CC BY
20
О НОСИТЕАЬСТВЕ
Streptococcus pneumoniae
у ДЕТЕЙ дошкольного ВОЗРАСТА
С. Н. БЕНИОВА1, А. Л. СИЗОНЕНКО1, М. П. Костинов3, С. В. СИДОРЕНКО2, С. В. ТАРАНОВА1
Владивостокский Государственный медицинский университет1, Государственный Научный Центр по антибиотикам, Москва2 НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва3
В статье приведены результаты исследования цитокинового статуса и иммунного ответа у 142 детей, являющихся носителями Str. pneumoniae. Увеличение уровня IL-6 в сыворотке крови подтверждает наличие воспалительного процесса в организме. Сниженное содержание TNF-а в слюне и в сыворотке крови позволяет говорить об истощении компенсаторных возможностей иммунной системы, а увеличение уровня IgG-, IgM-АТ к различным антигенам Str. pneumoniae в сыворотке крови подчеркивает напряженность иммунных механизмов на фоне клинического благополучия. Показатели цитокинового статуса и специфического иммунного ответа могут использоваться как прогностические критерии развития пневмококковой инфекции у детей из групп риска с носительством Str. pneumoniae.
Ключевые слова: пневмококковая инфекция, бактерионосительство, группы риска, дети УДК 616.022:579.862
Carriage of Streptococcus pneumoniae by children of pre-school age
S. N. BENIOVA1, A. L. SlZONENKO1, M. P. KOSTINOV3, S. V. SlDORENKO2, S. V. TARANOVA1
Vladivostok StAte MedicAL University, Vladivostok1 Stare Scientific Center for Antibiotics, Moscow2
The Scientific Institute of Vaccines And SeruMs nAMed After I. I. Mecnnikov, Moscow3
The results of cytokines status and immune response in 142 children (carriers of Str. pneumoniae) are demonstrated in the article. Increase of IL-6 level in blood serum confirms inflammatory process in the organism. Decrease of TNF-a content in saliva and blood serum confirms decreasing of compensation abilities of immune system; increase of IgG-, IgM-antibodies to different antigens of Str. pneumoniae in blood serum marks the tension of immune mechanisms while the clinical presentation is favourable. The indexes of cytokines status and specific immune response can be used as prognostic criteria of Pneumoococcus infection in children from risk groups with carriage of Str. pneumoniae.
Key words: Pneumococcus infection, carriage of bacteria, risk groups, children
Пневмококковая инфекция в настоящее время — серьезная эпидемическая и клиническая проблема здравоохранения и занимает лидирующее место среди заболеваний верхних и нижних дыхательных путей. Особенно высока заболеваемость в детском возрасте. У детей до 6 летнего возраста Str. pneumoniae вызывают респираторные заболевания в 50—90% случаев, у детей 7— 15 лет — в 35—40% [1]. Кроме того, пневмококковая инфекция является причиной целого ряда заболеваний — от тяжелых, инвазивных, угрожающих жизни менингитов, сепсиса и пневмоний до менее серьезных поражений слизистых в виде отита, синусита, фарингита. У детей самыми частыми клиническими формами инфекций, вызванных Str. pneumoniae, остаются в настоящее время острый средний отит, пневмония и менингит [2, 3]. Несмотря на обширное применение программ иммунизации против пневмококковой инфекции, оптимизацию методов антибактериальной терапии, сохраняется высокий процент летальности среди детского населения, а осложнения после перенесенной тяжелой пневмококковой инфекции очень часто приводят к ограничению жизнедеятельности и социальной недостаточности. Это объясняется с одной стороны, широким распространением циркуляции наиболее вирулентных серотипов пневмококка в составе микрофлоры ротоглотки как больных, так и здоровых детей, с другой стороны, недостаточностью иммунной системы,
Сизоненко Анна Леонидовна — аспирант кафедры педиатрии № 1 ГОУ ВПО ВГМУ Росздрава; 69002, Владивосток, ул. Бу-рачека, 15—60; (4232) 28-35-30
неспособностью организма противостоять микробной антигенной агрессии.
