CC BY
67
КАЧЕСТВО И БЕЗОПАСНОСТЬ
I ■
Новый санитарно-паразитологический показатель качества воды -
ооцисты криптоспоридий
В.Е.Ларин
Аналитический Центр контроля качества воды ЗАО «РОСА»
Ооцисты криптоспоридий [1] - новейший из биологических показателей качества питьевой воды. Первый случай заболевания человека криптоспо-ридиозом был зарегистрирован в 1976 г. По некоторым оценкам, ежегодное количество заболеваний крип-тоспоридиозом во всем мире достигает нескольких миллионов случаев.
Криптоспоридии обладают набором свойств, обусловливающих значимость водного пути передачи помимо контактно-бытового и актуальность контроля за их содержанием в воде:
• широкая распространенность в природе среди млекопитающих - до 150 видов [2];
• микроскопические размеры ооцист - 5 мкм в среднем;
• высокая устойчивость ооцист в окружающей среде - до нескольких месяцев, в том числе в воде;
• высокая устойчивость к традиционным технологиям дезинфекции при водоподготовке;
• высокая инфекционность и низкая заражающая доза.
Всемирный резонанс получила в
1993 г. вспышка криптоспоридиоза водного происхождения в Милуоки, США, когда из-за прорыва загрузки скорых песчаных фильтров и нарушения режима коагуляции на станциях питьевой водоподготовки через систему централизованного водоснабжения было инфицировано криптоспоридио-зом свыше 400 000 человек. Это событие стало стимулом интенсивного развития методов обнаружения ооцист криптоспоридий в воде. В результате к
1994 г. Агентство охраны окружающей среды США (EPA) разработало основанный на картриджной фильтрации проб большого объема и флюоресцентном мечении моноклональными антителами метод одновременного обнаружения в воде ооцист криптоспо-ридий и цист лямблий.
Усовершенствованная модификация данного метода [3] обеспечила возможность для проведения в США федеральной программы мониторинга в соответствии с принятым в 1996 г. За-
коном сбора информации, согласно которому станции питьевой водоподготовки, обслуживающие свыше 10000 человек, обязывались в течение 18 мес ежемесячно тестировать исходную и конечную воду на содержание цист лямблий и ооцист криптоспоридий в комплексе с другими показателями.
На основании полученных в результате реализации программы мониторинга данных о распространенности цист и ооцист в источниках водоснабжения, эффективности технологий водоподготовки в их удалении в 1998 г. в США был принят Временный Закон усиленной очистки поверхностных вод [4], распространяющий свое действие на станции питьевой водоподготовки, обслуживающие более 10000 пользователей и использующие поверхностные или подземные воды под прямым воздействием поверхностных. Закон установил для ооцист криптоспоридий максимальный целевой уровень содержания (MCLG), равный 0.
В 1999 г. EPA официально опубликовало метод № 1623 [5], усовершенствованный благодаря замене карт-риджной фильтрации капсульной, замене иммуномагнитной сепарацией (IMS) очистки концентрата проб флотацией и дополнению специфического мечения поверхности ооцист и цист флюоресцентными антителами (FITC-Mab) неспецифическим мечением ядер диамидинофенил индолом (DAPI).
Аналогичным путем - от регистрации случаев и вспышек криптоспори-диоза водного происхождения, разработки и совершенствования методов обнаружения ооцист криптоспоридий с одновременным изучением их распространенности в водах различных типов и эффективности различных технологий водоподготовки в их удалении, на основе публикаций и открытого обсуждения полученных данных до норматива и рутинного контроля -формировалось водное законодательство Великобритании в отношении ооцист криптоспоридий. С 1999 г. этот показатель регламентирован как обя-
зательный показатель качества питьевой воды в Великобритании [6]. Норматив установлен как «среднее количество ооцист в 10 л менее 1», при условии ежедневного отбора производителями питьевой воды централизованного водоснабжения кумулятивных суточных проб воды с расходом не менее 40 л/ч в точках повышенного риска, определенных по критериям Инспектората по Питьевой Воде
Методические подходы к обнаружению ооцист криптоспоридий и цист лямблий национальных методик США и Великобритании объединены в проекте международного стандарта ИСО 15553 [7], представляющего различные способы концентрирования - от фло-куляции или мембранной фильтрации проб объемом 10 л до капсульной фильтрации проб объемом до 1000 л, с последующей очисткой концентрата с помощью иммуномагнитной сепарации коммерческими наборами различных производителей и мечением очищенного концентрата пробы моно-клональными антителами, сконъюги-рованными с FITC и DAPI. Данный стандарт разрабатывается рабочей группой №13 подкомитета №4 «Микробиологические методы» технического комитета №147 «Качество воды» ИСО и является обобщением последних методических достижений, применяемых за рубежом для рутинного санитарно-паразитологического контроля. В стандарте предусмотрены также процедуры контроля качества выполнения анализа.
