Разумеется, использование каждого нового неспецифического показателя для оценки состояния здоровья детей может быть оправдано лишь в том случае, если степень его информативности выше, чем общепринятых тестов.
Наши предварительные данные показывают, что имеется определенная взаимосвязь между отдельными показателями функционального состояния организма и состоянием здоровья в целом (группой здоровья). Например, среди детей дошкольного возраста, отнесенных к 1-й группе, удовлетворительный и хороший уровень общей иммунологической реактивности (по В. И. Иоффе) имели 81,0%, плохой — 10,0%, среди же детей, отнесенных к 3-й и 4-й группам,— соответственно 31,0 и 43,0%. Оказалось также, что коэффициент корреляции между показателями интенсивности свечения сыворотки крови у детей и группами здоровья, на которые они были распределены, составил 0,41 (/=3,5); функциональная же связь между другими изученными показателями (СОЭ, ФСОЭ, функциональным состоянием сердечно-сосудистой системы, степенью бактерицидной способности кожи и др.) и уровнем здоровья, хотя и имеется, то незначима (И. Д. Ду-бинская и Г. Л. Туровец).
Таким образом, проведенные исследования показали, что предложенные критерии, определяющие уровень здоровья, и комплексная оценка состояния здоровья (по группам) вполне приемлемы для изучения влияния атмосферных загрязнений на организм в целом.
ЛИТЕРАТУРА
Владимиров Ю. А., Оленев В. И., Суслова Т.Е. — В кн.: Сверхслабое свечение плазмы
крови в клинической диагностике. М., 1974, с. 6. Голубев И. Р. и др. — В кн.: Методические и теоретические вопросы гигиены атмосферного воздуха. М., 1976, с. 29. Громбах С. М. — Вопр. охр. мат., 1973, № 7, с. 3—7. Казначеев В. П. Биосистема и адаптация. Новосибирск, 1973.
Карпман В. Л., Белоцерковский 3. В., Гудков И. А. Исследование физической работоспособности у спортсменов. М., 1974. Сердюковская Г. Н. —1. ges. НуЕ., 1974, В<1 20, Б. 21.
Фролов Б. А. и др. — В кн.: Факторы естественного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. Челябинск, 1972, с. 9.
Поступила 28/УИ 1978 г.
УДК 616-008.93-074:543.544
Канд. мед. наук Я. Ф. Сопиков, канд. техн. наук А. И. Горшунова
О ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ
В БИОСРЕДАХ
Институт медико-биологических проблем Министерства здравоохранения СССР, Москва
Мы предлагаем простой экспрессный микрометод выделения и газохро-матографического анализа летучих органических соединений в тканях и биосредах организма. Метод основан на прямом термическом испарении веществ из тонкослойных биопроб в герметизируемой кварцевой трубке пиролитической приставки и последующем анализе газовой фазы.
Подлежащие анализу биопробы (ткани, кровь, моча и др.) массой от 3 до 10 мг (лучше 4—5 мг) наносят тонким слоем (0,2—0,3 мм) глазным скальпелем на кусочки кальки (ГОСТ-89270) размером 10x4 мм, быстро взвешивают на торзионных весах с точностью до 0,05 мг и помещают на подложке в платиновую лодочку со штоком, которую вводят в кварцевую трубку пиролитической приставки и сразу же герметизируют поворотом специальной муфты. На все указанные операции затрачивается 20—30 с, что почти полностью предупреждает потерю анализируемых веществ в процессе подготовки биопроб к анализу.
После двухминутного выдерживания пробы при температуре 120°С, не приводящей к термораспаду органических соединений, но вызывающей дегидратацию и денатурацию белков, происходит выделение в газовую фазу содержащихся в биопробе летучих органических веществ, которые поворотом четырехходового крана подают в потоке газа-носителя на хро-матографическую колонку и в пламенно-ионизационный детектор хроматографа.
Условия разделения на колонке подбирают в зависимости от состава анализируемых веществ. Так, при определении 1,4-диоксана, 1,2-дихлор-этана, изопропилбензола и этилацетата в биопробах хорошее разделение достигается при использовании колонки длиной 2,6 м с внутренним диаметром 3 мм при заполнении ее целитом 545 (зернение 0,177—0,25 мм) с 15% полиэтиленгликоля 2000. Температура термостатирования колонки 75°С. Скорость потока газа-носителя гелия и водорода 30 мл/мин. Скорость потока воздуха 300 мл/мин. Температура детектора 150°С. При анализе гексанола в качестве неподвижной фазы применяют ди-2-этилгексил-себацинат.
Анализируемые соединения регистрируются на хроматограмме в виде острых и симметричных пиков. Одновременно на хроматограммах постоянно фиксируются пики ряда летучих органических веществ эндогенного происхождения, образующихся в процессе естественного метаболизма, в частности ацетон, ацетальдегид, этанол и др. Пары воды обнаруживаются на хроматограмме в виде небольшого размытого сигнала. Вода не мешает определению изучаемых соединений и не отражается на чувствительности детектора.