Общепризнано, что Str. pneumoniae — условно-патогенный микроорганизм и довольно часто колонизирует слизистую ротоглотки здоровых детей, не вызывая при этом патологических состояний, ассоциированных с пневмококком, но при определенных условиях — дисфункции клеточного и гуморального звеньев иммунитета происходит реализация наиболее тяжелых форм пневмококковой инфекции. Таким образом, бактерионосительство Str. pneumoniae у детей необходимо рассматривать как фактор риска по развитию пневмококковой инфекции.
Все вышеизложенное определило цель нашей работы: изучить иммунный ответ у детей-носителей Str. pneumoniae с патологическими фоновыми состояниями.
Материалы и методы исследования
Изучение распространенности носительства Str. pneumoniae проводилось в рамках программы «Изучение распространения и молекулярных механизмов устойчивости Str. pneumoniae к антибиотикам в Российской Федерации» в период 2007—2008 гг. Было обследовано 516 детей в возрасте 3—6 лет из детских образовательных учреждений г. Владивостока. Материалом исследования от здоровых детей служила слизь, взятая из носовых ходов. Заключительный этап идентификации Str. pneumoniae осуществляли в Государственном научном центре по антибиотикам г. Москвы на основании культуральных и морфологических свойств и чувствительности к оптохину.
Определение уровня цитокинов — IL-6, TNF в слюне и сыворотке крови проводили с помощью специфических реактивов фирмы «R&D. Diagnostics Inc.» (USA) методом сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа [4] согласно прилагаемой инструкции. Учет результатов производили с помощью иммуноферментного анализатора «Multiscan» (Финляндия). Расчеты количества цитокинов проводили путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы. Количество выражали в пикограммах на миллилитр (пг/мл).
Уровень IgG-, IgM-АТ к полисахаридам сероваров 3, 6, 9N, 23F Str.pneumoniae, и IgG-АТ к полисахаридам, входящим в состав вакцины «Пневмо 23», определяли методом ИФА, разработанным в лаборатории иммунохимической диагностики ГУ НИИВС им. И. И. Мечникова РАМН (зав. лаб. к.м.н. Н. Е. Ястребова).
Результаты исследования обработаны методами вариационной статистики с вычислением процентной частоты. Достоверность различий оценивали по критерию Стью-дента.
Результаты и их обсуждение
При микробиологическом обследовании 516 клинически здоровых детей Str. pneumoniae был обнаружен у 142 из них, т. е. частота бактерионосительства составила 27,5%. По клинико-анамнестическим данным носители Str. pneumoniae были разделены на 4 группы: первую группу составили 23 ребенка (16,2%) с отягощенным ал-лергологическим анамнезом; во вторую группу вошло 63 ребенка (44,1%) с наличием хронических очагов инфекции со стороны ЛОР-органов без клинических проявлений на момент исследования (хронический тонзиллит — 10,5%, аденоидит — 10,5%, ринофарингит — 28,9%, отит — 5,2%, синусит — 2,6%, сочетанная патология — 36,8%); в третьей группе было 24 ребенка (17,4%), имеющие сочетание отягощенного аллергологического анамнеза и хронических очагов инфекции со стороны ЛОР-органов в стадии ремиссии; четвертую группу составили 32 ребенка (22%) с I и II группой здоровья. В контрольную группу вошло 1 0 здоровых детей с I группой здоровья, у которых не выделен Str. pneumoniae при микробиологическом обследовании.