В Российской Федерации ооцисты криптоспоридий в 2002 г. установлены показателем санитарно-эпидемиологической безопасности воды, расфасованной в емкости [8]. Для контроля за содержанием ооцист криптоспоридий в воде МУ 2.1.4.1184-03 [9], введенные в действие в 2003 г., предписывают два метода:
• основанный на МУК 4.2.964-00 [10], с модифицированным окрашиванием препарата по Цилю-Нильсену;
• комитетский проект ИСО 15553, редакция 2002 г.
В настоящее время ооцисты крип-тоспоридий предлагается включить в перечень обязательных показателей качества питьевой воды, и в рамках «Проекта реформы водного законодательства Российской Федерации» подготовлен проект Федерального закона «О питьевой воде и питьевом водоснабжении», регламентирующий ооцисты криптоспоридий вместе с цистами лямблий и яйцами гельминтов в перечне показателей безопасности питьевой воды.
Следует отметить, что опубликованных данных об официально зарегистрированных вспышках криптоспори-
QUALITY AND SAFETY
диоза доказанного водного происхождения в РФ нет. Если заболеваемость лямблиозом регистрируется в РФ официально с 1991 г., то представительные статистические данные о заболеваемости криптоспоридиозом отсутствуют. При анализе литературных источников можно найти небольшое число публикаций с отечественными оригинальными данными о распространенности ооцист криптоспоридий в водоисточниках РФ. Результаты исследований встречаемости паразитарных агентов в поверхностных, сточных и питьевых водах различных регионов бывшего СССР приводятся только в ранних публикациях [11], но, к сожалению, без выделения ооцист криптоспоридий в отдельную группу, поэтому по ним невозможно определить частоту обнаружения именно ооцист. Представленные в указанных публикациях результаты получены методикой, послужившей основой МУК 4.2.668-97 [12], далее МУК 4.2.964-00, «не предназначенной для индикации в воде ооцист криптоспоридий» [10].
Опубликованные к настоящему времени работы о встречаемости ооцист криптоспоридий в поверхностных водоисточниках РФ, представляющие результаты иммунофлюоресцентного метода, также единичны и не представительны с географической точки зрения. Уникальные результаты исследования водоемов Московской области методом ЕРА [3], проводимого в соответствии с программой МГП «Мосво-доканал» в Аналитическом Центре контроля качества воды ЗАО «РОСА» с 1997 г. и охватывающего данные анализа свыше 750 проб, регулярно отбираемых в постоянных точках отбора, являются локальными и недостаточными для целостной оценки загрязненности поверхностных водоемов на обширной и разнообразной в географическом отношении территории Российской Федерации.
По нашим данным, полученным им-мунофлюоресцентным методом, встречаемость цист лямблий в поверхностных водах контролируемых точек отбора значительно выше, чем встречаемость ооцист криптоспоридий: 57% от общего числа исследованных проб были положительными по цистам лямблий и 7 % — положительными по ооцистам криптоспоридий.
Таким образом, можно констатировать несомненную недостаточность опубликованных отечественных данных о распространенности криптоспо-ридиоза среди населения РФ, а ооцист криптоспоридий - в водных ресурсах. С другой стороны, очевидно признание потенциальной актуальности контроля качества воды по данному показателю, проявляющееся во введении
его в СанПиН 2.1.4.1116-02 и проектах внесения его в Федеральный закон «О питьевой воде и питьевом водоснабжении». Существующее противоречие между нормативной базой и недостаточностью информации о действительной эпидемиологической значимости показателя ооцисты криптос-поридий может быть разрешено только путем реализации тщательно спланированного обследования населения и мониторинга станций водоподготов-ки, основанных на использовании для контроля передовых современных методов клинических и санитарно-пара-зитологических исследований.
