по сравнению с группой №2.
Гистологическое исследование печени экспериментальных животных, получавших изолированное введение хлорида ртути, характеризовалось наличием выраженных микроциркуляторных расстройств в виде отека (а) и плазматического пропитывания
Условия опыта ё с а а" т О Общий билирубин (мкмоль/л) Прямой билирубин (мкмоль/л) ЩФ (МЕ/л) Холес- терин (ммоль/л) АЛТ (мккат/л) АСТ (мккат/л) Коэффициент де Ритиса
Фон М±т 1,6±0,359 0,82±0,142 429,6±51,5 Ю 00 о, S o' ± 0,27±0,009 0,255±0,015 1,07±0,051
Группа №2 3,59±0,46 2,25±0,35 301,8±43,5 1,85±0,11 0,58±0,028 0,342±0,031 0,59±0,083
**) *) **) *) **) *)
Группа №3 М±т 2,4±0,34 1,12±0,24 358,1±48,3 1,63±0,096 0,36±0,033 0,296±0,024 0,82±0,065
##) ##) *) #) **) ##)
стенок сосудов, с очагами жировой (б) и белковой дистрофии. Отмечалась выраженная паренхиматозная дистрофия гепатоци-тов (в) с очагами кровоизлияний и некрозом отдельных гепатоци-тов (рис.1).
При морфологическом исследовании печени лабораторных животных профилактически получавших мелатонин в условиях хронической ртутной интоксикации отмечалось существенное снижение выраженности альтеративных (а) изменений (рис.2).
Рис. 1.Морфологические изменения печени в условиях интрагастрального введения хлорида ртути. Окраска гематоксилином и эозином, увеличение 80x200x400.
Рис.2. Влияние мелаксена на выраженность гистологических изменений печени в условиях интрагастрального введения хлорида ртути. Окраска гематоксилином и эозином, увеличение 80х200х400.
Таким образом, из вышеизложенного следует, что применение мелаксена в условиях хронической ртутной интоксикации, является эффективным способом профилактики гепатотоксиче-ского действия тяжелого металла.
Литература
1. Арефьева, А.С. Экология человека / А.С. Арефьева, В.В. Барыгина, О.В. Зацепина.- 2010.- № 8.- С. 35-41.
2. Вестник Астраханского государственного технического университета / М.Н. Коляда [и др.].- 200б.- № 6.- С. 62-68.
3. Кубракова, М.Е. Современные наукоемкие технологии / М.Е. Кубракова.- 2005.- № 4.- С. 48-49.
4. Лилица, Г.А. Клиническая медицина / Г.А. Лилица, Р.М. Заславская, Е.В. Калинина.- 2005.- №3.- С. 54-57.
5. Савченков, М.Ф. Сибирский медицинский журнал / М.Ф. Савченков, В.С. Рукавишникова, Н.В. Ефимова.- 2010.- Т. 99.- № 8.- С. 9-11.
6. El-Shenawy SM, Hassan NS. Pharmacol Rep. 2008 Mar-Apr;60(2):199-208.
7. Brain Res / Z. Yin [et al.].- 2007.- N 1131.- P. 1-10.
THE METHOD OF MELAXEN PREVENTION OF HEPATOTOXIC EFFECTS OF MERCURY IN THE EXPERIMENT
V.B. BRIN, A.K. MITSTIEV, K.G. MITSTIEV
SBEE HPE NOSMA Health Ministry of Russia
The chronic mercury intoxication forms expressed by the functional and morphological changes of the liver. Application melaxen as a prophylactic agent in chronic poisoning reduces the xenobiotic hepa-totoxicity, significantly supported by the data as a morphological and biochemical studies.
Key words: mercury intoxication, melaxen, liver.