При исследовании уровня цитокинов в слюне и в сыворотке крови (табл. 1) было установлено, что у детей с отягощенным аллергологическим анамнезом и детей с наличием хронических очагов инфекции со стороны ЛОР-органов уровень IL-6 в слюне был снижен. Поскольку IL-6 присутствует в слюне здоровых детей [5] и является одним из наиболее активных цитокинов, участвующих в реализации иммунного ответа и воспалительной реакции [6], то его снижение можно рассматривать как недостаточность механизмов местной защиты у этих детей. В 3-й группе уровень IL-6 в слюне по сравнению с уровнем у здоровых детей контрольной группы (p <0,001) был повышен в 2 раза. По данным ряда авторов [7, 8] хроническое воспаление на фоне отягощенного аллергологиче-
Таблица 1. Уровень IL-6 и TNF-a у детей с носительством Str. pneumoniae (М ± m)
Группы детей IL-6, пг/мл TNF-a, пг/мл
слюна сыворотка крови слюна сыворотка крови
1-я группа 1,9 ± 0,2* 8,6 ± 3,1 37,8 ± 4,2 1,0 ± 0,2*
2-я группа 2,7 ± 0,09 6,2 ± 0,1* 27,4 ± 1,0* 0,7 ± 0,05*
3-я группа 8,5 ± 2,7 9,07 ± 3,5* 13,7 ± 0,8* 0,7 ± 0,05*
4-я группа 4,2 ± 0,3 11,7 ± 0,2* 33,5 ± 1,7 1,6 ± 0,4*
Контрольная группа 4,4 ± 0,4 3,1 ± 0,1 36,2 ± 0,5 4,3 ± 0,3
* — p < 0,001 по сравнению с контрольной группой
Таблица 2. Напряженность специфического иммунного ответа у детей с носительством Sfr. pneumoniae (М + m)
Группы детей Уровень IgM-АТ (в ед. ОП) Уровень IgG-АТ (в ед. ОП) Уровень IgG-АТ (в ед. ОП)
к полисахаридам различных серотипов Sfr. pneumoniae к полисахаридам, входящим в состав вакцины «Пневмо 23»
1-я группа 2,06 ± 0,02* 2,3 ± 0,05* 0,76 ± 0,01 *
2-я группа 2,4 ± 0,01 * 2,2 ± 0,02* 0,8 ± 0,01
3-я группа 2,3 ± 0,02* 2,3 ± 0,05* 1,02 ± 0,06*
4-я группа 2,1 ± 0,02* 2,1 ± 0,02* 1,2 ± 0,01
Контрольная группа 0,8 ± 0,02 1,09 ± 0,02 0,7 ± 0,03
* — p < 0,001 по сравнению с контрольной группой
ского анамнеза приводит к длительной антигенемии и, соответственно, к пролиферации пула сенсибилизированных лимфоцитов и гиперпродукции цитокинов, т. е. повышение содержания IL-6 может быть индикатором патологических процессов на местном уровне.
В сыворотке крови у детей всех обследуемых групп отмечалась однонаправленная динамика уровня IL-6 в сторону увеличения. Известно, что концентрация IL-6 повышается при многих микробных инвазиях, иммунологических реакциях, воспалении [6]. Следовательно, мы не можем исключить возможность реализации воспалительного процесса у бактерионосителей Str. pneumoniae даже при отсутствии клинических проявлений пневмококковой инфекции.
При анализе выявлено достоверное снижение TNF-a в слюне во 2-й и 3-й группах и в сыворотке крови у всех обследуемых детей (p< 0,001 ).Установлено, что TNF-a участвует не только в процессах деструкции, но и стимулирует репарацию, усиливает продукцию Т-клетками
IFN-Y, а непосредственно в очаге воспаления обеспечивает хемотаксис гранулоцитов и моноцитов в очаг, усиливает фагоцитоз и микробицидность фагоцитов [6]. Таким образом, снижение уровня TNF-а можно рассматривать как неблагоприятный признак у клинически здоровых бактерионосителей пневмококка.
При исследовании специфического иммунитета к Str.pneumoniae выявлено увеличение исходного уровня и IgG-, IgM-АТ к различным антигенам Str.pneumoniae, и IgG-АТ к полисахаридам, входящим в состав вакцины «Пневмо 23» в 2 раза во всех обследуемых группах по сравнению с контрольной группой здоровых детей (p < 0,001) (табл. 2). Поскольку с возрастом иммунитет приобретается естественным путем, то часть детей может иметь то или иное количество антител к Str. pneumoniae [3, 9]. Однако двукратное увеличение специфических антител у бактерионосителей Str. pneumoniae всех исследуемых групп не только свидетельствует о встрече с пневмококком когда-либо, но и позволяет предположить напряженность иммунного ответа в отношении пневмококковой инфекции на момент исследования.