Однако выполнение таких программ проблематично из-за отсутствия методической базы, поскольку регламентированные отечественные методы сани-тарно-паразитологических исследований - МУК 4.2.964-00 [10] для обнаружения в воде цист лямблий и яиц гельминтов и МУ 2.1.4.1184-03 [9] в части для обнаружения ооцист криптоспоридий - обладают очень низкой чувствительностью. Известно, что [10] являются модификацией метода Jakubowski, признанного автором непригодным для рутинного контроля воды по результатам межлабораторных испытаний.
Различными авторами показано, что в санитарно-паразитологическом анализе воды потери ооцист и цист, приводящие к снижению итоговой эффективности, происходят на всех этапах методики [13]. Первый этап методик -этап концентрирования пробы - может быть осуществлен различными способами с приблизительно одинаковой эффективностью, об этом свидетельствует допущение в методе №1623 EPA и проекте стандарта ИСО разных способов концентрирования проб - от флокуляции с седиментацией до кап-сульной фильтрации. Поэтому решающее значение имеет снижение потерь на этапах очистки концентрата и микроскопии, повышение селективности очистки и мечения. Этим объясняется, почему в современных зарубежных методах очистка концентрата регламентируется только иммуномагнитной сепарацией, а мечение препарата - только FITC-Mab и DAPI.
Внедрению в отечественную практику санитарно-паразитологического контроля воды современных методов, основанных на иммуномагнитной сепарации и двойном флуоресцентном мечении, препятствует высокая стоимость импортных диагностикумов и расходных материалов (до 180 — 200 долл. США на анализ) и отсутствие диагностикумов российского производства. Возник своего рода замкнутый круг - нормативные иммунофлюорес-центные методы не разрабатываются из-за высокой стоимости импортных диагностикумов и отсутствия отечественных, а производители и поставщики импортных диагностикумов не заинтересованы в снижении стоимости и ввозе из-за отсутствия рынка сбыта, поскольку нет официальных нормативных методов с применением их продуктов.
По мнению автора, санитарно-пара-зитологический контроль качества воды современными методами может осуществляться с применением импортных диагностикумов при условии сосредоточения таких исследований в крупных региональных лабораторных центрах. Зарубежная практика организации санитарно-паразитологического контроля качества воды показывает, что в США для его осуществления в 1996 г. было достаточно 29 аккредитованных ЕРА лабораторий, а в Великобритании в 2002 г. - 13 лабораторий, аккредитованных DWI. Например, производственная лаборатория компании South East Water, производителя питьевой воды централизованного водоснабжения, исследует в год 12500 проб воды на ооцисты криптоспори-дий. Для сравнения, - по официальным данным, всеми паразитологичес-кими лабораториями (подразделениями) центров госсанэпиднадзора РФ в 2002 г. было выполнено исследование 72320 проб воды [14].
Наилучшим выходом из сложившейся ситуации является, очевидно,
Предпринимаются попытки совершенствования отечественных методик санитарно-паразито-логического анализа, но они касаются концентрирования пробы, исключая очистку концентрата и сохраняя неспецифическое мечение.
Экоипкс-Эксперт
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ
Производство и реализация химико-аналитического оборудования для пищевой промышленности:
- рН-метры-иономеры и кондуктометры;
- анализаторы йода и тяжелых металлов;
- анализаторы нитратов и нитритов "Микон-2";
- специализированные приборы для анализа молочных продуктов и др.
117630, Москва, Старокалужское ш„, 62 тел./факс: (095) 974 2345, тел.: (095) 974 2346 и 933 7396 http://www. ionomer. ru E-mail: ionomer@ionomer.ru; ionomer@kbpauk.ru
КАЧЕСТВО И БЕЗОПАСНОСТЬ
разработка и производство отечественных диагностикумов-аналогов. Для этого информация о существующей проблеме методического обеспечения контроля качества воды по сани-тарно-паразитологическим показателям - цистам лямблий и ооцистам криптоспоридий - должна быть доведена до соответствующих полномочных и заинтересованных в решении этой проблемы должностных лиц и учреждений.
ЛИТЕРАТУРА
1. Fayer R. Cryptosporidium and Cryptosporidiosis. CRC Press, New York, 1997.
2. Fayer R, Morgan, U., and Upton, S.J. Epidemiology of Cryptosporidium: transmission, detection and identification. Int. J. Parasitol, 2000. 30: 1305-1322.