Количественные расчеты содержания органических веществ в пробах проводят по калибровочному графику.
Для оценки точности метода анализа органических веществ в биопробах избран 1,4-диоксан, обладающий сравнительно небольшой летучестью (135 мг/л), малой скоростью трансформации в тканях и хорошей растворимостью в воде и биосредах.
При анализе крови и воды, содержащих 1,4-диоксан в расчетной концентрации 0,2 мкг в 10 мкл, установлено, что результаты определения его в крови отличаются от данных анализа вещества в воде и расчетной величины всего на 2—5%.
Точность определения 1,4-диоксана в тканях определяли с использованием гомогенатов печени и мозга крыс, в которые добавляли различные количества стандартного раствора диоксана в воде с 200 мкг вещества в 1 мл. После тщательного перемешивания указанных гомогенатов и воды, содержащих расчетные количества диоксана (от 9,6 до 100,0 мкг/г), определяли концентрацию вещества в пробах. Полученные при этом результаты свидетельствуют о том, что содержание вещества в гомогенатах отличалось , от расчетного не более чем на 3—5% и лишь в отдельных случаях (при наименьшей концентрации диоксана 9,6 мкг/г) разница достигала 10—12%.
При определении количества органических соединений в органах животных целесообразно вместо гомогенатов тканей использовать для анализа тонкослойные срезы органов, что создает ряд преимуществ. Правомерность применения тонкослойных биопроб установлена в экспериментах с печенью крыс, отравленных диоксаном или дихлорэтаном.
Из доли печени, содержащей анализируемое вещество, глазным скальпелем отрезали тонкий (0,2—0,3 мм) слой ткани, помещали его на подложку из кальки, взвешивали и вводили на платиновой лодочке в пиролитическую приставку хроматографа для анализа описанным методом. Контролем служили гомогенаты ткани, приготовленные из той же доли печени. В результате многочисленных анализов установлено, что количество определяемых соединений как в срезах печени, так и в гомогенатах из нее одинаково. Различие не превышало 10%, что находится в пределах ошибки метода и
свидетельствует о достоверности данных, полученных при использовании тонкослойных биопроб.
Таким образом, предлагаемый метод выделения и анализа летучих органических веществ в тонкослойных срезах органов позволяет максимально сократить время подготовки и анализа биопроб, а следовательно, и возможные при этом потери летучих соединений. Применение миллиграммовых навесок ткани дает возможность определять содержание веществ в различных по функции структурных образованиях, имеющих малую массу (отдельные ядра и центры головного мозга, надпочечники, гипофиз и др.) и многократно (в динамике) исследовать кровь у мелких лабораторных животных (мышей, крыс). Использование подложки из кальки для введения биопроб в пиролитическую приставку при анализе исключает непосредственный контакт ткани с деталями хроматографа и предохраняет его от загрязнения.
Рекомендуемый метод отличается универсальностью применения. Он пригоден для анализа как тканей органов, так и жидких биосред (крови, мочи и др.). Особого внимания заслуживает возможность одновременно определять в одной и той же биопробе содержание летучих органических веществ не только экзогенного, но и эндогенного происхождения, что позволяет изучать влияние ксенобиотиков на процессы метаболизма веществ в организме. Метод апробирован при исследовании процессов всасывания, распределения и выведения из организма животных 5 различных по физи-ко-химическим свойствам соединений (1,4-диоксана, изопропилбензола, гексилового спирта, 1,2-дихлорэтана, этилацетата) и полностью себя оправдал в качестве простого экспрессного микрометода определения летучих органических веществ в тканях и биосредах, обладающего высокой чувствительностью. Минимально определяемые в биопробе количества веществ 0,01—0,02 мкг.
Поступила 14/1Х 1978 г.
УДК 815.471:614.71/.73-07
Канд. физ.-мат. наук П. И. Бреслер, канд. хим. наук Н. Ш. Вольберг, Г. А. Гаранина, Р. П. Клюев, канд. техн. наук В. А. Садаков
АВТОМАТИЧЕСКОЕ МНОГОКАНАЛЬНОЕ УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОТБОРА ПРОБ ВОЗДУХА
Всесоюзный научно-исследовательский и конструкторский институт научного приборостроения, Ленинград
Подавляющее большинство газообразных атмосферных загрязнений анализируется с помощью стандартных химических методик. Учитывая сложность и высокую стоимость газоанализаторов и большие трудности, возникающие при их разработке, есть все основания предполагать, что химический анализ атмосферных загрязнений сохранит свое значение и в будущем.
Наибольшие трудности при химическом анализе вызывает отбор проб воздуха, состоящий в прокачивании заданных объемов анализируемого воздуха при установленных показателях расхода, определяемых чувствительностью соответствующих методик, через сосуды с селективными химическими поглотителями тех или иных компонентов. При массовом ручном отборе проб очень велики затраты труда и очень сложно обеспечить отбор в вечернее и ночное время. Кроме того, практически невозможно контролировать субъективную ошибку оператора, возникающую при ручном отборе и достигающую^ отдельных случаях десятков процентов (Б. И. Ряб-цев).