Заключение
Таким образом, в проведенном нами исследовании выявлено, что у детей с носительством Str. pneumoniae отмечается повышение титров специфических антител к различным серотипам пневмококка, преимущественно, не входящим в состав вакцины «Пневмо 23». Кроме того, отмечена различная направленность цитоки-нового профиля в зависимости от характера сопутствующей патологии. У детей с хроническими заболеваниями ЛОР-органов или с отягощенным аллергологическим анамнезом отмечено снижение уровня факторов местного специфического иммунитета на фоне высоких показателей системного воспалительного процесса. У бактерионосителей с сочетанной патологией в анамнезе зареги-
стрировано снижение активности процессов репарации и хемотаксиса иммунных клеток в очаге воспаления.
Учитывая, что вакцина «Пневмо 23» не только стимулирует специфический ответ, но и оказывает выраженное иммуномодулирующее действие [9], полученные результаты нашего исследования должны учитываться практическими врачами при построении индивидуальной профилактики пневмококковой инфекции у детей с отягощенным преморбидным фоном и недоказанным носительством Str. pneumoniae.
Литература:
1. Таточенко В. К. Диагностика, терапия и вакцинопрофилактика пневмоний у детей // Новости вакцинопрофилактики. Вакцинация. - 2003. - № 5 (29). - С. 6-7.
2. Баранов А. А. Пневмококковая инфекция и связанные с ней заболевания — серьезная проблема современного здравоохранения / А. А. Баранов, Л. С. Намазова, В. К. Таточенко // Педиатрическая фармакология.— 2008.— Т. 5, №1.— С. 1—3.
3. Костинов М. П. Иммунокоррекция вакцинального процесса у лиц с нарушенным состоянием здоровья / Под ред. М. П. Кос-тинова. — М.: МдВ, 2006. — С. 26—128.
4. Mossman T. R. Specific assaya for cytokine productio / T. R Moss-man, T. A. Fong // J. Immunol. Meth. — 1 998. — V. 116. — № 2. — P. 151—158.
5. Уровень цитокинов в секрете ротовой полости у детей с бронхиальной астмой / М. А. Абаджиди и др. // Цитокины и воспаление. — 2002. — Т. 1, № 3. — С. 9—14.
6. Тотолян А. А., Фрейдлин И. С. Клетки иммунной системы.— СПб.: Наука, 2000. — 231 с.
7. Федосеев Г. Б. Общая аллергология. — СПб.: Нордмедиздат, 2001. — Т. 2. — С. 51—78.
8. Kraft M. The role of bacterial infections in astma // Clin. Chest Med. — 2000. — V. 21. — P. 301—313.
9. Костинов М. П. От профилактического к терапевтическому эффекту вакцин против пневмококковой и гемофильной типа b инфекций у пациентов с бронхолегочной патологией / Под ред. М. П. Костинова. — М., 2007. — С. 11 — 17.
КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ В ОЦЕНКЕ ТЯЖЕСТИ И ВЫЗДОРОВЛЕНИЯ ПРИ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЯХ
В. Ф. Бдликин, Н. Н. Федотова, Э. С. Акдйзин
гоу впо ивановская государственная медицинская академия росздрава
Целью работы явилось изучение клинического значения метаболитов анаэробной микрофлоры — короткоцепочечных жирных кислот (уксусной, пропионовой, масляной и изовалериановой) при острых кишечных инфекциях. Обследовано 86 больных с кишечными инфекциями, из них 45 в динамике болезни (в остром периоде и в периоде реконвалесценции). В ранние сроки болезни определение короткоцепочечных жирных кислот в крови позволяет дифференцировать больных по степени тяжести, выявлять пациентов с наиболее выраженной интоксикацией, разграничивать больных с симптомами обезвоживания и без признаков дегидратации. В периоде реконвалесценции сохранение высокого уровня пропионовой кислоты свидетельствует о незавершенности воспалительного процесса в кишечнике и неполном клиническом выздоровлении. Ключевые слова: короткоцепочечные жирные кислоты, интоксикация, дегидратация, кишечные инфекции
УДК 616.34-07