3. EPA/600/R-95/178. ICR Microbial Laboratory Manual. Section VII. ICR Protozoan Method for Detecting Giardia Cysts and Cryptosporidium Oocysts in Water by a Fluorescent Antibody Procedure. - US EPA, Office of Water, Washington, DC 20460, 1996.
4. Interim Enhanced Surface Water Treatment Rule. USA Federal Register/ Vol. 63, № 241. - 1998. p. 6947769521.
5. EPA-821-R-99-006. Method 1623: Cryptosporidium and Giardia in Water by Filtration/IMS/FA. - US EPA, Office of Water, Washington, DC 20460, 1999.
6. The Water Supply (Water Quality) (Amendment), Regulations № 1524, UK, 1999.
7. ISO/DIS 15553. Water quality -Isolation and identification of Cryptosporidium Oocysts and Giardia Cysts from Water. 2003.
8.СанПиН 2.1.4.1116-02. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества: Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2002. 27 с.
9. Методические указания по внедрению и применению санитарных правил и нормативов СанПиН 2.1.4.1116-02 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества». МУ 2.1.4.1184-
03. — М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2003. 63 с.
10. МУК 4.2.964-00. Санитарно-па-разитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования: Методические указания. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000. - 19 с.
11. Романенко Н.А., Новосильцев -Г.И., Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И. Научные основы паразитологического контроля качества воды//Гигиена и санитария. 1998. №4. С. 23-26.
12. МУК 4.2.668-97. Санитарно-па-разитологическое исследование воды: Методические указания. - М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1997. 16 с.
13. EPA-822-K-94-001. Cryptosporidium: Human Health Criteria Document. US EPA, Office of Science and Technology, Office of Water, Washington, DC 20460, 2001.
14. Цыбина Т.Н. Паразитологические исследования в центрах госсанэпиднадзора Российской Федерации//Здо-ровье населения и среда обитания. 2003. № 10. С. 8-11.
/ Прямые поставки сырья для пшцевой промышленное™ от
московская
торговая
компания
mth@vniiofi.ru
S Низкие цены
S Широкий ассортимент предлагаемой продукции
I ¡9361, г. Москва, уп. Озерная 46 Tea.: (095) 772 J I 15,437 99 58, 437 98 52 Факс-. (095) 437 99 81
Группа «ЛУКОЙЛ-Нефтсхим»
ООО "СТАВРОЛЕН"
Объявляет тендер
На закупку детских новогодних кондитерских наборов
Срок подачи заявок - до 26 ноября 2004 года
E-mail: tk@stavrolcn.lukoil.com Ставропольский кран, www.usetender.com г. Буденновск:
факс (86559)3-27-88
ООО "ПРОГРЕСС"
ipaifH'ee
пищевые смеси и ингредиенты для мясном промышленности
ПРИГЛАШАЕТ НА РАБОТУ в Москву и Санкт-Петербург:
• Технолога
Знание технологии переработки мяса, производства колбасной н деликатесном продукции, применение и сионетгш фосфатных комплексов, пищевых ингредиентов
• Менеджера по продажам ингредиентов, используемых в мясо переработке
Тел.: (812) 277-29-68 Факс: (812)275-17-05
E-mail: progrecc^mail.wplus.net mait@progre555pb.ru
Подробнее о деятельности фирмы на нашем сайте
www.progressspb.ru
«К.Т.К.»
Торговый представитель
нетчреою
концерна
EMSLMÏD-STARKE GMBH
ПРЕДЛАГАЕТ следующие пищевые добавки:
• мальтодекстрины и сиропы глюкозы (крахмальная патока)
• модифицированные крахмалы для производства:
■ соусов, кетчупов и майонеза
• детского питания и молочных продуктов
■ консервов и мясной гастрономии
■ безалкогольных напитков
■ кондитерских и хлебобулочных изделий
■ и многого, многого другого
СУХОЕ КАРТОФЕЛЬНОЕ ПЮРЕ мешки по 25 кг., в т.», фасованное Стабилъиые поставки. Вся продукция сертифицирована
тип 575- 6471, 575-6570 т./ф. 573-4083
141400 Россия, Московская область, Г. Хшки. ул. Пролетарская д. 17
